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神经酰胺在儿茶素诱导lovo细胞凋亡中的作用

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中国药学杂志 2000年第8期35卷 517-520页

作者：谭晓华周殿元张亚历北京军区总医院全军肝病研究所北京100700 第一军医大学南方医院全军消化内科研究所广东广州510510

目的　探讨神经酰胺在表没食子儿茶素没食子酸酯 (EGCG)、表没食子儿茶素 (EGC)和表儿茶素 (EC)诱导大肠癌lovo细胞凋亡及其差异性中的作用。方法　EGCG ,EGC和EC以及C2 和C6 神经酰胺处理lovo细胞后 ,用琼脂糖凝胶电泳 ,Heochst染色... 详细信息

目的　探讨神经酰胺在表没食子儿茶素没食子酸酯 (EGCG)、表没食子儿茶素 (EGC)和表儿茶素 (EC)诱导大肠癌lovo细胞凋亡及其差异性中的作用。方法　EGCG ,EGC和EC以及C2 和C6 神经酰胺处理lovo细胞后 ,用琼脂糖凝胶电泳 ,Heochst染色、流式细胞术定性和定量检测lovo细胞凋亡相关的形态学和生化方面的改变 ;用二酰基甘油激酶法测定 3种儿茶素处理lovo细胞后其神经酰胺含量的变化。结果　EGCG和EGC处理lovo细胞后 ,可引起lovo细胞的凋亡 ,C2 和C6 神经酰胺也可引起相似的改变 ,但EC则无此作用。EGCG或EGC处理lovo细胞后细胞内神经酰胺含量先一短暂的升高后逐渐回到基线水平 ,而EC则先引起短暂的下降再逐渐回升至基线水平。结论　 3种儿茶素在诱导lovo细胞凋亡时呈现出差异性。

关键词：儿茶素大肠癌神经酰胺 lovo细胞细胞凋亡

β-榄香烯诱导结肠癌lovo细胞凋亡的作用

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复旦学报（医学版） 2003年第1期30卷 49-51页

作者：黄富春范钰林庚金钱立平许祖德李华河南省漯河市第二人民医院消化科漯河462000 复旦大学附属华山医院消化科上海200040 上海医学院病理学系上海200032

目的　研究 β 榄香烯诱导结肠癌细胞的凋亡作用 ,探讨其治疗结肠癌的作用机制。方法　选择 β 榄香烯诱导结肠癌细胞凋亡 ,采用光镜、琼脂糖凝胶电泳和流式细胞仪检测凋亡及细胞周期。Fura 2荧光复合技术测结肠癌细胞内 [Ca2 +]i浓度... 详细信息

目的　研究 β 榄香烯诱导结肠癌细胞的凋亡作用 ,探讨其治疗结肠癌的作用机制。方法　选择 β 榄香烯诱导结肠癌细胞凋亡 ,采用光镜、琼脂糖凝胶电泳和流式细胞仪检测凋亡及细胞周期。Fura 2荧光复合技术测结肠癌细胞内 [Ca2 +]i浓度。结果　β 榄香烯对结肠癌细胞增殖具有很强的抑制作用。β 榄香烯能够诱导结肠癌凋亡。在结肠癌细胞凋亡过程中 ,胞内 [Ca2 +]i明显升高 ,以凋亡早期更为明显。 1h时为 ( 2 5 6.18± 8.85 )nmol/L ,明显高于对照组 ( 12 7.81± 5 .18)nmol/L(P 细胞生长具有很强的抑制作用 ,与诱导凋亡有关。Ca2 +在 β

关键词： β-榄香烯诱导结肠癌 lovo细胞细胞凋亡分子机制

RNA干扰沉默高迁移率族蛋白B1的表达对结直肠癌lovo细胞增殖和侵袭的抑制作用

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中华肿瘤杂志 2015年第9期37卷 664-670页

作者：李增军王海鹏宋宝孙燕来徐忠法韩建军山东省肿瘤医院山东省肿瘤防治研究院普外科济南250117 山东省肿瘤医院山东省肿瘤防治研究院基础研究中心济南250117 济南大学山东省医学科学院

目的探讨小分子RNA（siRNA）干扰高迁移率族蛋白B1（HMGB1）基因的表达对结直肠癌细胞株kv0增殖和侵袭的抑制作用。方法采用慢病毒介导的RNA干扰技术沉默HMGB1的表达，以逆转录聚合酶链反应和Western blot法检测干扰后lovo细胞中HMGB1 m... 详细信息

目的探讨小分子RNA（siRNA）干扰高迁移率族蛋白B1（HMGB1）基因的表达对结直肠癌细胞株kv0增殖和侵袭的抑制作用。方法采用慢病毒介导的RNA干扰技术沉默HMGB1的表达，以逆转录聚合酶链反应和Western blot法检测干扰后lovo细胞中HMGB1 mRNA和蛋白的表达情况。采用四甲基偶氮唑蓝（MTr）法、流式细胞术、Transwell小室实验、细胞划痕实验及裸鼠成瘤实验，分析HMGB1基因沉默对lovo细胞生长、增殖、侵袭及转移的影响。结果慢病毒介导siRNA可成功转染结直肠癌细胞株lovo。HMGB1-siRNA转染组lovo细胞中HMGB1 mRNA和蛋白的相对表达水平分别为0．24±0．04和0．21±0．03，阴性对照组分别为0．82±0．13和1．15±0．18，空白对照组分别为0．93±0．15和1．21±0．20；HMGB1-siRNA转染组HMGB1 mRNA和蛋白的表达水平均明显低于阴性对照组和空白对照组（P〈0．05）。MTT法检测结果显示，HMGB1-siRNA转染组lovo细胞的生长速度较阴性对照组和空白对照组降低（P〈0．05）。流式细胞术检测结果显示，HMGBI—siRNA转染组lovo细胞的增殖指数为38．27±1．32，明显低于阴性对照组（54．66±1．74）和空白对照组（57．43±1．29，P〈0．05）。Transwell小室实验显示，HMGB1-siRNA转染组穿膜细胞数为（14．0±3．5）个／高倍视野，明显低于阴性对照组[（51．0±6．7）个／高倍视野]和空白对照组[（68．0±5．3）个／高倍视野，P〈0．05]。细胞划痕实验显示，划痕后培养48h时，HMGB1-siRNA转染组lovo细胞的迁移距离为（83．61±23．21）μm，明显低于阴性对照组[（202．86±46．46）μm]和空白对照组[（214．58±57．38）μm，P〈0．05]。裸鼠成瘤实验显示，21d后，肿瘤最终体积为（521±34）mm^3,明显小于阴性对照组[（763±46）mm^3]和空白对照组[（802±51）mm^3，P〈0．05]。结论慢病毒介导的RNA干扰技术可有效抑制结直肠癌lovo细胞中HMGB1基因的表达，HMGB1基因沉默可使结直肠癌细胞生长缓慢，增殖周期延长，侵袭与迁移能力明显下降，裸鼠移植瘤的生长受到明显抑制。

关键词：结直肠肿瘤高迁移率族蛋白B1 lovo细胞 RNA干扰肿瘤侵袭肿瘤转移裸鼠

石蒜碱通过调控MAPK/ERK信号通路抑制人结肠腺癌lovo细胞生长

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中国病理生理杂志 2020年第3期36卷 479-486页

作者：张平袁晓慧喻婷婷黄华坤杨春梅张露露罗小辑罗进勇重庆医科大学检验医学院临床检验诊断学教育部重点实验室重庆医科大学附属第一医院骨科重庆400016

目的:探讨石蒜碱(lycorine)对人结肠腺癌lovo细胞活力、凋亡和迁移侵袭能力的影响及其作用机制。方法:不同浓度(1~8μmol/L) lycorine处理lovo细胞,CCK-8法检测细胞活力;划痕愈合和Transwell小室实验检测迁移和侵袭能力;Hoechst染色及... 详细信息

目的:探讨石蒜碱(lycorine)对人结肠腺癌lovo细胞活力、凋亡和迁移侵袭能力的影响及其作用机制。方法:不同浓度(1~8μmol/L) lycorine处理lovo细胞,CCK-8法检测细胞活力;划痕愈合和Transwell小室实验检测迁移和侵袭能力;Hoechst染色及流式细胞术实验检测凋亡改变;萤光素酶报告基因系统检测MAPK/ERK信号通路活化情况;同时采用Western blot法检测增殖细胞核抗原(proliferating cell nuclear antigen, PCNA)、上皮-间充质转化(epithelial-mesenchymal transition, EMT)相关标志物、凋亡相关蛋白及磷酸化ERK1/2蛋白水平的变化。结果:与空白对照组相比,lycorine处理组lovo细胞的活力和迁移侵袭能力受到显著抑制(P细胞数及cleaved caspase-3无显著差异(P>0.05)。此外,lycorine处理组Elk1/SRF转录活性降低,ERK1/2磷酸化水平降低(Plovo细胞的活力及迁移侵袭能力,从而在体外主要发挥生长抑制的抗肿瘤作用。

关键词：石蒜碱 lovo细胞上皮-间充质转化 MAPK/ERK信号通路细胞活力

神经胶质成熟因子γ抑制人结直肠癌lovo细胞增殖并影响人脐静脉内皮细胞的骨架运动

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中国组织工程研究 2021年第13期25卷 2055-2059页

作者：王惠丽陈志江吴炳义广东省妇幼保健院检验科广东省广州市511442 南方医科大学珠江医院儿科中心广东省广州市510280 南方医科大学南方医院临床医学研究中心广东省广州市510515

背景:神经胶质成熟因子γ(glia maturation factor-gamma,GMFG)是细胞骨架运动重建过程中ADF/cofilin超家族蛋白成员之一,可以通过调节肌动蛋白介导细胞骨架重组参与细胞运动的调控。作者前期发现GMFG的高表达与结直肠癌肿瘤患者临床病... 详细信息

背景:神经胶质成熟因子γ(glia maturation factor-gamma,GMFG)是细胞骨架运动重建过程中ADF/cofilin超家族蛋白成员之一,可以通过调节肌动蛋白介导细胞骨架重组参与细胞运动的调控。作者前期发现GMFG的高表达与结直肠癌肿瘤患者临床病理相关,但具体的上游及下游机制有待探究。目的:探索GMFG对人脐静脉内皮细胞骨架及lovo细胞增殖的影响。方法:①将人脐静脉内皮细胞接种在激光共聚焦皿中,待细胞贴壁稳定生长后,细胞免疫荧光染色观察GMFG的表达与人脐静脉内皮细胞骨架蛋白F-actin表达的关系;然后加入秋水仙素抑制细胞有丝分裂,分为对照组、0.5 mg/L秋水仙素组、1.0 mg/L秋水仙素组,流式细胞术观察3组细胞周期的变化,Western blot蛋白印迹观察3组细胞GMFG蛋白表达;②将人结直肠癌lovo细胞接种在激光共聚焦皿中,待细胞贴壁稳定生长后,细胞免疫荧光染色观察GMFG的表达与细胞周期的相关性,然后采用siRNA技术干扰lovo细胞中GMFG的表达,分为空白对照组、空转染组和siRNA-GMFG组,Edu实验检测细胞增殖率的变化。结果与结论:①在人脐静脉内皮细胞中,GMFG的表达与人脐静脉内皮细胞骨架运动有关,细胞骨架回缩时GMFG表达增多;秋水仙素抑制人脐静脉内皮细胞有丝分裂后,随秋水仙素用量增加G2/M期细胞占比增加,GMFG蛋白表达下降;②在lovo细胞中,GMFG的表达强度与细胞有丝分裂有关,在细胞有丝分裂中后期GMFG表达增强;③siRNA技术干扰lovo细胞GMFG表达后,细胞增殖率下降;④结果表明,干扰GMFG表达能够抑制人结直肠癌lovo细胞的增殖率,并且细胞骨架运动与GMFG的表达存在一定的相关性。

关键词：人脐静脉内皮细胞细胞骨架 lovo细胞细胞增殖神经胶质成熟因子γ 秋水仙素肠癌

23-羟基白桦酸诱导lovo细胞凋亡与线粒体膜电位的变化

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中国药理学通报 2007年第3期23卷 350-353页

作者：程燕叶文才石俊敏姚新生栗原博暨南大学中药及天然药物研究所广东广州510632

目的探讨23-羟基白桦酸对人结肠癌细胞株lovo细胞增殖和凋亡的影响。方法采用MTT法检测23-羟基白桦酸对lovo细胞的增殖抑制作用。Hoechst染色、流式细胞仪检测细胞凋亡及线粒体膜电位的变化。结果23-羟基白桦酸能抑制lovo细胞的增殖,其... 详细信息

目的探讨23-羟基白桦酸对人结肠癌细胞株lovo细胞增殖和凋亡的影响。方法采用MTT法检测23-羟基白桦酸对lovo细胞的增殖抑制作用。Hoechst染色、流式细胞仪检测细胞凋亡及线粒体膜电位的变化。结果23-羟基白桦酸能抑制lovo细胞的增殖,其作用呈明显的时间和剂量依赖性。Hoechst33258染色显示细胞凋亡特征。23-羟基白桦酸25、50、100及200μmol·L-1作用lovo细胞48h后,其凋亡率分别为11.32%±0.92%、19.23%±0.78%、24.51%±5.88%及42.22%±2.32%,显示一定的剂量依赖性关系。与空白组相比,23-羟基白桦酸可明显降低lovo细胞线粒体膜电位(Plovo细胞的增殖,其机制与降低线粒体膜电位继而诱导lovo细胞凋亡有关。

关键词： 23-羟基白桦酸 lovo细胞细胞凋亡线粒体膜电位

儿茶素对lovo细胞生长周期的影响和诱导凋亡的作用

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中华预防医学杂志 2000年第6期34卷 333-335页

作者：谭晓华周殿元张亚历姜泊北京军区总医院全军肝病研究所 100700 第一军医大学南方医院全军消化内科研究所

目的　探讨表没食子儿茶素没食子酸酯 (EGCG)、表没食子儿茶素 (EGC)、表儿茶素没食子酸酯 (ECG)和表儿茶素 (EC)对大肠癌lovo细胞生长周期的影响和它们诱导lovo细胞凋亡作用及其差异性。方法　用MTT法、琼脂糖凝胶电泳、透射电镜和流... 详细信息

目的　探讨表没食子儿茶素没食子酸酯 (EGCG)、表没食子儿茶素 (EGC)、表儿茶素没食子酸酯 (ECG)和表儿茶素 (EC)对大肠癌lovo细胞生长周期的影响和它们诱导lovo细胞凋亡作用及其差异性。方法　用MTT法、琼脂糖凝胶电泳、透射电镜和流式细胞术观察 4种儿茶素处理lovo细胞后 ,它们对lovo细胞的生长抑制作用、细胞生长周期的改变以及诱导其凋亡形态学和生化方面的改变。结果　EGCG和EGC对lovo细胞的生长抑制作用显示时间和剂量效应关系 ,且可引起lovo细胞凋亡相关的一系列改变 ,而ECG和EC则无上述作用。此外 ,EGCG、EGC和ECG可使lovo细胞生长阻滞在G1期 ,而EC主要引起S期阻滞。结论　 4种儿茶素对lovo细胞的生长抑制作用具有明显的差异性。

关键词：儿茶素结肠直肠肿瘤 lovo细胞细胞凋亡

circ_0091579/miR-330-3p/RNF126轴影响结直肠癌lovo细胞的增殖、侵袭和凋亡

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中国肿瘤生物治疗杂志 2021年第5期28卷 460-468页

作者：杨兴广艾可为杨继武程伟赵鹏举大理大学第一附属医院普通外科云南大理671000

目的:探讨环状RNA circ0091579作为分子海绵吸附miR-330-3p介导环指蛋白126(ring finger protein 126,RNF126)对结直肠癌(colorectal cancer,CRC)细胞增殖、凋亡、侵袭的影响。方法:选取2019年2月至2020年5月在大理大学第一附属医院行手术治疗的60例CRC患者的癌组织和癌旁组织。构建circ0091579、miR-330-3p的过表达或敲减的CRC lovo细胞,qPCR检测CRC组织和细胞中circ0091579、miR-330-3p和RNF126的表达;MTT、Transwell、流式细胞术分别检测细胞的增殖、侵袭、凋亡情况;生物信息学方法预测circ0091579和miR-330-3p、miR-330-3p和RNF126的靶向关系并用双荧光素酶报告实验和RNA免疫沉淀实验验证。结果:CRC组织和多种细胞(HCT116、SW620、CW-2、lovo细胞)中,circ0091579和RNF126均高表达、miR-330-3p均低表达(均Plovo细胞的增殖、侵袭而促进其凋亡(均Plovo细胞增殖和侵袭能力减弱但凋亡程度加强(均Plovo细胞增殖、迁移和侵袭而抑制其凋亡。

关键词： circ0091579 miR-330-3p 环指蛋白126 结直肠癌 lovo细胞增殖侵袭凋亡

miRNA-95靶向FOXD1基因对结直肠癌lovo细胞放射敏感性的影响及其机制

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中国应用生理学杂志 2020年第2期36卷 148-151页

作者：梁宛伶肖天保袁峰曹一波颜登国贵州中医药大学第一附属医院肛肠外科贵阳550001 四川省自贡市第一人民医院核医学科自贡643000 贵州医科大学附属医院肛肠外科贵阳550001

目的:探讨miRNA-95靶向FOXD1基因对结直肠癌lovo细胞放射敏感性的影响及其机制。方法:结直肠癌lovo细胞购自武汉普诺赛生命科技有限公司,将lovo细胞分为三组接种于6孔板中,每组3个复孔,实验重复3次,C组(对照组正常lovo细胞),M组(miRNA-9... 详细信息

目的:探讨miRNA-95靶向FOXD1基因对结直肠癌lovo细胞放射敏感性的影响及其机制。方法:结直肠癌lovo细胞购自武汉普诺赛生命科技有限公司,将lovo细胞分为三组接种于6孔板中,每组3个复孔,实验重复3次,C组(对照组正常lovo细胞),M组(miRNA-95-mimics转染lovo细胞),I组(miRNA-95-inhibitions转染lovo细胞),利用直线加速器6 MV/8 Gy的X射线垂直照射细胞,剂量率3 Gy/min,持续照射12 h后收集细胞。采用RT-PCR法检测lovo细胞中FOXD1的表达情况,流式细胞术检测lovo细胞凋亡情况,Western blot检测细胞中FOXD1蛋白的水平,细胞克隆测定细胞存活率,裸鼠成瘤实验取转染未经X射线照射的C组、M组、I组lovo细胞细胞悬液,各取0.2 ml分别接种于C组、M组、I组BALB/C-nu雄性裸鼠左下肢足部皮上1次,每组10只,注射2周后,各组选取5只裸鼠进行X射线照射,每天4 Gy照射一次,连续照射15 d,其余小鼠不照射,处死裸鼠并取出肿瘤进行称重。结果:与C组比对,M组FOXD1水平明显升高,I组FOXD1水平明显低于M组、C组(Plovo细胞凋亡率显著下降(Plovo细胞单克隆存活率有上升趋势(Plovo细胞的放射敏感性,促进细胞凋亡,其作用机制可能抑制FOXD1蛋白的活性有关。

关键词： miRNA-95 放射敏感性 lovo细胞小鼠 X射线