检索结果-南通市图书馆

作者：杨峥广西医科大学

学位级别：硕士

目的1、检测鼻咽癌中WWOXmRNA表达情况,分析其与临床病例特征的关系,探讨其在鼻咽癌可能发生的作用。2、检测鼻咽癌中WWOX基因启动子区甲基化状态,分析其与临床病例特征、WWOXmRNA表达的关系。3、检测鼻咽癌WWOX基因杂合性缺失的情况,... 详细信息

目的1、检测鼻咽癌中WWOXmRNA表达情况,分析其与临床病例特征的关系,探讨其在鼻咽癌可能发生的作用。2、检测鼻咽癌中WWOX基因启动子区甲基化状态,分析其与临床病例特征、WWOXmRNA表达的关系。3、检测鼻咽癌WWOX基因杂合性缺失的情况,分析其与临床病例特征、WWOXmRNA表达的关系。4、分析WWOXmRNA表达和启动子区甲基化、杂合性缺失之间的关系,探讨影响鼻咽癌WWOXmRNA表达的作用机制。方法分别通过RT-PCR、甲基化特异性PCR、变性的PAGE电泳检测细胞株、鼻咽癌组织及鼻咽部粘膜慢性炎组织中WWOXmRNA表达情况、WWOX基因启动子区甲基化水平、微卫星位点中杂合性缺失的状态。结果1、鼻咽癌细胞株CNE1和CNE2的WWOX mRNA均表达缺失,正常鼻咽上皮细胞株NP69表达正常。在检测的65例鼻咽癌组织标本中,有31例癌组织标本WWOXmRNA表达缺失或降低,在同时收集的43例粘膜慢性炎组织中,WWOXmRNA均表达正常。统计学分析表明,鼻咽癌组织与非鼻咽癌组织二者WWOX mRNA表达水平差异有统计学意义（P0.05）。2、鼻咽癌细胞株CNE1和CNE2的WWOX启动子区均甲基化,正常鼻咽上皮细胞株NP69为非甲基化。在检测的65例鼻咽癌组织标本中,有37例癌组织标本WWOX启动子区出现甲基化,占56.9%。在同时收集的43例对照组中,0例出现WWOX启动子区甲基化。统计学分析表明,鼻咽癌组织与非鼻咽癌组织二者在WWOX启动子区甲基化水平差异有统计学意义（P0.05）;WWOX mRNA表达与其启动子区甲基化呈负相关（rs=-0. 582, P=0. 000）。3、在65例鼻咽癌组织标本中,有29例（44.6%）至少在一个位点存在loh,在43例粘膜慢性炎对照组标本中,仅有2例（4.7%）loh,统计学分析表明,鼻咽癌组织与非鼻咽癌组织二者在WWOX出现loh差异有统计学意义（Ploh与年龄、性别、组织学类型、临床分期、侵袭程度、淋巴结转移、远处转移无关,差异无统计学意义（P>0.05）;WWOX mRNA表达与其杂合性缺失相关性分析无统计学意义（rs=-0. 196, P=0. 117）。4、WWOX基因mRNA表达与甲基化、杂合性缺失呈负相关,且有统计学意义（rs=-0. 546, P=0.000）。结论:1、WWOX mRNA在鼻咽癌细胞株、鼻咽癌组织中缺失或表达降低为高频事件,与鼻咽癌的临床分期有关,提示WWOX的异常表达可能参与鼻咽癌的发生、发展。2、在鼻咽癌细胞株、鼻咽癌组织中WWOX启动子区甲基化为高频事件,与鼻咽癌组织中WWOX的异常表达有关。3、在鼻咽癌组织中WWOX基因发生loh为高频事件,但与鼻咽癌组织中WWOX的异常表达相关性无统计学意义。4、WWOX mRNA表达缺失在鼻咽癌的发生发展中起重要作用。WWOX启动子区甲基化及杂合性缺失可能是鼻咽癌中WWOX基因表达沉默的重要机制之一。

关键词：鼻咽癌 WWOX mRNA 甲基化 loh

全基因组肺鳞癌发生相关基因的初步筛选及PTPN13在肺鳞癌侵袭转移...

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作者：韩秀娟第四军医大学

学位级别：硕士

背景及目的：肺癌是人类最常见的恶性肿瘤之一，其死亡率位居癌症之首，严重威胁人类的健康和生命。我国肺癌的发病率和死亡率一直呈明显上升趋势，这种趋势在城市女性人群中尤为明显。到本世纪初，肺癌的死亡率已由20世纪70年代位居... 详细信息

背景及目的：肺癌是人类最常见的恶性肿瘤之一，其死亡率位居癌症之首，严重威胁人类的健康和生命。我国肺癌的发病率和死亡率一直呈明显上升趋势，这种趋势在城市女性人群中尤为明显。到本世纪初，肺癌的死亡率已由20世纪70年代位居癌症死因的第4位攀升至第1位。肺癌中最为常见的组织学类型是鳞状细胞癌。由于肺鳞癌对放化疗均不敏感，一旦发生转移，治疗效果往往较差。因此，对于肺鳞癌制定早期预防、早期诊断、预后预警及相应个体化治疗的现代诊疗新策略具有重要意义。随着新一代多态性遗传标记SNP的深入研究，人们发现SNP可以为我们提供我们先前没有发现的全基因组分子遗传学信息，包括杂合性缺失（loss of heterozygosity, loh）和拷贝数变异（copy number variation,CNV）。而Affymetrix SNP 6.0芯片的开发及应用，则为我们进行分子遗传学全基因组筛查提供了强有力的平台。一般来说，如果发现某一肿瘤某一染色体位点有较高频率的loh，往往提示可能存在该肿瘤相关的抑制基因（tumor suppressor genes，TSG），而CNV也已被证实和肿瘤的发生发展关系密切。为此我们选择发生淋巴结转移和未发生转移的肺鳞癌病例共10例进行全基因组SNP芯片分析，在全基因组内初步筛选与肺鳞癌发生发展相关的基因及染色体片段。同时，初步分析所筛选的基因及染色体片段与肺鳞癌侵袭转移等临床病理特征的关系。为进一步的功能研究及建立集早期预防、早期诊断、预后预警及个体化治疗的肺鳞癌防治新策略奠定基础。本研究包括下述两部分：第一部分全基因组肺鳞癌发生相关基因的初步筛选实验方法：采用激光捕获显微切割技术（LCM）对肺鳞癌组织进行精确切割;采用Affymetrix SNP6.0基因芯片对全基因组loh和CNV进行精确分析。实验结果： 1、SNP芯片关于CNV的检测分析显示，肺鳞癌病例第3号染色体相关基因及染色体片段拷贝数增加明显，而第4号染色体相关基因及染色体片段拷贝数减少明显。 2、SNP芯片关于loh的检测分析显示，未发生转移的肺鳞癌病例出现高频率loh的基因及染色体片段明显少于发生淋巴结转移的病例。所有发生淋巴结转移的4例肺鳞癌病例均检测到在4号染色体长臂存在高频率loh，尤其是4q18-32片段频率最高。主要结论：在第4q等染色体发现了新的可能与肺鳞癌发生相关的基因和染色体片段;4q18-32上可能存在抑制肺鳞癌侵袭和转移的抑癌基因。第二部分PTPN13在肺鳞癌侵袭转移中的作用研究实验方法：免疫组化法观察PTPN13在肺鳞癌及癌旁组织中的表达情况。实验结果： 1、PTPN13在肺鳞癌组织中呈低表达，在癌旁组织中高表达，两组间差异显著（P<0.05）。PTPN13表达与肺鳞癌的恶性程度、临床分期和侵袭转移能力呈显著负相关(P<0.05)，与年龄和性别无明显相关性。 2、FAK在肺鳞癌组织中高表达，在癌旁组织中低表达，两组间差异显著（P<0.05）。FAK表达与肺鳞癌的恶性程度、临床分期和侵袭转移能力呈显著正相关(P<0.05)，与年龄和性别无明显相关性。 3、PTPN13和FAK在肺鳞癌组织中的表达呈显著负相关，相关系数rs= -0.538（P<0.05）。主要结论： 1、PTPN13基因可能是肺鳞癌发生相关的抑癌基因，其缺失可能与肺鳞癌的侵袭和转移相关。 2、PTPN13基因做为肺鳞癌发生相关的抑癌基因及其抑制侵袭转移的生物学功能可能与FAK磷酸化有关。

关键词：肺鳞状细胞癌肿瘤侵袭与转移 SNP loh CNV PTPN13 FAK

肾透明细胞癌多中心病灶单克隆、多克隆起源并存的研究论证

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肾透明细胞癌多中心病灶单克隆、多克隆起源并存的研究论证

作者：王增增大连医科大学

学位级别：硕士

目的：随着腹部影像学诊断技术的进步和广泛应用,早期肾癌的诊断率不断提高,且初发诊断病例肿瘤的直径亦有所减小,使得保留肾单位手术(nephron sparing surgery, NSS)日益受到重视。尤其对于初发肿瘤较小(肿瘤≤4cm)的患者,NSS在最大限... 详细信息

目的：随着腹部影像学诊断技术的进步和广泛应用,早期肾癌的诊断率不断提高,且初发诊断病例肿瘤的直径亦有所减小,使得保留肾单位手术(nephron sparing surgery, NSS)日益受到重视。尤其对于初发肿瘤较小(肿瘤≤4cm)的患者,NSS在最大限度的保留功能肾单位的同时,亦取得了良好的临床效果,由此NSS更是在国内外得到广泛开展。而其中肾癌多中心病灶是造成保肾手术后局部复发的主要因素之一。临床研究报道肾癌多中心病灶的发生率为5%-25%,且多为镜下多中心灶,基于现有的检测技术,术前多中心病灶的低检出性更是增加了人们对NSS的质疑。目前关于散发性肾透明细胞癌多中心病灶的生物学行为、潜在恶性及发生机制等尚不清楚。本研究通过分子生物学技术研究多中心灶肾透明细胞癌各癌灶间的克隆起源关系。材料与方法：本研究中,提取来自20例多中心灶性肾透明细胞癌患者的共计42枚癌灶(均已经病理学家诊断为肾透明细胞癌)及对应的正常组织的DNA后,选取3、7、8、9、17号染色体上10个微卫星多态性标志物D3S1038、D3S1234、D3S1300、D3S1317、D3S1540、D3S1597、D7S522、D8S261、D9S171、TP53作为引物分别对20例多中心灶性肾透明细胞癌组织及其对应的正常肾组织DNA进行PCR扩增。在完成对PCR产物进行聚丙烯酰胺凝胶电泳、溴化乙锭染色之后,在紫外透射光下观察照相并用Labworks3.0凝胶分析软件进行分析。在某位点的信息性病例中若肿瘤组织的某一条等位基因条带消失或相对密度减少50%,则记录为杂合性缺失(loh)。实验重复两次,两次结果一致者纳入最终loh检测结果。观察各癌灶基因组DNA的loh类型。若多中心病灶与原发灶显示相同的等位基因图谱表示为共同克隆来源,否则为独立克隆起源。结果：在20例多中心灶性肾透明细胞癌中,17例(85%)在上述10位点中的至少1个位点检测到loh。其中14例(14/17)检测到原发灶与相应的多中心灶有相同的loh类型。在该14例中,有3例仅多中心癌灶在某1个位点检测到loh;有另外2例仅原发癌灶在某1位点检测到loh。有3例(3/17)检测到原发灶与相应并发癌灶有不相同的loh类型。结论：我们的实验研究结果表明似乎大多数多中心灶性肾透明细胞癌为同一克隆起源,即由原发癌灶肾内转移而来;但是我们也发现了多克隆起源的证据。结合以往国内外相关研究,我们认为多中心灶性肾透明细胞癌同时存在单克隆起源和多克隆起源两种发生机制。

关键词：肾癌多中心灶 loh 克隆起源

STR基因座复合扩增体系的构建及其与食管癌的相关性研究

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STR基因座复合扩增体系的构建及其与食管癌的相关性研究

作者：胡羽四川大学

学位级别：硕士

目的:本研究的目的在于探索D3S1754、D4S1647和D12S391三个基因座复合扩增-银染检测方法的可行性。方法:用热启动PCR、变性聚丙烯酰胺凝胶电泳、银染技术,建立D3S1754、D4S1647和D12S391三个基因座复合扩增体系。结果:成功建立了三个ST... 详细信息

目的:本研究的目的在于探索D3S1754、D4S1647和D12S391三个基因座复合扩增-银染检测方法的可行性。方法:用热启动PCR、变性聚丙烯酰胺凝胶电泳、银染技术,建立D3S1754、D4S1647和D12S391三个基因座复合扩增体系。结果:成功建立了三个STR基因座复合扩增-银染体系,可快速、简便、准确地测定D3S1754、D4S1647和D12S391的基因型。结论:本研究成功建立了D3S1754、D4S1647和D12S391三个STR基因座复合扩增-银染体系,可替代进口复合扩增试剂,方法简单,不需昂贵的测序仪,所建立的复合扩增体系技术也为其他STR基因座的银染和荧光标记复合扩增方法的建立奠定了基础。

关键词：复合扩增 STR 遗传多态性 D3S1754 D4S1647 食管癌 loh D4S1538 D4S395

P53基因内含子1内VNTR区的多态性及其在肺癌中应用的探讨

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P53基因内含子1内VNTR区的多态性及其在肺癌中应用的探讨

作者：李曦北京市结核病胸部肿瘤研究所

学位级别：硕士

目的检测抑癌基因p53内含子1内的数目可变的串联重复序列(variable number of tandem repeats VNTR)在中国人中的多态性，为其应用于p53基因杂合型缺失(loss of heterozygosity loh)的检测提供依据。研究p53基因的内含子1内的VNTR 区... 详细信息

目的检测抑癌基因p53内含子1内的数目可变的串联重复序列(variable number of tandem repeats VNTR)在中国人中的多态性，为其应用于p53基因杂合型缺失(loss of heterozygosity loh)的检测提供依据。研究p53基因的内含子1内的VNTR 区的杂合型是否与肺癌的遗传易感性相关。以及探讨p53基因的loh与肺癌临床病理的相关性。方法常规方法提取150例汉族，无亲属关系健康中国人、57例肺腺癌初治患者、46例肺鳞癌初治患者外周血标本DNA及33例肺癌病人肿瘤组织及癌旁正常组织标本DNA，所有肺癌患者均未接受过化学药物以及放射治疗。PCR方法扩增p53内含子1内的VNTR区，产物进行12％非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳。结果在150例健康中国人中，102例表现出VNTR区等位基因的杂合型，杂合率为68％;57例肺腺癌患者中，41例(71.9％)为该区杂合型;46例肺鳞癌患者中，31例(67.4％)为该区杂合型;肺癌患者的p53基因内含子1的VNTR区的杂合型比例与正常健康人无明显差别(P>0.05)。33例肺癌病人癌旁正常组织中，29例(87.8％)为杂合型，其中6例与之相对应的肿瘤组织(20.7％)为p53基因内含子1内的VNTR区的loh;小细胞肺癌p53基因内含子1内的VNTR区的loh率为50％，高于非小细胞肺癌(12.5％);p53基因内含子1内的VNTR区的loh与年龄，分期及预后无明显关系。结论中国人p53基因内含子1的VNTR区有高度多态性，杂合型达68％。在肺癌病人中可检测出该区的loh。

关键词： p53 loh VNTR 肺癌

中国人肺鳞癌nm23H1基因遗传不稳定性的研究

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中国人肺鳞癌nm23H1基因遗传不稳定性的研究

作者：谢永红浙江大学

学位级别：硕士

1．目的肺癌是严重危害人类健康的恶性肿瘤之一，近年来，在我国肺癌的发病率和死亡率均有明显增长。肺鳞癌是肺癌中最为常见的类型，约占肺癌手术切除标本的60％以上。在肺鳞癌中，淋巴道转移是最常见且较为早期的扩散途径，也是肿瘤... 详细信息

1．目的肺癌是严重危害人类健康的恶性肿瘤之一，近年来，在我国肺癌的发病率和死亡率均有明显增长。肺鳞癌是肺癌中最为常见的类型，约占肺癌手术切除标本的60％以上。在肺鳞癌中，淋巴道转移是最常见且较为早期的扩散途径，也是肿瘤患者致死的重要原因。因此，揭示肺鳞癌淋巴转移的作用机制，对该病的治疗及预后具有重要的临床意义。肿瘤的发生发展是一个多基因多步骤的复杂过程，其中涉及到癌基因的激活和抑癌基因的失活。基因遗传不稳定性，如基因的微卫星不稳定(microsatellite instability，MSI)和杂合性缺失(loss of heterozygosity，loh)可能是引起抑癌基因失活，导致肿瘤发生发展的重要分子事件。nm23H1基因作为一种肿瘤转移抑制基因，类似于其他抑癌基因，它的失活可使其编码的蛋白NDPK(核苷酸二磷酸激酶)表达减少，进而促进肿瘤的发展、侵袭与转移。目前对中国人nm23H1基因遗传不稳定性如何参与肺鳞癌淋巴转移机制的研究，仍鲜见报道。本课题应用荧光PCR-单链构象多态性(FPCR-SSCP)方法、免疫组织化学染色法等方法，检测肺鳞癌nm23H1基因5’端非转录区微卫星位点的MSI和loh以及nm23H1蛋白的表达，分析该基因位点遗传不稳定性对肺鳞癌蛋白表达及其进展的影响，以便为肺鳞癌临床治疗和预后提供实验依据。 2．材料与方法 2．1标本新鲜肺鳞癌手术标本50例，其中男性47例，女性3例。每例均包括肿瘤组织和周围正常组织。每例标本均作冰冻切片由病理医师予以确诊，并确保每例肿瘤标本中的肿瘤细胞比例在80％以上。 2．2引物和抗体 nm23H1基因5’端非转录区微卫星位点引物序列：5’ TAT GAG TTC AAC TAC GCACG 3’和5’ CTC GAG CAC AGG AGC AGG GTT 3’。鼠抗人nm23H1蛋白单克隆抗体。 2．3基因组DNA的抽提按照试剂盒提供的方法，提取肿瘤组织基因组DNA。同时，抽提患者肿瘤周围正常组织基因组DNA作为对照。 2．4荧光PCR-单链构象多态性方法(FPCR-SSCP) 引物经荧光标记后，进行PCR扩增微卫星片断(110bp-120bp)。将PCR产物行毛细管电泳，同时采用Genescan分析软件给出电泳图谱。 2．5免疫组织化学染色常规石蜡切片，脱蜡后行nm23H1蛋白免疫组织化学法染色，DAB显色，镜下控制显色时间，常规脱水、透明、中性树胶封片。同时，采用PBS代替一抗作阴性对照。 2．6判断标准以正常组织的电泳图谱作为对照，如果在肿瘤组织电泳图谱上至少有一个对应峰发生移位或者峰的数量增多，则为微卫星不稳定(MSI)。已为MSI阳性的病例不再作loh的评价。分别计算正常组织和肿瘤组织的两个主峰之间的峰值比率，然后由正常组织的峰值比率除以肿瘤组织的峰值比率，得到loh指数(lohindex)。如果loh指数为≤0.67或≥1.5时则被认为是loh。 2．7图像分析每例标本连续选取不重叠的20个高倍视野，在相同灰度设定条件下测出G(整个背景视野灰度值)、G(视野内nm23H1蛋白免疫组化阳性染色颗粒的灰度值)、A(nm23H1阳性细胞占视野面积的面积密度)。 2．8数据处理用Excel函数算出PU值(positive unit阳性单位)，代表nm23H1蛋白在肺鳞癌细胞的表达强度。 2．9统计学分析所有数据均采用SPSS10.0软件包行单因素方差分析(One-Way ANOVA)、t检验和x检验。 3．结果 3．1肺鳞癌与MSI、loh的关系利用FPCR-SSCP检测法，发现50例肺鳞癌患者中能提供信息的个体数(杂合子数)为44例(88％)，其可用于loh分析。 44例能提供信息的肺鳞癌患者中MSI和loh检出率分别为11.36％(5／44)和25.00％(11／44)，5例MSI全部发生在分化良好(G1为2例和G2为3例)及存活患者(1年生存率)中。然而，MSI和loh的检出率与肺鳞癌分化程度、TNM分期、淋巴转移、患者生存状态及其它临床病理参数均无关(p＞0.05)。 3．2肺鳞癌与nm23H1蛋白表达的关系 nm23H1蛋白免疫染色反应阳性结果为棕黄色颗粒，主要位于细胞质，胞核和胞膜也有阳性反应结果。44例肺鳞癌nm23H1蛋白检出率为50％(22／44)。nm23H1蛋白阳性表达率在TNMⅠ期(65.22％)、无淋巴结转移组(66.67％)显著高于TNMⅢ期(18.18％)、淋巴结转移组(30.00％)(p＜0.05)。 3．3 MSI、loh与nm23H1蛋白表达的关系 nm23H1蛋白在MSI阳性组和阴性组的阳性检出率分别为40％、51.28％，而其在loh阳性组和阴性组的阳性检出率分别为54.55％、48.48％，但统计

关键词：肺鳞癌 nm23H1基因 MSI loh 荧光PCR-单链构象多态性(FPCR-SSCP)方法免疫组织化学染色计算机图像分析技术

中国人nm23H1、KAI1基因遗传不稳定性及肿瘤临床病理特性的相关性研究

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中国人nm23H1、KAI1基因遗传不稳定性及肿瘤临床病理特性的相关性...

作者：杨月琴浙江大学

学位级别：硕士

研究背景恶性肿瘤起病隐匿,微小癌灶的浸润和转移难以及时探查和治疗,是患者生存率低的主要原因。为此,阐明肿瘤浸润及转移的机制,确立可靠的预后指标和治疗靶点极为重要。研究发现,随着肿瘤进展和转移的发生,肿瘤细胞内抑癌蛋白的表... 详细信息

研究背景恶性肿瘤起病隐匿,微小癌灶的浸润和转移难以及时探查和治疗,是患者生存率低的主要原因。为此,阐明肿瘤浸润及转移的机制,确立可靠的预后指标和治疗靶点极为重要。研究发现,随着肿瘤进展和转移的发生,肿瘤细胞内抑癌蛋白的表达量减少,逐渐失去对肿瘤细胞生长、转移的抑制,表现为肿瘤的浸润与转移。而抑癌基因的失活是编码蛋白量减少的重要机制之一。为揭示抑癌基因失活的机理,国内外针对P53、P16等抑癌基因作了大量研究,结果表明基因的遗传不稳定性改变,即微卫星不稳定性(microsatellite instablility,MSI)和杂合性缺失(loss of heterozygosity,loh),可能是产生基因突变,导致抑癌基因功能失调,引起肿瘤发生的重要因素。微卫星是由2-6个核苷酸组成,具有高度多态性的简单串联核苷酸重复序列。MSI是指由于复制错误导致微卫星的增多或减少。loh是指一个位点上两个多态性的等位基因中的一个出现缺失或变异。大量研究表明,抑癌基因MSI与loh在肿瘤的多步骤发生过程中起着重要的作用。MSI首先是在遗传性非息肉性结直肠癌(heredity non-polyposis colorectal cancer,HNPCC)中发现的,后在各种散发性肿瘤如大肠癌、胃癌、子宫内膜癌、乳腺癌、前列腺癌和胰腺癌中均发现MSI。研究表明MSI的发生提高了随机突变率,更重要的是导致了肿瘤相关基因的突变,可能是引起肿瘤发

关键词：卵巢上皮性肿瘤胃癌 nm23H1 KAT1 MSI loh

FHIT基因在鼻咽癌中的表达及其下调机制的研究

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FHIT基因在鼻咽癌中的表达及其下调机制的研究

作者：李屏广西医科大学

学位级别：硕士

目的探讨FHIT基因组鼻咽癌发生发展中的作用以及它的失活机制。方法 1.使用相对定量荧光PCR检测鼻咽癌中FHIT基因mRNA表达水平。 2.使用荧光定量甲基化特异性PCR检测FHIT基因启动子区域甲基化程度,分析其与FHIT基因mRNA表达的关系。3... 详细信息

目的探讨FHIT基因组鼻咽癌发生发展中的作用以及它的失活机制。方法 1.使用相对定量荧光PCR检测鼻咽癌中FHIT基因mRNA表达水平。 2.使用荧光定量甲基化特异性PCR检测FHIT基因启动子区域甲基化程度,分析其与FHIT基因mRNA表达的关系。3.使用变性聚丙烯酰胺凝胶电泳检测FHIT基因微卫星位点杂合性缺失状态,分析其与FHIT基因mRNA表达的关系。结果 1.在检测的45例慢性粘膜炎对照组中FHIT基因mRNA相对表达量为：2.31±3.40;在76例NPC组中为0.98±2.24,差异有统计学意义(Ploh;在76例NPC组中32例(42.1%)在D3S1300位点存在loh,24例(31.6%)D3S1234位点存在loh。其中16例(21%)这2个位点均存在loh,差异有统计学意义(Ploh相关系数为-0.435(Ploh在NPC组中是高频事件,提示FHIT基因loh是NPC发生的重要遗传学因素。 4. FHIT基因mRNA与其启动子甲基化程度和loh成反比,提示FHIT基因启动子甲基化程度增加和loh都可导致FHIT基因mRNA表达下降,二者很有可能是共同因素。

关键词：鼻咽癌 FHIT mRAN 甲基化 loh

中国人sFRP1基因遗传不稳定性与肝癌关系的研究

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中国人sFRP1基因遗传不稳定性与肝癌关系的研究

作者：徐丽倩浙江大学

学位级别：硕士

研究背景恶性肿瘤起病隐匿,微小癌灶的浸润和转移难以早期发现和和诊断,影响及时治疗,这是影响患者生存期的主要原因。因此,阐明肿瘤浸润及转移的机制,确立可靠的实验室预后指标和探索治疗恶性肿瘤靶点对恶性肿瘤患者临床治疗极为重要... 详细信息

研究背景恶性肿瘤起病隐匿,微小癌灶的浸润和转移难以早期发现和和诊断,影响及时治疗,这是影响患者生存期的主要原因。因此,阐明肿瘤浸润及转移的机制,确立可靠的实验室预后指标和探索治疗恶性肿瘤靶点对恶性肿瘤患者临床治疗极为重要。研究发现,随着肿瘤进展和转移的发生,肿瘤细胞内抑癌蛋白的表达量减少,逐渐失去对肿瘤细胞生长、转移的抑制,进而导致肿瘤的浸润与转移。而抑癌基因的失活是编码蛋白量减少的重要机制之一。为揭示抑癌基因失活的机理,国内外针对P53、P16等抑癌基因作了大量研究,结果表明基因的遗传不稳定性改变,即微卫星不稳定性(microsatellite instablility,MSI)和杂合性缺失(loss ofheterozygosity,loh)可能是产生基因突变,导致抑癌基因功能失调,引起肿瘤发生的重要因素。微卫星是由2～6个核苷酸组成,具有高度多态性的简单串联核苷酸重复序列。MSI是指由于复制错误导致微卫星的增多或减少。loh是指一个位点上两个多态性的等位基因中的一个出现缺失或变异。大量研究表明,抑癌基因MSI与loh在肿瘤的多步骤发生过程中起着重要的作用。MSI首先是在遗传性非息肉性结直肠癌(heredity non-polyposis colorectal cancer,HNPCC)中发现的,随后在各种散发性肿瘤,如大肠癌、胃癌、子宫内膜癌、乳腺癌、前列腺癌和胰腺癌中均发现MSI。研究表明MSI的发生提高了随机突变率,更重要的是导致了肿瘤相关基因的突变,可能是引起肿瘤发生的一个重要机制。若DNA复制错误的结果是等位基因片段的缺失,则导致loh的发生。研究发现与抑癌基因相关的杂合性微卫星位点常伴有等位基因的丢失,即loh的发生。所以分析loh已成为目前检测抑癌基因失活、发现和定位新的肿瘤抑制基因(tumor suppressor gene,TSG)的重要手段之一。分泌型卷曲相关蛋白1(Secreted Frizzled-related Protein 1,sFRP1)定位于8p12-p11.1,包含3个外显子和2个内含子。sFRP1基因近年来作为一种候选抑癌基因而研究,其编码一种分泌性糖蛋白,是Wnt信号通路的一种上游抑制物。sFRP1蛋白约由313个氨基酸构成,大小约35.3kDa。Wnt/β-catenin信号途径的作用特点是:在缺乏Wnt信号时,胞浆内新合成的β-catenin维持在一个稳定的低水平。β-catenin与胞浆中由多种蛋白包括APC(adenomatous polyposis coli)、GSK-3β(glycogen synthase kinase-3β)、Axin、β-TrCP/Slimb等组成的“降解复合物”结合,Axin和APC提供一个使GSK-3β和β-catenin附着的支架,GSK-3β能够使β-cateninNH端的丝/苏氨酸残基磷酸化。被磷酸化了的β-catenin可以被β-TrCP识别并进而被其泛素化,β-catenin以蛋白酶体的方式迅速降解,这样胞浆中游离β-catenin就保持在低水平而不会有过多沉积。当Wnt信号存在时,Wnt蛋白与蛇根碱受体家族的7次跨膜卷曲蛋白(Frz)的胞外区结合,在低密度脂蛋白受体相关蛋白(LDL-receptor-related protein,LRP)协同作用下,存在于细胞浆中的Dishevelled(Dvl或Dsh)蛋白被募集至胞膜下,Dvl能够把GSK-3β磷酸化,致GSK-3β从Axin上脱落,β-catenin不能被降解,大量游离的β-catenin在胞浆中聚集并进而进入细胞核内。在核内无β-catenin时转录因子家族的TCF/LEF通过HMG盒(HMG boxes)与DNA结合,DNA的转录活性被抑制。β-catenin与TCF/LCF结合形成复合体后,TCF/LEF抑制作用被解除,特异地启动、激活下游Wnt靶基因的转录。目前已经证实的靶基因包括c-myc、cyclinD1等。而这些靶基因与细胞凋亡、细胞生长、血管生成及肿瘤侵袭转移相关。 sFRP1与Wnt的受体卷曲蛋白(frizzled,Frz)受体的胞外区有相似的核苷酸序列,但是,与Frz受体不同,sFRP1缺乏用来转导Wnt信号的跨膜区和胞内区,因此,sFRP1通过与受体竞争结合Wnt蛋白,或直接与Wnt蛋白结合,由此阻断了Wnt信号传导通路,sFRP1基因的表达沉默,可引起Wnt的持续存在,激活Wnt靶基因,导致恶性肿瘤的发生、恶化。目前发现有十几种已知的高发性癌变源于Wnt信号传导途径的失调。既往研究表明,在结肠癌、肺癌、子宫癌、乳腺癌、食管癌中,sFRP1表达下调与其启动子甲基化有关。***等研究指出,91.5%的HCCs相对于癌旁肝组织的sFRP1表达量

关键词：肝癌 sFRP1 MSI loh

江苏省中老年男性生殖健康现状评估及健康指导

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江苏省中老年男性生殖健康现状评估及健康指导

作者：卿兴荣南方医科大学

学位级别：硕士

研究背景随着人类社会生活水平和医疗保健水平的提高,全球人均寿命快速增长。同时,伴随着中国社会老龄化进程的不断继续,老年人在社会人群中所占的比例正逐渐增大。更年期是人类从中年进入到老年的过渡期。对男性更年期,医学界争论了多... 详细信息

研究背景随着人类社会生活水平和医疗保健水平的提高,全球人均寿命快速增长。同时,伴随着中国社会老龄化进程的不断继续,老年人在社会人群中所占的比例正逐渐增大。更年期是人类从中年进入到老年的过渡期。对男性更年期,医学界争论了多年,目前意见已趋于一致,认为男性亦存在更年期。如同女性,此时期的男性同样会出现许多心理上和机体上的功能紊乱。但与女性更年期雌激素骤降不同,中老年男性更年期时,其雄激素水平会出现增龄性缓慢下降,且只有部分雄激素缺乏的中老年男性会出现相应的临床症状,即迟发型性腺功能减退症(Late-Onset Hypogonadism, loh)。 loh是一种与男性年龄增长相关的临床和生物化学综合征,其特征为血清睾酮(T)水平降低(低于健康年轻成年男性的正常参考值范围)和一定的临床症状,如性功能减退、抑郁、瘦体量下降、骨质疏松及代谢异常等。loh的诊断应包括以下三个方面：①症状筛查评价：由于loh发病隐匿、进展缓慢及症状缺乏特异性导致诊断困难。为了筛查loh、提高诊断的准确性,许多学者将loh的诸多症状归纳总结、设计了许多症状筛查量表用于临床诊断,取得了较好的效果。目前,用于loh诊断的筛查量表主要采用AMS量表(the Aging Male Symptoms Scale)用于症状筛查,结合SF-36量表及Beck抑郁量表可对患者的症状进行全面筛查。②血清T测定：血清T水平测定是公认的诊断性腺功能减退症最为可靠的指标,测定T水平的血清标本,应于7：0-9：00时段采集。对于T水平,目前国内外尚无统一的切点值,一般以20～39岁年龄组95%可信区间的下限值或T水平的10%位数作为切点值。国内推荐血清T水平低下的切点值为：总睾酮(TT)≤11.5nmol/L,睾酮分泌指数(TSI=TT/LH)≤208nmol/IU,计算所得游离睾酮(cFT)≤0.3nmol/L,游离睾酮指数(fTI=TT/SHBG)≤0.42nmol/nmol。③试验性睾酮补充治疗的反应：患者出现loh相关症状并伴有血清T降低,在排除其他疾病或药物影响后,提示症状可能与血清T降低有关,试验性睾酮补充治疗(testosterone supplementary therapy, TST)可以进一步确定症状与T水平的关系(具有潜在或明显T缺乏症状,而T水平处于边缘水平时,且高度怀疑症状由T缺乏引起,可进行诊断性TST)。通过loh相关症状筛查评价、实验室检查,并且证明试验性TST有效时,才能最后确立loh的诊断,并根据患者的具体情况,采用相应的治疗方案进行TST。若处理不当,可严重影响患者的生活质量。鉴于中老年男性雄激素缺乏可对多器官、系统造成诸多不利影响,对中老年更年期生殖健康的评估和相关健康指导迫在眉睫。同时,代谢组学(metabolomics或metabonomics)作为继基因组学、转录组学和蛋白质组学之后兴起的系统生物学的一个新的分支,它能通过考察生物体系受刺激或扰动前后(如将某个特定的基因变异或环境变化后)代谢产物图谱及其动态变化研究生物体系的代谢网络。代谢组学的优势在于生物体的代谢物分析可反映机体系统的生理和病理状态,另外,基因和蛋白表达的微小变化会在代谢物水平得到放大。由于较高的生物敏感性,可以用于疾病的先期诊断和新药的早期筛选。因此,利用代谢组学的研究方法,可敏感地检测中老年男性更年期血清T水平的微小变化,评估T变化与多器官、系统效应的关系,并提供可能的生殖激素水平的遗传易感位点。代谢组学技术在中老年男性更年期生殖健康评估中具有非常广阔的应用前景。江苏省目前尚缺乏中老年男性生殖健康的系统调查及评估,而当地具有较为完善的卫生保健体系,其居民亦具有较强的个人保健意识,这为中老年男性生殖健康现状调查提供了有利条件。本课题通过对以南京城区为代表的城镇中老年男性进行随机抽样调查和以金湖县所辖乡镇为代表的农村中老年男性进行整群抽样调查,通过调查问卷、体格检查及实验室检查相结合的方法,获取基线数据,本课题组后续工作将以此为基础结合代谢组学等临床实验检查,多因素相关分析及系统评价分析影响江苏省中老年男性生殖健康的不利影响因素,研究江苏省中老年男性更年期生殖激素水平的遗传易感位点,及更年期早期预警分子,并根据研究数据拟定预防和治疗方案。目的 1、通过对以南京城区为代表的城镇中老年男性进行随机抽样调查和以金湖县所辖乡镇为代表的农村中老年男性进行整群抽样调查,获取江苏省城乡中老年男性生殖健康现状的基线数据;2、通过对基线数据的初步分析,评估江苏省城乡中老年男性更年期生殖健康现状,探索影响其生殖健康的可能因素,同时给予相应健康指导;3、通过对基线数据的进一步分析,为本课题组的后续研究提供良好的基础。方法 1、南京城区中老年男性生殖健康现状评估 1.1研究对象及分组

关键词：江苏省中老年男性 loh 生殖健康生殖激素现状评估健康指导