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Subtoxic concentration of Doxorubicin enhances TRAIL-induced apoptosis in Human prostate cancer cell line lncap

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Subtoxic concentration of Doxorubicin enhances TRAIL-induced...

二甲双胍抑制IL-6诱导的lncap增殖及上皮-间质转化

第十三届全国泌尿外科学术会议暨第八届全球华人泌尿外科学...

作者： Jian Kang Liang Zhang Jun Qi Fang Chen Department of Urology Xinhua Hospital Medical School of Shanghai Jiaotong University

＜正＞Most tumor cells are sensitive to TRAIL-induced apoptosis but sparing to normal cells, thus providing therapeutic potential for clinical use. Some tumor cells are resistant to TRAIL-induced cell death while the ... 详细信息

关键词： TRAIL Doxorubicin lncap Apoptosis

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第三军医大学学报 2013年第13期35卷 1337-1340页

作者：章国亮姜庆江军重庆医科大学附属第二医院泌尿外科重庆400010 第三军医大学大坪医院野战外科研究所泌尿外科重庆400042

目的初步探讨二甲双胍抑制前列腺癌发展的作用。方法使用慢病毒感染构建IL-6过表达细胞株lncap-IL-6(IL-6过表达病毒转染)和lncap-ctr(空病毒转染),运用激光共聚焦扫描确定转染效果,ELISA检测lncap、lncap-IL-6和lncap-ctr细胞IL-6分泌... 详细信息

目的初步探讨二甲双胍抑制前列腺癌发展的作用。方法使用慢病毒感染构建IL-6过表达细胞株lncap-IL-6(IL-6过表达病毒转染)和lncap-ctr(空病毒转染),运用激光共聚焦扫描确定转染效果,ELISA检测lncap、lncap-IL-6和lncap-ctr细胞IL-6分泌水平,倒置显微镜观察细胞形态。实验分为lncap-ctr组、lncap-IL-6组、lncap-ctr+二甲双胍组和lncap-IL-6+二甲双胍组,MTT技术检测相对细胞数量,流式细胞技术检测二甲双胍对细胞周期的影响。实验分为lncap-IL-6和lncap-IL-6+二甲双胍组,运用细胞迁移实验检测两组细胞迁移速度,Western blot技术检测两组细胞TWIST和E-Cadherin表达水平。结果激光共聚焦扫描和ELISA检测证明IL-6过表达细胞株lncap-IL-6构建成功,lncap-IL-6细胞IL-6分泌水平约为lncap-ctr的5 000倍。MTT实验显示第5天lncap-IL-6相对细胞数量约为lncap-ctr的1.4倍,处理组的lncap-IL-6相对细胞数量约为lncap-ctr的1.6倍;流式细胞仪检测显示二甲双胍阻滞lncap的细胞周期为S期。细胞形态学观察和Western blot检测证实IL-6诱导lncap发生上皮-间质转化,细胞迁移实验显示二甲双胍可抑制lncap-IL-6细胞的迁移,Western blot进一步证实二甲双胍降低lncap-IL-6 TWIST表达及升高E-Cadherin表达。结论二甲双胍能够抑制IL-6诱导的lncap细胞的上皮-间质转化。

关键词：前列腺癌二甲双胍上皮-间质转化 lncap

Decoy核酸在前列腺癌lncap细胞株中的作用及其机制

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中华实验外科杂志 2010年第8期27卷 1139-1141页

作者：杨立峰叶定伟姚旭东张世林戴波张海梁复旦大学附属肿瘤医院泌尿外科上海200032

目的观察雄激素受体反应元件陷阱核酸（ARE decoy DNA）在lncap细胞中的致凋亡作用及下游信号通路.方法根据ARE-Ⅰ、ARE-Ⅱ人工合成decoy核酸,进行部分和完全硫代修饰,应用凝胶阻抑分析方法检测4种decoy核酸与雄激素受体（AR）特异性... 详细信息

目的观察雄激素受体反应元件陷阱核酸（ARE decoy DNA）在lncap细胞中的致凋亡作用及下游信号通路.方法根据ARE-Ⅰ、ARE-Ⅱ人工合成decoy核酸,进行部分和完全硫代修饰,应用凝胶阻抑分析方法检测4种decoy核酸与雄激素受体（AR）特异性结合.选择特异性结合最强decoy核酸通过LipofectinTM 2000转染细胞,MTS法检测转染后细胞增殖能力,共聚焦显微镜观察细胞形态学改变,Western blot检测细胞内蛋白表达.结果 ARE-Ⅱdecoy转染后MTS检测细胞A值0.500±0.013（48 h）,与对照decoy转染组0.750±0.055（48 h）比较差异有统计学意义（P＜0.01）.细胞核皱缩,核染色质分块,DNA电泳出现阶梯状ladder,证明细胞发生凋亡.Western blot检测发现细胞内p-Akt表达明显降低（P＜0.05）,Akt信号通路被抑制,促进了细胞凋亡.结论 ARE-Ⅱdecoy核酸明显抑制前列腺癌lncap细胞生长,促进细胞凋亡,改变细胞内信号通路.

关键词：前列腺癌雄激素受体 lncap Decoy核酸

阿福豆苷对前列腺癌lncap、PC-3细胞增殖和凋亡的影响及其机制

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阿福豆苷对前列腺癌LNCaP、PC-3细胞增殖和凋亡的影响及其机制

lncap前列腺癌原位接种SCID小鼠模型的建立

第十次全国中西医结合男科学术大会、第六次广西中医、中西医结合男科学术大会、全国中西医结合男科疾病诊疗新进展学习班

作者：朱开常刘峰许小林陈琳王忠刘林涛上海市奉贤区中心医院泌尿外科

目的观察香睡莲提取物阿福豆苷的体外抗前列腺癌活性及其对前列腺癌三磷酸酶家族蛋白的影响。方法（1）细胞培养:培养雄激素依赖性lncap细胞和雄激素非依赖性PC-3细胞。（2）细胞增殖实验:将对数生长期的lncap和PC-3细胞接种于96孔培... 详细信息

目的观察香睡莲提取物阿福豆苷的体外抗前列腺癌活性及其对前列腺癌三磷酸酶家族蛋白的影响。方法（1）细胞培养:培养雄激素依赖性lncap细胞和雄激素非依赖性PC-3细胞。（2）细胞增殖实验:将对数生长期的lncap和PC-3细胞接种于96孔培养板恒温培养。次日分别加入不同终浓度（0,0.1,1,10 ug/ml）的阿福豆苷。在CO培养箱中再孵育24 h,48 h,72 h后终止培养,0 ug/ml组仅加等量培养液。WST-1标记。检测波长为420 nm处的吸光度值。（3）细胞周期分析:将培养的lncap和PC-3前列腺癌细胞分别加入不同的浓度的阿福豆苷孵育24 h。碘化丙啶染色。流式细胞仪检测细胞周期分布,CellQuest细胞周期分析软件进行数据分析。（4）蛋白印迹分析:检测不同浓度阿福豆苷对前列腺癌lncap和PC-3细胞中MRCKα,LIMK1及ROCK1激酶表达的影响。采用改良Lowry分光光度法测定蛋白质浓度。结果:（1）阿福豆苷可以降低前列腺癌细胞在体外的生长速率:浓度为1μg/ml与10μg/ml的阿福豆苷在所有的三个时间点（24 h,48 h,72 h）上都强烈影响到了两种细胞的生长速率,而0.1ug/ml浓度下没有明显的生长抑制作用。（2）阿福豆苷诱导PC3和lncap细胞凋亡:经过浓度为10μg/ml的阿福豆苷处理后的PC-3细胞中,有相当于细胞总数27.6%的一段宽峰数值出现在G0期,相比之下的对照组中数值仅为12.7%。在lncap细胞中观察到了相同的结果,对照组中细胞总数的12.0%都停止在了G0期,而经过浓度为10 ug/ml阿福豆苷处理的lncap细胞则有19.4%停止在G0期。（3）阿福豆苷抑制三磷酸酶家族蛋白质的表达:蛋白印迹分析发现,当阿福豆苷的剂量增大时lncap与PC-3细胞中的三磷酸酶家族（LIMK1,MRCKα和ROCK1蛋白）蛋白的磷酸化逐渐消失。光密度定量分析结果显示阿福豆苷对PC-3细胞三磷酸酶家族蛋白质的表达抑制作用尤为明显。结论:香睡莲提取物阿福豆苷能强有力的抑制雄激素敏感性lncap细胞和雄激素非依赖性PC-3细胞这两种细胞的增殖,阻断细胞周期在G0期,诱导lncap和PC3细胞凋亡。其对这些细胞的抗癌活性与L1MK1表达抑制有关,当阿福豆苷的剂量增大时,lncap与PC-3细胞中的LIMKl,MRCKα和ROCK1蛋白等激酶的磷酸化逐渐消失,而这些激酶的磷酸化将打乱肌动蛋白细胞骨架,导致细胞快速恶性增长。阿福豆苷反向调节LIMK1的作用是通过抑制MRCKα和ROCK1的方式来达到的。

关键词： lncap 雄激素非依赖性阿福豆苷前列腺癌细胞增殖和凋亡

来源： cnki会议评论

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黑龙江畜牧兽医 2012年第7期 104-106页

作者：王金秋李志何丹李朋北京农业职业学院北京102442

为了研究lncap前列腺癌疾病,试验采用在SCID小鼠前列腺内接种lncap前列腺癌细胞建立原位接种模型并探讨其应用价值,用微量注射器在SCID小鼠的前列腺左右背外侧叶包膜下接种小鼠前列腺癌lncap细胞1×106个建立原位移植瘤模型,以皮下移植... 详细信息

为了研究lncap前列腺癌疾病,试验采用在SCID小鼠前列腺内接种lncap前列腺癌细胞建立原位接种模型并探讨其应用价值,用微量注射器在SCID小鼠的前列腺左右背外侧叶包膜下接种小鼠前列腺癌lncap细胞1×106个建立原位移植瘤模型,以皮下移植瘤模型作为对照比较两者的生存期、肿瘤转移发生情况,并在电镜下观察lncap前列腺肿瘤细胞和小鼠正常前列腺组织细胞的特征。结果表明:原位模型组小鼠平均生存时间为(21.0±2.1)d,较对照组(35.0±4.5)d明显缩短,差异极显著(P<0.01);原位模型组小鼠全部发生肿瘤转移,其中盆腔淋巴结和肺脏的转移发生率分别为100%(15/15)、60%(9/15);电镜观察发现,SCID小鼠的正常前列腺细胞与癌变后的细胞体积及细胞器均有很大差异。

关键词： lncap 原位接种 SCID小鼠

雌激素受体α上调前列腺癌细胞株lncap中L-Plastin启动子转录活性研究

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中华实验外科杂志 2005年第11期22卷 1364-1366页

作者：林天歆褚忠华黄健许可慰李泗耀黄海尹心宝江春中山大学附属第二医院泌尿外科广州510120 中山大学附属第二医院肝胆外科广州510120

目的鉴定雌激素受体在L-Plastin启动子上的结合位点,进一步阐明雌激素受体在激素依赖型前列腺癌中的作用机制。方法利用TF SEARCH软件分析L-Plastin启动子的序列,寻找可能调控L-Plastin表达的雌激素受体结合位点,利用PCR定点突变法构建... 详细信息

目的鉴定雌激素受体在L-Plastin启动子上的结合位点,进一步阐明雌激素受体在激素依赖型前列腺癌中的作用机制。方法利用TF SEARCH软件分析L-Plastin启动子的序列,寻找可能调控L-Plastin表达的雌激素受体结合位点,利用PCR定点突变法构建删除该转录因子结合位点的重组子,检测切除该片段序列后荧光素酶活性,并用凝胶滞后实验和超滞后实验证实雌激素受体是否结合于该位点,研究雌激素受体在激素依赖型前列腺癌中调控L-Plastin表达的作用。结果TF SEARCH软件分析表明,在L-Plastin启动子上距转录起始点-85^-70 bp处,含有雌激素受体结合位点ATTTCACTGTGACCT,删除该结合位点后L-Plastin启动子荧光素酶活性明显下降,凝胶滞后实验和超滞后实验表明雌激素受体α是结合于该位点的转录因子。结论雌激素受体α具有促进L-plastin在激素依赖型前列腺癌中表达的作用。

关键词：前列腺癌雌激素受体启动子前列腺癌细胞株雌激素受体α 转录因子 lncap 活性研究受体结合位点 PCR定点突变法

小檗胺和氟他胺联合应用对前列腺癌lncap细胞株的抑制作用

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中华泌尿外科杂志 2009年第9期30卷 623-626页

作者：玄绪军孙鹏赵勇李连军王慕文中山大学附属孙逸仙纪念医院泌尿外科广州510120 山东省立医院泌尿微创科

目的研究小檗胺与氟他胺联合应用对雄激素依赖性前列腺癌细胞株lncap的抑制作用。方法以不同浓度的小檗胺作用于lncap细胞株24、48、72h，并以氟他胺及小檗胺联合氟他胺作为对照，采用噻唑盐（MTT）法检测小檗胺和氟他胺对lncap细胞的... 详细信息

目的研究小檗胺与氟他胺联合应用对雄激素依赖性前列腺癌细胞株lncap的抑制作用。方法以不同浓度的小檗胺作用于lncap细胞株24、48、72h，并以氟他胺及小檗胺联合氟他胺作为对照，采用噻唑盐（MTT）法检测小檗胺和氟他胺对lncap细胞的抑制作用，流式细胞术检测细胞周期分布，并在透射电镜下观察细胞超微结构改变。统计分析应用SPSS 11．0软件包，组间比较行单因素方差分析，细胞周期结果采用Х^2检验。结果MTT结果显示，40mg／L小檗胺作用24、48、72h对lncap细胞的抑制率分别为（34．43±1．92）％、（63．72±2．46）％、（83．42±2．02）％，与对照组比较差异有统计学意义（P〈0．01）；小檗胺对lncap细胞的增殖抑制作用呈时间、浓度依赖关系。小檗胺联合氟他胺对lncap的增殖抑制作用具有协同性。透射电镜下见经小檗胺作用后细胞具有典型的凋亡形态学改变；流式细胞仪检测lncap细胞有明显的凋亡峰，凋亡强度具有时间、浓度依赖性。结论小檗胺通过影响细胞周期和诱导细胞凋亡等机制抑制前列腺癌细胞株lncap的增殖，并具有时间和浓度依赖性；小檗胺联合氟他胺对lncap的增殖抑制作用具有协同性。

关键词：前列腺肿瘤小檗胺氟他胺 lncap

灵芝酮三醇对人前列腺癌细胞lncap生长的影响及其对5α-还原酶的抑制作用

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天然产物研究与开发 2013年第10期25卷 1416-1419页

作者：章慧张劲松冯娜汪雯翰唐传红杨焱贾薇唐庆九潘迎捷国家食用菌工程技术研究中心农业部南方食用菌资源利用重点实验室上海市农业科学院食用菌所上海201403 上海海洋大学上海201306 不详

本文用四唑盐(MTT)比色法和酶联免疫(ELISA)法研究了灵芝酮三醇对雄激素依赖性前列腺癌细胞株lncap细胞增殖和分泌前列腺特异性抗原(PSA)的抑制作用,另外还运用高效液相色谱法研究了灵芝酮三醇对5α-还原酶的抑制作用。结果显示,灵芝酮... 详细信息

本文用四唑盐(MTT)比色法和酶联免疫(ELISA)法研究了灵芝酮三醇对雄激素依赖性前列腺癌细胞株lncap细胞增殖和分泌前列腺特异性抗原(PSA)的抑制作用,另外还运用高效液相色谱法研究了灵芝酮三醇对5α-还原酶的抑制作用。结果显示,灵芝酮三醇对lncap细胞的增殖和分泌PSA的作用均呈现浓度依赖性抑制。另外,灵芝酮三醇对5α-还原酶的抑制作用也呈现浓度依赖性,作用浓度为2.5 mM时,其对5α-还原酶的抑制率为51.88%。结果表明灵芝酮三醇对lncap的抑制用既与其细胞毒性有关也与其对雄激素的抑制作用有关。

关键词：灵芝酮三醇 lncap 前列腺特异性抗原雄激素受体 5α-还原酶

雄激素非依赖性前列腺癌细胞亚系模型lncap-AI的建立

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第二军医大学学报 2008年第1期29卷 59-62页

作者：叶华茂孙颖浩许传亮王林辉侯建国高旭杨庆刘智勇第二军医大学长海医院泌尿外科上海200433

目的:建立雄激素非依赖性前列腺癌细胞亚系模型lncap-AI。方法:长期在去雄激素的血清环境下培养雄激素依赖性lncap细胞,培养出能够适应无雄激素环境的lncap-AI细胞亚系。MTT、RT-PCR、免疫荧光方法观察lncap-AI细胞在无雄激素环境下的... 详细信息

目的:建立雄激素非依赖性前列腺癌细胞亚系模型lncap-AI。方法:长期在去雄激素的血清环境下培养雄激素依赖性lncap细胞,培养出能够适应无雄激素环境的lncap-AI细胞亚系。MTT、RT-PCR、免疫荧光方法观察lncap-AI细胞在无雄激素环境下的增殖能力和表达及分泌前列腺特异性抗原(PSA)的水平。结果:lncap前列腺癌细胞在无雄激素中培养3个月后逐渐适应了无雄激素的环境,成为雄激素非依赖的lncap-AI细胞亚系。lncap-AI细胞在无雄激素的环境下迅速增殖,能够分泌PSA,但其PSA mRNA的表达水平是正常生长lncap细胞的44%。结论:成功构建雄激素非依赖性前列腺癌细胞亚系模型lncap-AI,可以模拟前列腺癌由雄激素依赖发展为雄激素非依赖的过程。

关键词：前列腺癌雄激素非依赖 lncap