检索结果-南通市图书馆

作者：张景国河北医科大学

学位级别：硕士

目的:我国肺癌的发病率和死亡率均位于常见恶性肿瘤的首位。非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSClC)是最常见的组织学类型(～80%)。临床治疗中伴随细胞毒化疗用药、靶向药物的应用,伴随出现的耐药问题已经成为肿瘤治疗的瓶颈... 详细信息

目的:我国肺癌的发病率和死亡率均位于常见恶性肿瘤的首位。非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSClC)是最常见的组织学类型(～80%)。临床治疗中伴随细胞毒化疗用药、靶向药物的应用,伴随出现的耐药问题已经成为肿瘤治疗的瓶颈。其中上皮-间质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)为多种药物耐药相关的重要机制之一,但是其复杂的调控机制尚未完全阐明。课题组前期研究表明,RNA结合蛋白-lix1l作为间质样细胞的重要标记分子,其高表达与多个NSClC细胞系EMT相关(未发表)。敲低lix1l后进行二代测序发现,阿片生长因子受体OGFr(opioid growth factor receptor,OGFr)基因表达显著增加,提示OGFr可能在lix1l-EMT过程中发挥作用。鉴于此,本研究中我们通过体外实验,初步探讨OGFr在NSClC细胞增殖、迁移以及侵袭等生物学过程中的作用,为揭示lix1l基因作用机制奠定基础。方法:1.细胞培养与处理:含1%青霉素/链霉素的双抗及10%胎牛血清的RPMI-1640培养基培养贴壁生长的H358、HCC827、H1975细胞;分别给予上述细胞TGF-β1处理后获得EMT转化细胞,标记为H358T、HCC827T以及H1975T,用于后续实验。2.细胞转染:lix1l-siRNA、OGFr-siRNA分别转染细胞用于敲低基因表达实验。***-PCR方法:检测lix1l、OGFr、CDH1、Vimentin等基因在m RNA水平的表达。*** Blot方法:检测lix1l、OGFr、E-cadherin、Vimentin蛋白水平的表达。5.二代测序:H358T、HCC827T、H1975T细胞转染lix1l-siRNA后提取细胞总RNA,在敲低效率验证基础上进行二代测序检测。***方法:检测OGFr-siRNA转染、lix1l-siRNA转染或OGFr抑制剂NTX处理对细胞增殖的影响。7.克隆形成实验:检测OGFr-siRNA转染、或OGFr抑制剂NTX处理对细胞增殖的影响。***小室:检测OGFr-siRNA转染、lix1l-siRNA转染或OGFr抑制剂NTX处理对细胞迁移和侵袭能力的影响。9.统计学处理:应用SPSS21.0和Graphpad软件对结果进行统计学分析及作图。结果用均数±标准差描述,P1.二代测序结果及验证:测序结果表明三组细胞均发现下游分子OGFr显著升高,应用Real-Time qPCR验证与测序结果一致。2.检测lix1l、OGFr基因在H358以及H358T细胞中的表达:H358T细胞较H358细胞相比,lix1l在m RNA和蛋白水平显著增高,OGFr在m R NA和蛋白水平显著降低(P1)。***转染敲低OGFr表达对H358细胞增殖能力的影响:与对照组相比,其增殖活性(P1)均增高。4.敲低OGFr对H358细胞迁移与侵袭能力的影响:与对照组相比,其迁移能力(P1)、侵袭能力(P1)均增高。***抑制剂NTX处理对H358细胞增殖能力的影响:与对照组相比,其增殖活性(P1)均增高。***抑制剂NTX处理对H358细胞迁移与侵袭能力的影响:与对照组相比,其迁移(P1)和侵袭能力(P1)均增高。7.联合敲低lix1l、OGFr对H358细胞增殖活性、迁移与侵袭能力的影响:与对照组相比,敲低lix1l后细胞增殖活性(P1)、迁移(P1)和侵袭(Plix1l和OGFr,与敲低lI X1l组相比,细胞增殖活性(P1)、迁移(P1)和侵袭能力(P0.05)。结论:1.给予TGF-β1处理诱导H358、HCC827以及H1975肺腺癌细胞发生EMT后,lix1l基因表达显著增加,OGFr表达显著降低,提示两者与细胞EMT相关。2.给予二代测序筛选以及验证发现,抑制细胞中lix1l表达后OGFr表达增加,提示OGFr可能为lix1l负向调控的下游基因。***1l、OGFr参与NSClC细胞增殖、迁移与侵袭过程的调节,并且OGFr在lI

关键词：非小细胞肺癌 lix1l OGFr 上皮-间质转化

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lix1-like protein promotes liver cancer progression via miR-21-3p-mediated inhibition of fructose-1,6-bisphosphatase

引用

Acta Pharmaceutica Sinica B 2021年第6期11卷 1578-1591页

作者： Jie Zou Xiaoyun Zhu Dejuan Xiang Yanqiu Zhang Jie li Zhigui Su lingyi Kong Hao Zhang State Key laboratory of Natural Medicines and Jiangsu Key laboratory of Bioactive Natural Product Research School of Traditional Chinese PharmacyChina Pharmaceutical UniversityNanjing 210009China State Key laboratory of Natural Medicines and Jiangsu Key laboratory of Drug Discovery for Metabolic Diseases Center of Advanced Pharmaceuticals and BiomaterialsChina Pharmaceutical UniversityNanjing 210009China

limb and CNS expressed 1 like(lix1l) is over-expressed in several types of ***,the function of lix1l in glucose metabolism and hepatocellular carcinoma(HCC) progression remains *** we report that lix1l is over-expressed in human HCC tissues,which predicts unfavorable ***1l deficiency in vivo significantly attenuated liver cancer initiation in *** studies indicated that lix1l overexpression elevated proliferation,migratory,invasive capacities of HCC cells in vitro,and promoted liver cancer growth and metastasis in ***1l knockdown up-regulated fructose-1,6-bisphosphatase(FBP1) expression to reduce glucose consumption as well as lactate ***,lix1l increased miR-21-3p expression,which targeted and suppressed FBP1,thereby promoting HCC growth and ***-21-3p inhibitor could abrogate lix1l induced enhancement of cell migration,invasion,and glucose *** of miR-21-3p suppressed tumor growth in an orthotopic tumor *** results establish lix1l as a critical driver of hepatocarcinogenesis and HCC progression,with implications for prognosis and treatment.

关键词： lix1l FBP1 miR-21-3p Glucose metabolism Hepatocellular carcinoma Proliferation Metastasis Gluconeogenesis

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