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linc01268 promotes epithelial-mesenchymal transition,invasion and metastasis of gastric cancer via the PI3K/Akt signaling pathway and targeting MARCKS

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World Journal of Gastrointestinal Oncology 2023年第8期15卷 1366-1383页

作者： Ling-Han Tang Peng-Cheng Ye Lin Yao Ya-Jun Luo Wang Tan Wan-Ping Xiang Zi-Lin Liu Ling Tan Jiang-Wei Xiao Department of Gastrointestinal Surgery Clinical Medical College and the First Affiliated Hospital of Chengdu Medical CollegeChengdu 610000Sichuan ProvinceChina Department of Gastrointestinal Surgery The Affiliated Hospital of North Sichuan Medical CollegeNanchong 637000Sichuan ProvinceChina Department of Gastrointestinal Surgery Sichuan Cancer HospitalChengdu 610000Sichuan ProvinceChina Department of Gastrointestinal Surgery Yaan People’s HospitalYaan 625000Sichuan ProvinceChina Department of Thoracic Surgery The Affiliated Hospital of North Sichuan Medical CollegeNanchong 637000Sichuan ProvinceChina Department of Surgery People’s Hospital Affiliated to Chongqing Three Gorges Medical CollegeChongqing 404041China

BACKGROUND Long non-coding RNAs(lncRNAs)with differential expression characteristics have been found to be closely related to the tumorigenesis and development of gastric cancer(GC),but their specific mechanisms and roles still need to be further elucidated.AIM To investigate the expression of linc01268 in GC and its mechanism of affecting GC progression.METHODS Real-time quantitative polymerase chain reaction was used to detect the expression of linc01268 in GC tissues,cell lines and plasma.The Kaplan-Meier method was used to evaluate the value of linc01268 in the prognostication of GC patients.An receiver operating characteristic curve was constructed to evaluate the value of linc01268 in the diagnosis of GC.Transwell migration and invasion assays and wound healing assays were used to confirm the effect of linc01268 on the invasion and migration of GC cells.The regulatory relationship between linc01268 and myristoylated alanine rich protein kinase C substrate(MARCKS),the PI3K/Akt signaling pathway,and the epithelial-mesenchymal transition(EMT)process in GC was demonstrated by western blot analysis.RESULTS The expression of linc01268 was increased in GC tissues and cell lines.The expression level of linc01268 was significantly correlated with lymph node metastasis,TNM stage,and tumor differentiation in patients with GC.Over-expression of linc01268 indicated a poor prognosis for patients with GC,and it had a certain auxiliary diagnostic value for GC.In vitro functional experiments proved that the abnormal expression of linc01268 further activated the PI3K/Akt signaling pathway and promoted EMT by targeting and regulating MARCKS and ultimately promoted the invasion and metastasis of GC.CONCLUSION This study elucidates that linc01268 in GC may be an oncogene that further activates the PI3K/Akt signaling pathway and EMT by targeting and regulating MARCKS,and ultimately promotes the invasion and metastasis of GC.linc01268 may be a potential effective target for the treatment of GC.

关键词： Gastric cancer Long non-coding RNA linc01268 Myristoylated alanine rich protein kinase C substrate Invasion Metastasis

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长链非编码RNA linc01268对急性髓系白血病细胞恶性生物学行为的影响

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中国实验血液学杂志 2023年第6期31卷 1608-1616页

作者：陈婉干定云武汉市第三医院血液内分泌内科湖北武汉430060

目的:探讨长链非编码RNA linc01268对急性髓系白血病(AML)细胞凋亡的影响及其相关机制。方法:采用q RT-PCR检测AML患者外周血样本及AML细胞系HL-60、KG-1中linc01268和miR-217的表达水平;将HL-60细胞分为pc DNA3.1-NC、pc DNA3.1-linc01268、si-NC、si-linc01268、miR-NC、miR-217 mimics、si-linc01268+inhibitorNC和si-linc01268+miR-217 inhibitor共8组。采用q RT-PCR检测转染后细胞中linc01268和miR-217 mRNA的表达;双荧光素酶报告实验检测linc01268与miR-217的靶向关系;CCK-8法检测细胞活力;流式细胞术检测细胞周期分布和凋亡;Western blot检测细胞周期和凋亡相关蛋白p21、Bcl-2、Bax、caspase-3及PI3K/AKT信号通路相关蛋白表达。结果:linc01268在AML患者外周血样本、AML细胞系HL-60和KG-1中表达量均明显升高(Plinc01268组和miR-217 mimics组HL-60细胞活力下降(Plinc01268靶向结合并负向调控miR-217的表达,抑制miR-217的表达可部分逆转干扰linc01268对HL-60细胞活力、细胞周期和凋亡的影响;干扰linc01268可抑制PI3K/AKT信号通路活性,抑制miR-217的表达能部分逆转干扰linc01268对PI3K/AKT信号通路的抑制作用。结论:AML细胞中linc01268呈高表达,miR-217呈低表达。linc01268可通过靶向miR-217表达,促进PI3K/AKT信号通路活性,升高急性髓系白血病细胞存活率,抑制其凋亡。

关键词： linc01268 miR-217 急性髓系白血病 PI3K/AKT通路生物学行为

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长链非编码RNA linc01268经由PI3K/Akt信号通路调控胃癌EMT和侵袭转移的实验研究

长链非编码RNA LINC01268经由PI3K/Akt信号通路调控胃癌EMT和侵袭...

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作者：唐翎瀚川北医学院

学位级别：硕士

目的:长链非编码RNA（long non-coding RNA,LncRNA）在肿瘤发生发展过程中的作用和参与调控机制是目前肿瘤研究领域的热点,需要进一步阐明。本研究旨在探究LncRNA linc01268在胃癌中的表达水平,与胃癌病人临床病理特征的关系及其在胃癌... 详细信息

目的:长链非编码RNA（long non-coding RNA,LncRNA）在肿瘤发生发展过程中的作用和参与调控机制是目前肿瘤研究领域的热点,需要进一步阐明。本研究旨在探究LncRNA linc01268在胃癌中的表达水平,与胃癌病人临床病理特征的关系及其在胃癌诊断、预后评估方面的潜在意义,并深入探讨其参与调控胃癌EMT和侵袭转移的分子机制。方法:（1）利用基因芯片分析筛选出差异表达LncRNAlinc01268。利用RT-qPCR检测linc01268在62例胃癌和癌旁组织,以及胃癌细胞系、胃正常粘膜上皮细胞中的表达水平差异。（2）结合临床病理资料分析linc01268的表达变化与胃癌病人临床病理特征的关系。（3）RT-qPCR检测31例胃癌患者和19名健康人血浆中的linc01268表达水平,并构建ROC曲线初步评估其诊断价值。（4）根据随访资料,用Kaplan-Meier法绘制生存曲线并探讨linc01268表达水平与患者预后的关系,评估其在胃癌患者预后判断中的价值。（5）利用在线分析工具circlncRNAnet筛选linc01268共表达基因,用RT-qPCR检测共表达基因在胃癌组织中的表达水平,并结合数据库starBase、Kaplan-Meier Plotter分别分析其与linc01268在胃癌中表达量、预后评估等方面的相关性。（6）体外细胞实验中,利用基因干扰技术敲低linc01268表达,通过transwell、划痕实验中观察胃癌细胞侵袭迁移能力的变化,同时分析MARCKS、PI3K/Akt信号通路以及EMT相关分子的表达变化。结果:（1）与癌旁组织和正常胃壁细胞对比,胃癌组织和胃癌细胞系中linc01268的表达水平明显上调。（2）linc01268表达水平与胃癌病人淋巴结转移、TNM分期、癌组织分化程度呈现明显相关性。（3）linc01268表达水平是胃癌发生转移的独立影响因素。（4）胃癌患者血浆中linc01268表达水平明显上调,血浆linc01268诊断胃癌灵敏度为67.74%,特异度为94.74%,AUC为0.840,具有一定的临床诊断价值。（5）linc01268表达水平可能与胃癌患者的不良预后有关,表达水平高的患者预后更差。（6）胃癌组织中MARCKS的mRNA和蛋白水平均高于癌旁组织。在共表达基因MARCKS与HDAC2中,MARCKS与linc01268在多方面都表现出更明显的正向相关性,因此推测MARCKS极大可能是linc01268靶调控基因。（7）敲低linc01268表达水平后,MARCKS表达水平也下降,同时胃癌细胞的侵袭迁移能力削弱。（8）敲低linc01268表达水平后,胃癌细胞中PI3K、Akt、CDH2、Vimentin、MMP9表达水平也下降,提示PI3K/Akt信号通路、EMT过程受到抑制。结论:（1）胃癌中linc01268表达上调,与胃癌淋巴结转移阳性、更晚的TNM分期、癌组织低分化呈现显著正相关性,同时linc01268的表达水平可能与胃癌患者的不良预后有关,表达水平高的患者预后更差。（2）相比较正常健康人群,胃癌病人血浆中linc01268的表达水平升高,其对胃癌诊断、预后评估监测具有一定的潜在临床应用的价值。（3）敲低linc01268表达能够显著抑制胃癌细胞的EMT和侵袭转移,提示linc01268在胃癌的侵袭转移过程中扮演着重要角色,其极大可能是通过靶向调控促进MARCKS基因的表达上调和活化,进而激活PI3K/Akt信号通路,并促使胃癌细胞EMT的发生,最终促进胃癌的侵袭和转移。

关键词：胃癌长链非编码RNA linc01268 MARCKS

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