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linc00152靶向miR-376c-3p对宫颈癌细胞活力、凋亡和放射敏感性的影响

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中国病理生理杂志 2020年第1期36卷 67-74页

作者：刘晓娟王静张娟高月月王虹河北北方学院附属第一医院妇产科

目的:探讨长链非编码RNA linc00152对宫颈癌细胞活力、凋亡和放射敏感性的影响及作用机制。方法:RT-qPCR检测宫颈癌HeLa细胞和SiHa细胞以及正常宫颈细胞Ect1/E6E7中linc00152与微小RNA-376c-3p(miR-376c-3p)的表达水平。建立linc00152... 详细信息

目的:探讨长链非编码RNA linc00152对宫颈癌细胞活力、凋亡和放射敏感性的影响及作用机制。方法:RT-qPCR检测宫颈癌HeLa细胞和SiHa细胞以及正常宫颈细胞Ect1/E6E7中linc00152与微小RNA-376c-3p(miR-376c-3p)的表达水平。建立linc00152低表达或miR-376c-3p过表达的宫颈癌HeLa细胞系,MTT法、流式细胞术、集落形成实验和Western blot分别检测linc00152低表达或miR-376c-3p过表达对宫颈癌HeLa细胞的活力、凋亡、放射敏感性及相关蛋白表达的影响。双萤光素酶报告基因实验验证linc00152与miR-376c-3p的调控关系。结果:与Ect1/E6E7细胞相比,宫颈癌HeLa细胞和SiHa细胞中的linc00152表达上调,miR-376c-3p表达下调(Plinc00152低表达或miR-376c-3p过表达均可抑制HeLa细胞的活力,并诱导其凋亡,增强其放射敏感性,抑制cyclin D和Bcl-2蛋白表达,促进P21和Bax蛋白表达(Plinc00152在HeLa细胞中负向调控miR-376c-3p的表达,抑制miR-376c-3p表达可逆转linc00152低表达对HeLa细胞活力、凋亡和放射敏感性的作用。结论:宫颈癌细胞中linc00152高表达;linc00152通过靶向调控miR-376c-3p影响HeLa细胞的生长、凋亡和放射敏感性,是宫颈癌潜在的诊治靶点。

关键词：宫颈癌 linc00152 微小RNA-376c-3p 细胞活力细胞凋亡放射敏感性

linc00152 accelerates gastric cancer cell growth by acting as a competing endogenous RNA and regulating FASN expression

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LINC00152 accelerates gastric cancer cell growth by acting a...

LncRNA linc00152过表达在替莫唑胺诱导脑胶质瘤干细胞周期阻滞中的作用机制探讨

中国生物化学与分子生物学会2016年全国学术会议

作者： Zhen Jiang Junming Guo Department of Biochemistry School of Preclinical Medicine North Sichuan Medical College Department of Biochemistry and Molecular Biology Zhejiang Provincial Key Laboratory of Pathophysiology Ningbo University School of Medicine

Gastric cancer(GC)is thought to be driven by long noncoding RNA(lnc RNA),lipid metabolism and the activation of the oncogene,but it is uncertain how they may become coordinated during the gastric *** present study reports that the lnc RNA linc00152 acts as a competing endogenous RNA(ce RNA)to regulate the expression of fatty acid synthase

关键词： linc00152 competing endogenous RNA gastric cancer

来源： cnki会议评论

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中国癌症杂志 2020年第5期30卷 328-334页

作者：张良龙安宏伟赵立智董倩高桂艳沧州市人民医院神经外科河北沧州061000 德州市陵城区中医院神经外科山东德州253500

背景与目的:linc00152是异常表达于肝癌、胃癌及结肠癌等恶性肿瘤中的长链非编码RNA(long non-coding RNA,lncRNA)之一,参与增殖、迁移及凋亡等生物学行为,观察linc00152在替莫唑胺(temozolomide,TMZ)诱导脑胶质瘤干细胞(glioblastoma s... 详细信息

背景与目的:linc00152是异常表达于肝癌、胃癌及结肠癌等恶性肿瘤中的长链非编码RNA(long non-coding RNA,lncRNA)之一,参与增殖、迁移及凋亡等生物学行为,观察linc00152在替莫唑胺(temozolomide,TMZ)诱导脑胶质瘤干细胞(glioblastoma stem cell,GSC)周期阻滞中的作用及其机制。方法:神经干细胞培养液培养脑胶质瘤U251细胞,并提取成球生长的GSC作为研究对象,慢病毒转染法外源性上调模型细胞linc00152表达水平并以嘌呤霉素筛选稳定表达的细胞株,实时荧光定量聚合酶链反应(real-time fluorescence quantitative polymerase chain reaction,RTFQPCR)检测linc00152表达水平,细胞计数试剂盒(cell counting kit-8,CCK-8)法检测细胞活力变化,流式细胞术检测细胞周期变化,蛋白质印迹法(Western blot)检测P53、Cyclin A、CDC25A及CDK2蛋白水平变化。结果:分离提取的GSC呈球状生长,细胞球CD133和Oct-4呈阳性表达。慢病毒转染明显上调GSC中linc00152表达水平(Plinc00152过表达能抵抗TMZ的诱导效应(Plinc00152过表达能抵抗TMZ的诱导效应(Plinc00152过表达能抵抗TMZ的诱导效应(Plinc00152过表达可抑制TMZ诱导的P53蛋白水平上调和CyclinA、CDC25A、CDK2蛋白水平下调,拮抗S期阻滞。

关键词：长链非编码RNA linc00152 替莫唑胺细胞周期脑胶质瘤

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linc00152/微小RNA-150/β-连环蛋白轴对非小细胞肺癌增殖、迁移和上皮-间充质转化的影响

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中华实验外科杂志 2021年第11期38卷 2183-2186页

作者：徐磊魏立贾向波姚文健胡帅赵璞张全务森河南省人民医院郑州大学人民医院胸外科河南省终末期肺疾病外科治疗工程研究中心河南省肺结节精准治疗工程研究中心河南省肺移植快速康复外科治疗工程研究中心450003

目的探讨linc00152/微小RNA(miR)-150/β-连环蛋白(β-catenin)轴对非小细胞肺癌增殖、迁移和上皮-间充质转化的影响。方法人非小细胞肺癌细胞A549随机分为linc00152 KD组和长链非编码RNA(lncRNA)对照组,分别采用linc00152短发卡RNA(shR... 详细信息

目的探讨linc00152/微小RNA(miR)-150/β-连环蛋白(β-catenin)轴对非小细胞肺癌增殖、迁移和上皮-间充质转化的影响。方法人非小细胞肺癌细胞A549随机分为linc00152 KD组和长链非编码RNA(lncRNA)对照组,分别采用linc00152短发卡RNA(shRNA)和lncRNA对照慢病毒感染,建立linc00152敲降细胞系。采用噻唑蓝(MTT)、克隆形成实验、划痕实验和蛋白质印迹法(Western blot)分析linc00152对细胞增殖、迁移和上皮-间充质转化的影响。采用生物信息学和双荧光素酶报告基因分析linc00152和miR-150关系及其靶基因。采用Western blot分析靶基因蛋白表达水平。计量数据比较采用t检验。结果 lncRNA对照组细胞linc00152表达水平(1.24±0.22)明显高于linc00152 KD组linc00152表达水平(0.42±0.12),差异有统计学意义(t=4,819,Plinc00152 KD组(1.75±0.12),差异有统计学意义(t=4,819,Plinc00152 KD组[(97.47±9.43)个],差异有统计学意义(t=5.081,Plinc00152 KD组细胞(2.54±0.33),差异有统计学意义(t=4.909,Plinc00152 KD组细胞(0.26±0.07、0.34±0.09),差异有统计学意义(t=4.127、3.298,Plinc00152的靶miRNA是miR-150,而miR-150的靶基因是β-catenin。lncRNA对照组细胞miR-150表达水平(1.08±0.15)明显低于linc00152 KD组miR-150表达水平(2.87±0.18),差异有统计学意义(t=3.179,Plinc00152 KD组β-catenin蛋白表达水平(0.42±0.12),差异有统计学意义(t=4.819,Plinc00152在非小细胞肺癌中表达上调,下调linc00152可显著抑制非小细胞肺癌的增殖、迁移和上皮-间充质转化,其作用机制可能是linc00152通过吸附miR-150促进β-catenin表达。

关键词： linc00152 非小细胞肺癌微小RNA-150 β-连环蛋白增殖迁移

linc00152在骨肉瘤中的表达及其与细胞增殖、迁移的关系

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中华实验外科杂志 2019年第7期36卷 1253-1255页

作者：杜文君张雪松孙娟夏英鹏朱如森张诗武天津市人民医院南开大学人民医院脊柱中心 300121 唐山市第二医院唐山市骨科医院 063608 天津市人民医院病理科 300121

目的探讨长链非编码RNA(lncRNA) linc00152在骨肉瘤中的表达及其与细胞增殖迁移的关系.方法采用实时荧光定量聚合酶链反应(Real-time PCR)技术检测天津市人民医院收治并手术治疗的26骨肉瘤患者癌组织、远癌的正常骨组织及SaoS2、U2OS、... 详细信息

目的探讨长链非编码RNA(lncRNA) linc00152在骨肉瘤中的表达及其与细胞增殖迁移的关系.方法采用实时荧光定量聚合酶链反应(Real-time PCR)技术检测天津市人民医院收治并手术治疗的26骨肉瘤患者癌组织、远癌的正常骨组织及SaoS2、U2OS、HOS、MG63骨肉瘤细胞株及正常骨细胞株hFOB1.19中linc00152的差达水平,分析linc00152在不同的组织及细胞株中的差异表达.应用小干扰RNA(siRNA)技术下调骨肉瘤细胞株中linc00152表达,比较下调前后骨肉瘤细胞增殖、迁移能力变化情况.应用SPSS 17.0统计软件分析,计量资料以均值±标准差(Mean±SD)表示,两组之间比较采用t检验.结果人骨肉瘤细胞(SaoS2、U2OS、HOS及MG63)中linc00152的相对表达水平分别为7.23 ±2.11,5.02±1.89,4.21 ±1.51和3.75±1.52,显著高于正常骨细胞株hFOB1.19(1.21±0.22)且差异有统计学意义(F=9.358,Plinc00152的相对表达量分别为4.12±1.81和1.97±1.03,肿瘤组织显著高于正常组织,差异有统计学意义(t=5.490,Plinc00152的小干扰RNA (si_00152)及无关序列(si_nc),发现SaoS2细胞下调linc00152表达后,其增殖能力、迁移能力及穿膜能力显著降低.结论lncRNA linc00152在入骨肉瘤组织及细胞株中表达明显增高,并参与了细胞增殖及迁移生物学过程.

关键词：骨肉瘤 linc00152 增殖迁移

linc00152在幽门螺杆菌感染的胃上皮细胞中的调控作用及机制研究

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LINC00152在幽门螺杆菌感染的胃上皮细胞中的调控作用及机制研究

作者：李璐燕江苏大学

学位级别：硕士

目的:本研究旨在探讨linc00152在幽门螺杆菌（Helicobactor pylori,***）感染的胃上皮细胞中的调控作用及作用机制,为***感染相关性胃炎及胃癌的诊断提供一定的分子生物学基础。方法:（1）应用qRT-PCR方法检测linc00152在***感染的正常... 详细信息

目的:本研究旨在探讨linc00152在幽门螺杆菌（Helicobactor pylori,***）感染的胃上皮细胞中的调控作用及作用机制,为***感染相关性胃炎及胃癌的诊断提供一定的分子生物学基础。方法:（1）应用qRT-PCR方法检测linc00152在***感染的正常胃上皮细胞中的表达,确定linc00152基因表达与***的关系;应用qRT-PCR检测linc00152在不同胃癌细胞及正常胃黏膜上皮细胞中的表达水平。（2）采用基因干扰技术和基因过表达技术,分别在不同胃癌细胞中转染si-linc00152和过表达质粒pc DNA-linc00152,建立体外linc00152敲减和过表达细胞模型,且通过qRT-PCR技术验证敲减及过表达效率。（3）通过CCK8细胞增殖实验检测linc00152表达对胃癌细胞增殖能力的影响;利用Transwell小室细胞迁移实验检测linc00152表达对胃癌细胞的迁移能力。（4）采用Western blot技术分析细胞迁移、增殖相关蛋白的变化,检测NF-κB、Wnt/β-catenin信号通路相关蛋白及炎症因子表达的变化。（5）利用细胞转染技术分别在linc00152低表达细胞及高表达细胞中共转e GFP-LC3质粒,通过观察细胞内LC3颗粒的聚集情况,分析各组细胞自噬水平的差异。（6）应用Western blot检测linc00152表达对各组细胞自噬相关蛋白表达水平的影响。结果:（1）linc00152在正常胃上皮细胞GES-1和不同胃癌细胞株中均有表达,在BGC-823细胞中表达量最高,在MGC-803细胞中表达量最低。（2）linc00152的表达在***感染的正常胃上皮细胞GES-1中被抑制,且随着***感染时间的延长,linc00152表达水平呈现下降趋势。（3）Transwell细胞迁移实验及CCK8细胞增殖实验结果提示:linc00152表达能够抑制***感染引起的促进胃癌细胞增殖及迁移的现象;同时通过调节TIMP1、MMP9、MMP2等蛋白影响胃癌细胞的迁移能力;通过调节PCNA、bcl-2、Cyclin D1细胞增殖相关蛋白影响胃癌细胞的增殖能力。（4）linc00152通过调节间质细胞标志蛋白N-cadherin、snail、Vimentin以及上皮细胞标志蛋白E-cadherin影响胃癌细胞的EMT进程。（5）linc00152可以调控NF-κB、Wnt/β-catenin信号通路中关键蛋白的变化。（6）linc00152表达能够影响胃上皮细胞的细胞自噬,***明显促进了细胞自噬;linc00152过表达能够抑制***诱导的胃癌细胞自噬,而linc00152敲减可以增强细胞自噬。（7）linc00152表达能够影响细胞自噬相关蛋白LC3I/II、Beclin1、P62的表达。结论:linc00152在***感染的胃上皮细胞GES-1中表达下降,并通过作用于Wnt/β-catenin信号通路、EMT进程影响胃癌细胞的增殖和转移,同时影响***诱导的细胞自噬和炎症作用。

关键词： linc00152 幽门螺杆菌上皮间质转化细胞自噬胃癌

linc00152对胰腺癌细胞MIA PaCa-2增殖侵袭及迁移的影响

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Linc00152对胰腺癌细胞MIA PaCa-2增殖侵袭及迁移的影响

作者：何美玲贵州医科大学

学位级别：硕士

目的:探讨长链非编码RNA linc00152对人胰腺癌细胞株MIA PaCa-2增殖、侵袭和迁移能力的影响。方法:于医院胆胰科采集到20对胰腺癌组织和其对应的癌旁正常的胰腺组织;人正常胰腺细胞HPDE及各组胰腺癌细胞系MIA PaCa-2细胞、BxPC-3细胞、C... 详细信息

目的:探讨长链非编码RNA linc00152对人胰腺癌细胞株MIA PaCa-2增殖、侵袭和迁移能力的影响。方法:于医院胆胰科采集到20对胰腺癌组织和其对应的癌旁正常的胰腺组织;人正常胰腺细胞HPDE及各组胰腺癌细胞系MIA PaCa-2细胞、BxPC-3细胞、Capan2细胞购于美国ATCC细胞库。实时荧光定量聚合酶链式反应(RT-qPCR)验证组织及各组细胞中linc00152的表达水平。人胰腺癌细胞株MIA PaCa-2细胞随机分为阴性对照组(si-NC组)和linc00152下调组(si-linc00152组)。设计linc00152的siRNA(small interfering RNA)干扰模型,si-NC组和si-linc00152组分别转染阴性对照序列(Negative control)、siRNA抑制序列,采用RT-qPCR验证两组MIA PaCa-2细胞中linc00152的转染效率并进行后续实验。采用CCK-8法和集落形成实验检测两组MIA PaCa-2细胞的增殖能力;流式细胞术检测两组MIA PaCa-2细胞的细胞周期;Western-blot检测两组胰腺癌细胞MIA PaCa-2的细胞周期相关蛋白cyclin D1、CDK4的表达:采用Transwell实验和细胞划痕实验测两组MIA PaCa-2细胞的侵袭、迁移能力;Western-blot检测两组MIA PaCa-2的细胞相关蛋白vimentin及N-cadherin的表达水平。结果:与癌旁正常的胰腺组织相比,linc00152在胰腺癌组织中表达明显增加(Plinc00152在胰腺癌细胞系中的表达均高于人正常胰腺细胞HPDE,且在MIA PaCa-2中表达最高(Plinc00152组中的linc00152表达明显降低(Plinc00152组中的细胞在48 h、72 h、96 h增殖显著下降(Plinc00152组的集落形成是(226±8),结果显示沉默linc00152后细胞克隆数目明显减少(Plinc00152后,与si-NC组相比,si-linc00152组MIA PaCa-2在细胞周期中的G0/G1期百分比上升,提示发生了细胞周期阻滞(Plinc00152后细胞侵袭的数目明显减少(Plinc00152后细胞迁移的数目明显减少(Plinc00152组中细胞迁移,侵袭能力也显著降低(Plinc00152组中的cyclin D1、CDK4蛋白表达水平均显著降低(Plinc00152组中的vimentin及N-cadherin蛋白表达水平均显著降低(Plinc00152在胰腺癌组织及细胞系中高表达。2、沉默linc00152能抑制胰腺癌细胞MIA PaCa-2增殖、侵袭、迁移。3、沉默linc00152能阻滞胰腺癌细胞MIA PaCa-2周期于G0/G1期,可能与cyclinD1-CDK4通路有关。4、沉默linc00152能抑制胰腺癌细胞MIA PaCa-2的EMT,可能与vimentin及N-cadherin蛋白表达水平降低有关。

关键词：胰腺癌长链非编码RNA linc00152 增殖侵袭迁移

LncRNA linc00152靶向miR-193a-3p对胃癌细胞增殖、侵袭和迁移的影响

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中国现代应用药学 2022年第10期39卷 1296-1304页

作者：李琪儿胡桂梅沈慈益宁波大学医学院附属医院浙江宁波315020 宁波大学消化疾病研究所浙江宁波315020

目的探讨LncRNA linc00152靶向调控miR-193a-3p对胃癌细胞增殖、侵袭和迁移的影响。方法采用qRT-PCR法检测正常胃黏膜细胞GES-1及4种胃癌细胞(MGC803、BGC803、SGC7901、AGS)中linc00152的表达水平。MGC-803细胞分为pcDNA3.1-GFP-linc00152组、pcDNA3.1-GFP组;AGS细胞分为si-linc00152组、si-NC组,分别转染相应的linc00152过表达和抑制载体。qRT-PCR法检测linc00152、细胞周期素D1(cyclin D1,CCND1)和miR-193a-3p基因的表达水平,CCK-8检测细胞的活性,细胞克隆试验检测细胞的克隆能力,Annexin VFITC/PI染色后采用流式细胞术检测转染细胞凋亡率,Transwell法检测细胞侵袭,荧光素酶报告试验检测linc00152和miR-193a-3p靶向关系,Western blotting检测Bcl-2、Bax、CCND1、E-钙黏蛋白(E-cadherin)和波形蛋白(Vimentin)的蛋白表达水平。并将si-linc00152组、si-NC组细胞接种裸鼠,观察裸鼠体质量和一般状态,处死后称重记录肿瘤体积、质量,qRT-PCR法测定肿瘤组织linc00152、CCND1和miR-193a-3p的表达水平。结果与GES-1细胞相比,胃癌细胞MGC803、BGC803、SGC7901、AGS中linc00152的表达升高,其中linc00152在胃癌MGC803细胞中表达较低,而在胃癌AGS细胞中的表达较高,选用胃癌MGC803、AGS细胞进行后续试验。与pcDNA3.1-GFP组相比,pcDNA3.1-GFP-linc00152组细胞的活性显著升高,克隆能力增强,细胞凋亡减少,侵袭能力显著上升,CCND1、Bcl-2、波形蛋白的表达显著升高,miR-193a-3p和E-钙黏蛋白的表达显著降低。双荧光素酶报告基因系统检测结果显示,linc00152可直接调控miR-193a-3p的转录活性,且linc00152可显著上调MGC-803细胞CCND1蛋白表达。与si-NC组相比,si-linc00152组的裸鼠体内的异种移植瘤体积和体质量显著下降,CCND1和linc00152的表达显著下降,miR-193a-3p的表达显著上升。结论 linc00152可靶向作用于miR-193a-3p促进胃癌细胞增殖、侵袭和迁移,其作用机制与细胞周期、上皮细胞间充质转化以及细胞凋亡有关。

关键词： linc00152 胃癌 miR-193a-3p 细胞周期素D1 上皮细胞间充质转化

敲除linc00152对丝裂霉素耐药胃癌细胞NCI-N87/MMC的化疗耐药性影响及机制

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世界华人消化杂志 2021年第7期29卷 332-339页

作者：吴明东叶洁桐朱蓓蕾叶芳敏汪望月丽水市人民医院药学部浙江省丽水市323000 浙江省人民医院消化内科浙江省杭州市310000

背景长基因间非编码RNA 152(long intergenic noncoding RNA 152,linc00152)在胃癌组织中高表达,且其能促进胃癌细胞增殖、迁移与侵袭,而linc00152对胃癌化疗耐药的影响和机制并不清楚.目的探究linc00152对人胃癌细胞系NCI-N87化疗耐药... 详细信息

背景长基因间非编码RNA 152(long intergenic noncoding RNA 152,linc00152)在胃癌组织中高表达,且其能促进胃癌细胞增殖、迁移与侵袭,而linc00152对胃癌化疗耐药的影响和机制并不清楚.目的探究linc00152对人胃癌细胞系NCI-N87化疗耐药性的影响及相关的作用机制.方法实时定量荧光聚合酶链式反应(real-time fluorescence quantitative polymerase chain reaction,Real-time PCR)检测人胃癌细胞系NCI-N87及其丝裂霉素(mitomycin,MMC)耐药细胞系NCI-N87/MMC中linc00152的表达情况.采用小分子RNA干扰技术敲除NCI-N87/MMC中linc00152的表达后,MTT法检测细胞对MMC和顺铂的敏感性,流式细胞术检测细胞凋亡,Western Blot检测B细胞淋巴瘤/白血病-2(B cell lymphoma/lewkmia-2,Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bcl-2 associated X protein,Bax)、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3(cysteine aspartic acid proteinase 3,caspase3)和劈裂的caspase3(cleaved-caspase3)的蛋白表达水平.此外,Real-time PCR和Western blot检测多药耐药蛋白1/P-糖蛋白(multidrug resistant protein 1/P-glycoprotein,MDR1/P-gp)、层粘连蛋白受体1前体抗原(P37-kDa laminin receptor-1 precursor antigen,Mgr1-Ag)以及多药耐药相关蛋白(multidrug resistance-associated protein,MRP)的表达.结果NCI-N87/MMC细胞中linc00152的表达水平明显高于其亲本细胞NCI-N87.在NCI-N87/MMC细胞中,敲除linc00152可诱导细胞凋亡,并增加其对MMC和顺铂的敏感性.敲除linc00152可抑制NCI-N87/MMC细胞中Bcl-2蛋白表达,促进Bax蛋白表达和caspase 3的活化.此外,敲除linc00152还可下调NCI-N87/MMC细胞中多药耐药基因MDR1、Mgr1-Ag、MRP及其编码的蛋白的表达.结论下调NCI-N87/MMC细胞中linc00152的表达可提高细胞对MMC和顺铂的敏感性,其机制可能与调控细胞凋亡相关因子促进凋亡,同时下调细胞中多药耐药基因MDR1、Mgr1-Ag及MRP的表达有关.

关键词： linc00152 胃癌 NCI-N87细胞丝裂霉素耐药细胞凋亡