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REGγ drives lgr5^(+) stem cells to potentiate radiation induced intestinal regeneration

Science China(Life Sciences) 2022年第8期65卷 1608-1623页

作者： Xiangzhan Zhu Minglei Yang Zaijun Lin Solomon Kibreab Mael Ya Li Lili Zhang Yaqi Kong Yaodong Zhang Yuping Ren Jianhui Li Zimeng Wang Ying Zhang Bo yang Tingmei Huang Fangxia Guan Zhenlong Li Robb E Moses Lei Li Bing Wang Xiaotao Li Bianhong Zhang Changning Maternity and Infant Health Hospital East China Normal UniversityShanghai 20051China Shanghai Key Laboratory of Regulatory Biology Institute of Biomedical SciencesSchool of Life SciencesEast China Normal UniversityShanghai 200241China Department of Orthopedic Oncology Changzheng Hospitalthe Second Military Medical UniversityShanghai 200003China Department of Spinal Surgery Shidong HospitalYangpu DistrictShidong Hospital Affiliated to University of Shanghai for Science and TechnologyShanghai 200438China Henan Key Laboratory for Helicobacter pylori&Microbiota and GI cancer Marshall Medical Research CenterThe Fifth Affiliated Hospital of Zhengzhou UniversityZhengzhou 450052China Department of Neonatology Children’s Hospital Affiliated to Zhengzhou UniversityZhengzhou 450018China Department of Pathology Xuchang Central Hospital Affiliated to Henan University of Science and TechnologyXuchang 461000China School of Life Sciences Zhengzhou UniversityZhengzhou 450001China Department of Hematology&Hematopoietic Cell Transplantation City of Hope National Medical CenterLos Angeles CA 91010USA Department of Molecular and Cellular Biology Baylor College of MedicineHouston TX 77030USA Department of Oncological Surgery Minhang BranchShanghai Cancer CenterFudan UniversityShanghai 200240China

Leucine-rich repeat containing G protein-coupled receptor 5(lgr5), a marker of intestinal stem cells(ISCs), is considered to play key roles in tissue homoeostasis and regeneration after acute radiation injury. However, the activation of lgr5 by integrated signaling pathways upon radiation remains poorly understood. Here, we show that irradiation of mice with whole-body depletion or conditional ablation of REGγ in lgr5^(+) stem cell impairs proliferation of intestinal crypts, delaying regeneration of intestine epithelial cells. Mechanistically, REGγ enhances transcriptional activation of lgr5 via the potentiation of both Wnt and Hippo signal pathways. TEAD4 alone or cooperates with TCF4, a transcription factor mediating Wnt signaling, to enhance the expression of lgr5. Silencing TEAD4 drastically attenuated β-catenin/TCF4 dependent expression of lgr5. Together, our study reveals how REGγ controls lgr5 expression and expansion of lgr5+stem cells in the regeneration of intestinal epithelial ***, REGγ proteasome appears to be a potential therapeutic target for radiation-induced gastrointestinal disorders.

关键词： REGγ intestinal stem cell lgr5 Wnt YAP

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lgr5^+ intestinal stem cell sorting and organoid culture

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Animal Models and Experimental Medicine 2019年第2期2卷 132-135页

作者： Ruixue Liu Haifeng Li Juan Cai Qiang Wei Xiaonan Han Key Laboratory of Human Disease Comparative Medicine The Ministry of Health Institute of Laboratory Animal Science (ILAS) Chinese Academy of Medical Science (CAMS) and Peking Union Medical College (PUMC)

Intestinal epithelial stem cells (IESCs) are one of the most rapidly self‐renewing and proliferating adult stem cells. The IESCs reside at the bottom of intestinal and colonic crypts, giving rise to all intestinal epithelial lineages and maintaining intestinal epithelial replenishment. The technique of three‐dimensional culture based upon intestinal stem cell biology has been recently developed to study gastrointestinal development and disease pathogenesis. Here, we summarize the techniques used to isolate lgr5‐ positive IESCs to form the enteroids from intestine or colonoids from colon, and present the means to examine these organoid functions. This study will provide a simple and practical way for producing intestinal tissues in the laboratory.

关键词： colonoids enteroids lgr5 intestinal stem cells organoid culture

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lgr5与结肠癌关系的研究进展

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世界华人消化杂志 2013年第8期21卷 673-678页

作者：陈小燕赵逵遵义医学院附属医院消化内科贵州省遵义市563099

lgr5(leucine-rich repeat-containing g-protein coupled receptor5)属于G蛋白耦联受体家族,含17个富含亮氨酸重复序列和7次a螺旋跨膜区,其N-和C-末端尾部侧翼富含半胱氨酸序列,可在胃肠道、毛囊等多种组织中表达.lgr5是最新发现的Wnt... 详细信息

lgr5(leucine-rich repeat-containing g-protein coupled receptor5)属于G蛋白耦联受体家族,含17个富含亮氨酸重复序列和7次a螺旋跨膜区,其N-和C-末端尾部侧翼富含半胱氨酸序列,可在胃肠道、毛囊等多种组织中表达.lgr5是最新发现的Wnt通路的靶基因,而且是潜在的结肠癌干细胞标志物,与结肠癌的发生和发展密切相关,现就lgr5与结肠癌的关系作一综述.

关键词：干细胞标志物 lgr5 Wnt通路结肠癌

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lgr5和CD44在肠息肉和结直肠癌中的表达及意义

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南方医科大学学报 2013年第7期33卷 972-976页

作者：柴宁莉张文成王艳敏周昭涛张艳娥刘红艳万军覃金华王术勇王韫芳裴雪涛吴本俨令狐恩强解放军总医院南楼消化内科北京100853 解放军军事医学科学院野战输血研究所干细胞与再生医学实验室北京100853 解放军总医院南楼消化内科健康医学中心胃肠镜室北京100853 解放军总医院消化科北京100853

目的探讨不同病理分型肠息肉与肿瘤发生相关的干细胞标志lgr5和CD44的表达及其对息肉癌变的临床预测意义。方法经结肠镜活检获取结肠直肠息肉、腺瘤和癌组织145例,进行病理检测分型;应用免疫组化方法检测不同病理类型标本中肿瘤干细胞标... 详细信息

目的探讨不同病理分型肠息肉与肿瘤发生相关的干细胞标志lgr5和CD44的表达及其对息肉癌变的临床预测意义。方法经结肠镜活检获取结肠直肠息肉、腺瘤和癌组织145例,进行病理检测分型;应用免疫组化方法检测不同病理类型标本中肿瘤干细胞标志lgr5和CD44的表达,分析比较其与结、直癌的发生和预后的关系。结果 CD44在结肠癌组织中的表达率为95.65%,显著高于正常粘膜5%、炎性增生性息肉22.58%、管状腺瘤性息肉55.26%及绒毛状息肉75.76%(P5)。lgr5在大肠癌组织中的表达高达95.65%(22/23),显著高于正常粘膜(无表达)和炎性增生息肉16.12%(P5),而在管状腺瘤和绒毛状腺瘤中表达分别为86.84%(33/38)和93.94%(31/33),与大肠癌相比,两两差异不具有统计学意义(P>0.05)。相关性分析结果显示,CD44、lgr5的表达强度与肠息肉癌变进展均呈正相关(rs=0.69377,Plgr5和CD44在大肠癌癌组织中高表达,它们的高表达与临床和病理的特征具有显著相关性;lgr5和CD44的表达是区别大肠癌癌组织与正常肠粘膜组织的显著特点;与CD44相比,lgr5表达与息肉癌变具有较强相关性,联合检测lgr5与CD44在肠道早期病变诊断、尤其是肠息肉癌变预测中具有重要意义。

关键词：肿瘤干细胞 lgr5 CD44 结肠息肉结肠癌

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lgr5在肝癌细胞及肝癌组织中的表达及意义

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解剖学报 2011年第6期42卷 802-806页

作者：宋竹雯魏潇凡高建超白莉张宏权第三军医大学研究生大队重庆400038 北京大学医学部基础医学院解剖学与组织胚胎学系北京100191

目的探讨lgr5在4个肝癌细胞系、癌旁组织及肝癌组织中的表达,及在肝癌中的作用。方法免疫印迹法及实时定量RT-PCR检测正常细胞和4种肝癌细胞中lgr5的表达;采用免疫组织化学检测36例肝癌及癌旁组织中lgr5及β-catenin的表达;利用免疫细... 详细信息

目的探讨lgr5在4个肝癌细胞系、癌旁组织及肝癌组织中的表达,及在肝癌中的作用。方法免疫印迹法及实时定量RT-PCR检测正常细胞和4种肝癌细胞中lgr5的表达;采用免疫组织化学检测36例肝癌及癌旁组织中lgr5及β-catenin的表达;利用免疫细胞化学检测HepG2细胞中lgr5的表达。结果免疫印迹法及实时定量RT-PCR证实,与正常肝脏细胞相比,lgr5除了在HepG2细胞中等表达外,在另外3种肝癌细胞Hep3B、Huh7、PLC中呈弱表达或不表达(P5),免疫细胞化学结果进一步证实lgr5在HepG2细胞膜上表达。免疫组织化学结果显示,与癌旁组织相比,lgr5在肝癌组织中表达明显减少,而β-catenin的表达显著增加。结论与正常肝脏细胞及癌旁组织相比,lgr5在多种肝癌细胞及肝癌组织中的表达明显减少。

关键词： lgr5 肝癌免疫组织化学免疫印迹法实时荧光RT—PCR 人

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利用谱系追踪方法探究lgr5在胰腺组织及其类器官中的表达

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遗传 2022年第5期44卷 432-441页

作者：闫炳儒艾显辉刘淼田丽红梁洋滕春波东北林业大学生命科学学院哈尔滨150040 东北林业大学野生动物保护与自然保护地学院哈尔滨150040

富含亮氨酸重复序列G蛋白偶联受体5(leucine-rich repeat containing G protein-coupled receptor 5,lgr5)在体内分布广泛,可以作为多种上皮组织(包括小肠、结肠、胃和毛囊)中干细胞的标记物。为了探究小鼠(Mus musculus)胰腺发育过程... 详细信息

富含亮氨酸重复序列G蛋白偶联受体5(leucine-rich repeat containing G protein-coupled receptor 5,lgr5)在体内分布广泛,可以作为多种上皮组织(包括小肠、结肠、胃和毛囊)中干细胞的标记物。为了探究小鼠(Mus musculus)胰腺发育过程中导管上皮细胞及体外培养的胰腺导管类器官中lgr5的表达情况,本研究利用lgr5-Cre^(ERT2+/–)和Rosa26-mTmG杂交后的转基因小鼠,经Tamoxifen(他莫昔芬)诱导后,观察不同发育阶段胰腺组织切片的荧光表达情况,并通过三维培养建立成体小鼠胰腺导管类器官,观察诱导后类器官细胞中的荧光变化。结果显示:Tamoxifen诱导的正常成体转基因小鼠胰腺导管内未检测到表达lgr5的细胞;通过对孕鼠及哺乳母鼠注射Tamoxifen,在胚胎发育15.5 d和新生小鼠胰腺中也未发现lgr5阳性细胞;但是将4-hydroxy-Tamoxifen(4-羟基–他莫昔芬)添加到培养基中,在lgr5-Cre^(ERT2+/–);Rosa26-mTmG转基因小鼠胰腺导管来源的类器官中检测到部分细胞表达lgr5。本研究结果证实,在成体及胚胎胰腺组织中没有检测到lgr5表达,但在体外培养的胰腺导管类器官细胞中检测到lgr5表达。本研究为探索胰腺发育过程中干/祖细胞特异性表达基因奠定了基础。

关键词：胰腺导管 lgr5 类器官谱系追踪

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lgr5在结直肠癌中的作用机制及靶向治疗研究进展

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生命科学 2021年第10期33卷 1231-1238页

作者：彭立雄常江张博威胡学渝谭忠鹏柳增善胡盼吉林大学动物医学学院长春130062 吉林大学人兽共患病研究所教育部重点实验室长春130062

lgr5是7次跨膜G蛋白偶联受体(G protein-coupled receptor,GPCR)超家族成员,在结直肠癌中高表达。研究发现,lgr5是结直肠癌干细胞的标志物,其异常表达能够促进结直肠癌的进展和转移,被认为是重要的结直肠癌预后不良分子。lgr5主要通过W... 详细信息

lgr5是7次跨膜G蛋白偶联受体(G protein-coupled receptor,GPCR)超家族成员,在结直肠癌中高表达。研究发现,lgr5是结直肠癌干细胞的标志物,其异常表达能够促进结直肠癌的进展和转移,被认为是重要的结直肠癌预后不良分子。lgr5主要通过Wnt/β-catenin通路参与结直肠癌的发生发展,近年来针对该靶点的治疗研究不断增加。虽然靶向lgr5的ADCs类药物在治疗结直肠癌后存在复发的情况,但是联合用药使治疗结直肠癌的效果显著提升。该文综述了lgr5在结直肠癌中的作用机制及靶向治疗进展,表明靶向lgr5联合用药对于结直肠癌患者个性化治疗具有潜在的应用价值。

关键词： lgr5 结直肠癌肿瘤干细胞 Wnt/β-catenin 靶向治疗

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shRNA干扰lgr5对HeLa细胞增殖及耐药性的影响

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西安交通大学学报（医学版） 2017年第2期38卷 206-209页

作者：陈庆赵金燕卢晓宁郑鹏生西安交通大学第二附属医院妇产科陕西西安710004 西安交通大学第一附属医院生殖医学科陕西西安710069

目的探讨富含亮氨酸重复序列G-蛋白偶联受体5(lgr5)基因在HeLa细胞增殖及耐药性中的作用及可能机制。方法采用shRNA技术干扰lgr5表达,构建lgr5干扰(shlgr5)的HeLa细胞,并设对照组(shCon)。采用细胞计数、平板克隆以及MTT实验观察shlgr5... 详细信息

目的探讨富含亮氨酸重复序列G-蛋白偶联受体5(lgr5)基因在HeLa细胞增殖及耐药性中的作用及可能机制。方法采用shRNA技术干扰lgr5表达,构建lgr5干扰(shlgr5)的HeLa细胞,并设对照组(shCon)。采用细胞计数、平板克隆以及MTT实验观察shlgr5对HeLa细胞增殖及耐药性的影响;采用Western blot检测lgr5、β-catenin在HeLa细胞中的表达。结果成功构建了lgr5干扰的HeLa细胞系;与shCon组相比,shlgr5组细胞生长速度及克隆形成率明显降低,差异具有统计学意义(Plgr5组与shCon组HeLa细胞对顺铂的耐药性差异亦具有统计学意义(Plgr5抑制HeLa细胞中β-catenin蛋白的表达。结论 lgr5基因在HeLa细胞增殖及耐药性中有重要作用,且与Wnt/β-catenin通路有关。

关键词： lgr5 细胞增殖 β-catenin 耐药性 HeLa细胞 Western blot shRNA

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Study on the Relationship between Expression of lgr5 and Clinicopathological Characteristics in Gastric Cancer Patients

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Health 2018年第1期10卷 159-169页

作者： Xiulian Xu Qijun Lv Ping Xie Shoujiang Wei Chongshu Wang The First Department of General Surgery Affiliated Hospital of North Sichuan Medical College Nanchong China Courage Pancreatic Bowel Disease Institute Affiliated Hospital of North Sichuan Medical College Nanchong China

The aim of the study was to clarify the role of lgr5 in the process of formation and development of gastric cancer. The expression of lgr5 in gastric cancer and corresponding non-cancerous gastric tissues of 52 gastric cancer patients was assessed with the real-time fluorescence quantitative polymerase chain reaction (RT-PCR) and immunohistochemistry. We also analyzed the relationship between the expression level and clinicopathological characteristics. lgr5 gene and protein expression in gastric cancer tissues was in both cases significantly higher than in corresponding non-cancerous gastric tissues (both P 0.05, respectively). Furthermore, lgr5 gene expression was markedly higher in gastric cancer tissues of Helicobacter pylori (HP)-positive patients than negative ones (P 5). The result of the study showed that lgr5 might play a significant role in the process of formation and development of gastric cancer as an oncogene. Its effect might be strengthened by HP infection.

关键词： lgr5 Clinicopathological Characteristics Gastric Cancer HP

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lgr5在Barrett食管和早期食管鳞癌中的表达

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胃肠病学 2011年第6期16卷 328-331页

作者：丁黎葭陈世耀纪元马丽黎练晶晶复旦大学附属中山医院消化科 200032 复旦大学附属中山医院病理科 200032 复旦大学附属中山医院内镜中心 200032 复旦大学附属中山医院内科 200032

背景:lgr5为Wnt信号通路的靶基因和肿瘤干细胞标记物,有作为Barrett食管相关异型增生和食管腺癌生物学标记的潜能。目的:探讨lgr5在Barrett食管和早期食管鳞癌中的表达及其临床意义。方法:选取Barrett食管、早期食管鳞癌和轻度食管炎组... 详细信息

背景:lgr5为Wnt信号通路的靶基因和肿瘤干细胞标记物,有作为Barrett食管相关异型增生和食管腺癌生物学标记的潜能。目的:探讨lgr5在Barrett食管和早期食管鳞癌中的表达及其临床意义。方法:选取Barrett食管、早期食管鳞癌和轻度食管炎组织各20例,以免疫组化方法检测lgr5的表达和分布,根据阳性细胞比例和染色强度行半定量评分。结果:lgr5表达于腺体细胞的细胞质和鳞状细胞的细胞核。Barrett食管组织腺上皮lgr5表达评分显著高于轻度食管炎组织(3.65±1.95对2.55±1.70,P=0.049)。早期食管鳞癌癌灶组织lgr5表达评分显著高于相应癌旁组织(5.39±0.61对3.06±1.06,P=0.000);原位癌、黏膜内癌与黏膜下癌间lgr5表达评分差异无统计学意义(5.00±0.63、5.56±0.53和6.00±0.58,P=0.174)。结论:lgr5可能作为辅助诊断Barrett食管和早期食管鳞癌的生物学标记。

关键词： lgr5 Barrett食管癌鳞状细胞免疫组织化学

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