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利美尼定促进肌萎缩侧索硬化相关蛋白质TDP-43降解的研究

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脑与神经疾病杂志 2021年第3期29卷 156-160页

作者：李奕王晓艳祝岩波段伟松张瑞宁李春岩河北医科大学第二医院神经内科河北省神经病学重点实验室石家庄050000

目的探索利美尼定(RIL)对肌萎缩侧索硬化(ALS)相关蛋白质TAR DNA结合蛋白43(TDP-43)降解的影响.方法用瞬时转染的方法在运动神经元样细胞系NSC-34中过表达WT TDP-43,与家族型ALS相关的Q331K TDP-43、M337V TDP-43突变蛋白、TDP-43的两种... 详细信息

目的探索利美尼定(RIL)对肌萎缩侧索硬化(ALS)相关蛋白质TAR DNA结合蛋白43(TDP-43)降解的影响.方法用瞬时转染的方法在运动神经元样细胞系NSC-34中过表达WT TDP-43,与家族型ALS相关的Q331K TDP-43、M337V TDP-43突变蛋白、TDP-43的两种C末端片段TDP-25和TDP-35,再给予利美尼定干预16h,通过蛋白印迹方法检测5种TDP-43的表达水平.结果在自噬诱导剂RIL的作用下,两种突变TDP-43及其C末端片段的表达明显减少,而WT TDP-43的蛋白质表达水平无明显变化.在自噬阻断剂3-MA的干预下,RIL降解异常蛋白质的作用也被阻断.结论RIL可经由自噬通路降解Q331K TDP-43、M337V TDP-43及其C末端截短片段.

关键词：肌萎缩侧索硬化 TAR DNA结合蛋白43 利美尼定自噬 lc3-ⅱ

柴胡皂甙D对于人类肝癌细胞自噬水平的影响及其分子机制研究

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北方药学 2021年第11期18卷 1-4页

作者：纪梅芳许惠春厦门大学附属第一医院福建厦门361000

目的:探究柴胡皂甙D(SSD)对于人类肝癌细胞自噬水平的影响机制研究,为肝癌治疗提供参考。方法:本研究采用体外细胞实验,所有细胞分三组(对照组、SSD组、SSD+自噬抑制剂3-MA组)。对照组不做任何处理。SSD组的细胞采用20mM的SSD处理48小时... 详细信息

目的:探究柴胡皂甙D(SSD)对于人类肝癌细胞自噬水平的影响机制研究,为肝癌治疗提供参考。方法:本研究采用体外细胞实验,所有细胞分三组(对照组、SSD组、SSD+自噬抑制剂3-MA组)。对照组不做任何处理。SSD组的细胞采用20mM的SSD处理48小时。SSD+自噬抑制剂3-MA组的细胞同时采用20mM的SSD和10mM的3-MA处理48小时。然后采用电镜研究SSD对于肝癌细胞中的自噬小体形成的影响,并且采用Western blot方法检测肝癌细胞中p-AKT、p-AMPK、lc3-ⅱ的表达。结果:经SSD处理2周后,人类肝癌细胞Plc、MHCC-97H、SMMC-7721以及Huh7的细胞克隆数较对照组更少。SSD在人类肝癌细胞诱导细胞凋亡。经SSD干预的人类肝癌细胞中的自噬小体明显增加。Western blot显示,SSD处理细胞后p-AKT表达降低,p-AMPK表达增加。结论:SSD可以增加人类肝癌细胞的自噬,促进细胞凋亡,本研究为SSD以后在临床中应用于肝癌提供了实验数据参考。

关键词：柴胡皂甙D 肝癌细胞自噬 p-AKT p-AMPK lc3-ⅱ

Apelin-13对急性坏死性胰腺炎大鼠胰腺组织中自噬的影响

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中南医学科学杂志 2021年第3期49卷 295-299页

作者：黄秋林曾奎陈豪何宝凤南华大学附属第一医院胃肠外科湖南省衡阳市421001

目的探讨Apelin-13对大鼠急性坏死性胰腺炎(ANP)时自噬相关蛋白lc3-ⅱ、Beclin-1的影响。方法取健康清洁SD大鼠54只,随机分为对照组、造模组、给药组,每组18只。每组大鼠分别对应处理后第3、6、12 h检测血清淀粉酶,并取部分胰腺组织做... 详细信息

目的探讨Apelin-13对大鼠急性坏死性胰腺炎(ANP)时自噬相关蛋白lc3-ⅱ、Beclin-1的影响。方法取健康清洁SD大鼠54只,随机分为对照组、造模组、给药组,每组18只。每组大鼠分别对应处理后第3、6、12 h检测血清淀粉酶,并取部分胰腺组织做常规病理切片、HE染色观察其病理变化,Western blot检测自噬相关蛋白lc3-ⅱ、Beclin-1的表达情况。结果造模组各时间点血清淀粉酶、lc3-ⅱ、Beclin-1表达水平较对照组显著提高,给药组各时间点血清淀粉酶、lc3-ⅱ、Beclin-1表达较造模组显著降低(P均3可以显著抑制自噬相关蛋白Beclin-1、lc3-ⅱ的表达。结论Apelin-13在ANP中通过下调自噬相关蛋白Beclin-1、lc3-ⅱ的表达发挥对胰腺组织的保护作用。

关键词： Apelin-13 急性坏死性胰腺炎自噬 Beclin-1 lc3-ⅱ

染料木素磺酸钠对脑缺血再灌注损伤大鼠自噬的影响

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赣南医学院学报 2018年第10期38卷 964-967,980页

作者：刘松周海倩刘国祥叶珂顾乔乔黎晓薛进华黄志华黄诚赣南医学院江西赣州341000 赣南医学院基础医学院江西赣州341000

目的:初步探讨染料木素磺酸钠是否对大鼠脑缺血再灌注损伤诱导的自噬起调控作用。方法:采用MCAO动物模型和谷氨酸损伤的原代培养大鼠皮层神经元模型,给予GSS处理后,分别提取大脑皮层半暗带区组织或细胞总蛋白样本,运用Western blot方法... 详细信息

目的:初步探讨染料木素磺酸钠是否对大鼠脑缺血再灌注损伤诱导的自噬起调控作用。方法:采用MCAO动物模型和谷氨酸损伤的原代培养大鼠皮层神经元模型,给予GSS处理后,分别提取大脑皮层半暗带区组织或细胞总蛋白样本,运用Western blot方法测定样本中Beclin1、p-Beclin1和lc3-ⅱ蛋白的表达情况。结果:与对照组相比,模型组Beclin1磷酸化水平及lc3-ⅱ蛋白的表达均明显升高,经染料木素磺酸钠治疗后,相应表达量显著下降。结论:染料木素磺酸钠可能通过调控自噬对脑缺血再灌注损伤大鼠起神经保护作用。

关键词：染料木素磺酸钠脑缺血再灌注损伤 Beclinl lc3-ⅱ

抗疏强骨合剂对去势骨质疏松模型大鼠骨组织中自噬相关蛋白表达的影响

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现代中西医结合杂志 2020年第25期29卷 2752-2756页

作者：朱伟李智斌杨利学谭龙旺袁普卫董博欧国峰陕西中医药大学附属医院陕西咸阳712000 陕西中医药大学第二附属医院陕西咸阳712000

目的观察抗疏强骨合剂对去势骨质疏松模型大鼠骨组织中自噬相关蛋白lc3-ⅱ、Beclin1、p62表达的影响,探讨抗疏强骨合剂治疗骨质疏松的可能作用机制。方法将120只雌性SD大鼠随机分为空白组、模型组、抗疏强骨合剂组、阿仑膦酸钠组,每组3... 详细信息

目的观察抗疏强骨合剂对去势骨质疏松模型大鼠骨组织中自噬相关蛋白lc3-ⅱ、Beclin1、p62表达的影响,探讨抗疏强骨合剂治疗骨质疏松的可能作用机制。方法将120只雌性SD大鼠随机分为空白组、模型组、抗疏强骨合剂组、阿仑膦酸钠组,每组30只。除空白组外,其余各组大鼠采用双侧卵巢切除法建立骨质疏松模型,造模后抗疏强骨合剂组给予抗疏强骨合剂灌胃3个月,阿仑膦酸钠组给予阿仑膦酸钠水溶液灌胃3个月。观察各组大鼠的一般情况、骨组织病理学改变以及骨组织中自噬相关蛋白lc3-ⅱ、Beclin1、p62表达情况。结果模型组大鼠精神状况较差,毛发颜色晦暗没有光泽,体质量下降显著,偶有毛发脱落;阿仑膦酸钠组、抗疏强骨合剂组大鼠精神状况尚可,毛发颜色较空白组稍差,体质量轻微下降,但抗疏强骨合剂组大鼠的一般情况更接近于空白组。HE染色示模型组大鼠骨髓腔内大量脂肪细胞增生,部分脂肪细胞核消失、碎裂,空骨陷窝数明显增多,骨小梁稀疏、结构紊乱;抗疏强骨合剂组大鼠骨髓腔脂肪细胞形态基本正常,偶有部分细胞增生,软骨下及骨髓腔骨小梁粗大、结构完整,空泡陷窝较少见,接近空白组;阿仑膦酸钠组大鼠的变化与抗疏强骨合剂组相似,但空泡陷窝较抗疏强骨合剂组多。与空白组比较,模型组大鼠骨组织中lc3-ⅱ、Beclin1的相对灰度值升高(P均lc3-ⅱ、Beclin1的相对灰度值降低(P均0.05)。结论抗疏强骨合剂可能通过降低骨组织中自噬相关蛋白的含量,抑制自噬起到治疗骨质疏松症的作用。

关键词：骨质疏松症抗疏强骨合剂去势大鼠自噬 lc3-ⅱ Beclin1 p62

柴胡皂苷d诱导肝癌细胞株HepG2发生自噬的研究

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齐齐哈尔医学院学报 2015年第29期36卷 4373-4374页

作者：杨春燕广东医学院临床技能培训中心外科实验室

目的研究柴胡皂苷d诱导人肝癌Hep G2细胞发生自噬并对其产生的影响。方法体外培养肝癌细胞株Hep G2,用不同浓度的柴胡皂苷d(5、10、25、50μmol/L)作用于Hep G2细胞,MTT法检测细胞增殖,Western blot法检测Hep G2细胞自噬相关蛋白微管相... 详细信息

目的研究柴胡皂苷d诱导人肝癌Hep G2细胞发生自噬并对其产生的影响。方法体外培养肝癌细胞株Hep G2,用不同浓度的柴胡皂苷d(5、10、25、50μmol/L)作用于Hep G2细胞,MTT法检测细胞增殖,Western blot法检测Hep G2细胞自噬相关蛋白微管相关蛋白1轻链3Ⅱ(lc3Ⅱ)的表达,并用单丹磺酰尸胺(MDC)染色在激光共聚焦显微镜下观察Hep G2细胞内自噬体的形成情况。结果柴胡皂苷d可显著抑制肝癌Hep G2细胞增殖,Western blot结果显示柴胡皂苷d处理后lc3-ⅱ表达增多且呈剂量依赖关系,柴胡皂苷d(25μmol/L组)在24h时间段激光共聚焦显微镜下观察到自噬小体形成。结论柴胡皂苷d可抑制人肝癌Hep G2细胞生长,其机制可能为上调lc3-ⅱ表达并诱导自噬有关。

关键词：柴胡皂苷 d肝癌细胞 lc3-ⅱ 自噬