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特应性皮炎差异表达基因筛选及KLF15对AD小鼠血清中Th1/Th2型细胞因子水平的影响

中国皮肤性病学杂志 2023年第6期37卷 645-651页

作者：唐情汪海珍汪碧滢易婷婷王力罗菲菲冉崇军罗美俊子严伊宁黄盼彭友华潘意周蓉湖南中医药大学湖南长沙410208 湖南中医药大学第二附属医院湖南长沙410005

目的分析特应性皮炎(AD)患者皮损组织中差异表达基因(DEGs)及其功能作用,并探究其中的krüppel样因子15(KLF15)对AD小鼠血清中Th1/Th2型细胞因子水平的影响。方法基于GSE157194芯片筛选AD患者皮损组织中的差异表达基因,通过Metascape在... 详细信息

目的分析特应性皮炎(AD)患者皮损组织中差异表达基因(DEGs)及其功能作用,并探究其中的krüppel样因子15(KLF15)对AD小鼠血清中Th1/Th2型细胞因子水平的影响。方法基于GSE157194芯片筛选AD患者皮损组织中的差异表达基因,通过Metascape在线分析工具进行基因本体(GO)功能分析和京都基因与基因组百科全书(KEGG)通路富集分析。进一步通过基因芯片验证KLF15在AD皮损组织与正常皮肤组织中的差异表达水平及治疗前后的表达变化。将16只BALB/c小鼠随机分为对照组(n=4),模型组(n=4),OE-NC组(n=4,空载质粒),OE-KLF15组(n=4,KLF15过表达质粒)。利用二硝基氯苯(DNCB)涂抹小鼠左耳构建AD小鼠模型,验证KLF15在AD小鼠组织中的表达水平。构建KLF15过表达载体,并注射至各小鼠皮损处,qPCR和Western blot检测转染效率,酶联免疫吸附试验(ELISA)检测白细胞介素(IL)-4、IL-13、IL-31和干扰素(IFN)-γ的表达水平。结果与正常皮肤组织相比,治疗前AD患者的皮损组织中有74个下调的DEGs及331个上调的DEGs,主要与细菌应答、炎症反应、Th2型免疫激活、皮肤发育、细胞离子代谢、调节类固醇代谢过程以及Wnt通路调控显著相关。与治疗前正常皮肤组织样本(AN)相比,皮损组织样本(AL)中KLF15表达显著下调(|logFC|>1,P1,P>0.05)。对照组小鼠表皮、真皮结构正常,无炎性细胞浸润。模型组小鼠出现棘层肥厚、真皮层水肿并伴有大量炎细胞浸润。与对照组小鼠比较,AD小鼠KLF15 mRNA及蛋白水平显著下调(P<0.05)。与OE-NC组比较,OE-KLF15组小鼠血清中IL-4、IL-13和IL-31的表达水平显著下调(P<0.01),KLF15、IFN-γ的表达水平显著上升(P<0.01)。结论KLF15在AD患者皮损组织中下调,KLF15可能通过改善AD小鼠血清中Th1/Th2平衡,减轻炎症反应,缓解皮肤损伤。

关键词：特应性皮炎 krü ppel样因子15(KLF15) Th1/Th2平衡炎症因子

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