检索结果-南通市图书馆

中国比较医学杂志 2015年第6期25卷 46-52页

作者：李晓波付瑞王吉卫礼王淑菁岳秉飞贺争鸣中国食品药品检定研究院实验动物资源研究所北京100050

目的建立大鼠细小病毒H-1和krv株双重PCR方法并对方法进行初步应用。方法根据NCBI发表的H-1(NC_001358)和krv(U790330)基因组序列分别设计特异引物,以H-1和krv病毒DNA为模板建立双重PCR方法,对方法进行优化后验证方法的敏感性和特异性;... 详细信息

目的建立大鼠细小病毒H-1和krv株双重PCR方法并对方法进行初步应用。方法根据NCBI发表的H-1(NC_001358)和krv(U790330)基因组序列分别设计特异引物,以H-1和krv病毒DNA为模板建立双重PCR方法,对方法进行优化后验证方法的敏感性和特异性;经口感染大鼠,分为H-1和krv单独感染组和混合感染组,感染后第2,4,6,8,10天采集大鼠粪便,第10天处死所有大鼠,采集心、肝、脾、肺、肾和盲肠内容物等组织,用建立的方法对粪便和组织样本进行检测。结果建立的双重PCR方法以H-1和krv为模板能够分别扩增出183 bp和302 bp 2个条带,敏感性验证显示能够检测到的最低H-1量为3.8 pg/m L,最低krv量为0.73 pg/m L;在以小鼠微小病毒、犬细小病毒和猫细小病毒为模板时无任何条带扩增出,特异性良好。感染第2天在所有大鼠粪便中均检测到病毒核酸,感染大鼠均无明显临床症状,感染第10天采集组织,H-1在各组织的检出率分别是心50%(4/8),肝50%(4/8),脾62.5%(5/8),肺50%(4/8),肾37.5%(3/8),盲肠内容物62.5%(5/8),且单独感染组检出率高于混合感染组;krv在各组织的检出率分别是心0(0/8),肝25%(2/8),脾87.5%(7/8),肺12.5%(1/8),肾25%(2/8),盲肠内容物62.5%(5/8),混合感染组检出率高于单独感染组。结论建立的H-1和krv双重PCR方法能够高效的检测大鼠粪便及组织中的病毒感染,可作为实验动物国家标准的有力补充。

关键词：大鼠细小病毒 H-1 krv 双重PCR

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岩藻多糖体外抗krv活性初步研究(英文)

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中国海洋药物 2022年第3期41卷 69-74页

作者：吕昌宁孙延龙张敏安琪周雨石管福来刘志军潍坊医学院临床医学院山东潍坊261053 潍坊医学院药学院山东潍坊261053 潍坊医学院形态学实验室山东潍坊261053 潍坊医学院医学微生物学教研室山东潍坊261053

目的研究岩藻多糖体外抗 Kilham rat virus(krv)病毒的活性以及抑制炎症因子 IL-1、IL-6 的表达。方法 CCK-8 法测得岩藻多糖对大鼠肾细胞(NRK)的半数细胞毒性浓度(CC;);通过细胞病变效应测定药物的抗病毒活性,计算药物的半数抑制浓度(... 详细信息

目的研究岩藻多糖体外抗 Kilham rat virus(krv)病毒的活性以及抑制炎症因子 IL-1、IL-6 的表达。方法 CCK-8 法测得岩藻多糖对大鼠肾细胞(NRK)的半数细胞毒性浓度(CC;);通过细胞病变效应测定药物的抗病毒活性,计算药物的半数抑制浓度(IC;)以及治疗指数(SI);建立 krv感染大鼠肾细胞(NRK)细胞模型,设置阴性对照、病毒感染组以及治疗实验组,通过实时荧光定量 PCR 检测病毒以及 IL-1、IL-6 的表达水平。结果 CCK-8 法测得药物的 CC;> 2 500 μg/mL,岩藻多糖的 IC;为(114.8 ± 8.1) μg/mL,SI > 21.78;qPCR 结果表明 krv 病毒衣壳蛋白 2(VP2)的转录水平实验组较阳性对照组明显降低,且 IL-1、IL-6 的转录水平亦显著降低。结论岩藻多糖具有较小的细胞毒性以及良好的抗 krv 病毒的效果,并且能够减轻病毒诱导的炎症反应,为防治病毒感染导致的糖尿病提供理论基础。

关键词：岩藻多糖 krv IL-1 IL-6

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大鼠细小病毒双重PCR检测方法的建立

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实验动物与比较医学 2017年第1期37卷 32-35页

作者：饶丹朱余军伍妙梨袁文王静尹雪琴丛锋练月晓黄碧洪徐凤娇刘向楠刘助红黄韧张钰郭鹏举广东省实验动物监测所广州510663

目的建立快速检测大鼠细小病毒的PCR方法。方法根据大鼠细小病毒基因序列的特点,建立鉴别检测大鼠细小病毒(RPV)与其他三种大鼠细小病毒(H-1、krv、RMV)的双重PCR方法。根据RPV核酸序列的性质,在VP2基因筛选了一对用于特异扩增RPV株的引... 详细信息

目的建立快速检测大鼠细小病毒的PCR方法。方法根据大鼠细小病毒基因序列的特点,建立鉴别检测大鼠细小病毒(RPV)与其他三种大鼠细小病毒(H-1、krv、RMV)的双重PCR方法。根据RPV核酸序列的性质,在VP2基因筛选了一对用于特异扩增RPV株的引物,在NS1基因设计了一对用于特异性扩增H-1、krv和RMV的引物。结果两对引物组成的二重PCR方法可以特异性的扩增RPV而不扩增核酸同源性高的小鼠细小病毒和多种其他病原微生物;敏感性实验表明,二重PCR的最低检测限可达1 000拷贝/μL。双重PCR结合测序在检测23份临床样本中,检测出7份RMV阳性,包括1份与RPV共感染阳性样本。结论本研究建立的检测RPV的双重PCR方法具有特异性好、灵敏度高及操作简单等优点,是一种简便、可靠的检测方法。

关键词：大鼠细小病毒(RPV) H-1 krv RMV 双重PCR

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