检索结果-南通市图书馆

MiR-145-5p靶向klfs调控人角膜成纤维细胞中炎性因子的表达

同方学位论文库评论

在线全文

同方学位论文库

学校读者我要写书评

暂无评论

MiR-145-5p靶向KLFs调控人角膜成纤维细胞中炎性因子的表达

作者：王思佳太原理工大学

学位级别：硕士

圆锥角膜是一种角膜扩张性疾病,在临床中是较为常见的致盲性疾病之一。角膜是一种典型的承载组织,在眼内压的作用下角膜主要承受拉伸和剪切载荷的作用。圆锥角膜局部组织变薄、结构破坏、材料性能降低,导致角膜内部应力发生重新分布。... 详细信息

圆锥角膜是一种角膜扩张性疾病,在临床中是较为常见的致盲性疾病之一。角膜是一种典型的承载组织,在眼内压的作用下角膜主要承受拉伸和剪切载荷的作用。圆锥角膜局部组织变薄、结构破坏、材料性能降低,导致角膜内部应力发生重新分布。多种炎性因子在圆锥角膜患者角膜组织、细胞及泪液过度表达。miRNAs作为重要的基因表达调控因子,与角膜的生理病理过程密切相关,miRNAs还与转录因子klfs相互作用参与炎症介质的表达调控,klfs家族是重要的调控炎症介质表达的转录因子之一。miRNAs和klfs是否参与力学刺激下角膜中炎性因子的表达调控尚不清楚。本研究通过对体外培养的人角膜成纤维细胞进行不同时间的周期性机械拉伸,研究了力学刺激对人的角膜成纤维细胞中klfs、炎性因子及基质重塑相关基因表达的影响;通过siRNA技术研究了KLF4与KLF5对角膜成纤维细胞中炎性因子及基质重塑相关基因表达的影响;同时筛选了能够同时靶定KLF4与KLF5且与其表达呈负相关的miRNAs,探究了miRNA是否通过klfs调控人角膜成纤维细胞中炎性因子的表达,进而参与角膜基质重塑相关蛋白的调控。本文的主要工作如下:（1）对体外培养的正常人角膜成纤维细胞进行0 h、3 h、6 h、12 h的周期性机械拉伸,采用实时荧光定量PCR检测细胞中转录因子klfs、白细胞介素（ILs）、基质金属蛋白酶（MMPs）、赖氨酰氧化酶（LOX）、胶原蛋白（COL）的基因表达。结果发现,在周期性机械拉伸的刺激下人角膜成纤维细胞转录因子（KLF4、KLF5）、炎性因子（IL-1β、IL-6、IL-8、ICAM-1）、基质金属蛋白酶（MMP-1、MMP-2、MMP-9、MMP-13和MMP-14）的表达均显著上升,赖氨酰氧化酶样蛋白（LOX-1、LOX-2、LOX-4）和胶原蛋白（COL1A2、COL3A1）的表达显著下调。提示机械拉伸可以诱导人角膜成纤维细胞中转录因子klfs、炎性因子及基质重塑相关基因的表达。（2）构建KLF4与KLF5基因的siRNA干扰片段并分别转染到人角膜成纤维细胞中,采用实时荧光定量PCR检测人角膜成纤维细胞中KLF4与KLF5对炎性因子及基质重塑相关基因表达的影响。结果显示在干扰KLF4与KLF5表达后,人角膜成纤维细胞中除IL-1β外,IL-6、IL-8、MMP-1、MMP-2、MMP-9、MMP-13和MMP-14的表达也随之下降,而COL1A2、COL3A1、LOX-1、LOX-2和LOX-4的表达显著上升。提示KLF4与KLF5可以通过调控人角膜成纤维细胞中炎性因子（除IL-1β外）的表达,进而参与基质重塑相关蛋白的调控。（3）通过miRBase和Target Scan网站预测能同时靶定KLF4与KLF5的miRNAs（miR-145-5p,miR-5195-3p）。对体外培养的人角膜成纤维细胞进行机械拉伸,通过实时荧光定量PCR检测KLF4、KLF5及上述miRNAs的表达。结果显示miR-145-5p与KLF4及KLF5的表达趋势相反,且在3 h时最明显,故选取miR-145-5p做后续实验研究。（4）分别将miR-145-5p的模拟物与抑制剂转染到体外培养的人角膜成纤维细胞中,检测转染后角膜成纤维细胞中klfs、炎性因子及基质重塑相关基因的表达。结果显示miR-145-5p模拟物能够显著下调转录因子KLF4和KLF5的表达,同时使炎性因子IL-6、IL-8和基质金属蛋白酶MMP-1、MMP-2、MMP-9、MMP-13和MMP-14表达降低,COL1A2、COL3A1、LOX-1和LOX-2的表达升高。提示在机械拉伸刺激下miR-145-5p表达下降,引起KLF4与KLF5表达升高,促进炎性因子（除IL-1β外）和基质重塑相关蛋白（除LOX-4外）的表达。这可为圆锥角膜的发病机理和治疗提供了潜在靶点。

关键词：圆锥角膜力学刺激 klfs MicroRNA 炎性因子

同方学位论文库评论

在线全文

同方学位论文库

学校读者我要写书评

暂无评论

klfs与肿瘤发生发展的关系

解剖科学进展 2014年第6期20卷 585-587,591页

作者：郑乐李天人郭科军中国医科大学附属第一医院妇科辽宁沈阳110001

Krüpple是果蝇分节基因"间隙基因"类的一个成员,它编码一个包含一个DNA结合序列的蛋白质,该序列由几个Cys2/His2型的锌指构成,一群与Krüpple的锌指结构高度同源的蛋白质被发现,命名为Krüpple样因子(Krüpple-like factor,klfs),它们... 详细信息

Krüpple是果蝇分节基因"间隙基因"类的一个成员,它编码一个包含一个DNA结合序列的蛋白质,该序列由几个Cys2/His2型的锌指构成,一群与Krüpple的锌指结构高度同源的蛋白质被发现,命名为Krüpple样因子(Krüpple-like factor,klfs),它们通过调控多种富含GC或CACCC的启动子的基因的表达,参与细胞增殖、分化、凋亡和肿瘤发生、发展等多种生理、病理过程。本文综述klfs的结构、表达调控功能、主要家族成员及其在肿瘤研究中的现状,探讨其与肿瘤发生发展的关系。

关键词： klfs 分节基因锌指结构细胞增殖结合序列高度同源启动子 Smad 宫颈鳞癌结构域

klfs家族成员在骨关节炎发病机制中的研究进展

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

中文科技期刊数据库（全文版）医药卫生 2022年第12期 147-151页

作者：高旺张国梁孙艳宏内蒙古医科大学内蒙古呼和浩特010110 内蒙古医科大学附属医院骨科内蒙古呼和浩特010000

骨关节炎(osteoarthritis, OA)是一种常见的慢性进行性和退行性骨关节疾病,其发病机制尚未明确,推断可能与软骨细胞的退变和凋亡有关。近年来,随着对klfs研究的深入,其对软骨的作用OA也逐渐被报道,也引起了多方关注。本文查阅国内外相... 详细信息

骨关节炎(osteoarthritis, OA)是一种常见的慢性进行性和退行性骨关节疾病,其发病机制尚未明确,推断可能与软骨细胞的退变和凋亡有关。近年来,随着对klfs研究的深入,其对软骨的作用OA也逐渐被报道,也引起了多方关注。本文查阅国内外相关研究,就klfs在OA中的相关作用机制做一综述,以期在临床为OA的治疗提供理论依据,并加强这方面的进一步研究。

关键词：骨关节炎 klfs 基质金属蛋白酶

肝细胞癌相关转录激活因子klfs的研究进展

维普期刊数据库评论

在线全文

维普期刊数据库

学校读者我要写书评

暂无评论

胃肠病学和肝病学杂志 2019年第9期28卷 1056-1062页

作者：孙建英巫梦娜姚敏姚登福南通大学附属医院临床医学研究中心江苏南通226001 南通大学医学院免疫学系

锌指蛋白转录因子(Krüppel-like factors,klfs)家族共17个成员,在肿瘤发生、发展中起促进或抑制作用,其中家族成员中KLF4、KLF5、KLF6、KLF8、KLF9、KLF10及KLF17与肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)关系密切,显示HCC相关klfs异... 详细信息

关键词：肝细胞癌 klfs 生物学行为表达

A Ttach Importance to Vascular Implications of Kruppel- like Factors

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

血栓与止血学 2009年第5期15卷 195-197页

作者：范自力贺石林 Xiangya 3~(rd) Hospital/CSU Xiangya Medical School/CSU

Kruppel-like factors(klfs) are a subclass of the zinc finger family of DNA-binding transcription factors. The nomenclature is based on the homology to the DNA-binding domain of the drosophila protein *** date,17 membe... 详细信息

关键词： klfs 转录因子动脉粥样硬化血栓

牦牛KLF5、KLF6、KLF7基因的克隆表达及其与肌内脂肪含量的相关性分析

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

畜牧兽医学报 2017年第3期48卷 416-424页

作者：朱江江林亚秋左璐璐王永柏雪江明锋青藏高原动物遗传资源保护与利用四川省重点实验室成都610041 动物遗传育种学国家民委-教育部重点实验室成都610041

本研究旨在克隆牦牛Krüppel样因子(KLF5、KLF6、KLF7)的CDS区序列,鉴定其在牦牛不同组织中的表达水平,并分析其表达水平与牦牛肌内脂肪(IMF)的相关性,从而为研究klfs在牦牛脂质代谢中的功能提供试验依据。选取4~6周岁的健康麦洼牦牛公... 详细信息

本研究旨在克隆牦牛Krüppel样因子(KLF5、KLF6、KLF7)的CDS区序列,鉴定其在牦牛不同组织中的表达水平,并分析其表达水平与牦牛肌内脂肪(IMF)的相关性,从而为研究klfs在牦牛脂质代谢中的功能提供试验依据。选取4~6周岁的健康麦洼牦牛公牛7头,清晨空腹屠宰后,迅速采集脾、肺、肾、皮下脂肪和背最长肌组织样品,提取组织总RNA,利用RT-PCR法克隆牦牛KLF5、KLF6、KLF7基因序列,进行生物信息学分析,利用实时定量PCR法检测其mRNA的表达水平,并使用皮尔逊相关系数进行KLF5、KLF6、KLF7基因的表达量与IMF含量的相关性分析。结果表明,KLF5、KLF6、KLF7基因CDS全长分别为1 086、855和909bp,分别编码361、284和302个氨基酸残基,且均与牛具有最近的亲缘关系,其次为山羊、绵羊、猪,而与鸡的亲缘关系较远。KLF5、KLF6、KLF7均在肺中具有较高的表达水平,而在背最长肌中的表达量较低,且与牦牛IMF含量均没有显著相关性。但KLF5的表达水平与KLF6、KLF7均具有显著的正相关性。这些结果为研究KLF5、KLF6、KLF7的功能提供了基础数据,也为揭示牦牛脂质代谢的调控机制提供了试验参考。

关键词：牦牛 klfs 克隆组织表达相关性分析

猪Klf4、Klf5、Klf7和Egr2基因扩增及在前脂肪细胞3T3-L1中的表达

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

江苏农业学报 2010年第6期26卷 1264-1269页

作者：杨红文漳州师范学院生物系福建漳州363000 华中农业大学农业微生物国家重点实验室湖北武汉430070

klfs(Kruppel-like factors)家族和Egr2(Early growth response factor 2)是真核生物中广泛存在的锌指类基础调控因子,在各类细胞的增殖分化和组织发育中起关键作用,在此研究它们在3T3-L1前脂肪细胞中的表达差异。以肝脏cDNA为模板,扩增... 详细信息

klfs(Kruppel-like factors)家族和Egr2(Early growth response factor 2)是真核生物中广泛存在的锌指类基础调控因子,在各类细胞的增殖分化和组织发育中起关键作用,在此研究它们在3T3-L1前脂肪细胞中的表达差异。以肝脏cDNA为模板,扩增猪Klf4、Klf5、Klf7和Egr2部分编码序列,通过半定量RT-PCR进一步检测它们在胰岛素和盐酸克伦特罗刺激下的前脂肪细胞3T3-L1细胞中的表达差异。结果表明,试验扩增到了长度分别为1 387bp、767 bp、518 bp和959 bp的猪Klf4、Klf5、Klf7和Egr2的部分编码序列,并通过与GenBank序列比对加以确认,在胰岛素和盐酸克伦特罗刺激的3T3-L1前脂肪细胞中检测到了它们部分表达,胰岛素刺激Klf4的表达,而抑制Klf5和Egr2的表达;盐酸克伦特罗刺激Klf5的表达,抑制Egr2的表达,对Klf4表达影响则随着浓度的升高由刺激变为抑制;而Klf7在3T3-L1前脂肪细胞中则检测不到有效表达。

关键词：猪 klfs Egr2 前脂肪细胞胰岛素盐酸克伦特罗

ZNF267过表达促进乳腺癌细胞转移及其转录组分析

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

ZNF267过表达促进乳腺癌细胞转移及其转录组分析

作者：丁文静淮北师范大学

学位级别：硕士

克虏伯样因子（Krüppel-like factors,klfs）是一种高度保守的锌指蛋白家族,参与哺乳动物的早期胚胎发生、器官发生、疾病发生等多种生理过程。锌指蛋白267（zinc finger protein 267,ZNF267）是该家族成员之一,主要调控细胞增殖、分... 详细信息

克虏伯样因子（Krüppel-like factors,klfs）是一种高度保守的锌指蛋白家族,参与哺乳动物的早期胚胎发生、器官发生、疾病发生等多种生理过程。锌指蛋白267（zinc finger protein 267,ZNF267）是该家族成员之一,主要调控细胞增殖、分化、应激等过程,并与多种疾病的发生密切相关,如阿尔兹海默症、白血病、胰腺癌、肝癌、弥漫大B细胞淋巴瘤等。生物信息数据库GEPIA、UALCAN和CCLE提供的信息显示,ZNF267在乳腺癌细胞及组织中表达高于正常细胞和癌旁正常组织,且高表达患者生存率较低。有关ZNF267在乳腺癌细胞生长和转移中的功能,迄今未有研究报道。本研究通过在乳腺癌细胞中过表达ZNF267,探索该基因与乳腺癌细胞转移的关系。结果如下:1.成功克隆出ZNF267的CDS序列,构建p EB-3×flag-ZNF267慢病毒过表达质粒,包装p EB-3×flag-GP和p EB-3×flag-ZNF267质粒慢病毒,分别成功转染乳腺癌细胞（SUM159和MCF-7）。q RT-PCR和Western Blot结果显示,ZNF267过表达乳腺癌细胞株（SUM159-ZNF267和MCF-7-ZNF267）构建成功。***和细胞克隆形成实验表明,ZNF267过表达能够提高乳腺癌细胞的增殖活力和其成瘤性。3.细胞划痕和Transwell迁移实验表明,ZNF267过表达明显促进了乳腺癌细胞迁移。***侵袭实验表明,ZNF267过表达提高了乳腺癌细胞的侵袭能力。5.对乳腺癌细胞（SUM159-ZNF267/SUM159-GP和MCF-7-ZNF267/MCF-7-GP）进行转录组测序,分别鉴定出243和1225个差异表达基因,其中13个是两组共有,它们是SLC6A12、DHRS2、GALNT9、S100A9、OLFM1、ACTL10、TMEM8B、FER1L4、GPNMB、CAPN12、VLDLR、STS和RAB3B。经GO功能注释和KEGG通路富集分析,发现ZNF267过表达后,富集差异表达基因主要参与的代谢通路有细胞粘附分子途径、c AMP信号通路、GABA能突触通路、Rap1信号通路、胆固醇代谢通路、PI3K-AKT信号通路等,从而揭示了ZNF267通过参与多种信号通路影响乳腺癌细胞转移。综上,ZNF267过表达促进了乳腺癌细胞转移,为乳腺癌分子靶向治疗提供了新思路。

关键词：锌指蛋白267 klfs 慢病毒载体细胞增殖