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中国畜牧兽医学会第七届养牛学分会2009年学术研讨会

作者：马亮蓝贤勇淮永涛王辰王景雷初朝王巨强陈宏西北农林科技大学动物科技学院陕西省农业分子生物学重点实验室河南省肉牛工程技术研究中心徐州师范大学细胞与分子生物学研究所

klf7基因编码Krupple-like 7,据报道其单核苷酸多态性(SNPs)与日本人的二型糖尿病有关,在丹麦人群体中与抑制肥胖有关。因此,它在可能能量代谢中具有潜在的作用,进而影响动物生长发育。本研究利用测序和人工创造限制性酶切位点(ACRS)-PC... 详细信息

klf7基因编码Krupple-like 7,据报道其单核苷酸多态性(SNPs)与日本人的二型糖尿病有关,在丹麦人群体中与抑制肥胖有关。因此,它在可能能量代谢中具有潜在的作用,进而影响动物生长发育。本研究利用测序和人工创造限制性酶切位点(ACRS)-PCR-RFLP的方法在秦川牛、南阳牛、郏县红牛和中国荷斯坦奶牛共计1002头牛中揭示了位于klf7基因第二外显子及其侧翼区的3个SNPs:NC07300:g.41401C>T,42025T>C和42075A>G。其中发现了一个同义突变:苯丙氨酸/苯丙氨酸(F54F,C41401T)。有趣的是在同时引入三个TaqI酶切位点后这三个单核苷多态性可以同时被酶切和检测。在三个位点中,只有中国荷斯坦奶牛在C41401T位点偏离哈代温伯格平衡状态。连锁不平衡分析发现C41401T和T42025C在郏县红牛中强连锁,T42025C和A42075G在秦川牛、南阳牛和中国荷斯坦奶牛中强连锁(r>0.33)。群体遗传指数分析发现中国荷斯坦奶牛纯合度在C41401T位点达到1并只有1个有效等位基因。χ检验显示在P1、P2和P3位点基因型分布有显著差异,暗示这些多态性与牛品种显著相关(P基因型TT(T42025C)的牛比基因型TC的牛具有更大的日增重(P=0.009)和胸围(P=0.009)。在12月龄,基因型CC(T42025C)的牛比基因型TC的牛具有更大的体重(P=0.008)、体长(P=0.001)和胸围(P=0.003);基因型AA(T42075C)的牛比基因型AG的牛具有更大的体长(P=0.006)。总之,我们提供了一种便捷的方法(ACRS-PCR-RFLP)来评价遗传资源。另外,klf7对黄牛早期生长的显著效应还需在其他群体中进行验证,以期有助于中国黄牛的育种。

关键词：牛生长性状 klf7基因 PCR-RFLP 单核苷酸多态性(SNP)

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黄牛klf7基因多态性及其与生产性状的关联分析

黄牛KLF7基因多态性及其与生产性状的关联分析

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第十五次全国动物遗传育种学术讨论会

作者：马亮蓝贤勇雷初朝张春雷王居强陈宏西北农林科技大学动物科技学院陕西省农业分子生物学重点实验室徐州师范大学细胞与分子生物学研究所河南省肉牛工程技术研究中心

＜正＞引言脂肪组织在维持能量稳态中具有重要的作用,有报道证明脂肪组织分泌脂肪激酶,而脂肪激酶在许多生理病理过程如采食、葡萄糖代谢、繁殖、胰岛素易感性、炎症反应、动脉粥样硬化形成和血管发生发挥功能,

关键词：黄牛 klf7基因单核甘酸多态性(SNPs) PCR-RFLP 生长性状

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藏绵羊klf7基因表达特征分析及其过表达对前脂肪细胞增殖分化的影响

引用

中国畜牧兽医 2022年第8期49卷 2920-2930页

作者：张雪萍石斌刚金夏阳王向彦兰丽娟时钰祁有鹏赵世杰李少斌胡江甘肃农业大学动物科学技术学院甘肃省草食动物生物技术重点实验室兰州730070

【目的】分析藏绵羊Krüppel样因子7(Krüppel-like factor 7,klf7)基因表达特征,研究过表达该基因对前脂肪细胞增殖及分化的影响。【方法】从藏绵羊脂肪组织中分离前脂肪细胞进行培养及成脂诱导,应用实时荧光定量PCR技术检测klf7基因... 详细信息

【目的】分析藏绵羊Krüppel样因子7(Krüppel-like factor 7,klf7)基因表达特征,研究过表达该基因对前脂肪细胞增殖及分化的影响。【方法】从藏绵羊脂肪组织中分离前脂肪细胞进行培养及成脂诱导,应用实时荧光定量PCR技术检测klf7基因在藏绵羊7个组织(大脑、皮下脂肪、肾脏、背最长肌、瘤胃、睾丸和回肠)和前脂肪细胞不同分化阶段(第0、2、4和8天)的mRNA相对表达水平;应用RT-PCR方法从藏绵羊脂肪组织中扩增klf7基因CDS区序列,并将其连接到pcDNA3.1(+)真核表达载体获得pcDNA3.1-klf7过表达质粒,转染前脂肪细胞;应用实时荧光定量PCR方法检测脂肪细胞增殖及分化标志基因mRNA表达水平;采用EdU和CCK-8方法分别检测过表达klf7基因对EdU阳性细胞数和细胞活力的影响;采用油红O染色检测过表达klf7基因后脂肪细胞脂滴生成量。【结果】klf7基因在藏绵羊7个组织中均有表达,其中在大脑中的表达量最高,其次为皮下脂肪和肾脏,均显著高于其他组织(Pklf7过表达质粒转染前脂肪细胞2 d后显著或极显著抑制增殖标志基因CDK4、CyclinB1和CyclinD1的表达水平(Pklf7过表达质粒转染前脂肪细胞,诱导分化8 d后,脂肪细胞分化标志基因PPARγ、Glut4和ELOVL6的mRNA相对表达水平显著或极显著下调(Pklf7基因可抑制藏绵羊前脂肪细胞增殖及分化。【结论】klf7基因在藏绵羊多个组织中广泛表达,且大脑、皮下脂肪、肾脏中表达量较高;诱导分化后脂肪细胞表达量显著高于分化前,且分化第2天表达量最高;过表达klf7基因可抑制藏绵羊前脂肪细胞的增殖及分化。试验结果为阐明藏绵羊脂肪沉积的分子调控机制提供了基础数据。

关键词：藏绵羊 klf7基因表达前脂肪细胞增殖分化

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