检索结果-南通市图书馆

同方学位论文库评论

在线全文

同方学位论文库

学校读者我要写书评

暂无评论

山羊klf13基因的克隆及表达分析

农业生物技术学报 2017年第1期25卷 102-109页

作者：朱江江林亚秋王永李倩林森熊朝瑞俄木曲者青藏高原动物遗传资源保护与利用四川省重点实验室西南民族大学生命科学与技术学院四川省畜牧科学研究院

Krüppel样因子(Krüppel-like factors,klfs)是一组与真核基因转录调控密切相关的锌指蛋白。本研究旨在克隆山羊(Capra hircus)klf13基因的CDS区序列,检测其在山羊不同组织中表达水平,并鉴定在细胞分化过程中的表达规律。随机选取24月... 详细信息

Krüppel样因子(Krüppel-like factors,klfs)是一组与真核基因转录调控密切相关的锌指蛋白。本研究旨在克隆山羊(Capra hircus)klf13基因的CDS区序列,检测其在山羊不同组织中表达水平,并鉴定在细胞分化过程中的表达规律。随机选取24月龄的健康简州大耳羊公羊4只,屠宰后分别采集心、肝、脾、肺、肾、皮下脂肪、背最长肌、股二头肌和臂三头肌组织样品,提取组织总RNA,利用RT-PCR法克隆山羊klf13基因序列,并进行生物信息学分析;利用实时定量PCR法检测klf13 m RNA的表达水平,并检测前体脂肪细胞(0、3、5、7 d)和成肌细胞(0、2、3、4、5 d)诱导分化后的klf13 m RNA表达水平。结果显示,克隆得到klf13 c DNA序列长991 bp(Gen Bank登陆号:KU041755),其中包含CDS区876 bp,5’UTR序列12 bp,3’UTR序列103 bp,编码292个氨基酸残基。山羊klf13基因编码的氨基酸序列与绵羊(Ovis aries)、牛(Bos taurus)、猪(Sus scrofa)、小鼠(Mus musculus)的相似性分别为100%、97.9%、96.6%和90.8%。山羊klf13基因与绵羊具有最近的亲缘关系,其次为牛、人(Homo sapiens)、猪和小鼠。klf13 m RNA在山羊脾和肺中具有最高的表达水平,而在肌肉中的表达丰度较低。在前体脂肪细胞的分化过程中klf13m RNA表达水平逐渐降低,而在成肌细胞分化过程中则逐渐上升(除5 d外)。结果提示,klf13基因可能在调控山羊前体脂肪细胞分化过程中具有重要作用。本实验为研究klf13基因在山羊前体脂肪细胞分化中的作用提供了基础资料。

关键词：山羊 klf13 克隆基因表达前体脂肪细胞

Krüppel-like Factor 13 Promotes HCC Progression by Transcriptional Regulation of HMGCS1-mediated Cholesterol Synthesis

在线全文

同方期刊数据库

学校读者我要写书评

暂无评论

Journal of Clinical and Translational Hepatology 2022年第6期10卷 1125-1137页

作者： Chao-Chun Chen Xing-Ming Xie Xue-Ke Zhao Shi Zuo Hai-Yang Li Department of Clinical Medicine Guizhou Medical UniversityGuiyangGuizhouChina Department of Hepatobiliary Sur-gery The Affiliated Hospital of Guizhou Medical UniversityGuiyangGuizhouChina Department of Infectious Diseases The Affiliated Hospital of Guizhou Medical UniversityGuiyangGuizhouChina

Background and Aims:Krüppel-like factor(klf)has a role in the occurrence,development and metabolism of can-cer.We aimed to explore the role and potential molecular mechanism of klf13 in the growth and migration of liver cancer cells.Methods:The expression of klf13 in hepa-tocellular carcinoma(HCC)tissues was higher than that in normal tissues according to analysis of The Cancer Genome Atlas(TCGA)database.Lentiviral plasmids were used for overexpression and plasmid knockdown of klf13.Real-time quantitative polymerase chain reaction(qPCR)and western blotting were used to detect mRNA and protein expression in HCC tissues and cells.Cell counting kit-8(CCK-8),colony formation,cell migration and invasion,and flow cytometry assays were used to assess the in vitro function of klf13 in HCC cells.The effect of klf13 on xenograft tumor growth in vivo was evaluated.The cholesterol content of HCC cells was determined by an indicator kit.A dual-luciferase reporter assay and chromatin immunoprecipitation sequencing(ChIP-seq)revealed the binding relationship between klf13 and HMGCS1.Results:The expression of klf13 was upregu-lated in HCC tissues and TCGA database.klf13 knockdown inhibited the proliferation,migration and invasion of HepG2 and Huh7 cells and increased the apoptosis of Huh7 cells.The opposite effects were observed with the overexpression of klf13 in SK-Hep1 and MHCC-97H cells.The overexpres-sion of klf13 promoted the growth of HCC in nude mice and klf13 transcription promoted the expression of HMGCS1 and the biosynthesis of cholesterol.klf13 knockdown inhibited cholesterol biosynthesis mediated by HMGCS1 and inhibited the growth and metastasis of HCC cells.Conclusions:klf13 acted as a tumor promoter in HCC by positively regulating HMGCS1-mediated cholesterol biosynthesis.

关键词： Hepatocellular carcinoma klf13 HMGCS1 Cholesterol

miR-19b在骨肉瘤组织中的表达及其通过调控klf13影响骨肉瘤Saos-2细胞侵袭和迁移的研究

维普期刊数据库评论

在线全文

维普期刊数据库

学校读者我要写书评

暂无评论

中国临床药理学与治疗学 2019年第11期24卷 1242-1248页

作者：钱万锋王秀峰陈学鹏绍兴文理学院附属医院骨外科浙江绍兴312000 浙江大学医学院骨病二科浙江杭州310031

目的:研究miR-19b在骨肉瘤组织中的表达及其通过调控klf13影响骨肉瘤细胞侵袭和迁移的作用。方法:Realtime PCR方法检测骨肉瘤组织和对应正常癌旁组织中的miR-19b表达差异。在骨肉瘤Saos-2细胞中转染miR-19b inhibitor,Transwell小室检... 详细信息

目的:研究miR-19b在骨肉瘤组织中的表达及其通过调控klf13影响骨肉瘤细胞侵袭和迁移的作用。方法:Realtime PCR方法检测骨肉瘤组织和对应正常癌旁组织中的miR-19b表达差异。在骨肉瘤Saos-2细胞中转染miR-19b inhibitor,Transwell小室检测侵袭和迁移能力变化,Western blot检测MMP-9和MMP-2蛋白表达差异。靶基因预测软件预测klf13可能为miR-19b的靶基因,荧光素酶报告系统鉴定靶向关系。Realtime PCR方法检测骨肉瘤组织和对应正常癌旁组织中的klf13表达差异。将klf13 siRNA和miR-19b inhibitor共转染到骨肉瘤细胞中,利用上述方法检测细胞侵袭、迁移和MMP-9、MMP-2蛋白表达差异。结果:骨肉瘤组织中miR-19b表达水平高于对应癌旁组织。转染miR-19b inhibitor的骨肉瘤细胞中miR-19b水平降低,细胞侵袭、迁移以及MMP-9、MMP-2蛋白水平下降。miR-19b靶向负调控klf13表达。klf13在骨肉瘤组织中的表达水平低于正常癌旁组织,并且其表达水平与miR-19b表达水平呈负相关。klf13 siRNA可以逆转miR-19b inhibitor对骨肉瘤细胞侵袭、迁移和MMP-9、MMP-2蛋白表达的抑制作用。结论:miR-19b在骨肉瘤组织中高表达,下调其表达可以通过靶向促进klf13表达抑制骨肉瘤Saos-2细胞侵袭和迁移。

关键词：骨肉瘤 miR-19b klf13 侵袭迁移

大连紫海胆klf8、klf10、klf13基因的克隆与表达及C/EBPs基因启动子活性研究

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

大连紫海胆KLF8、KLF10、KLF13基因的克隆与表达及C/EBPs基因启动...

作者：毋凯凯西北农林科技大学

学位级别：硕士

大连紫海胆(Strongylocentrotus nudus)是中国重要的经济水产物种,其性腺富含多种不饱和脂肪酸。然而大连紫海胆性腺脂类物质生成和脂肪酸合成的调控机制至今仍是空白。锌指样转录因子(Krüppel-like factors,klfs)和CCAAT增强子结合蛋... 详细信息

大连紫海胆(Strongylocentrotus nudus)是中国重要的经济水产物种,其性腺富含多种不饱和脂肪酸。然而大连紫海胆性腺脂类物质生成和脂肪酸合成的调控机制至今仍是空白。锌指样转录因子(Krüppel-like factors,klfs)和CCAAT增强子结合蛋白(CCAAT/enhancer binding proteins,C/EBPs)已经被证实在脂肪代谢中起调控作用。klfs基因家族包含17个成员,其中klf15,klf4,klf5,klf6和klf9促进脂肪形成,klf2和klf3抑制脂肪形成。C/EBPs基因家族包含6个成员(C/EBPα,C/EBPβ,C/EBPγ,C/EBPδ,C/EBPε和C/EBPζ),其在调控脂肪形成中是一个关键的转录因子。阐明大连紫海胆klfs基因的功能和C/EBPs基因的转录调控以及klfs与C/EBPs的互作调控机制,对了解大连紫海胆脂类物质形成机理的研究具有重要的意义。本研究筛选转录组中的脂类物质形成相关基因序列,设计特异性引物、构建过表达载体和逐段缺失载体,结合实时荧光定量PCR技术、Genome Walking技术、双荧光素酶报告基因实验以及生物信息学分析等,获得了大连紫海胆klf8、klf10、klf13全长cDNA和部分C/EBPs基因序列及其5`侧翼序列,分析了它们的序列特征和组织表达分布,并且对它们在脂类物质形成中的功能进行了相关的探索,得到了以下结果:1、Snklf8 cDNA全长为3954 bp,包含97 bp 5′非翻译区(Untranslated Regions,UTR)和2684 bp 3′UTR,开放阅读框1164 bp,编码387个氨基酸。Snklf10 cDNA全长为3526 bp,包含138 bp 5′UTR和1912 bp 3′UTR,开放阅读框1476 bp,编码491个氨基酸。Snklf13 cDNA全长为3756 bp,包含422 bp 5′UTR和2485 bp 3′UTR,开放阅读框894 bp,编码282个氨基酸。结构域预测表明Snklf8、Snklf10和Snklf13碳端都包含一个三联窜的锌指DNA结合结构域。2、获得了部分SnC/EBPs cDNA序列及完整的SnC/EBPs 5`侧翼序列。SnC/EBPα5`侧翼序列为1154 bp,SnC/EBPγ5`侧翼序列为1494 bp,SnC/EBPζ5`侧翼序列为823 bp。结构域预测表明SnC/EBPα、SnC/EBPγ和SnC/EBPζ碳端都包含一个亮氨酸拉链结构域(Basic-leucine zipper domain,bZIP)。3、Snklf8、Snklf10、Snklf13和SnC/EBPs mRNA在雄性性腺和雌性性腺的表达量相对较高,并且在两龄和三龄雌雄性腺的mRNA表达存在差异。4、Snklf8和Snklf10过表达,检测SnC/EBPα、SnC/EBPγ和SnC/EBPζ启动子的荧光活性不同程度的下降,表明Snklf8和Snklf10过表达抑制SnC/EBPs转录活性。Snklf13过表达,检测SnC/EBPα启动子荧光活性升高,SnC/EBPγ和SnC/EBPζ启动子荧光活性下降,表明Snklf13提高SnC/EBPα转录活性,抑制SnC/EBPγ和SnC/EBPζ转录活性。5、生物信息学预测SnC/EBPα、SnC/EBPγ和SnC/EBPζ启动子的转录因子结合位点,进一步表明SnC/EBPs是Snklfs转录因子潜在的靶基因。6、双荧光素酶报告基因实验表明SnC/EBPα核心启动子位于-20416序列之间,SnC/EBPγ包含两个核心启动子位于-13961179序列和-742525序列之间,SnC/EBPζ核心启动子位于16409序列之间。以上实验结果表明,Snklf8、Snklf10、Snklf13和Sn C/EBPs基因参与大连紫海胆性腺脂类物质的形成,并且Snklf8、Snklf10、Snklf13发挥功能是依靠调控SnC/EBPs转录来实现的。这将为进一步理解klf8、klf10、klf13和C/EBPs基因在无脊椎动物脂类物质形成机制中的功能奠定基础。

关键词：大连紫海胆 klf8 klf10 klf13 C/EBPs(C/EBPα,C/EBPγ和C/EBPζ)

弥漫大B细胞淋巴瘤中klf13的表达及其意义

同方学位论文库评论

在线全文

同方学位论文库

学校读者我要写书评

暂无评论

白血病．淋巴瘤 2013年第7期22卷 439-443页

作者：王黎李红李玉玲湖北医药学院附属人民医院血液科湖北十堰442000

目的探讨弥漫大B细胞淋巴瘤（DLBCL）中klf13的表达水平及其意义.方法对56例行CHOP方案化疗的DLBCL患者随访4～6年；采用免疫组织化学方法检测患者组织标本中klf13的表达水平,分析klf13表达与DLBCL患者生存率、临床特征之间的关系；采... 详细信息

目的探讨弥漫大B细胞淋巴瘤（DLBCL）中klf13的表达水平及其意义.方法对56例行CHOP方案化疗的DLBCL患者随访4～6年；采用免疫组织化学方法检测患者组织标本中klf13的表达水平,分析klf13表达与DLBCL患者生存率、临床特征之间的关系；采用Western blot法检测DLBCL细胞株Pfeiffer、LY8中klf13表达水平.应用siRNA阻断DLBCL细胞内klf13表达后,采用CCK-8方法检测DLBCL细胞的增殖水平.结果 32例（57.1％） DLBCL患者klf13高表达,24例（42.9％）低表达.klf13高表达组5年生存率（46.5％）低于低表达组（75.0％）（P=0.01）.多因素Cox回归分析结果表明,klf13蛋白表达水平、血清LDH水平和临床病理分期是影响患者预后的独立因素（均P＜ 0.05）.klf13表达高低与DLBCL患者的临床分期、淋巴结直径相关；阻断DLBCL细胞klf13表达后,细胞增殖水平降低.结论 klf13可作为DLBCL的预后预测因子及治疗靶点.

关键词：淋巴瘤,大细胞,弥漫型 klf13 预后

miR-19a对民猪前脂肪细胞分化影响的研究

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

东北农业大学学报 2023年第4期54卷 64-72页

作者：刘娣李皓月马红汪亮东北农业大学动物科学技术学院哈尔滨150030 黑龙江省农业科学院畜牧研究所哈尔滨150086

为探究miR-19a对民猪脂肪细胞分化过程的调控机制,研究采用双荧光素酶报告载体、实时荧光定量PCR构建组织表达谱、过表达和抑制miR-19a后对成脂标志基因和脂肪酸代谢标志基因的影响,油红O染色等生物学技术分析miR-19a对前脂肪细胞成脂... 详细信息

为探究miR-19a对民猪脂肪细胞分化过程的调控机制,研究采用双荧光素酶报告载体、实时荧光定量PCR构建组织表达谱、过表达和抑制miR-19a后对成脂标志基因和脂肪酸代谢标志基因的影响,油红O染色等生物学技术分析miR-19a对前脂肪细胞成脂的影响。结果表明,miR-19a与klf13呈靶向关系,过表达miR-19a抑制成脂标志基因表达,促进脂肪酸代谢标志基因表达,抑制脂滴形成。抑制miR-19a可促进成脂标志基因表达,抑制脂肪酸代谢标志基因表达,促进脂滴形成。综上,试验验证miR-19a可抑制前脂肪细胞成脂分化,确定klf13为miR-19a靶基因,为进一步研究microRNA对民猪前脂肪细胞分化的调控机制提供参考。

关键词：细胞分化猪前脂肪细胞 miR-19a klf13

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

klf基因家族在乳腺癌中的表达及临床意义

基因组学与应用生物学 2018年第5期37卷 2257-2265页

作者：梁铃黄玥莫之婧朱华马义丽广西卫生职业技术学院南宁530021 桂林医学院附属医院乳腺外科桂林541001 桂林医学院生物技术学院桂林541100

为了研究klf基因家族成员在乳腺癌发生中的分子机制及其与患者预后的关系,我们利用GEPIA对klf家族进行Kaplan-Meier生存分析,筛选出与患者预后显著相关家族成员;在Oncomine数据库中分析前面筛选出的与乳腺癌预后有关的klf家族成员;采用c... 详细信息

为了研究klf基因家族成员在乳腺癌发生中的分子机制及其与患者预后的关系,我们利用GEPIA对klf家族进行Kaplan-Meier生存分析,筛选出与患者预后显著相关家族成员;在Oncomine数据库中分析前面筛选出的与乳腺癌预后有关的klf家族成员;采用c Bio Portal筛选出与患者预后有关的klf家族成员共表达基因;STRING构建蛋白互作网络,Cytoscape软件中的MCODE插件识别网络模块,再用STRING对网络模块进行聚类分析。Kaplan-Meier生存分析显示klf家族成员中klf13和klf15与乳腺癌预后显著相关（p〈0.05）;Oncomine分析显示只有klf13在乳腺癌组织表达显著高于正常组织（p〈0.01）;c Bio Portal中筛选出klf13共表达基因274个;Cytoscape软件中的MCODE插件识别出网络模块3个,STRING进行GO分析发现,网络模块中基因主要参与线粒体内的翻译和呼吸链氧化磷酸化生成ATP等生物过程,KEGG分析发现网络模块中涉及基因主要线粒体蛋白质翻译场所核糖体及其氧化磷酸化等信号通路有关。以上表明klf13可能通过线粒体信号通路来影响乳腺癌的发生,可作为一个候选的乳腺癌临床预后标志物和潜在的治疗靶点。

关键词：乳腺癌 klf13 蛋白互作网络线粒体

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

RNA结合蛋白作为氯福克酚药靶的机制初探

基础医学与临床 2020年第5期40卷 621-626页

作者：张美莲王志星胡艳冉坤念韩为彭小忠中国医学科学院基础医学研究所北京协和医学院基础学院医学分子生物学国家重点实验室生物化学与分子生物学系医学灵长类研究中心神经科学中心北京100005 中国医学科学院医学生物学研究所云南昆明650118

目的探索氯福克酚靶向RNA结合蛋白的抗胶质瘤机制。方法Biotin pull-down实验检测RNA结合蛋白N-ras上游蛋白(UNR)与靶基因Krüppel样因子13(klf13)mRNA各片段的结合,以及氯福克酚对UNR与下游靶基因klf13 mRNA片段结合能力的影响;氯福克... 详细信息

目的探索氯福克酚靶向RNA结合蛋白的抗胶质瘤机制。方法Biotin pull-down实验检测RNA结合蛋白N-ras上游蛋白(UNR)与靶基因Krüppel样因子13(klf13)mRNA各片段的结合,以及氯福克酚对UNR与下游靶基因klf13 mRNA片段结合能力的影响;氯福克酚靶点稳定性的药物亲和反应(DARTS)样品质谱检测结果与转录组芯片分析相结合,筛选其他RNA结合蛋白作用靶点,并对其他下游靶基因进行预测分析。结果氯福克酚可以增强UNR与klf13 mRNA片段的结合;氯福克酚还可与其他RNA结合蛋白相互作用,参与mTOR信号通路以及由肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TRAIL)激活的凋亡信号通路。结论氯福克酚可通过作用于RNA结合蛋白而起到抗胶质瘤的效果。

关键词：氯福克酚胶质瘤 UNR klf13 mRNA RNA结合蛋白