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JAK-STAT信号通路在CD8～+T细胞中调控IL-10表达及功能的研究

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JAK-STAT信号通路在CD8～+T细胞中调控IL-10表达及功能的研究

作者：裴宇锦州医科大学

学位级别：硕士

目的IL-10是一种多效性细胞因子,在抗病毒、抗肿瘤免疫方面起着重要作用。效应性CD8T细胞在强TCR信号刺激后可以表达IL-10。当IL-10直接作用于CD8T细胞时,可促进CD8T细胞的杀伤效应。迄今,IL-10在CD8T细胞中的表达调控及其增强CD8T细胞... 详细信息

目的IL-10是一种多效性细胞因子,在抗病毒、抗肿瘤免疫方面起着重要作用。效应性CD8T细胞在强TCR信号刺激后可以表达IL-10。当IL-10直接作用于CD8T细胞时,可促进CD8T细胞的杀伤效应。迄今,IL-10在CD8T细胞中的表达调控及其增强CD8T细胞功能的信号通路还不明确。一方面,T细胞中细胞因子的表达受JAK-STAT信号通路的调控;另一方面,细胞因子通过其受体作用于T细胞后也通过JAK-STAT信号通路调控下游基因表达。在CD8T细胞中,调控IL-10表达及IL-10增强其效应性的JAK-STAT信号通路还不明确。本研究通过使用小分子抑制剂及CRISPR-Cas9基因编辑技术,结合流式细胞术来探讨CD8T细胞中调控IL-10表达的JAK-STAT信号分子及IL-10通过受体增强CD8T细胞功能的JAK-STAT信号通路。为肿瘤的免疫治疗提供新的思路和理论依据。方法1.CD8T细胞活化后分别加入不同的jak、stat抑制剂,使用流式细胞术对IL-10的表达进行分析。2.IL-10报告基因CD4CreCRISPR-Cas9条件性敲入小鼠繁育:T细胞条件性表达Cas9小鼠由CD4Cre小鼠与CRISPR-Cas9条件性敲入小鼠杂交获得,再通过使用Tiger小鼠与CD4CreCRISPR-Cas9小鼠杂交后获得。3.sg RNA载体构建:根据目的基因外显子设计其对应的sg RNA,对其进行合成并与酶切后的MSCV-sg RNA-U6-PGK-BFP载体连接、转化、小提质粒、测序,挑选正确的克隆进行质粒中提。4.病毒包装及T细胞转导:使用脂质体lipo2000将表达载体及包装载体转染至293T细胞来源的BOSC病毒包装细胞中,用病毒上清液感染来源于CreCas9+/+Tiger小鼠的活化T细胞,培养48h后用流式细胞仪检测靶基因敲除对IL-10表达的影响。5.添加IL-10到体外活化的T细胞,然后对体外活化的T细胞通过流式细胞术进行效应性分子IFN-γ和Granzyme B的表达分析。结果1.在活化的CD8T细胞中加入不同的jak和stat抑制剂,然后检测IL-10的表达变化,发现jak1、stat6抑制剂可以显著降低IL-10在CD8T细胞中的表达。2.使用CRISPR-Cas9技术对不同的jak进行基因和敲除,发现jak1敲除可以显著降低IL-10在CD8T细胞中的表达,同时也采用该技术对IL-10启动子上潜在的stat结合位点进行敲除,确认了IL-10启动子上的stat结合位点。3.抗体阻断和CRISPR-Cas9敲除Tim3都不影响IL-10在CD8T细胞中的表达。4.体外活化的CD8T细胞中加入IL-10培养,然后分别使用不同的jak、stat小分子抑制剂来观察CD8T细胞中效应性分子IFN-γ和Granzyme B的表达变化,发现在CD8T细胞中外源性IL-10主要通过jak3和SATA6来增强其效应性。结论jak1-stat6在CD8T细胞中调控IL-10的表达,stat通过与IL-10启动子上的多个位点结合调控IL-10的转录。外源性IL-10主要通过jak3-stat6来增强CD8T的效应性。

关键词： IL-10 CD8+T细胞 JAK-STAT

单味中药有效成分对类风湿关节炎JAK-STAT信号通路影响的研究进展

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中国中医基础医学杂志 2019年第3期25卷 417-420页

作者：张亚坤刘维刘子安天津中医药大学天津300193 天津中医药大学第一附属医院天津300381

JAK-STAT信号通路是介导细胞因子信号传导的重要通路之一,类风湿关节炎(rheumatoid arthritis,RA)患者滑液中的诸多细胞因子如白细胞介素-6、白细胞介素-15、干扰素及粒-巨细胞集落刺激因子等均可通过该通路在RA疾病的发生发展中起重要... 详细信息

JAK-STAT信号通路是介导细胞因子信号传导的重要通路之一,类风湿关节炎(rheumatoid arthritis,RA)患者滑液中的诸多细胞因子如白细胞介素-6、白细胞介素-15、干扰素及粒-巨细胞集落刺激因子等均可通过该通路在RA疾病的发生发展中起重要作用,且该通路在RA发病中呈持续激活状态。近年来研究发现,中药对JAK-STAT信号通路的调节机制,一是直接抑制JAK-STAT信号通路,二是调节与JAK-STAT信号通路相关的细胞因子的释放,三是调节与JAK-STAT信号通路相关基因的表达,多种机制间相互协同发挥作用。本文通过综述近年来单味中药有效成分对RA-JAK-STAT信号通路影响的研究成果,以期为RA的基础研究、新药开发及其临床治疗提供借鉴。

关键词：中药类风湿关节炎 JAK-STAT 信号通路综述

氨氮胁迫对中华条颈龟抗氧化防御系统、NF-κB和JAK-STAT信号通路的影响

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氨氮胁迫对中华条颈龟抗氧化防御系统、NF-κB和JAK-STAT信号通路...

作者：梁龄月海南师范大学

学位级别：硕士

氨氮是水产养殖水体中的主要有毒物质之一,主要来自于水环境中残留的有机物(水生动物排泄的粪便、残余的饲料等)的氨化作用,高浓度的氨氮将严重影响水生动物健康。龟类的高密度、集约化的养殖模式容易蓄积较高浓度的氨氮、亚硝酸盐等有... 详细信息

氨氮是水产养殖水体中的主要有毒物质之一,主要来自于水环境中残留的有机物(水生动物排泄的粪便、残余的饲料等)的氨化作用,高浓度的氨氮将严重影响水生动物健康。龟类的高密度、集约化的养殖模式容易蓄积较高浓度的氨氮、亚硝酸盐等有害物质,导致有害菌和条件致病菌大量滋生,降低机体抗病力,特别在高温期,养殖水体中溶解氧含量降低,极易诱发病害甚至暴发疾病,给养殖业带来重大经济损失。为了研究氨氮暴露对中华条颈龟(Mauremys sinensis)的影响,我们主要从氧化应激入手,系统研究中华条颈龟在高氨环境的抗氧化防御和免疫调控对策。为此,设计了两组实验:以曝气自来水为对照组,6.45 m M氨氮处理组,分别在胁迫6 h、12 h、24 h、48 h以及re 24 h(恢复24 h)和re 48 h进行取样。主要研究结果如下:1、氨氮在中华条颈龟机体内的蓄积及氧化应激(1)氨暴露初期血氨含量呈上升趋势,24 h达到最大值;在恢复期,血氨含量有所下降且与对照组无显著差异。就尿素而言,实验组含量呈现先上升后下降的趋势,这说明氨暴露可能加速了体内氨的代谢速率。(2)在各胁迫时间氨氮处理组谷草转氨酶(AST)活力均显著高于对照组,并在12 h达到最大值,之后随时间的延长显著下降;氨氮组胆碱酯酶(CHE)活力在12 h和24 h显著高于对照组,在胁迫后期与对照组相比无显著变化。(3)氧化应激标志物丙二醛(MDA)含量在各胁迫时间点均显著高于对照组,胁迫48 h时达到最大值,其含量约为对照组的2.1倍;在恢复期有所下降。这说明氨暴露对中华条颈龟机体造成了一定的损伤,并且出现了氧化应激反应。2、中华条颈龟应对氨氮胁迫的抗氧化防御调节(1)相关酶的基因表达量及活力:抗氧化酶(SOD、CAT和GSH-Px)活力在胁迫期间均显著高与对照组,但上升的趋势与达到最大值的时间有所不同,推测可能是因为各酶所行使的功能有所差异而造成的。抗氧化酶相关基因(Mn-SOD、CAT、GSH-Px)基因的相对表达在胁迫时间段均有显著高于对照组的情况,在恢复时间段,Mn-SOD和CAT有显著下降的情况,基因表达的变化情况与酶活的变化呈现类似的趋势。(2)抗氧化的上游调控通路(Nrf2-Keap1通路):除恢复期外,氨氮组Nrf2基因的表达量均显著高于对照组,在12 h达到最大值,Keap1基因的表达量在胁迫时间段均显著低于对照组,在恢复期与对照组差异不显著;蛋白表达情况与基因的变化趋势类似。这表明在高氨环境中,机体会活化Nrf2-Keap1通路,进而调控下游的抗氧化防御系统,提高抗氧化能力。(3)热休克蛋白反应:HSP70基因的表达量在整个实验期间均显著高于对照组,在48h急剧升高并达到最大值,随后有下降趋势;除6 h外,HSP 90基因均显著高于对照组,在48 h和re 48 h均达到最大值,恢复期间无下降趋势。这说明高氨环境可诱导中华条颈龟的抗氧化防御系统和热休克蛋白反应的激活,以抵御环境压力带来的机体损伤。3、氨氮胁迫对中华条颈龟JAK-STAT和NF-κB信号通路的影响(1)JAK-STAT通路:除12 h外,氨氮组stat3 mRNA表达量均显著高于对照组,在re 48 h达到最大值;jak1、jak2、jak3基因表达量在48 h均急剧升高,恢复时间段内,jak1和jak2的表达量有下降的趋势,而jak3在恢复时间段虽然有下降的情况,但与48h无显著差异。而后急剧下降至与对照组相比无显著差异;jak2基因的表达量在12 h、24 h和48 h显著高于对照组且呈递增趋势,在恢复期却显著低于对照组;jak3基因在12 h时显著高于对照组,随胁迫时间的延长,jak3基因表达量增加。这说明中华条颈龟在高氨环境中,JAK-STAT信号通路被激活。(2)NF-κB通路:氨氮组p50基因表达量只在48 h和re 48 h显著高于对照组,在恢复期与对照组差异不显著,其蛋白表达量在12 h显著低于对照组,48 h显著高于对照组且表达量最大;p65基因表达量在整个实验阶段均显著高于对照组,且在恢复期上升趋势更为明显,其蛋白表达量亦显著高于对照组,在re 48 h表达量最大。这说明中华条颈龟在应对高氨环境时NF-κB信号通路被激活。(3)炎症因子:BAFF基因在胁迫48 h后显著高于对照组,前期与对照组相比无显著差异,且在恢复期间无显著下降的趋势;IL-6基因在整个时间段均显著高于对照组,在48 h达到最大值,且在恢复时间段下降趋势很明显。这说明机体在高氨环境中仍处于一定的炎症状态。总的来说,中华条颈龟在应对高氨环境所造成的氧化应激时,可通过活化抗氧化防御系统以及免疫调控机制,以减少氨暴露造成的损伤。

关键词：氨氮胁迫中华条颈龟抗氧化防御 JAK-STAT NF-κB

黄芪桂枝五物汤对类风湿关节炎CIA模型大鼠JAK-STAT信号通路的影响

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时珍国医国药 2019年第4期30卷 811-814页

作者：刘佳维王永辉李艳彦张永刚赵乐张若楠孙力威山西中医学院基础医学院山西太原030024 遂昌县中医院浙江丽水323000 山西医科大学药学院山西太原030001 成都中医药大学四川成都611137

目的探讨黄芪桂枝五物汤(HGW)对类风湿关节炎CIA模型大鼠JAK-STAT信号通路的影响。方法选用SD大鼠72只,随机分为6组:正常组(N),模型组(CIA),HGW低中高剂量组(HGW-L、M、H),Tofacitinib组(TFN)。HGW-L、HGW-M、HGW-H组药物剂量分别为16,3... 详细信息

目的探讨黄芪桂枝五物汤(HGW)对类风湿关节炎CIA模型大鼠JAK-STAT信号通路的影响。方法选用SD大鼠72只,随机分为6组:正常组(N),模型组(CIA),HGW低中高剂量组(HGW-L、M、H),Tofacitinib组(TFN)。HGW-L、HGW-M、HGW-H组药物剂量分别为16,32,64 g·m l^(-1),相当于临床常人用量的3,6,12倍,TFN药物剂量为15 mg·kg^(-1),N、CIA组每日给予10 ml·kg^(-1)的蒸馏水。以牛Ⅱ型胶原加弗氏完全佐剂建立胶原诱导型关节炎(CIA)大鼠模型,每周监测各组大鼠足趾容积和体质量变化,经HGW治疗4周后光镜下观察各组大鼠踝关节病理形态;酶联法检测大鼠血清中IL-2的含量;免疫组化法检测大鼠软骨和滑膜中jak3、stat3、SOCS1、SOCS3的蛋白表达水平。结果 CIA组大鼠踝关节红肿明显,伴关节畸形、大鼠活动量明显减少,喜扎堆、哀鸣渐至跛行。与N组比较,CIA组、HGW-H组大鼠stat3、SOCS1蛋白表达水平显著升高(Pstat3、SOCS1蛋白表达水平显著降低(PJAK-STAT信号通路中IL-2、jak3、stat3、SOCS1、SOCS3的表达相关。

关键词：黄芪桂枝五物汤 JAK-STAT 信号转导通路类风湿关节炎

非JAK-STAT信号通路在BCR-ABL阴性骨髓增殖性肿瘤中的研究进展

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生理科学进展 2022年第1期53卷 33-38页

作者：齐林成志勇承德医学院研究生院承德067000 保定市第一医院血液内科保定071000 石家庄市第四医院内科石家庄050000

jak信号通路通过配体和细胞表面的受体相互结合而诱导受体二聚化及磷酸化,激活jak。活化的JAK-STAT信号通路参与肿瘤的发生、发展、血管新生、侵袭和转移。在BCR-ABL阴性骨髓增殖性肿瘤(MPN)中jak2、MPL及CALR基因突变均可组成性激活jak... 详细信息

jak信号通路通过配体和细胞表面的受体相互结合而诱导受体二聚化及磷酸化,激活jak。活化的JAK-STAT信号通路参与肿瘤的发生、发展、血管新生、侵袭和转移。在BCR-ABL阴性骨髓增殖性肿瘤(MPN)中jak2、MPL及CALR基因突变均可组成性激活jak2-stat5信号通路。因此JAK-STAT通路成为研究的热点。同时,越来越多的研究证实其它多条信号通路的异常激活和相互作用在MPN中也发挥重要作用。现就非JAK-STAT通路在MPN中的研究情况做一综述。

关键词：骨髓增殖性肿瘤 MPN 信号通路 JAK-STAT

类胰蛋白酶通过PAR2激活JAK-STAT通路促进小鼠骨髓来源的巨噬细胞向M1表型转换

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复旦学报（医学版） 2015年第5期42卷 607-612,627页

作者：张亚东卢涵宇陈亮李晓波殷莲华王松梅复旦大学基础医学院医学实验教学中心上海200032 复旦大学生理与病理生理学系上海200032

目的研究类胰蛋白酶促进小鼠巨噬细胞表型转换的作用及其机制。方法体外分离培养小鼠巨噬细胞(对照组),并诱导为M1和M2亚型,经类胰蛋白酶和PAR2激动剂分别作用后,通过real-time PCR和Western blot检测巨噬细胞亚型标志物以及JAK-STAT信... 详细信息

目的研究类胰蛋白酶促进小鼠巨噬细胞表型转换的作用及其机制。方法体外分离培养小鼠巨噬细胞(对照组),并诱导为M1和M2亚型,经类胰蛋白酶和PAR2激动剂分别作用后,通过real-time PCR和Western blot检测巨噬细胞亚型标志物以及JAK-STAT信号通路的变化。结果成功分离培养小鼠骨髓来源的巨噬细胞,并诱导其分化为M1和M2亚型。PAR2激动剂(2-Furoyl-LIGRLO-amide)和类胰蛋白酶分别与M1型巨噬细胞分别作用后,M1型标记物iNOS和IL-12高于对照组,而M2型标记物arg1和mrc1与对照相比无明显变化,提示类胰蛋白酶和PAR2激动剂可以促进巨噬细胞向M1型转化,而不会促进M1型向M2型转化。PAR2激动剂和类胰蛋白酶分别与M2型巨噬细胞作用后,M2型标记物arg1和mrc1明显下降,而M1型标记物iNOS和iL-12有所增加,提示类胰蛋白酶和PAR-2激动剂均可促进M2型向M1型转化。类胰蛋白酶作用于M1型巨噬细胞后,jak2磷酸化水平、stat和p-stat的表达水平均无明显变化。类胰蛋白酶作用于M2型巨噬细胞后,jak2的磷酸化随着时间延长明显升高,stat的磷酸化水平同时升高,提示类胰蛋白酶可以通过和PAR-2结合而激活jak2-stat信号通路,进而引起M2型向M1型转化。结论类胰蛋白酶可能通过与其受体PAR2相互作用后激活JAK-STAT通路,促进小鼠骨髓来源的巨噬细胞向M1亚型转化,起到促进炎症发展的作用,从而进一步加重动脉粥样硬化的发展。

关键词：类胰蛋白酶 PAR2 巨噬细胞M1/M2 JAK-STAT 小鼠

JAK-STAT信号通路相关基因单核苷酸多态性与强直性脊柱炎遗传易感...

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作者：高兴安徽医科大学

学位级别：硕士

目的:探讨JAK-STAT信号通路相关基因的单核苷酸多态性在强直性脊柱炎(Ankylosing Spondylitis,AS)易感性中的作用。方法:本次研究收集了在安徽医科大学第一附属医院风湿免疫科门诊就诊的660例确诊AS患者;按照AS患者的年龄、性别构成收集... 详细信息

目的:探讨JAK-STAT信号通路相关基因的单核苷酸多态性在强直性脊柱炎(Ankylosing Spondylitis,AS)易感性中的作用。方法:本次研究收集了在安徽医科大学第一附属医院风湿免疫科门诊就诊的660例确诊AS患者;按照AS患者的年龄、性别构成收集1:1匹配的来自于合肥中心血站和安医大一附院体检中心的健康人群作为对照组,共纳入646名。研究共选取了JAK-STAT信号通路相关基因的15个SNP位点(rs2230587、rs2230588、rs2780815、rs310241、rs2274472、rs2230722、rs2230724、rs10758669、rs10199181、rs1547550、rs2066802、rs45463799、rs6718902、rs3744483、rs1135669),基因分型采用了SNPscan分型专利技术。分别对基因型与等位基因频率、遗传模型进行分析,比较各候选位点在病例组和对照组及其各亚组之间频率的分布情况,并进行单倍型分析了解位点间单倍型情况;最后选择BASDAI以及BASFI两个反应患者疾病活动情况的指标进行临床关联分析。统计描述对符合正态分布的连续型资料用均数±标准差表示,不服从的则用中位数(四分位数间距)表示。分析数据采用了SPSS 23.0软件,检验水准为双侧0.05,多重比较使用Bonferroni法对P值进行校正。结果:AS患者660名,平均年龄29.30±9.57岁,男女性别比为527:133(3.96:1);646例健康对照平均年龄28.61±7.85岁,男女性别比为526:120(4.38:1)。经t检验和χ检验,病例组与对照组在年龄(t=1.427,P=0.154)和性别(χ=0.519,P=0.471)构成上不存在有统计学意义的差异,两组具有可比性。AS患者中有62.9%被检出HLA-B27阳性,病例组平均病程为2(0,7)年,BASFI、BASDAI得分中位数分别为0.8(0,2.6)、1.8(0.4,3.3)。HWE遗传平衡检验,结果显示15个位点均符合遗传平衡。基因型和等位基因分析结果显示两组之间分布差异无统计学意义,P均>0.05。对性别进行分层后,观察到stat1基因上的rs6718902位点与AS易感性在男性人群中存在统计学关联(χ=9.272,OR[95%CI]=0.765[0.644-0.909],P=0.002),而在女性人群中则未发现这种关联,根据患者的BASFI、BASDAI以及HLA-B27是否阳性进行分层分析,结果显示stat3基因上的rs3744483和stat5A基因上的rs1135669位点的基因型频率在不同BASFI得分的两组患者之间分布差异有统计学意义(rs3744483:χ=9.808,P=0.007;rs1135669:χ=10.469,P=0.005),而stat1基因上rs10199181位点的等位基因在患者根据HLA-B27是否阳性进行分组时,两组患者等位基因频率分布差异有统计学意义(χ=11.007,OR[95%CI]=0.642[0.493-0.835],P=0.001)。遗传模型分析发现jak2基因rs2230724隐性模型(χ=6.728,OR[95%CI]=0.680[0.507-0.911],P=0.009)在病例与对照组之间存在统计学差异,而按照性别分层分析后也发现了stat1基因上的rs1547550位点的显性模型(χ=22.982,OR[95%CI]=0.186[0.087-0.399],P<0.001)和纯合子模型(χ=21.592,OR[95%CI]=0.193[0.090-0.415],P<0.001)、rs6718902位点的显性模型(χ=10.591,OR[95%CI]=1.570[1.195-2.062],P=0.001)和纯合子模型(χ=8.550,OR[95%CI]=1.674[1.184-2.368],P=0.003)差异在男性中存在。对15个位点进行单倍型分析,发现rs310241与rs2230588(D’=0.98,r=0.93)、rs3744483与rs1135669(D’=0.99,r=0.98)存在较强连锁不平衡,对它们进行的单倍型分析后未识别出可能影响AS易感性的单倍型组合。临床指标关联分析:BASFI得分在以rs6718902位点基因型分组时分布在组间存在统计学差异(P=0.033),其余各分组中均未观察到统计学差异。按照性别对AS患者进行分层分析,结果显示男性患者BASDAI得分在rs2230724基因型间的分布差异有统计学意义(P=0.034);在女性患者中,分别以rs2230588、rs2780815和rs310241作为分组变量时,BASFI得分分布差异有统计学意义(rs2230588:P=0.026;rs2780815:P=0.006;rs31

关键词：强直性脊柱炎 JAK-STAT 基因多态性遗传易感性

川穹嗪对AngⅡ诱导的大鼠心肌肥大细胞JAK-STAT通路作用

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细胞与分子免疫学杂志 2011年第5期27卷 519-521,524页

作者：高美华张丽李冰任书荣张蓓青岛大学医学院免疫学教研室山东青岛266000 青岛大学医学院生物学教研室山东青岛266000

目的:研究川穹嗪对心肌肥大JAK-STAT通路的影响。方法:建立心肌肥大动物模型,分离培养新生大鼠心肌细胞,利用RT-PCR检测试验组和对照组基因ANP相对水平、Western blot检测试验组和对照组心肌肥大信号转导途径分子pjak2、pjak1、pstat3,... 详细信息

目的:研究川穹嗪对心肌肥大JAK-STAT通路的影响。方法:建立心肌肥大动物模型,分离培养新生大鼠心肌细胞,利用RT-PCR检测试验组和对照组基因ANP相对水平、Western blot检测试验组和对照组心肌肥大信号转导途径分子pjak2、pjak1、pstat3,并进行统计学分析。结果:川芎嗪可显著抑制ANP mRNA的表达(Pjak2 jak1 stat3的表达(PJAK-STAT信号转导通路,为中药干扰JAK-STAT信号转导通路治疗心肌肥大奠定基础。

关键词：心肌肥大 JAK-STAT 信号转导

Rab相关蛋白（RABRP）通过JAK-STAT通路参与家蚕先天免疫反应

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作者：陈晨安徽农业大学

学位级别：硕士

家蚕（Bombyx mori）是鳞翅目的绢丝昆虫,具有重要的经济价值,研究家蚕的先天免疫机制对于其病虫害防治具有重要意义。对家蚕Rab相关蛋白（Bombyx mori Rab related protein,BmRABRP）在家蚕先天免疫中发挥的作用进行了探究。结果如下:1... 详细信息

家蚕（Bombyx mori）是鳞翅目的绢丝昆虫,具有重要的经济价值,研究家蚕的先天免疫机制对于其病虫害防治具有重要意义。对家蚕Rab相关蛋白（Bombyx mori Rab related protein,BmRABRP）在家蚕先天免疫中发挥的作用进行了探究。结果如下:1.成功构建了重组质粒p ET-28a-RABRP,并获得重组蛋白RABRP-His,免疫SPF小鼠,成功获得多克隆鼠抗。2.qPCR分析表明,BmRABRP基因的mRNA在家蚕各组织（马氏管、表皮、丝腺、脂肪体、血细胞和中肠）中均有表达,其中在马氏管中表达量最高,在表皮中表达量最低。Western blot分析表明,BmRABRP蛋白在脂肪体中表达量最高。3.注射四种致病菌:大肠杆菌（Escherichia coli）、藤黄微球菌（Micrococcus luteus）、白僵菌（Beauveria bassiana）和家蚕核形多角体病毒（Bombyx mori nuclear polyhedrosis virus,Bm NPV）。BmRABRP基因在mRNA水平均能显著上调,其蛋白在Bm NPV刺激下显著上调。结果表明BmRABRP基因可能参与家蚕的先天免疫反应。4.BmRABRP基因沉默后,能显著降低家蚕对病原菌的抵抗力和结瘤个数。5.BmRABRP基因通过影响SOCS2的活性来调控JAK-STAT通路。综上所述,这些实验结果表明BmRABRP基因能够参与家蚕的先天免疫过程,并可能通过影响JAK-STAT通路的活性来参与该过程。本研究为后续进一步从分子水平阐释BmRABRP基因参与家蚕先天免疫作用机制提供基础,以及对家蚕病虫害免疫防御具有重要意义。

关键词：家蚕 Rab相关蛋白基因（RABRP）先天免疫结瘤 RNA干扰 JAK-STAT