检索结果-南通市图书馆

作者：李松建内蒙古农业大学

学位级别：硕士

新生儿的Fc受体(fcrn)对于向胎儿和新生儿提供具有保护性的母源抗体具有至关重要的作用,同时具有促进局部保护性免疫的功能。fcrn还可以将特异性igg与抗原结合的抗原-抗体复合物转运到粘膜的固有层,抗原复合物通过抗原递呈细胞递呈给T... 详细信息

新生儿的Fc受体(fcrn)对于向胎儿和新生儿提供具有保护性的母源抗体具有至关重要的作用,同时具有促进局部保护性免疫的功能。fcrn还可以将特异性igg与抗原结合的抗原-抗体复合物转运到粘膜的固有层,抗原复合物通过抗原递呈细胞递呈给T淋巴细胞,引起机体的免疫反应。为探究由igg fcrn介导奶牛乳房炎无乳链球菌和金黄色葡萄球菌保护性抗原亚单位疫苗的免疫效果,验证igg fcrn在奶牛乳腺发挥局部免疫过程中的重要作用。本研究采用分子生物学技术,构建了牛igg Fc和无乳链球菌(***)重要的表面抗原Sip的重组质粒pET-22b-Fc-Sip,通过原核表达并配合佐剂制备了亚单位疫苗Fc-Sip。在本实验室过去研究的基础上,制备了金黄色葡萄球菌Fc-FnBPB-ClfA亚单位疫苗。将无乳链球菌Fc-Sip亚单位疫苗、金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)Fc-FnBPB-ClfA亚单位疫苗、Fc-Sip和Fc-FnBPB-ClfA二联亚单位疫苗对即将干奶的患有隐性乳房炎奶牛进行免疫试验。通过免疫前后乳样细菌分离、乳样体细胞数测定、免疫血清间接ELISA方法,评价上述亚单位疫苗的免疫学特性。结果显示,免疫组0 d的乳样细菌分离率为83.3%,其中无乳链球菌检出率为20%,金黄色葡萄球菌检出率为23.3%;免疫组90 d后乳样细菌分离率降至26.6%,无乳链球菌检出率降至3.3%,金黄色葡萄球菌的检出率降至6.6%。免疫前后分菌试验结果说明Fc-Sip亚单位疫苗和Fc-FnBPB-ClfA亚单位疫苗,不但针对无乳链球菌性奶牛乳房炎和金黄色葡萄球菌性乳房炎具有治疗效果,而且还可以抑制其它奶牛乳房炎致病菌的侵入。免疫后第90 d,使用利拉伐牛奶体细胞检测仪对所有试验奶牛的乳汁进行体细胞数检测,免疫组奶牛乳样体细胞数小于3.3×10个/mL,而对照组奶牛乳样体细胞数大于4.0×10个/mL。监测0 d、7 d、14 d、28 d、60 d免疫组、对照组的血清抗体滴度,对照组奶牛血清抗体滴度一直保持在1:256至1:512之间。第一次免疫后7 d,免疫组80%的奶牛血清抗体滴度为1:1024;第14 d后,血清抗体滴度升高明显,免疫组90%奶牛血清抗体滴度为1:2048;第28 d后,免疫组80%奶牛血清抗体滴度在1:4096至1:8192之间,比对照组平均上升3至4个抗体滴度;第60 d后,免疫各组的血清抗体滴度呈现下降趋势。牛奶中体细胞数检测结果和抗体监测结果说明,该亚单位疫苗具有降低牛奶体细胞数的作用,也证明该亚单位疫苗促进了奶牛免疫反应的发生。免疫组中的A组是使用Fc-Sip和Fc-FnBPB-ClfA制备的二联亚单位疫苗对奶牛进行试验的,综合免疫效果在各免疫组中最佳。

关键词： igg fcrn 奶牛乳房炎无乳链球菌 Sip基因金黄色葡萄球菌粘膜免疫亚单位疫苗

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奶牛乳房炎无乳链球菌Fc-Sip和金黄色葡萄球菌Fc-FnBPB-ClfA亚单位疫苗的免疫试验研究

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中国预防兽医学报 2020年第3期42卷 280-286页

作者：李松建周雅坪吕天星杜琳郭婷郝永清内蒙古农业大学兽医微生物学与免疫学实验室内蒙古呼和浩特010018

为探究由igg fcrn介导奶牛乳房炎无乳链球菌(***,Sgc)和金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus,Sau)保护性抗原亚单位疫苗的免疫效果,在本实验室前期研究基础上,本研究按体积11的比例将Sgc的Fc-Sip和Sau的Fc-FnBPB-ClfA两种蛋白分别与1... 详细信息

为探究由igg fcrn介导奶牛乳房炎无乳链球菌(***,Sgc)和金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus,Sau)保护性抗原亚单位疫苗的免疫效果,在本实验室前期研究基础上,本研究按体积11的比例将Sgc的Fc-Sip和Sau的Fc-FnBPB-ClfA两种蛋白分别与1%的盐酸左旋咪唑(1%LH)充分混合,制备两种亚单位疫苗。将即将干奶(妊娠220 d)、CMT试验为"++"以上的奶牛随机分为4组,分别将Fc-Sip+Fc-FnBPB-ClfA二联亚单位疫苗(A组)、Fc-Sip亚单位疫苗(B组)、Fc-FnBPB-ClfA亚单位疫苗(C组)通过首次肌肉免疫和二次乳头管灌注免疫方式进行免疫试验。通过免疫前后对乳样细菌分离、体细胞数测定及免疫血清抗体滴度测定,评价上述亚单位疫苗的免疫效果。结果显示,免疫前免疫组(A、B、C)奶牛的乳样细菌分离率分别为80%、90%、80%,其中Sgc检出率分别为20%、30%、10%,Sau检出率分别为30%、20%、10%;首免90 d后3个免疫组奶牛乳样细菌分离率分别降至20%、20%、40%,其中Sgc的检出率分别降至0、0、10%,Sau的检出率分别降至10%、10%、0,对照组免疫前后以上各项检测无明显变化。使用利拉伐牛奶体细胞检测仪检测免疫前后试验奶牛乳样中的体细胞数,免疫前免疫组(A、B、C)奶牛体细胞数均值分别为6.19×105个/mL、5.16×105个/mL、5.49×105个/mL,首免90 d后3个免疫组奶牛乳样中体细胞数均值分别为2.05×105个/mL、2.04×105个/mL、2.52×105个/mL,而对照组奶牛乳样体细胞数与免疫前无明显变化。检测首免后0、7 d、14 d、28 d、60 d、90 d的血清抗体滴度,结果显示,首免后7 d,免疫组(A、B、C)80%的奶牛血清抗体滴度为11024;第14 d后,免疫组(A、B、C)90%奶牛血清抗体滴度达到12048;第28 d后,免疫组(A、B、C)80%奶牛血清抗体滴度在14096~18192,比对照组平均上升3~4个抗体滴度,对照组奶牛血清抗体滴度一直保持在1256~1512。综合分析以上试验结果显示免疫A组(Fc-Sip+Fc-FnBPB-ClfA)综合免疫效果在各免疫组中最佳。本研究结果表明Fc-Sip+Fc-FnBPB-ClfA二联亚单位疫苗对无乳链球菌和金黄色葡萄球菌性奶牛乳房炎具有较好的治疗和预防作用,为奶牛隐形乳房炎的防治提供了实验依据。

关键词：奶牛乳房炎无乳链球菌金黄色葡萄球菌 Sip基因 igg fcrn 亚单位疫苗

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