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itgav过表达与胆管癌转移及预后的关系

局解手术学杂志 2022年第6期31卷 496-501页

作者：陈平平张震生武金才郑进方唐荣李梦婷章家超曾勇超陈良海南省人民医院/海南医学院附属海南医院肝胆外科海南海口570311

目的探讨整合素αv(itgav)过表达与胆管癌侵袭转移及预后的关系。方法选取我院行根治性手术切除的胆管癌患者共374例,随机分为Ⅰ组(80例)和Ⅱ组(294例),取患者术中切除的癌组织及癌旁组织。采用RT-PCR和Western blot检测Ⅰ组胆管癌患者... 详细信息

目的探讨整合素αv(itgav)过表达与胆管癌侵袭转移及预后的关系。方法选取我院行根治性手术切除的胆管癌患者共374例,随机分为Ⅰ组(80例)和Ⅱ组(294例),取患者术中切除的癌组织及癌旁组织。采用RT-PCR和Western blot检测Ⅰ组胆管癌患者手术切除标本中itgav的mRNA与蛋白表达;应用组织芯片检测Ⅱ组胆管癌患者手术切除标本中itgav的表达,分析itgav表达与胆管癌临床病理特征、复发及预后的关系。结果胆管癌组织中itgav mRNA及蛋白表达水平均高于癌旁组织(Pitgav阳性表达率为54.8%。按复发时间进行分组,itgav在早期复发组(复发时间itgav低表达胆管癌患者比较,itgav过表达胆管癌患者术后更易复发,复发时间较短(HR=1.90;95%CI1.41~2.62;Pitgav过表达是胆管癌患者术后复发时间(HR=1.73;95%CI1.13~2.63;P=0.011)和术后生存时间(HR=1.65;95%CI1.08~2.51;P=0.021)的独立影响因素。结论胆管癌中itgav过表达可以促进胆管癌侵袭转移,itgav过表达预示胆管癌患者预后不良,可作为胆管癌术后复发和预后的潜在分子预测指标。

关键词： itgav 肿瘤转移癌胆管癌预后

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I TGAV在非小细胞肺癌中的表达及其与放射抵抗的关系

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肿瘤防治研究 2022年第11期49卷 1112-1118页

作者：唐园惠朱圣明柴晶晶韩佳慧田超邓鑫州段奇文湖北医药学院十堰442000 湖北医药学院附属太和医院肿瘤科十堰442000 锦州医科大学十堰市太和医院研究生培养基地十堰442000

目的探讨itgav的表达与NSCLC细胞放射敏感度的关系。方法使用生物信息学方法分析itgav在NSCLC组织中的表达水平及其与NSCLC患者预后的相关性。克隆形成实验验证放射抵抗细胞与亲本细胞的放射敏感度差异,Western blot检测itgav的表达。We... 详细信息

目的探讨itgav的表达与NSCLC细胞放射敏感度的关系。方法使用生物信息学方法分析itgav在NSCLC组织中的表达水平及其与NSCLC患者预后的相关性。克隆形成实验验证放射抵抗细胞与亲本细胞的放射敏感度差异,Western blot检测itgav的表达。Western blot、qRT-PCR验证si-itgav转染效率,选用最佳itgav干扰序列转染A549R、H1299R细胞。克隆形成实验、流式细胞术检测itgav干扰后对细胞克隆形成、凋亡和周期情况的影响。结果itgav在非小细胞肺癌组织中表达水平明显高于正常组织(Pitgav干扰组细胞在4、6、8 Gy射线照射克隆形成能力与阴性对照组相比显著降低(均Pitgav干扰组细胞的凋亡率增加(P_(H1299)Ritgav表达可以增加非小细胞肺癌放射敏感度。

关键词： itgav 放射抵抗肺癌生物信息学

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SIN3B promotes integrin αV subunit gene transcription and cell migration of hepatocellular carcinoma

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Journal of Molecular Cell Biology 2019年第5期11卷 421-432页

作者： Qianqian Cai Yuanyuan Liu Ping Zhu Chunlang Kang Heyang Xu Bing Qi Rong Wang Yiwei Dong Xing Zhong Wu Department of Biochemistry and Molecular Biology School of Basic Medical Sciences Fudan University. Key Lab of Glycoconjugate Research Ministry of Public Health Shanghai 200032 China Zhejiang Provincial People's Hospital Hangzhou 310053 China

Paired amphipathic helix protein (SIN3B) is a transcription corepressor for many genes. Here we show a different regulation mechanism of integrin aV gene expression by SIN3B in human hepatocellular carcinoma (HCC). We first observed a close relationship between Integrin aV and SIN3B expressions in HCC patients and tumor cell lines with different metastatic potentials. Overexpression of SIN3B significantly accelerated the cell migration rate of SMMC-7721, but failed when integrin αV expression was silenced. Interestingly, SIN3B stimulated integrin aV subunit promoter activity only in the presence of sulfatide. Importantly, SIN3B was identified in the complex with sulfatide by mass spectrometry. Fat blot assay indicated that SIN3B specifically interacted with sulfatide. Molecular modeling suggested that sulfatide induced the conformational change of SIN3B from compacted α-helices to a relaxed β-sheet in PAH2 domain. The data of immunoprecipitation and ChIP assay indicated that altered SIN3B lost the binding affinity with MAD1 and HDAC2, which reduced the recruitment of HDAC2 on integrin aV gene promoter and prevented the deacetylation of the histone 3. In conclusion, this study demonstrated that SIN3B promoted the transcriptional activation of the integrin αV subunit gene promoter by reducing interaction with HDAC2.

关键词： paired amphipathic helix protein itgav sulfatide HCC histone deacetylation

基于大数据分析探究影响阿尔兹海默症疾病进展的关键基因及通路

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药物生物技术 2022年第4期29卷 331-337页

作者：汤雅宁吉丽娜华子春南京大学生命科学学院、医药生物技术国家重点实验室江苏南京210023 中国药科大学生物药物学院江苏南京211198 江苏省产业技术研究院医药生物技术研究所江苏常州213164

为探究从无症状阿尔兹海默症(Asymptomatic Alzheimer′s disease,AsymAD)发展为阿尔兹海默症(Alzheimer′s disease,AD)的疾病进程,文章运用生物信息学方法筛选关键基因和信号通路。作者比较了GEO数据库中的表达芯片数据,发现AsymAD和A... 详细信息

为探究从无症状阿尔兹海默症(Asymptomatic Alzheimer′s disease,AsymAD)发展为阿尔兹海默症(Alzheimer′s disease,AD)的疾病进程,文章运用生物信息学方法筛选关键基因和信号通路。作者比较了GEO数据库中的表达芯片数据,发现AsymAD和AD内嗅皮层中存在具有统计学显著性差异的差异表达基因(Differen-tially expressed genes,DEGs),通过火山图对DEGs进行可视化分析,并使用STRING数据库对DEGs构建蛋白网络,同时利用Cytoscape软件中的cytoHubba插件分析获得关键基因,并对其进行靶基因聚合功能基因组学(Convergent functional genomic,CFG)评估,发现CXCL12、CD44和CASP8基因与Aβ(Amyloidβ)和Tau(microtubule-associated protein tau)具有显著相关,CXCL12、CDH18和itgav基因在AD症状出现前具有显著变化,CXCL12、CD44、CASP8、CDH18和itgav基因在AsymAD和AD患者的不同脑组织中存在表达差异变化,这些基因可能在从AsymAD到AD的疾病进展中发挥了重要作用。

关键词：阿尔兹海默症无症状阿尔兹海默症内嗅皮层靶基因聚合功能基因组学 CASP8 itgav CXCL12 CDH18

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楝酰胺在肝癌中介导PI3K/AKT通路的抗肿瘤活性研究

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楝酰胺在肝癌中介导PI3K/AKT通路的抗肿瘤活性研究

作者：李瑞华新乡医学院

学位级别：硕士

背景肝细胞癌（HCC）,目前已成为全球第六的恶性肿瘤疾病,并且是全球第二大的死亡原因[1]。易复发、易转移是其生存率低的主要原因[2],由于大多数肝癌患者就诊时往往已经症状严重,被确诊为肝癌已是晚期,导致肝癌的预后不佳[3]。因此探... 详细信息

背景肝细胞癌（HCC）,目前已成为全球第六的恶性肿瘤疾病,并且是全球第二大的死亡原因[1]。易复发、易转移是其生存率低的主要原因[2],由于大多数肝癌患者就诊时往往已经症状严重,被确诊为肝癌已是晚期,导致肝癌的预后不佳[3]。因此探究肝癌的发生、癌细胞的增殖及转移的机制为寻找新的肝癌治疗药物提供理论基础成为研究热点之一。磷脂酰肌3-激酶/蛋白激酶B（PI3K/Akt）通路是恶性肿瘤中的一个经典信号通路,在50%的HCC中被认为是关键所在[4]。PI3K/Akt通路与HCC的临床病理学特征密切相关,在肝癌细胞的增殖、分化、凋亡及代谢方面发挥重要作用[5]。楝酰胺（Rocaglamide,Roc-A）是从楝棵植物（Meliaceae）的根茎中分离出来的一种天然抗肿瘤化合物[6]。目前研究发现Roc-A可通过抑制m RNA帽结合真核翻译启动因子抑制癌细胞的增殖[7];还可通过激活ATM/ATR-Chk1/Chk2检查点途径来实现对癌细胞分裂周期进展的抑制[8];介导翻译抑制热休克因子1（heat-shock factor 1,HSF1）,减少葡萄糖的摄取从而抑制癌细胞的增殖能力[9];通过激活JNK和MAPK p38表达的同时还可以抑制Ras-CRaf-MEK-ERK信号通路的关于发图来诱导癌细胞的凋亡[10]。Roc-A作为天然抗肿瘤药物,除了具有抗癌活性,还可以保护正常细胞免受化疗引起的细胞死亡[11]。Roc-A在肝癌是否介导PI3K/Akt通路从而发挥抗肿瘤作用,目前所知甚少。目的通过观察不同浓度Roc-A条件下培养的肝癌细胞的增殖及凋亡情况,研究其可能的作用机制,为楝酰胺作为肝癌治疗新型药物提供理论依据。方法1.培养人Hep G2肝癌细胞并加入不同浓度的Roc-A观察细胞凋亡情况:取对数生长期的人Hep G2肝癌细胞,分为4组,分别加入0nmol/L（空白对照）、50nmol/L、100nmol/L、200 nmol/L浓度的Roc-A溶液,于培养的12h、24h、48h、72h观察细胞的增殖抑制及促进细胞凋亡情况。2.蛋白组学质谱分析:按上述方法分组培养人Hep G2肝癌细胞,培养24h后采用TMT（Tandem Mass Tags）标记定量蛋白组学分析,筛选出PI3K/Akt通路上具有显著表达差异的蛋白。*** blot检测细胞蛋白表达水平:按上述方法分组培养人Hep G2肝癌细胞培养24小时后,采用Western Blot法检测目标蛋白的表达量。4.目标蛋白表达情况与肝癌患者生存时间关系分析:从Kaplan Meier Plotter癌症数据库中检索目标蛋白,对肝癌细胞中目标蛋白的表达情况与肝癌患者生存时间的关系进行生存分析。结果1.楝酰胺能够抑制人Hep G2肝癌细胞的增殖、促进癌细胞的凋亡,且这种作用与楝酰胺的浓度及作用时间呈正相关。2.蛋白组学质谱分析筛选出具有显著差异的蛋白为itgav、LAMB1。*** blot检测结果显示,经过Roc-A处理的人Hep G2肝癌细胞中itgav、LAMB1的蛋白表达水平与对照组相比明显下降（Pitgav、LAMB1蛋白的相对表达量逐渐降低（Pitgav、LAMB1的肝癌患者能获得更长的生存时间（Pitgav、LAMB1的表达介导PI3K/Akt的激活实现的。

关键词：楝酰胺肝细胞癌 itgav LAMB1 PI3K/Akt通路

TREM2通过调控肝星状细胞活化在肝纤维化中的作用及机制研究

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TREM2通过调控肝星状细胞活化在肝纤维化中的作用及机制研究

作者：柳怡重庆医科大学

学位级别：硕士

目的:肝纤维化是慢性肝损伤进展为肝硬化的重要阶段。肝星状细胞（Hepatic stellate cell,HSC）的激活是肝纤维化过程中的一个关键环节。因此,需要对HSC活化在肝纤维化中的作用及分子机制进行更为深入的研究。髓样细胞触发受体2（Trigge... 详细信息

目的:肝纤维化是慢性肝损伤进展为肝硬化的重要阶段。肝星状细胞（Hepatic stellate cell,HSC）的激活是肝纤维化过程中的一个关键环节。因此,需要对HSC活化在肝纤维化中的作用及分子机制进行更为深入的研究。髓样细胞触发受体2（Triggering receptor expressed on myeloid cells 2,TREM2）属于免疫球蛋白超家族,参与组织的损伤修复,但其在肝星状细胞活化及肝纤维化中的作用尚不明确。本研究主要探讨TREM2是否通过调控肝星状细胞活化参与肝纤维化的发生发展及可能机制。方法:1、通过串联质量标签（TMT）蛋白质组学分析人肝纤维化组织和正常肝组织TREM2表达的差异性。通过实时定量PCR（RT-q PCR）、蛋白质免疫印迹（WB）、免疫组化（IHC）和免疫荧光（IF）检测人肝纤维化组织标本和CCl诱导的小鼠肝纤维化组织中TREM2、α-SMA和CollagenⅠ的表达情况。2、提取小鼠原代肝星状细胞进行体外培养,利用RT-q PCR、WB和IF检测小鼠原代肝星状细胞活化不同时间点和腺病毒干扰TREM2后的TREM2以及肝星状细胞活化标志物α-SMA、CollagenⅠ的表达。3、干扰小鼠原代肝星状细胞TREM2表达后,通过蛋白质组测序筛选下游相关细胞信号通路;通过WB检测细胞因子（TGF-β1、PDGF-BB或EGF）作用下α-SMA、CollagenⅠ的表达水平;进一步利用WB检测TGF-β信号通路的重要分子蛋白TGF-β受体Ⅱ、Smad2、p-Smad2和早期内吞体相关蛋白1（EEA-1）的表达;通过免疫荧光检测p-Smad2和EEA-1的表达。然后利用蛋白质组测序筛选在三种不同细胞因子刺激下HSC中参与调节内吞的关键蛋白分子;通过WB检测TGF-β1刺激细胞后整合素家族蛋白itgav、ITGAX、ITGA4以及TREM2下游磷酸激酶Syk、Akt1的表达水平。最后通过Phos-tag WB检测TREM2过表达、干扰情况下和Syk抑制剂R406、Akt1抑制剂A-674563处理后小鼠原代肝星状细胞itgav的磷酸化水平。结果:1、与正常肝组织相比,人肝纤维化组织中TREM2的表达明显升高。此外,在CCl诱导小鼠肝纤维化组织中TREM2的表达也明显增多,而干扰TREM2表达可以明显缓解CCl所诱导的肝纤维化进展。2、随着小鼠原代HSC的持续激活,TREM2与其活化标志物α-SMA和CollagenⅠ的表达呈一致上调趋势。并且,干扰TREM2表达可明显抑制肝星状细胞活化。3、干扰HSC中TREM2的表达后内吞信号通路改变较显著,同时可以抑制几种细胞因子（TGF-β1、PDGF-BB或EGF）对肝星状细胞的活化标志物α-SMA、CollagenⅠ的表达。WB结果显示干扰TREM2表达后早期内吞体相关蛋白1（EEA-1）和p-Smad2的表达下调,而TGF-β受体Ⅱ和Smad2的表达无明显改变。免疫荧光也发现EEA-1和p-Smad2的表达明显下调。利用蛋白质测序分析和WB验证发现整合素家族中的itgav和ITGA4的表达均呈现下调趋势,尤其是itgav下调最为显著。同时,TREM2下游磷酸激酶Syk、Akt1的表达水平也降低。通过Phos-tag WB实验发现,干扰TREM2表达可以抑制itgav磷酸化,而过表达TREM2后itgav的磷酸化水平呈上调趋势。Syk抑制剂R406处理HSC可以明显下调itgav蛋白的磷酸化水平,而使用Akt1抑制剂A-674563后itgav蛋白的磷酸化水平无明显改变。结论:TREM2可以通过Syk磷酸化itgav,促进肝星状细胞细胞因子（TGF-β1、PDGF-BB、EGF）的内吞,进而激活肝星状细胞,参与肝纤维化的进展。

关键词：肝纤维化肝星状细胞 TREM2 itgav

整合素αv mRNA在食管鳞状细胞癌组织的表达研究

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现代生物医学进展 2015年第9期15卷 1659-1662页

作者：傅庆萍孙明忠朱蓉周中卫金浩居会祥东南大学医学院附属盐城医院检验科江苏盐城224001

目的:检测食管鳞状细胞癌(Esophageal squamous cell carcinoma ESCC)组织整合素αv(integrinαv ITGA V)的表达,分析ITGA V表达与临床病理因素之间的相关性,探讨ITGA V在ESCC的进展和预后中的作用。方法:采用实时荧光定量PCR法检测72例... 详细信息

目的:检测食管鳞状细胞癌(Esophageal squamous cell carcinoma ESCC)组织整合素αv(integrinαv ITGA V)的表达,分析ITGA V表达与临床病理因素之间的相关性,探讨ITGA V在ESCC的进展和预后中的作用。方法:采用实时荧光定量PCR法检测72例ESCC组织ITGA V的表达,并同时检测33例食管炎性组织为对照。分析ITGA V表达与ESCC癌临床病理因素之间的相关性。结果:ESCC癌组织中ITGA V的m RNA表达水平明显高于炎症组织(P<0.05),且表达水平与T、N和临床分期(P均<0.05)呈显著相关,而与患者年龄及性别无相关性。结论:ITGA V的过度表达与ESCC的转移、进展有关,ITGA V可能会成为ESCC患者个体化治疗有效的预后标志物。

关键词： itgav 食管鳞状细胞转移

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