检索结果-南通市图书馆

Fucosyltransferase 8 regulates adult neurogenesis and cognition of mice by modulating the ITGA6-PI3K/Akt signaling pathway

引用

Science China Life Sciences 2024年第7期67卷 1427-1440页

作者： Hongfeng Guo Qihang Sun Xiaoli Huang Xiaohao Wang Feng Zhang Wenzheng Qu Jinling Liu Xuejun Cheng Qiang Zhu Wen Yi Qiang Shu Xuekun Li The Children's Hospital National Clinical Research Center for Child HealthSchool of MedicineZhejiang University The Institute of Translational Medicine School of MedicineZhejiang University College of Life Sciences Zhejiang University Binjiang Institute of Zhejiang University Zhejiang University Cancer Center Zhejiang University

Fucosyltransferase 8(Fut8) and core fucosylation play critical roles in regulating various biological processes, including immune response,signal transduction, proteasomal degradation, and energy metabolism. However, the function and underlying mechanism of Fut8 and core fucosylation in regulating adult neurogenesis remains unknown. We have shown that Fut8 and core fucosylation display dynamic features during the differentiation of adult neural stem/progenitor cells(aNSPCs) and postnatal brain development. Fut8 depletion reduces the proliferation of a NSPCs and inhibits neuronal differentiation of aNSPCs in vitro and in vivo, respectively. Additionally, Fut8 deficiency impairs learning and memory in mice. Mechanistically, Fut8 directly interacts with integrin α6(ITGA6), an upstream regulator of the PI3kAkt signaling pathway, and catalyzes core fucosylation of ITGA6. Deletion of Fut8 enhances the ubiquitination of ITGA6 by promoting the binding of ubiquitin ligase Trim21 to ITGA6. Low levels of ITGA6 inhibit the activity of the PI3K/Akt signaling pathway. Moreover, the Akt agonist SC79 can rescue neurogenic and behavioral deficits caused by Fut8 deficiency. In summary, our study uncovers an essential function of Fut8 and core fucosylation in regulating adult neurogenesis and sheds light on the underlying mechanisms.

关键词： Fut8 adult neural stem/progenitor cells neurogenesis ITGA6 PI3K/Akt

来源：

同方期刊数据库评论

在线全文

同方期刊数据库

学校读者我要写书评

暂无评论

GSTO1、LAMA5和ITGA6在EOC组织中的表达与患者临床病理预后及免疫细胞浸润的关系

GSTO1、LAMA5和ITGA6在EOC组织中的表达与患者临床病理预后及免疫...

引用

作者：侯纪帅石河子大学

学位级别：硕士

目的:探讨上皮性卵巢癌(Epithelial Ovarian Cancer,EOC)患者肿瘤组织中谷胱甘肽S-转移酶1(Glutathione-S-transferaseΩ-1,GSTO1)、层粘连蛋白亚基α5(Lamininα5,LAMA5)、整合素α6(Integrinα6,ITGA6)表达水平与患者临床病理特征、预后和免疫细胞浸润的关系。方法:1、卵巢癌(Ovarian Cancer,OC)高转移细胞和亲本细胞N-糖基化定量分析:课题组将OC高转移性细胞和亲本细胞各三对(由华中科技大学同济医学院附属协和医院王泽华教授团队馈赠)送至华大基因进行蛋白质N-糖基化检测分析(检测序号:F19FTSNWWLJ7959＿J200109064),结果显示,在肿瘤通路中GSTO1、LAMA5、ITGA6存在N-糖基化修饰的显著差异,课题组基于此,对GSTO1、LAMA5、ITGA6三个蛋白进行了深入研究。2、生物信息学方法探究GSTO1、LAMA5、ITGA6在OC中的表达以及与患者临床病理特征、预后和免疫细胞的浸润的关系:(1)c Bioprotal数据库探究GSTO1、LAMA5、ITGA6基因在OC中的基因突变情况。(2)GEPIA2和GEO数据库分析GSTO1、LAMA5、ITGA6在OC组织及对照组中的表达。(3)TCGA数据库分析GSTO1、LAMA5和ITGA6基因表达与患者临床病理特征的相关性。(4)Kaplan-Meier plotter数据库分析GSTO1、LAMA5和ITGA6基因表达与患者预后的关系。(5)STRING数据库分析GSTO1、LAMA5、ITGA6三个蛋白间的相互作用。(6)GSEA功能富集分析GSTO1、LAMA5、ITGA6基因在OC中发挥作用可能的机制。(7)GEPIA2数据库分析GSTO1、LAMA5、ITGA6表达与PD-1、PD-L1、CTLA4的相关性;TIMER数据库和Cibersort算法分析三个基因表达与免疫细胞浸润的关系;Kaplan-Meier plotter数据库分析不同免疫细胞浸润状态下三个基因表达与患者预后的关系。3、选取2010年01月至2022年05月石河子大学医学院第一附属医院收治的110例EOC患者的肿瘤组织为实验组,获得病理蜡块并制作组织芯片,选取30例正常输卵管伞端上皮组织作为对照。4、免疫组织化学(Immunohistochemistry,IHC)染色检测GSTO1、LAMA5、ITGA6在110例EOC组织和30例正常对照中的表达,根据IHC染色结果划分为高表达组和低表达组,≥4分定义为高表达,ITGA6的表达与患者临床病理特征的关系。6、对110例EOC患者进行随访,随访方式为电话询问或门诊/住院病历系统查询,获得患者复发和生存信息,计算患者无进展生存期(Progression free survival,PFS)和总生存期(Overall sur vival,OS),分析GSTO1、LAMA5、ITGA6的表达与患者预后的关系。采用单因素和多因素CO X风险评估模型分析影响患者预后的相关因素。7、将本课题纳入的110例EOC患者的临床病理资料和GSTO1、LAMA5、ITGA6三个基因IH C染色评分结果作为研究指标,通过绘制诺莫图对患者1、3、5年的复发或生存情况进行预测;运用机器学习模型的4种算法建立OC恶性风险预测模型。结果:1、蛋白质N-糖基化定量分析结果:OC高转细胞和亲本细胞在肿瘤通路中存在N-糖基化修饰,其中GSTO1、LAMA5和ITGA6三个蛋白存在N-糖基化修饰的显著差异。2、生物信息学数据库结果:(1)通过检索c Bioprotal数据库发现LAMA5在OC中的基因突变频率为15%,GSTO1、ITG A6分别为1.9%和6%。(2)GEPIA2数据库中LAMA5在OC组织中的表达高于对照组,差异具有统计学意义(PITGA6差异无统计学意义(P均>0.05);GEO数据集分析显示LAMA5与ITGA6在OC中的表达较正常对照组高,差异具有统计学意义(P均ITGA6在OC中表达水平与患者FIGO分期有相关性,LAM A5表达水平与肿瘤分化程度有相关性,(P均<0.05)。(4)检索Kaplan-Meier plotter数据库结果提示,GSTO1、LAMA5基因高表达与患者较短的O S相关(P均<0.05),

关键词： EOC GSTO1 LAMA5 ITGA6 临床病理特征及预后免疫

来源：

同方学位论文库评论

在线全文

同方学位论文库

学校读者我要写书评

暂无评论

Bta-miR-127靶向ITGA6调节牛睾丸支持细胞增殖及凋亡的机制研究

Bta-miR-127靶向ITGA6调节牛睾丸支持细胞增殖及凋亡的机制研究

引用

作者：李梅西北农林科技大学

学位级别：硕士

肉牛业是我国畜牧业的重要组成部分,一直以来高效繁育是肉牛养殖面临的难题,为解决这一难题,很多育种工作者都在着力提升母牛的繁殖率,而公牛繁殖的基础研究内容相对较少。影响公牛繁殖性能的主要因素是精子的数量和质量,而精子发生需... 详细信息

肉牛业是我国畜牧业的重要组成部分,一直以来高效繁育是肉牛养殖面临的难题,为解决这一难题,很多育种工作者都在着力提升母牛的繁殖率,而公牛繁殖的基础研究内容相对较少。影响公牛繁殖性能的主要因素是精子的数量和质量,而精子发生需要睾丸微环境中支持细胞、间质细胞等的协同作用,其中支持细胞(Sertoli cells,SCs)为生殖细胞提供物理支持和分泌激素等其他作用,从而影响精子生成。大量研究表明micro RNA(miRNAs)在细胞的增殖、凋亡和分泌中具有极其重要的作用,但目前关于miRNA对牛未成熟支持细胞的作用及分子机制的研究较少。实验室前期已对安格斯牛3日龄(性成熟前)和13月龄(性成熟后)睾丸样品进行了转录组测序,筛选了大量差异表达的非编码RNA。本研究选取其中差异表达的bta-miR-127作为研究对象,经过差异表达验证后,通过过表达和干扰bta-miR-127的手段,运用RT-qPCR、Western-Blot、Ed U、流式细胞术、CCK-8等试验技术探究bta-miR-127对牛支持细胞增殖和凋亡的影响。运用双荧光素酶报告系统确定了ITGA6为bta-miR-127的靶基因,并用干扰ITGA6基因的手段分析其对支持细胞的影响。通过上述试验分析了bta-miR-127通过ITGA6基因对牛支持细胞增殖和凋亡的影响及机制,为种公牛的分子育种提供更多的理论依据。主要研究结果如下:(1)选取bta-miR-127作为研究对象并用RT-qPCR验证其差异表达情况,结果显示bta-miR-127在牛睾丸中的表达量初生期显著高于成年期(PITGA6、DGKE、LAS1L),构建了包含这三个基因3’UTR区域与bta-miR-127潜在结合位点的野生型(WT)和突变型(MUT)的双荧光素酶报告载体,通过RT-q PCR、双荧光素酶报告试验,确定了ITGA6是bta-miR-127的靶基因。(3)为探究bta-miR-127的靶基因ITGA6对牛支持细胞的增殖及凋亡的影响及其分子机制,通过干扰ITGA6的手段以及上述RT-q PCR、Western-Blot等试验技术,结果证明敲低ITGA6后,牛支持细胞的增殖和分泌因子GDNF、BMP4、CXCL12的表达表现为被抑制状态,其凋亡受到促进作用(PITGA6的靶向关系及其对牛支持细胞增殖及凋亡的影响,将bta-miR-127抑制物和ITGA6的小干扰RNA共转染进牛支持细胞,发现ITGA6基因拮抗bta-miR-127抑制牛支持细胞的增殖和分泌因子GDNF、BMP4、CXCL12的表达、促进细胞凋亡的作用(PITGA6对牛支持细胞的增殖及凋亡的影响,并且进一步验证了bta-miR-127对ITGA6的靶向沉默作用,提示ITGA6可通过相关基因调控支持细胞的增殖及凋亡的作用从而影响精子发生和睾丸发育,可作为种公牛育种的候选分子标记。

关键词：牛支持细胞 Bta-miR-127 ITGA6 增殖凋亡

来源：

同方学位论文库评论

在线全文

同方学位论文库

学校读者我要写书评

暂无评论

miR-9-5P靶向CDH1、CTNNA1和ITGA6对脉络膜黑色素瘤细胞功能的影响

引用

中国医科大学学报 2020年第10期49卷 893-898页

作者：应曼曼张晓楠刘然宁宏中国医科大学附属第一医院眼科沈阳110001

目的探讨miR-9-5P对脉络膜黑色素瘤细胞增殖、凋亡及迁移、侵袭的调控作用,并探寻其发挥作用的靶基因CDH1,CTNNA1和ITGA6。方法体外给予脉络膜黑色素瘤细胞转染阴性对照(NC)和miR-9-5p mimics。采用RTCA实时增殖实验检测细胞的增殖情况;... 详细信息

目的探讨miR-9-5P对脉络膜黑色素瘤细胞增殖、凋亡及迁移、侵袭的调控作用,并探寻其发挥作用的靶基因CDH1,CTNNA1和ITGA6。方法体外给予脉络膜黑色素瘤细胞转染阴性对照(NC)和miR-9-5p mimics。采用RTCA实时增殖实验检测细胞的增殖情况;EDU实验进一步检测细胞的增殖变化;流式细胞技术检测细胞的凋亡变化;Transwell实验观察细胞迁移和侵袭能力的变化情况;Targetscan生物信息学网站分析预测miR-9-5P的靶基因,并通过GO分类和KEGG富集分析找到与迁移和侵袭相关靶基因;Western blotting检测CDH1蛋白表达情况。结果RTCA实时增殖实验结果显示,miR-9-5p能够抑制脉络膜黑色素瘤细胞MUM-2B(t=6.925,P62,PITGA6;Western blotting证明CDH1是miR-9-5p的靶基因。结论miR-9-5p能抑制脉络膜黑色素瘤细胞的增殖、迁移和侵袭,促进脉络膜黑色素瘤细胞的凋亡,并通过调节CDH1,CTNNA1和ITGA6表达发挥调控作用。

关键词：脉络膜黑色素瘤 miR-9-5p CDH1 CTNNA1 ITGA6

来源：

维普期刊数据库

同方期刊数据库评论

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

IDH2和ITGA6在多发性骨髓瘤中的作用及机制研究

IDH2和ITGA6在多发性骨髓瘤中的作用及机制研究

引用

作者：宋莎苏州大学

学位级别：硕士

第一部分 IDH2介导的m6ARNA甲基化在多发性骨髓瘤中的作用目的:探究异柠檬酸脱氢酶Ⅱ(Isocitrate Dehydrogenase 2,IDH2)介导的m6A(N6-Methyladenosine)甲基化修饰在多发性骨髓瘤中的作用及机制。方法:利用GEO(Gene Expression Omnibus)数据库,筛选健康人与多发性骨髓瘤患者差异表达的基因并进行基因富集分析。筛选4套数据共有的差异基因,分析差异基因在浆细胞疾病进展中的变化,生存分析评价该基因在骨髓瘤预后中的价值。体外实验:下调IDH2的表达,检测IDH2对细胞生物学表型的影响;体内实验:建立小鼠骨髓瘤原位模型,检测IDH2对肿瘤生长的影响。下调IDH2的表达,检测细胞整体m6ARNA甲基化、5-mC(5-Methylcytosine)DNA甲基化、组蛋白甲基化、RNA和DNA去甲基化酶活力的变化。分别下调DNA和RNA去甲基化酶,检测对细胞增殖能力的影响。将与FTO(Fat Mass and Obesity Associated Protein)具有相关性的基因进行基因富集分析。干扰FTO的表达,检测WNT7B(Wnt Family Member 7B)的甲基化水平和表达量的变化。运用双荧光素酶报告基因实验验证FTO 与 WNT7B 的结合。分析 m6A 结合蛋白YTHDF2(YTHN6-Methyladenosine RNABinding Protein 2)与 WNT7B 的相关性。下调 YTHDF2 的表达,检测 WNT7B表达量和半衰期的变化。通过双荧光素酶报告基因验证WNT7B与YTHDF2是否结合。检测WNT7B对WNT信号通路的作用。结果:健康人和骨髓瘤患者的差异基因主要富集在三羧酸循环通路中。有3个差异倍数大于1.5的基因在四套数据库中共有。其中,IDH2与浆细胞疾病的进展密切相关。IDH2高表达组骨髓瘤患者预后较差。下调IDH2的表达,细胞增殖降低,细胞周期阻滞于G1期,细胞凋亡也显著增加。在体内实验中,抑制IDH2的表达可降低小鼠骨髓瘤原位模型的成瘤能力,延长小鼠的生存时间。在骨髓瘤细胞(LP-1和MM.1S)中降低IDH2的表达,m6ARNA甲基化水平在两株细胞中都降低,但5-mCDNA甲基化水平在两株细胞中变化不一致,而组蛋白甲基化水平无显著变化。IDH2下调后,RNA去甲基化酶的活力和DNA去甲基化酶的活力都降低。下调DNA去甲基化酶的表达量,两株细胞增殖能力变化不一致。下调FTO的表达,细胞的增殖能力均降低。与FTO具有相关性的基因主要富集在WNT信号通路中,其中WNT7B与FTO呈显著正相关。下调FTO的表达后,WNT7B的m6A RNA甲基化水平增加,而表达量下降。双荧光素酶报告基因实验验证FTO能与WNT7B结合。相关性分析发现YTHDF2与WNT7B的表达量呈负相关。下调YTHDF2的表达,WNT7B的半衰期延长且表达量增加。双荧光素酶报告基因实验证明YTHDF2可与WNT7B结合。WNT7B下调后,WNT信号通路的活性降低。结论:IDH2通过靶向RNA去甲基化酶FTO的活性,调控多发性骨髓瘤的m6A甲基化修饰。下调IDH2导致多发性骨髓瘤的m6ARNA甲基化水平增高,细胞增殖抑制,细胞周期阻滞,细胞凋亡增加。多发性骨髓瘤m6ARNA甲基化失衡增强了WNT7B的表达,进而激活WNT信号通路,促进了多发性骨髓瘤的发生。第二部分 ITGA6-AS1靶向ITGA6调控多发性骨髓瘤侵袭的机制研究目的:本研究目的在于寻找多发性骨髓瘤进展为浆细胞白血病的基因改变及其潜在的分子机制,并揭示长链非编码RNA在其中的调控机制。方法:在GSE2113和GSE39925两套数据中筛选出多发性骨髓瘤和浆细胞白血病患者间差异表达的基因,再进行基因富集分析。应用单因素和多因素分析评价差异基因在骨髓瘤预后中的价值;建立ISS(International Student Services)预后模型和ISS+差异基因的预后模型,比较两组的预后效能。上调α6整合素(Integrin Subunitα6,ITGA6)的表达,检测对细胞的增殖能力和侵袭能力影响。分选出30例骨髓瘤患者的 CD138+细胞,qPCR 检测ITGA6和ITGA6-AS1(ITGA6 Antisense RNA 1)的表达水平。核质分离检测ITGA6-AS1的定位;Northern blot检测ITGA6-AS1在细胞中的表达;生物信息学分析ITGA6-AS1的非编码特性。上调ITGA6-AS1的表达,检测ITGA6 pre-mRNA、ITGA6 mRNA和蛋白水平的变化。利用核酸酶保护实验和RNA稳定性实验探究ITGA6-AS1对ITGA6稳定性的影响。在细胞中上调ITGA6-AS1,检测细胞的侵袭能力。回复实验中,在上调ITGA6-AS1的同时再下调ITGA6,比较细胞的

关键词：多发性骨髓瘤 m6ARNA甲基化 IDH2 ITGA6 细胞侵袭

来源：

同方学位论文库评论

在线全文

同方学位论文库

学校读者我要写书评

暂无评论

miR-92a-3p靶向ITGA6调控C2C12细胞迁移及机理初探

miR-92a-3p靶向Itga6调控C2C12细胞迁移及机理初探

引用

作者：曹灵博华南农业大学

学位级别：硕士

骨骼肌卫星细胞是位于肌纤维膜和基底膜之间具有增殖分化潜力的肌源性干细胞。脊柱动物出生后,骨骼肌卫星细胞对骨骼肌的生长发育以及损伤修复具有重要作用。C2C12细胞是小鼠成肌细胞系,被广泛用于成肌过程的研究。miRNA是短链非编码RNA... 详细信息

骨骼肌卫星细胞是位于肌纤维膜和基底膜之间具有增殖分化潜力的肌源性干细胞。脊柱动物出生后,骨骼肌卫星细胞对骨骼肌的生长发育以及损伤修复具有重要作用。C2C12细胞是小鼠成肌细胞系,被广泛用于成肌过程的研究。miRNA是短链非编码RNA,可通过调控其靶基因发挥重要功能。大量研究表明miR-92a-3p能够调控细胞增殖、迁移和粘附,而miR-92a-3p在成肌细胞中的功能尚未见报道。因此,本研究将对miR-92a-3p在C2C12细胞成肌分化中的作用及机理做初步探究。为明确miR-92a-3p在成肌过程中的功能,本研究通过过表达和干扰miR-92a-3p,研究其对C2C12细胞增殖、分化、迁移、粘附和扩散的作用,使用生物信息学方法预测其靶基因,验证靶向关系后,构建靶基因过表达载体,在C2C12细胞中过表达靶基因,研究靶基因功能并在C2C12细胞中完成功能回复验证。主要研究结果如下:1、miR-92a-3p对C2C12细胞增殖的影响过表达miR-92a-3p后24 h和48 h,通过Ed U和流式细胞技术检测C2C12细胞增殖。结果显示,miR-92a-3p不影响C2C12细胞增殖。2、miR-92a-3p对C2C12细胞分化的影响过表达miR-92a-3p后待C2C12细胞长至汇合,诱导分化,分别于诱导分化3 d、5 d、7 d、9 d进行Myosin免疫荧光,q RT-PCR检测Myogenin和Myosin的相对mRNA水平。结果显示,miR-92a-3p不影响C2C12细胞分化。3、miR-92a-3p对C2C12细胞迁移及相关基因的影响分别过表达和干扰miR-92a-3p后24 h,通过划痕试验和活细胞工作站检测C2C12细胞迁移,粘附试验和扩散试验检测C2C12粘附和扩散,q RT-PCR和Western blot检测相关基因mRNA和蛋白水平。结果显示,miR-92a-3p抑制C2C12细胞迁移、粘附和扩散,抑制Rac1和Cdc42的相对mRNA水平和RAC1的蛋白水平,抑制FAK和Paxillin的磷酸化水平。4、miR-92a-3p靶基因预测和验证使用生物信息学方法预测靶基因,通过双荧光素酶报告系统、q RT-PCR和Western blot验证靶向关系。结果显示miR-92a-3p能够直接靶向ITGA6。5、ITGA6对C2C12细胞迁移、粘附、扩散及相关基因的影响成功构建了ITGA6过表达载体pcDNA3.1-ITGA6,在C2C12细胞上成功过表达ITGA6,划痕试验、活细胞工作站、粘附试验和扩散试验结果显示,ITGA6促进C2C12细胞迁移、粘附和扩散。qRT-PCR和Western结果显示,ITGA6促进Rac1、Cdc42的相对mRNA水平和RAC1的蛋白水平,促进FAK和Paxillin的磷酸化水平。6、miR-92a-3p通过靶向ITGA6调控C2C12细胞迁移、粘附和扩散及相关基因与共转NC mimics和pcDNA3.1相比,共转miR-92a-3p和pcDNA3.1-EV抑制C2C12细胞迁移、粘附、扩散以及Rac1和Cdc42的相对mRNA水平、RAC1的蛋白水平、FAK和Paxillin的磷酸化水平,而共转miR-92a-3p和pcDNA3.1-ITGA6则会将上述结果逆转,逆转程度不会超过共转NC mimics和pcDNA3.1-ITGA6所获得的效果,证明miR-92a-3p通过靶向ITGA6抑制C2C12细胞的粘附和扩散,抑制Rac1、Cdc42的相对mRNA水平和RAC1蛋白水平,抑制FAK和Paxillin的磷酸化水平从而抑制C2C12细胞迁移。

关键词： miR-92a-3p ITGA6 C2C12细胞迁移粘附扩散

来源：

同方学位论文库评论

在线全文

同方学位论文库

学校读者我要写书评

暂无评论

miRNA-143-3p下调ITGA6和ASAP3的表达抑制结直肠癌侵袭和转移的机制研究

miRNA-143-3p下调ITGA6和ASAP3的表达抑制结直肠癌侵袭和转移的机...

引用

作者：祝敏圣苏州大学

学位级别：硕士

[目的]旨在阐明CRC(colorectal cancer)细胞借助miRNA及相关靶基因途径影响结直肠癌侵袭和转移进程的分子机制,为CRC肝转移的临床诊断、治疗和预后评估提供新的生物学标志物和分子治疗靶点。[方法]第一部分:1、microRNA芯片检测肝转移CR... 详细信息

[目的]旨在阐明CRC(colorectal cancer)细胞借助miRNA及相关靶基因途径影响结直肠癌侵袭和转移进程的分子机制,为CRC肝转移的临床诊断、治疗和预后评估提供新的生物学标志物和分子治疗靶点。[方法]第一部分:1、microRNA芯片检测肝转移CRC相关表达缺失的miRNA。2、实时荧光定量PCR检测miR-143-3p在肝转移及原位CRC组织中的表达以进一步验证芯片结果。3、MTT实验检测过表达miR-143-3p的结直肠癌Lovo细胞增殖能力的变化。4、Transwell实验检测过表达miR-143-3p的Lovo细胞侵袭和迁移能力的改变。第二部分:1、运用生物信息学技术和网络资源预测miR-143-3p的候选靶基因,并通过Western Blot法检测转染miR-143-3p模拟物的Lovo细胞中各候选靶基因蛋白水平的表达。2、Real-timePCR检测转染不同浓度梯度的miR-143-3p模拟物后Lovo细胞中候选靶基因ITGA6和ASAP3的表达情况。3、运用RNA干扰技术使靶基因在Lovo细胞中呈现低表达状态,并通过Real-time PCR、Western Blot法分别检测siRNA对Lovo细胞中靶基因(ITGA6和ASAP3)mRNA和蛋白表达水平的抑制效率。4、应用Transwell和划痕实验检测分别低表达ITGA6、ASAP3对Lovo细胞侵袭和迁移能力的影响。5、应用MTT实验检测分别低表达ITGA6、ASAP3对Lovo细胞增殖能力的影响。第三部分:1、运用组织芯片+免疫组化技术检测ITGA6和ASAP3在CRC组织和正常结直肠组织中的表达差异。2、分别分析两个指标的表达强度与患者的临床病理特征的相关性。[结果]第一部分:1、miRNA表达谱结果显示,与正常结直肠相比,miR-143-3p在肝转移CRC中的表达显著下降(59倍),而在原位CRC中的表达无明显差异。2、Real-time PCR结果显示miR-143-3p在原位CRC组织中下降5倍以上的比例为25%(3/12),而在肝转移CRC组织中下降5倍以上的比例为50%(4/8)。3、过表达miR-143-3p对Lovo细胞的增殖能力无影响。4、过表达miR-143-3p能够抑制Lovo细胞的侵袭和迁移能力。第二部分:1、生物信息学技术和网络资源预测出4个miR-143-3p的候选靶基因:ASAP3、MSI2、CRELD 和 ITGA6;在 Lovo 细胞中只有 ITGA6 和 ASAP3 的蛋白表达水平与过表达的miR-143-3p呈负相关。2、ITGA6和ASAP3 mRNA表达水平均随着Lovo细胞中miR-143-3p mimic转染浓度的升高而逐渐下降。3、ITGA6和ASAP3的siRNA能显著抑制Lovo细胞中ITGA6和ASAP3的表达。4、降低ITGA6和ASAP3的表达能够抑制Lovo细胞的侵袭和迁移能力。5、降低ITGA6和ASAP3的表达对Lovo细胞的增殖能力无影响。第三部分:1、ITGA6在CRC组织中总阳性率为36.00%;而在正常结直肠组织中总阳性率为20.00%;2、ASAP3在CRC组织中总阳性率为39.50%;而在正常结直肠组织总阳性率为16.00%,ITGA6和ASAP3在肿瘤与正常组织之间的表达差异均具有统计学意义。3、高表达的ITGA6与患者的TNM分期密切相关(PITGA6和ASAP3表达水平明显升高,使CRC细胞获得较强的侵袭和转移能力,从而促进CRC恶性演进。3、ITGA6和ASAP3在CRC组织中的表达高于正常组织,其表达强度与重要的临床病理特征有明显的相关性。

关键词：结直肠癌微小RNA ITGA6 ASAP3 侵袭转移

来源：

同方学位论文库评论

在线全文

同方学位论文库

学校读者我要写书评

暂无评论

ITGA6、CTHRC1在食管鳞癌中的表达及临床意义

引用

南京医科大学学报（自然科学版） 2009年第4期29卷 508-511页

作者：刘伟施瑞华朱宏郝波南京医科大学第一附属医院消化内科江苏南京210029

目的:研究食管鳞癌中ITGA6(integrin α6)、CTHRC1(collagen triple helix repeat containing1)基因的表达,并探讨其与食管鳞癌临床病理参数之间的关系。方法:应用免疫组化S-P法分析46例人食管鳞癌组织及10例食管正常组织中ITGA6、CTHRC... 详细信息

目的:研究食管鳞癌中ITGA6(integrin α6)、CTHRC1(collagen triple helix repeat containing1)基因的表达,并探讨其与食管鳞癌临床病理参数之间的关系。方法:应用免疫组化S-P法分析46例人食管鳞癌组织及10例食管正常组织中ITGA6、CTHRC1蛋白的表达情况。结果:①ITGA6、CTHRC1在食管鳞癌组织中有增强表达,表达率分别为71.7%(33/46)和56.5%(26/46),而在10例正常食管组织中均未见表达。②ITGA6、CTHRC1在淋巴结转移组中的阳性表达率显著高于无淋巴结转移组(PITGA6、CTHRC1表达与年龄、性别、肿瘤大小及病理类型无明显相关性(P>0.05)。结论:ITGA6、CTHRC1可能与食管鳞癌侵袭、转移相关,有望成为食管鳞癌新的治疗靶点。

关键词：食管鳞癌免疫组织化学 ITGA6 CTHRC1

来源：

维普期刊数据库

同方期刊数据库评论

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

北京地区汉族人群ITGA6基因多态性与前列腺癌的易感性研究

引用

中国老年保健医学 2011年第2期9卷 5-8页

作者：黄金魏东史晓红张耀光刘铭王鑫周昌虎杨一歌陈鑫杨泽王建业卫生部北京老年医学研究所 100730 卫生部北京医院泌尿外科 100730

目的探讨北京地区汉族人群中ITGA6基因多态性与前列腺癌遗传易感性的关系。方法采用病例对照研究,提取121例前列腺患者(病例组)和136例非前列腺癌健康人(对照组)外周血中基因组DNA,采用聚合酶链反应-高分辨熔解曲线(PCR-HRM)技术结合测... 详细信息

目的探讨北京地区汉族人群中ITGA6基因多态性与前列腺癌遗传易感性的关系。方法采用病例对照研究,提取121例前列腺患者(病例组)和136例非前列腺癌健康人(对照组)外周血中基因组DNA,采用聚合酶链反应-高分辨熔解曲线(PCR-HRM)技术结合测序验证法检测其ITGA6基因rs12621278单核苷酸多态性的分布情况,分析ITGA6基因多态性与前列腺癌的相关性。结果①前列腺癌组中AA,AG,GG基因型分别为69例(57%),40例(33.1%),12例(9.9%);正常对照组中AA,AG,GG基因型分别为69例(50.7%),55例(40.4%),12例(8.8%)。②ITGA6基因rs12621278单核苷酸多态性的三种基因型频率在前列腺癌组和正常对照组间的分布无显著差异(χ2=1.498,P=0.473),两种等位基因频率在两组间的分布也无显著差异(χ2=0.43,P=0.512)。结论 ITGA6基因rs12621278单核苷酸多态性与北京地区汉族人群前列腺癌的发生无明显相关性,可能与中国人前列腺癌发病风险无关。

关键词：前列腺癌 ITGA6 基因单核苷酸多态性

来源：

维普期刊数据库

同方期刊数据库评论

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

鸦胆子苦醇对非小细胞肺癌细胞生物学功能的影响及机制研究

鸦胆子苦醇对非小细胞肺癌细胞生物学功能的影响及机制研究

引用

作者：何爽重庆医科大学

学位级别：硕士

肺癌作为世界上发病率和死亡率均居高位的癌症,其85%的发病类型为非小细胞肺癌(Non-small cell lung cancer,NSCLC)。尽管近年来已经开发出许多NSCLC的治疗策略,如手术治疗、放化疗、光动力疗法、分子靶向治疗等。然而,由于早期诊断率低... 详细信息

肺癌作为世界上发病率和死亡率均居高位的癌症,其85%的发病类型为非小细胞肺癌(Non-small cell lung cancer,NSCLC)。尽管近年来已经开发出许多NSCLC的治疗策略,如手术治疗、放化疗、光动力疗法、分子靶向治疗等。然而,由于早期诊断率低,大部分患者在临床确诊时肿瘤已经发生转移,同时由于放化疗的副作用严重,分子靶向药物易产生耐药,导致NSCLC的整体治疗效果仍不尽如人意,患者五年生存率仅为15%,因此迫切需要研究新的治疗药物和开发新的治疗策略。近年来,许多研究发现中草药及其提取物具有优秀的抗肿瘤潜力,中草药及其活性成分已经成为抗肿瘤研究的热点。鸦胆子苦醇(Brusatol)是一种从传统中药鸦胆子中提取出的活性单体成分,研究已经证实其具有优秀的抗肿瘤能力,包括抑制肿瘤细胞的增殖、减弱肿瘤细胞的迁移侵袭、诱导肿瘤细胞的凋亡、增强肿瘤细胞对化疗药物和放疗射线的敏感性。虽然已有研究发现鸦胆子苦醇对部分NSCLC细胞株有抑制作用,但其具体作用和机制尚未深入研究。整合素(integrin,ITG)是一类广泛存在于几乎所有细胞表面的跨膜黏附受体,调控着许多细胞的生物学行为,包括细胞黏附、增殖、生长、凋亡等。整合素α6(ITGA6)作为整合素家族的一员,已经有研究证实ITGA6在肺癌中发挥着重要的调控作用,是NSCLC的潜在治疗靶标。目的:在本研究中,选取人NSCLC细胞系H1299细胞和A549细胞为研究对象,研究鸦胆子苦醇在体外对NSCLC细胞的增殖、迁移侵袭和凋亡的影响,并进一步探寻其分子机制。同时构建A549细胞裸鼠皮下移植瘤模型来探寻鸦胆子苦醇在体内对NSCLC细胞的影响及其机制。方法:体外培养A549和H1299细胞,CCK-8法检测鸦胆子苦醇对NSCLC细胞活力的影响并确认其不同作用时间的IC,选取最佳作用时间和药物浓度;EdU染色和克隆形成实验检测鸦胆子苦醇对NSCLC细胞体外增殖和克隆形成的影响;划痕实验和Transwell实验探究鸦胆子苦醇对NSCLC细胞迁移和侵袭的影响;流式细胞术测定鸦胆子苦醇对NSCLC细胞周期和凋亡的影响;JC-1线粒体膜电位荧光染色观察鸦胆子苦醇对两种细胞系线粒体的影响;免疫荧光染色观察AIF蛋白质在细胞内的定位情况;构建A549裸鼠移植瘤模型并分为两组,对照组:腹腔注射生理盐水(0.2 m L.2d×28d);鸦胆子苦醇处理组:腹腔注射鸦胆子苦醇(2 mg.kg.2d×28d),研究鸦胆子苦醇在体内对NSCLC细胞的影响;HE染色观察各组模型裸鼠肝、肾以及瘤体的形态学变化;免疫组化染色观察瘤体细胞中Ki67表达水平变化;TUNEL染色观察鸦胆子苦醇对两种细胞系以及裸鼠移植瘤瘤体细胞的胞核DNA的影响;RT-q-PCR检测ITGA6 m RNA在两种NSCLC细胞系与正常肺上皮细胞BEAS-2B细胞中的表达差异以及在经过鸦胆子苦醇处理后ITGA6m RNA在两种NSCLC细胞中的表达水平变化;Western Blot法检测细胞中凋亡、迁移侵袭相关蛋白,ITGA6蛋白,PI3K/AKT通路蛋白以及胞质、胞核中的AIF蛋白的表达水平;免疫共沉淀实验(CO-IP)检测A549、H1299细胞中ITGA6蛋白质与PI3K/AKT通路的相互作用。结果1.CCK-8结果发现:不同浓度鸦胆子苦醇(0、31.25、62.5、125、250、500、1000 nmol/L)分别处理A549和H1299细胞12 h、24 h、48 h后,两种细胞活力明显降低,且呈时间和药物浓度依赖,其在24 h的半数抑制浓度(IC)分别为0.31μM和0.67μM;2.EdU染色和克隆形成实验表明:鸦胆子苦醇以药物浓度依赖抑制两种NSCLC细胞的增殖和克隆形成;3.划痕和Transwell实验表明:鸦胆子苦醇处理可减弱两种NSCLC细胞的迁移和侵袭能力;4.流式细胞术结果表明:鸦胆子苦醇诱导A549和H1299细胞G0/G1期阻滞和凋亡;5.JC-1荧光染色发现:鸦胆子苦醇处理降低了两种NSCLC细胞的线粒体膜电位;6.TUNEL染色发现:鸦胆子苦醇处理诱导两种NSCLC细胞DNA断裂并发生凋亡;7.免疫荧光定位AIF蛋白质发现:鸦胆子苦醇处理两种细胞后,AIF蛋白质水平在胞质内降低,而在胞核内升高;8.RT-q-PCR与Western Blot结果显示:A549与H1299细胞中ITGA6的m RNA和蛋白质水平明显高于BEAS-2B细胞;9.Western Blot实验结果表明:鸦胆子苦醇处理两种NSCLC细胞后,Bcl-2、Caspase-3、Caspase-9、MMP2、MMP9、N-cadherin、ITGA6、p-PI3K、p-Akt及胞质中AIF蛋白质水平降低,Bax、Cleved-Caspase-3、Cleved-Caspase-9、E-cadherin及胞核中AIF蛋白质水平升高;10

关键词：鸦胆子苦醇 NSCLC 细胞生物学行为 ITGA6 PI3K/Akt通路

来源：

同方学位论文库评论

在线全文

同方学位论文库

学校读者我要写书评

暂无评论

欢迎您,

建议与咨询留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

时间限定

文献类型

馆藏选择

核心期刊

语言

文献类型

帮助

文字说明：

检索规则说明：

检索范例：

分类表

所选分类

限定检索结果

文献类型

馆藏范围

日期分布

学科分类号

主题

机构

作者

语言

在线全文

在线全文

在线全文

在线全文

在线全文

在线全文

在线全文

在线全文

在线全文

在线全文

请选择保存的检索档案：

请选择收藏分类：

通借通还

欢迎您,

建议与咨询 留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

时间限定

文献类型

馆藏选择

核心期刊

语言

文献类型

帮助

文字说明：

检索规则说明：

检索范例：

分类表

所选分类

限定检索结果

文献类型

馆藏范围

日期分布

学科分类号

主题

机构

作者

语言

在线全文

在线全文

在线全文

在线全文

在线全文

在线全文

在线全文

在线全文

在线全文

在线全文

请选择保存的检索档案： 新增检索档案 确定 取消

请选择收藏分类： 新增自定义分类 确定 取消

通借通还

建议与咨询留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

请选择保存的检索档案：

请选择收藏分类：