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番石榴酸对ins-1胰岛β细胞增殖、胰岛素合成与分泌的促进作用及其机制分析

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中国药理学通报 2014年第12期30卷 1681-1687页

作者：叶开和王婧茹马锦锦王小康张晓琦叶文才叶春玲暨南大学药学院药理学教研室广东广州510632 瑞典卡罗林斯卡医学院瑞典斯德哥尔摩17177 暨南大学中药与天然药物研究所广东广州510632

目的考察番石榴酸（guavenoic acid，GA）对 ins-1胰岛β细胞增殖、细胞内胰岛素含量及分泌功能的影响，并探讨其可能的作用机制。方法培养 ins-1胰岛β细胞，给予GA（0.3、1、3、10、30 n·L^－1），并设空白对照组、溶媒对照组（0.1％... 详细信息

目的考察番石榴酸（guavenoic acid，GA）对 ins-1胰岛β细胞增殖、细胞内胰岛素含量及分泌功能的影响，并探讨其可能的作用机制。方法培养 ins-1胰岛β细胞，给予GA（0.3、1、3、10、30 n·L^－1），并设空白对照组、溶媒对照组（0.1％ DMSO）、分泌模型组及阳性药组（150 nmol·L^－1格列苯脲含1‰DMSO），药物作用48 h。应用 MTT 法检测药物对 ins-1的影响。使用酸醇提取液提取细胞中胰岛素，用放射免疫法检测药物对 I 细胞增殖 NS-1细胞内胰岛素含量的影响。分别用5.6、16.7 mmol·L^－1葡萄糖干预细胞1 h建立基础胰岛素分泌模型（BIS）、高糖刺激胰岛素分泌模型（GSIS），用放射免疫法测定药物对 ins-1细胞胰岛素分泌的影响，结果以总蛋白量校正。荧光定量 PCR 法检测药物对ins-1细胞内胰岛素基因、PDX-1、MafA mRNA 表达的影响。结果与溶媒对照组比较，GA 能明显地促进 ins-1胰岛细胞的增殖（P ＜0.01）并能明显增加 ins-1细胞内胰岛素含量（P ＜0.01），0.3～30 nmol·L －1 GA 对 BIS 及 GSIS 均有明显促进作用（P ＜0.05或 P ＜0.01），0.3～30 nmol·L^－1 GA 明显地上调 insulin mRNA 的相对表达（P ＜0.01）。3、30 nmol·L^－1 GA 明显地上调 PDX-1 mRNA 的相对表达（P ＜0.01）。3、30 nmol·L^－1 GA 能明显地上调 MafA mRNA 的相对表达（P ＜0.01）。结论GA 能促进 ins-1胰岛β细胞增殖；增加细胞内胰岛素含量与分泌量，可能与其上调 insulin、PDX-1、MafA 基因表达有关。

关键词：番石榴酸 ins-1胰岛β细胞增殖胰岛素合成胰岛素分泌基因表达

二至丸对H2O2诱导的ins-1胰岛β细胞氧化应激损伤的影响

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中药新药与临床药理 2020年第9期31卷 1008-1014页

作者：钟询龙徐玮梁文意钟艳梅广州医科大学附属第二医院药学部广东广州510260 广东药科大学新药研发中心广东广州510006

目的探讨二至丸对H2O2诱导的ins-1胰岛β细胞氧化应激损伤的影响。方法采用H2O2(终浓度500μmol·L^-1)诱导ins-1细胞建立氧化损伤模型,并以不同浓度二至丸(10、50、250μg·mL^-1)进行干预。采用CCK-8法检测细胞活力;ELISA法测定细胞... 详细信息

目的探讨二至丸对H2O2诱导的ins-1胰岛β细胞氧化应激损伤的影响。方法采用H2O2(终浓度500μmol·L^-1)诱导ins-1细胞建立氧化损伤模型,并以不同浓度二至丸(10、50、250μg·mL^-1)进行干预。采用CCK-8法检测细胞活力;ELISA法测定细胞胰岛素分泌量;DCFH-DA荧光探针法检测细胞内活性氧(ROS)水平;比色法检测细胞上清液中超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)及丙二醛(MDA)含量;Western Blot法测定细胞内过氧化氢酶(CAT)蛋白表达。结果二至丸在浓度为0.5~500μg·mL^-1时对ins-1细胞增殖活力无明显抑制作用。与空白对照组比较,模型组细胞在基础葡萄糖(BIS)/高糖(GSIS)状态下的胰岛素分泌量、SOD、GSH-Px含量及CAT蛋白表达水平显著降低(Pins-1细胞BIS/GSIS状态下的胰岛素分泌量(Pins-1细胞内的ROS水平(Pins-1胰岛β细胞氧化应激损伤及保护其细胞功能,其作用机制可能与抑制细胞内ROS生成、提高抗氧化酶活性及其蛋白表达水平有关。

关键词：二至丸 ins-1胰岛β细胞氧化应激损伤胰岛素分泌活性氧抗氧化酶

重组胰生定多肽对H2O2诱导的ins-1胰岛β细胞凋亡的抑制作用

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第三军医大学学报 2011年第11期33卷 1141-1143页

作者：董瓅瑾金鑫高欣李文潮袁强邓靖宋光明武警医学院学报编辑部天津300162 武警医学院药理学教研室天津300162 武警医学院预防医学系天津300162

目的观察重组胰生定多肽(EXf)对H2O2诱导的ins-1胰岛β细胞凋亡的影响。方法将ins-1细胞分成5组:空白对照组、阴性对照组、阳性对照组(EX-4)、给药组(EXf,终浓度分别为10、100 nmol/L),每组至少6孔。除空白对照组外,均给予终浓度为100μ... 详细信息

目的观察重组胰生定多肽(EXf)对H2O2诱导的ins-1胰岛β细胞凋亡的影响。方法将ins-1细胞分成5组:空白对照组、阴性对照组、阳性对照组(EX-4)、给药组(EXf,终浓度分别为10、100 nmol/L),每组至少6孔。除空白对照组外,均给予终浓度为100μmol/L H2O2诱导ins-1胰岛β细胞凋亡模型。通过MTT检测法、Hoechest 33342染色法、DNA ladder检测法,观察EXf对H2O2诱导ins-1胰岛β细胞细胞存活率、形态学变化和凋亡的影响。结果 MTT实验结果显示与模型对照组相比,EXf能使H2O2处理的ins-1胰岛β细胞存活率明显增加(P细胞凋亡数量明显减少,正常细胞数量明显增加。EXf能明显抑制DNA ladder的出现,且呈一定量效关系。结论 EXf对H2O2诱导的ins-1胰岛β细胞的凋亡具有明显的保护作用。

关键词： ins-1胰岛β细胞肠促胰岛素类似物凋亡 H2O2

知母总皂苷对ins-1胰岛β细胞功能的影响

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中华中医药杂志 2018年第6期33卷 2631-2633页

作者：钟艳梅陈坚平钟静君陈永浩冯毅凡广东药科大学广州510006 中山大学附属第一医院广州510080

目的:通过知母总皂苷药物干预ins-1胰岛β细胞评价知母总皂苷的对胰岛细胞功能的影响。方法:采用MTT法考察知母总皂苷对ins-1细胞增殖的影响,知母总皂苷不同剂量药物组干预不同状态ins-1细胞,ELISA试剂盒测定药物干预后胰岛素分泌量,SOD... 详细信息

目的:通过知母总皂苷药物干预ins-1胰岛β细胞评价知母总皂苷的对胰岛细胞功能的影响。方法:采用MTT法考察知母总皂苷对ins-1细胞增殖的影响,知母总皂苷不同剂量药物组干预不同状态ins-1细胞,ELISA试剂盒测定药物干预后胰岛素分泌量,SOD、GSH和MDA含量。结果:知母总皂苷在浓度为0.3~80μg/m L时,对ins-1细胞有明显的促进增殖作用,并增强氧化损伤ins-1细胞胰岛素释放(P细胞中SOD、GSH的含量(Pins-1细胞,减少其氧化损伤,促进其胰岛素释放。

关键词：知母总皂苷 ins-1胰岛β细胞氧化损伤

番石榴酸改善ins-1胰岛β细胞胰岛素抵抗

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中成药 2015年第4期37卷 710-715页

作者：魏崧丞王婧茹叶开和王小康马锦锦张晓琦叶文才叶春玲暨南大学药学院药理学教研室广东广州510632 瑞典卡罗林斯卡医学院瑞典斯德哥尔摩17177 暨南大学中药与天然药物研究所广东广州510632

目的考察番石榴酸对ins-1胰岛β细胞胰岛素抵抗的作用,并探讨其可能的作用机制。方法 40 mmol/L葡萄糖干预ins-1胰岛β细胞48 h建立胰岛素抵抗模型,设番石榴酸干预组(0.3、1、3、10、30 nmol/L),以及空白对照组、二甲亚砜对照组,胰岛素... 详细信息

目的考察番石榴酸对ins-1胰岛β细胞胰岛素抵抗的作用,并探讨其可能的作用机制。方法 40 mmol/L葡萄糖干预ins-1胰岛β细胞48 h建立胰岛素抵抗模型,设番石榴酸干预组(0.3、1、3、10、30 nmol/L),以及空白对照组、二甲亚砜对照组,胰岛素抵抗模型组,正钒酸钠组(1 mmol/L)和罗格列酮组(1 mmol/L),药物作用48 h。分别以5.6、16.7 mmol/L葡萄糖干预细胞1 h作为基础胰岛素分泌(BIS)、高糖刺激胰岛素分泌(GSIS)条件,用放射免疫法检测药物对胰岛素分泌的影响,结果以该细胞总蛋白量校正。荧光定量PCR法检测药物对胰岛素抵抗ins-1细胞内PTP1B、PPARγmRNA表达的作用。结果与胰岛素抵抗模型组比较,0.3 nmol/L番石榴酸便能促进胰岛素抵抗ins-1细胞的GSIS(P胰岛素分泌(P胰岛素抵抗ins-1细胞的PTP1B mRNA相对表达(Pins-1细胞胰岛素抵抗,可能通过下调PTP1B和上调PPARγ基因表达有关。番石榴酸可能通过改善胰岛β细胞自身胰岛素抵抗而发挥抗糖尿病作用。

关键词：番石榴酸 ins-1胰岛β细胞胰岛素抵抗 PTP1B PPARγ

番石榴叶三萜化合物对ins-1胰岛β细胞增殖、胰岛素分泌和氧化损伤的影响及其作用机制

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番石榴叶三萜化合物对INS-1胰岛β细胞增殖、胰岛素分泌和氧化损...

作者：王婧茹暨南大学

学位级别：硕士

目的：观察番石榴叶三萜化合物（TPGLs）对ins-1胰岛β细胞增殖、胰岛素合成与分泌功能的影响;考察其改善胰岛β细胞胰岛素抵抗、抗氧化损伤作用，并探讨其可能的作用机制。方法：培养ins-1胰岛β细胞，给予TPGLs（TPGL-1、TPGL-3、TPG... 详细信息

目的：观察番石榴叶三萜化合物（TPGLs）对ins-1胰岛β细胞增殖、胰岛素合成与分泌功能的影响;考察其改善胰岛β细胞胰岛素抵抗、抗氧化损伤作用，并探讨其可能的作用机制。方法：培养ins-1胰岛β细胞，给予TPGLs（TPGL-1、TPGL-3、TPGL-5、TPGL-7）0.3、1、3、10、30nmol/L及番石榴叶总三萜（TTPGL）0.3、1、3、10、30ng/ml，并设空白对照组、溶媒对照组及阳性药组，药物作用时间均为48h。应用MTT法检测药物对ins-1细胞增殖的影响。5.6、16.7mmol/L葡萄糖干预细胞1h建立胰岛素分泌模型，用放射免疫法测定药物对ins-1细胞胰岛素分泌的影响;使用酸醇提取液提取细胞中胰岛素，用放射免疫法检测药物对ins-1细胞胰岛素合成量的影响。40mmol/L葡萄糖干预细胞48h建立胰岛β细胞胰岛素抵抗模型，用放射免疫法检测药物对胰岛素抵抗细胞胰岛素分泌的影响。650μmol/LH2O2干预细胞2h建立氧化损伤模型，用MTT法检测药物对ins-1β细胞氧化损伤的保护作用，用核染色法观察细胞核变化，用ROS-流式细胞术检测药物对细胞活性氧生成的作用。荧光定量PCR法检测药物对正常ins-1细胞内胰岛素基因、PDX-1、MafA，胰岛素抵抗ins-1细胞内PTP1B、PPARγ mRNA表达的作用。结果： 1.对ins-1β细胞增殖的影响与溶媒对照组比较，较低剂量的TPGLs（0.3、1、3nmol/L）和TTPGL（0.3、1、3ng/ml）能显著促进ins-1胰岛细胞的增殖（P细胞增殖作用并不明显，且TTPGL（30ng/ml）甚至表现为抑制作用（Pins-1β细胞胰岛素合成、分泌功能的影响 (1)胰岛素合成量：与溶媒对照组比较，TPGL-1、TPGL-3、TPGL-7、TTPGL能显著促进ins-1细胞合成胰岛素（P胰岛素分泌量： A.对正常ins-1细胞：与葡萄糖刺激胰岛素分泌模型组比较，TPGL-5、TPGL-7、TTPGL对BIS、GSIS均有显著促进作用（P胰岛素抵抗ins-1细胞：与胰岛素抵抗模型组比较，TPGL-1、TPGL-3、TPGL-7、TTPGL在低浓度下均能促进BIS、GSIS（Pins-1细胞GSIS（Pins-1细胞氧化损伤的影响与模型组比较，低浓度的TPGLs（0.3、1nmol/L）和TTPGL（0.3、1ng/ml）均能显著保护ins-1β细胞活力（Pins-1细胞胰岛素相关基因、PTP1B、PPARγ基因表达的影响 (1)正常ins-1细胞：与溶媒对照组比较，对insulin mRNA相对表达，TPGL-7、TTPGL能极显著上调其表达（P0.05）。 (2)胰岛素抵抗ins-1细胞：与模型组比较，对PTP1B mRNA相对表达，TPGL-1、TPGL-3、TPGL-7、TTPGL能下调该基因表达（P0.05）。对PPARγ mRNA表达，5种药物均能上调该基因表达（Pins-1β细胞增殖;促进ins-1细胞合成胰岛素，其作用机制可能与其增加MafA基因表达量有关;能改善ins-1细胞胰岛素抵抗，可能与其下调PTP1B、上调PPARγ基因表达有关。能对抗ins-1细胞氧化损伤，

关键词：番石榴叶三萜化合物 ins-1胰岛β细胞胰岛素分泌胰岛素抵抗氧化损伤

3'-甲氧基葛根素对H2O2氧化损伤ins-1胰岛β细胞的保护作用及其作用机制

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3'-甲氧基葛根素对H2O2氧化损伤INS-1胰岛β细胞的保护作用及其作...

作者：林娟娜暨南大学

学位级别：硕士

目的：观察3′-甲氧基葛根素对ins-1胰岛β细胞增殖的影响以及对氧化损伤ins-1胰岛β细胞的保护作用，并探讨其作用机制。方法：培养ins-1胰岛β细胞，设置空白对照组、溶媒对照组、阳性药对照组和药物处理组（0.1、0.3、1、3、10μmol/... 详细信息

目的：观察3′-甲氧基葛根素对ins-1胰岛β细胞增殖的影响以及对氧化损伤ins-1胰岛β细胞的保护作用，并探讨其作用机制。方法：培养ins-1胰岛β细胞，设置空白对照组、溶媒对照组、阳性药对照组和药物处理组（0.1、0.3、1、3、10μmol/L），给予药物作用48h，采用MTT法检测药物对ins-1细胞增殖的影响;5.6、16.7mmol/L葡萄糖干预细胞1h建立胰岛素分泌模型，采用RIA法测定药物对ins-1细胞胰岛素分泌的影响;采用H2O2建立氧化损伤模型，采用MTT法检测药物对氧化损伤ins-1细胞活力的影响。此外，采用Hochest33258法、DCFH-DA荧光探针、AnnexinⅤ/PI双染法分别检测3′-甲氧基葛根素对氧化损伤ins-1细胞的细胞形态、ROS和凋亡水平的影响;Q-PCR分析氧化损伤ins-1细胞Bcl-2、Bax的表达。结果：1、对ins-1胰岛β细胞增殖的影响与溶媒对照组相比，3'-甲氧基葛根素在浓度0.3～10μmol/L时明显促进细胞增殖(P1μmol/L时其增殖率达到18.08%。2、对H2O2氧化损伤ins-1胰岛β细胞的保护作用与模型对照组比较，3'-甲氧基葛根素在浓度0.3～3μmol/L时能明显提高细胞活力(P1或P1～1μmol/L范围内，随药物浓度的增加，正常细胞比例增多，也能显著地降低细胞内ROS水平(P1或P1μmol/L时能显著降低细胞凋亡(P1或Pins-1细胞分泌功能的影响与模型对照组比较，在浓度0.1～1μmol/L时则对BIS、GSIS均有明显促进作用(P1或Pins-1细胞凋亡相关因子Bcl-2、Bax mRNA表达的影响与模型对照组比较，在浓度0.1～1μmol/L时上调Bcl-2的mRNA相对表达，在浓度1μmol/L时下调Bax mRNA(P1)。结论：1、3′-甲氧基葛根素能显著促进细胞增殖，提高抗氧化损伤β细胞活力，降低β细胞凋亡、抑制β细胞内ROS的生成，增加胰岛素分泌，具有保护胰岛β细胞的作用。2、3′-甲氧基葛根素抗凋亡作用机制可能与上调Bcl-2、下调Bax mRNA表达有关。

关键词： 3′-甲氧基葛根素 ins-1胰岛β细胞氧化损伤胰岛素分泌

知母醇提物对ins-1胰岛β细胞功能的影响

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广东药学院学报 2016年第6期32卷 762-766页

作者：张国改曾平燕肖雪蓉冯毅凡吴霞广东药科大学中心实验室广东广州510006 广州市香雪制药股份有限公司广东广州510530

目的研究知母醇提物对正常和抵抗ins-1胰岛β细胞的增殖及分泌功能的影响,探讨知母醇提物对正常细胞的毒性影响以及对胰岛素抵抗细胞的改善作用。方法采用MTT法测定知母醇提物对正常ins-1胰岛β细胞的增殖作用;知母醇提物干预正常细胞... 详细信息

目的研究知母醇提物对正常和抵抗ins-1胰岛β细胞的增殖及分泌功能的影响,探讨知母醇提物对正常细胞的毒性影响以及对胰岛素抵抗细胞的改善作用。方法采用MTT法测定知母醇提物对正常ins-1胰岛β细胞的增殖作用;知母醇提物干预正常细胞及胰岛素抵抗ins-1胰岛β细胞,分为溶媒组（ME）、胰岛素分泌模型组（MC）、胰岛素抵抗组（IR）、阳性药格列本脲组（Gli）和罗格列酮组（ROZ）及知母醇提物组,测定各组基础胰岛素分泌（BIS）和葡萄糖刺激的胰岛素分泌（GSIS）值。结果知母醇提物质量浓度在0.3~30μg/m L时对正常细胞有明显的增殖作用,与MC组的GSIS比较,差异均有统计学意义（P〈0.05或P〈0.01）;与IR组的BIS和GSIS比较,知母醇提物浓度在3~30μg/m L能显著促进细胞的BIS能力,同时其质量浓度在0.3~30μg/m L能显著性促进GSIS功能。结论知母醇提物在一定浓度范围内对正常ins-1胰岛β细胞的毒性较低,同时能通过促进正常细胞的增殖,增强其胰岛素分泌能力,改善细胞自身的胰岛素抵抗。

关键词：知母醇提物 ins-1胰岛β细胞增殖毒性

二至丸对H2O2诱导的ins-1胰岛β细胞氧化应激损伤的影响

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