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醋酸铅对大鼠胰岛瘤细胞ins-1自噬与凋亡的影响

醋酸铅对大鼠胰岛瘤细胞INS-1自噬与凋亡的影响

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作者：付荣济南大学

学位级别：硕士

背景：近年来，糖尿病的患病率呈逐年上升的趋势，合理的防治糖尿病尤为重要。糖尿病是一种主要表现为血浆葡萄糖水平升高的代谢性疾病，其主要特征为胰岛素分泌不足和胰岛素抵抗。胰岛β细胞的减少是其发生发展的核心。胰岛β细胞的减... 详细信息

背景：近年来，糖尿病的患病率呈逐年上升的趋势，合理的防治糖尿病尤为重要。糖尿病是一种主要表现为血浆葡萄糖水平升高的代谢性疾病，其主要特征为胰岛素分泌不足和胰岛素抵抗。胰岛β细胞的减少是其发生发展的核心。胰岛β细胞的减少通常是由于细胞凋亡，导致胰岛β细胞凋亡的一个重要因素是细胞内的氧化压力。此外，作为另一种细胞破坏的方式，自噬性细胞死亡也愈来愈为人们所关注。目前研究发现多种重金属可导致细胞的自噬与凋亡。铅是一种有害重金属，由于其广泛使用已在世界很多地方造成了严重的环境污染和健康问题。铅可通过多个途径进入人体，并可对多个系统(包括神经、血液、消化、循环和泌尿系统等)造成广泛的伤害。研究表明，铅能够改变细胞氧化还原状态，通过促进胰岛β细胞产生活性氧造成氧化压力，进一步导致胰岛β细胞凋亡。但是铅能否引起胰岛β细胞自噬，及铅引起自噬可能的分子通路尚未明确。探讨重金属污染物铅造成胰岛β细胞损伤可能的分子通路，为采取相应措施预防胰岛β细胞损伤从而为降低2型糖尿病的患病风险提供理论依据。目的：研究醋酸铅对胰岛β细胞ins–1自噬与凋亡的影响及其可能的分子机制。方法：利用不同浓度醋酸铅暴露大鼠胰岛瘤细胞ins–1，利用磺酰罗丹明B法检测细胞生存率;Western blot法测定不同浓度醋酸铅对细胞中凋亡与自噬标志蛋白及哺乳动物雷帕霉素靶蛋白信号通路标志分子表达的影响;细胞内ROS水平使用活性氧试剂盒检测;用ROS清除剂N–乙酰–L–半胱氨酸预处理细胞，检测醋酸铅引起的细胞自噬与凋亡能否受到影响。使用统计学软件SPSS17.0对数据进行统计学分析。结果：与对照组相比，醋酸铅导致ins–1细胞的存活率下降(p细胞自噬和凋亡减少。结论：醋酸铅可通过mTOR–非依赖途径诱导ins–1细胞的自噬与凋亡，其可能机制为刺激细胞内ROS的产生。

关键词：醋酸铅 ins–1细胞自噬凋亡活性氧

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