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细胞与分子免疫学杂志 2011年第7期27卷 730-732页

作者：李倩如臧文巧高峰杜英张清勇郑州大学基础医学院微生物学与免疫学教研室河南郑州450001 河南省医学科学研究所河南郑州450052 郑州大学第二附属医院胸外科河南郑州450000

目的:探讨CD74基因对重症肌无力患者胸腺上皮细胞(TEC)ifn-γr基因表达的影响。方法:原代培养重症肌无力患者胸腺上皮细胞,脂质体法转染pCMV-CD74,荧光定量rT-PCr法检测转染结果及TEC中ifn-γr等与自身免疫病相关基因mrNA水平的表达。结... 详细信息

目的:探讨CD74基因对重症肌无力患者胸腺上皮细胞(TEC)ifn-γr基因表达的影响。方法:原代培养重症肌无力患者胸腺上皮细胞,脂质体法转染pCMV-CD74,荧光定量rT-PCr法检测转染结果及TEC中ifn-γr等与自身免疫病相关基因mrNA水平的表达。结果:原代培养并传代的胸腺上皮细胞转染pCMV-CD74质粒后,CD74基因的表达显著提高。TEC高表达CD74基因,可引起HLA-A、ECFG1、IL-4r、IL-32和ifn-γr基因表达显著增加。结论:CD74基因对TEC表达ifnγr基因有明显的促进作用。

关键词： CD74 胸腺上皮细胞 ifn-γr 自身免疫相关基因

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ifn-γr在调控衣原体定植小鼠大肠的作用机制研究

IFN-γR在调控衣原体定植小鼠大肠的作用机制研究

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作者：宋晨晨南华大学

学位级别：硕士

目的:探究调控衣原体在小鼠大肠定植的ifn-γr及其可能的机制。方法:(1)C57BL/6J(WT)小鼠分别经结肠感染鼠衣原体(Chlamydia muridarum,Cm)G13.32.1和Cm G28.51.1,ifn-γr1小鼠经结肠感染Cm G28.51.1,定期采集小鼠直肠拭子,检测包涵体... 详细信息

目的:探究调控衣原体在小鼠大肠定植的ifn-γr及其可能的机制。方法:(1)C57BL/6J(WT)小鼠分别经结肠感染鼠衣原体(Chlamydia muridarum,Cm)G13.32.1和Cm G28.51.1,ifn-γr1小鼠经结肠感染Cm G28.51.1,定期采集小鼠直肠拭子,检测包涵体形成单位(inclusion forming units,IFUs),在感染后第56天处死小鼠,分离胃肠道各部分,制成组织匀浆检测IFUs;(2)采用Cre-loxP重组系统,通过Cre重组酶的作用,分别将小鼠肠道上皮细胞、骨髓细胞、树突状细胞或淋巴细胞中DNA的ifn-γr1基因进行条件性敲除;并通过PCr法鉴定小鼠基因型;(3)WT鼠和ifn-γr1、Vil-Cre ifn-γr1、Lys M-Cre ifn-γr1、CD11c-Cre ifn-γr1、Lck-Cre ifn-γr1小鼠经结肠感染Cm G28.51.1,感染后第28天处死小鼠,分离胃肠道各部分,制成组织匀浆检测IFUs,并用Wilcoxon rank sun test比较各组小鼠组织的IFUs;(4)WT鼠和Vil-Cre ifn-γr1、CD11c-Cre ifn-γr1、Lck-Cre ifn-γr1小鼠经结肠感染Cm G28.51.1,感染后第5或7天处死小鼠,取小鼠结肠组织,提取总rNA,通过rNA-sequencing检测不同小鼠间的基因表达差异,初步筛选出调控Cm定植的相关分子,并通过q rT-PCr验证ifn-γ相关基因的表达差异;(5)WT小鼠和GBP、iNOS小鼠经结肠感染Cm G28.51.1,定期检测直肠拭子IFUs,感染后第28天处死小鼠,分离胃肠道各部分,制成组织匀浆检测IFUs;(6)WT小鼠和IL-22小鼠经结肠感染Cm G28.51.1,定期检测直肠拭子IFUs,感染后第28天处死小鼠,分离胃肠道各部分,制成组织匀浆检测IFUs;结果:(1)Cm G13.32.1(WTCm)能够感染WT小鼠结肠并长期定植,而Cm G28.51.1不能长期定植WT小鼠结肠,Cm G28.51.1能够经结肠感染ifn-γr1小鼠并长期定植;(2)成功建立肠道上皮细胞、骨髓细胞、树突状细胞或淋巴细胞条件性ifn-γr基因敲除小鼠模型;(3)ifn-γ主要通过作用于肠道上皮细胞ifn-γr调控Cm在小鼠大肠中的定植;(4)iNOS在调控Cm大肠定植中发挥作用,GBP不发挥作用;(5)IL-22在调控Cm大肠定植中发挥作用;结论:***-γ主要通过作用于肠道上皮细胞ifn-γr调控Cm在小鼠大肠中的定植;***-γr可能够通过调节iNOS的表达调控Cm在小鼠大肠中的定植;***-22参与调控Cm在小鼠大肠中的定植。

关键词：衣原体 ifn-γr iNOS IL-22

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ifn-γr、IL18rα、IL10rα、IL4rα在雌性山羊腰脊神经节中的表达

IFN-γR、IL18Rα、IL10Rα、IL4Rα在雌性山羊腰脊神经节中的表达

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中国畜牧兽医学会动物解剖学及组织胚胎学分会第五次会员代表大会暨第十六次学术研讨会

作者：王红梅徐永平吴卫妮任妮西北农林科技大学动物医学院

由TH1/TH2细胞介导的免疫反应在各种炎症反应和免疫系统疾病发病过程中起着关键性的作用。为了探究TH1/TH2型细胞因子是否可以通过外周感觉神经这一途径调节内脏的生理状态,试验选取雌性山羊腰段脊神经节,采用免疫组织化学的方法,检测... 详细信息

由TH1/TH2细胞介导的免疫反应在各种炎症反应和免疫系统疾病发病过程中起着关键性的作用。为了探究TH1/TH2型细胞因子是否可以通过外周感觉神经这一途径调节内脏的生理状态,试验选取雌性山羊腰段脊神经节,采用免疫组织化学的方法,检测了γ干扰素受体(ifn-γr)、白介素18受体α(IL18rα)、白介素4受体α(IL4rα)和白介素10受体α(IL10rα)的表达情况。结果显示,腰段脊神经节的神经元胞体均为ifn-γr、IL18rα、IL4rα和IL10rα的阳性,但其在其阳性表达分布状况各具特点。此类神经元胞体多呈圆形或椭圆形,分为大、中、小型三种胞体类型,被神经纤维束分隔成群。ifn-γr的阳性产物在大的神经元比小的神经元着色浅,胞核以及围绕在胞体周围的卫星细胞有受体的强阳性反应产物。IL18rα的阳性产物在胞核呈强阳性表达,在胞浆中呈中强度表达,小的神经元胞体比较大的染色深。IL4rα的阳性产物存在于胞浆和与其并行的神经纤维束,周围的卫星细胞和胞核呈弱阳性反应。IL10rα的阳性产物在核膜呈强阳性表达,胞浆中强表达,核仁不表达,周围的卫星细胞以及胞体间的一些细胞也可观察到阳性产物。由以上结果分析这四种细胞因子的受体存在于脊神经节的神经元胞体,这说明这四种细胞因子可以通过影响内脏感觉神经来协调内脏的生理机能。

关键词：山羊腰脊神经节 ifn-γr IL18rα 、IL4rα IL10rα 表达

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七味白术散对HrV感染乳鼠小肠iEL ifn-γ与ifn-γr表达的影响

七味白术散对HRV感染乳鼠小肠iEL IFN-γ与IFN-γR表达的影响

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第五届全国中医药免疫学术研讨会——暨环境·免疫与肿瘤防...

作者：伍参荣姜晓田雪飞贺双藤李杰李珊蔡锐陈伶俐高立凡湖南中医药大学美国康萨斯大学医学院

目的探讨七味白术散对HrV感染乳鼠小肠黏膜小肠粘膜内淋巴细胞(iEL)ifn-γ及其受体表达的影响。方法5日龄NIH乳鼠经口感染HrV建立乳鼠腹泻模型,按窝随机分为6组:正常组(NG)、模型组(MG)、七味白术散组(BG)、病毒唑组(ZG)、抑制剂组(YG)... 详细信息

目的探讨七味白术散对HrV感染乳鼠小肠黏膜小肠粘膜内淋巴细胞(iEL)ifn-γ及其受体表达的影响。方法5日龄NIH乳鼠经口感染HrV建立乳鼠腹泻模型,按窝随机分为6组:正常组(NG)、模型组(MG)、七味白术散组(BG)、病毒唑组(ZG)、抑制剂组(YG)及七味白术散联合抑制剂组(BYG),各组乳鼠分别经口滴入相对应的治疗药物3次/d(NG与MG给生理盐水)。分别于治疗后15min、2h、6h、12h、24h、32h、48h处死乳鼠,取乳鼠小肠,免疫组化法观察iEL ifn-γr;rT-PCr法检测iEL ifn-γ及ifn-γr mrNA表达水平。结果***(2h、6h、12h、24h、32h、48h)ifn-γmrNA表达水平明显升高,与MG,ZG,BYG,YG比较差异有统计学意义(Pifn-γr mrNA表达水平明显升高,与MG,ZG,BYG,YG比较差异有统计学意义(Pifn-γrmrNA水平与ifn-γmrNA水平呈正向相关。结论七味白术散能提高小肠黏膜iEL ifn-γ及ifn-γr表达水平。提示:调节乳鼠iEL ifn-γ及ifn-γr表达水平,可能是七味白术散治疗HrV感染性腹泻的机理之一。

关键词：七味白术散人轮状病毒小肠黏膜间淋巴细胞 ifn-γ ifn-γr

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七味白术散对HrV感染乳鼠小肠黏膜ifn-γ及其受体表达的影响

七味白术散对HRV感染乳鼠小肠黏膜IFN-γ及其受体表达的影响

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作者：姜晓湖南中医药大学

学位级别：硕士

目的：探讨七味白术散对HrV感染乳鼠小肠黏膜的保护作用机理。方法：1.观察HrV对MA104细胞的细胞病变效应(CPE),确定HrV的TCID50。2. ELISA法检测HrV感染乳鼠粪便标本内HrV水平,以HrV对5日龄NIH乳鼠100%感染最低剂量作为本实验中对乳鼠... 详细信息

目的：探讨七味白术散对HrV感染乳鼠小肠黏膜的保护作用机理。方法：1.观察HrV对MA104细胞的细胞病变效应(CPE),确定HrV的TCID50。2. ELISA法检测HrV感染乳鼠粪便标本内HrV水平,以HrV对5日龄NIH乳鼠100%感染最低剂量作为本实验中对乳鼠的造模剂量。***感染乳鼠(ELISA法确定已造模成功)按窝随机分为6组：正常组(NG)、模型组(MG)、七味白术散组(BG)、病毒唑组(ZG)、抑制剂组(YG)及七味白术散联合抑制剂组(BYG),各组乳鼠分别经口滴入相对应的治疗药物3次/d(NG与MG给生理盐水)。4.分别于治疗后15min、2h、6h、12h、24h、32h及48h处死乳鼠取材,免疫组化法观察小肠黏膜ifn-γr表达部位及水平;rT-PCr法检测小肠黏膜ifn-γ及ifn-γrmrNA表达水平;治疗5天后处死乳鼠取材,HE染色观察小肠黏膜病理改变情况。结果：1.小肠黏膜病理改变七味白术散治疗5天后,HrV感染乳鼠小肠黏膜病变明显减轻,与ZG、YG、BYG比较差异均有统计学意义(PrNA表达水平①NG乳鼠小肠黏膜ifn-γmrNA表达水平与MG比较差异有统计学意义(Pifn-γmrNA表达水平明显升高,与MG比较差异有统计学意义(Pifn-γmrNA的表达,且作用持续平稳,并对机体ifn-γ表达具有双向调节作用。②ZG(2h、6h、12h、24h、32h) ifn-γmrNA表达水平与MG比较差异有统计学意义(Pifn-γmrNA表达水平与ZG比较差异有统计学意义(Pifn-γmrNA表达作用强于病毒唑。③YG (2h、6h、12h、24h、32h、48h) ifn-γmrNA表达水平均低于MG,与MG比较差异有统计学意义(Pifn-γmrNA表达水平与YG比较差异有统计学意义(PrV感染乳鼠小肠黏膜ifn-γmrNA的表达,而七味白术散则能拮抗Genistein对ifn-γmrNA表达的抑制作用。3. ifn-γrmrN表达水平及ifn-γr光密度值①ifn-γrmrNA水平与ifn-γmrNA水平呈正向相关。②各组ifn-γr光密度值结果与ifn-γrmrNA表达水平一致。结论：七味白术散能明显改善HrV感染乳鼠小肠黏膜病变,提高小肠黏膜ifn-γ及ifn-γr表达水平,提示通过调节HrV感染乳鼠小肠黏膜ifn-γ及ifn-γr表达水平可能是七味白术散治疗HrV感染性腹泻的机理之一。

关键词：七味白术散人轮状病毒小肠黏膜 ifn-γ ifn-γr

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不同营养条件大鼠胃和小肠Ghrelin、γ-干扰素受体和雌激素受体-α的表达

不同营养条件大鼠胃和小肠Ghrelin、γ-干扰素受体和雌激素受体-...

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作者：徐立西北农林科技大学

学位级别：硕士

随着对动物营养和消化生理以及近年来对胃肠黏膜免疫的深入研究,使得胃肠神经内分泌免疫网络功能研究成为目前重要的热点研究领域之一。胃肠肽与其它生物活性物质及其受体等共同作用,调节消化道的分泌、吸收、血流和细胞营养、免疫等各... 详细信息

随着对动物营养和消化生理以及近年来对胃肠黏膜免疫的深入研究,使得胃肠神经内分泌免疫网络功能研究成为目前重要的热点研究领域之一。胃肠肽与其它生物活性物质及其受体等共同作用,调节消化道的分泌、吸收、血流和细胞营养、免疫等各种功能,维持和调节胃肠道微环境的平衡及正常的生理功能。 Ghrelin是一种新近发现的生长激素促释放激素受体(GHS-r)的内源性配体,它能够强烈的刺激GH的释放,并能促进动物的采食。γ-干扰素受体(ifn-γr)是具有抗病毒作用的细胞因子,研究证明在胃肠道发育和黏膜免疫调节中起重要作用。雌激素通过其受体(Er)除对生殖功能发挥作用外,其在胃肠消化中也发挥一定的功能。为探讨胃肠肽与细胞因子、激素互作维持胃肠神经内分泌网络平衡的形态学基础,本实验用免疫组织化学SP法,分别对标准、低营养和高营养饲料饲喂大鼠的胃肠道内Ghrelin、γ-干扰素受体(ifn-γr)和Er-α的定位进行了的研究。获得了以下主要研究结果: 1. Ghrelin阳性细胞主要分布在胃底腺和小肠的各层,其中胃中Ghrelin的表达量显著高于小肠(Prelin表达量高于标准营养组和高营养组(Prelin的表达量随着饲喂时间的延长而增加。低营养组大鼠恢复到标准饲养条件后Ghrelin表达量降低(Pifn-γr表达较弱,饲养到第4周时ifn-γr出现在胃底腺区和小肠的肠腺及粘膜下层。高营养处理组大鼠胃中的ifn-γr的阳性细胞数量多于低营养处理组,但差异不显著。 3. Er-α阳性细胞主要分布于胃粘膜上皮、胃底腺和小肠腺,以相关分泌细胞和免疫细胞中最多。标准饲养组胃肠道Er-α的表达量随着饲喂时间的延长而增加(Pr-α的表达量显著低于高营养和标准组大鼠(Pr-α的表达量无变化而小肠内Er-α的表达量增加;高营养恢复组胃和小肠内Er-α的表达量均低于2周高营养组(Prelin的分泌降低以抑制饮食,且具短时效性;食物应激和持续刺激能激发胃和小肠相关分泌细胞和免疫细胞中ifn-γ受体的表达;胃肠道中Erα的表达量与动物的营养状态呈正相关。Ghrelin和Erα在减轻动物的食物应激反应和维持胃肠道粘膜的免疫特性中起主要作用。

关键词：胃和小肠营养条件 Ghrelin ifn-γr Erα

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