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id-3和PTEN在非小细胞肺癌中的表达及其关系的研究

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Id-3和PTEN在非小细胞肺癌中的表达及其关系的研究

作者：杨雯静河北医科大学

学位级别：硕士

目的：原发性支气管肺癌（或简称肺癌），是指起源于支气管黏膜或腺体的恶性肿瘤。肺癌一般分为两类：非小细胞肺癌（non-small cell lungcancer，NSCLC）、小细胞肺癌（small cell lung cancer，SCLC），其中NSCLC占所有肺癌的80%以上... 详细信息

目的：原发性支气管肺癌（或简称肺癌），是指起源于支气管黏膜或腺体的恶性肿瘤。肺癌一般分为两类：非小细胞肺癌（non-small cell lungcancer，NSCLC）、小细胞肺癌（small cell lung cancer，SCLC），其中NSCLC占所有肺癌的80%以上。NSCLC是一种常见的、预后较差的恶性肿瘤，其5年生存率低于15%。近年来，随着分子生物学的不断发展，寻找NSCLC特异性肿瘤标记物提高诊断率，分子靶向治疗提高治疗的有效率已成为NSCLC诊断与治疗的关键。NSCLC发生发展的重要原因为癌细胞凋亡受抑制和肿瘤血管新生，其机制复杂，涉及众多相关基因与蛋白质。癌基因的激活与抑癌基因的失活异常和已被认为是NSCLC发生发展的重要事件。DNA结合抑制因子-3（Inhibitor of DNAbinding-3，id-3）是一种癌基因，其可通过对细胞周期的调控抑制细胞分化、促进细胞增殖，在诱导肿瘤发生、促进肿瘤血管形成、调节肿瘤侵袭中具有重要的作用。目前的研究已发现id-3在癌细胞中过表达，但其在非小细胞肺癌中的研究较少。PTEN是1997年发现的一种新型抑癌基因，在抑制肿瘤细胞增殖、分化以及肿瘤侵袭转移及肿瘤血管形成中起重要作用。本文研究NSCLC中id-3和PTEN的表达及二者在NSCLC发生发展中的作用。方法：收集河北医科大学第四医院胸二科2007年6月-2008年6月期间手术切除非小细胞肺癌存档蜡块134例，术后病理均经河北医科大学第四医院病理科诊断证实。取36例正常组织（手术切除的肺部良性病变）作为正常对照。根据其性别、年龄、肿块大小、分化程度、病理类型、肿瘤的临床分期及有无淋巴结转移等，分别进行分组对照。应用免疫组化SP法测定标本中id-3和PTEN的表达情况，按SP试剂盒介绍的方法进行。应用Motic MED6.0数码医学图像分析系统观察所有标本，id-3的阳性表达表现为细胞质内沉着着黄色或棕黄色的颗粒;PTEN的阳性表达表现为细胞核内沉着着黄色或棕褐色颗粒。采用染色强度（A）及染色细胞百分率（B）综合记分方式评估。将不同组别中id-3和PTEN的表达情况进行对照分析,并将所有NSCLC样本中id-3和PTEN的表达情况进行相关性分析。采用SPSS13.0统计软件，用χ2检验或Fisher确切概率法分析id-3、PTEN的表达及其与NSCLC各临床病理特征之间的关系，用Spearman等级相关分析法分析id-3、PTEN表达的相关关系，Pid-3在NSCLC组织中的阳性表达率为76.1%（102/134），而在正常肺组织中阳性表达率为11.1%（4/36），二者差异具有统计学意义（Pid-3在NSCLC中的表达与患者的性别、年龄、肿瘤大小及病理类型均无关（P>0.05）;与NSCLC的分化程度、有无淋巴结转移及临床分期有关（P3PTEN在NSCLC组织中的阳性表达率为44.0%（59/134），而在正常肺组织中阳性表达率为97.2%（35/36），二者差异具有统计学意义（P0.05）;与NSCLC的分化程度、有无淋巴结转移及临床分期有关（Pid-3与PTEN在NSCLC中的表达呈负相关（r=-0.238，P=0.007）。结论：1NSCLC组织中的id-3的表达明显高于正常组织，提示id-3的高表达可能与NSCLC有关。2id-3高表达可能与肿瘤的恶性程度及侵袭与转移有关，id-3的表达越高，NSCLC的组织分化越低，淋巴结越容易转移，临床分期越晚。3NSCLC组织中的PTEN的表达明显低于正常组织，提示PTEN的低表达可能与NSCLC有关。4PTEN的低表达可能与肿瘤的恶性程度及侵袭与转移有关，PTEN的表达越低，NSCLC的组织分化越低，淋巴结越容易转移，临床分期越晚。5id-3和PTEN在NSCLC中呈负相关，提示id-3的激活及PTEN的失活或缺失共同促进NSCLC的发生。

关键词：非小细胞肺癌 id-3 PTEN 侵袭转移免疫组化

id-3和VEGF在食管鳞状细胞癌中的表达及其意义的研究

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ID-3和VEGF在食管鳞状细胞癌中的表达及其意义的研究

作者：韩青松河北医科大学

学位级别：硕士

目的：食管癌是世界上最常见的恶性肿瘤之一，其发病率有明显的地域性。我国是世界上食管癌发病率及死亡率最高的国家，其死亡率在我国恶性肿瘤中排名第四位，而在我国北方地区则高居第二位，仅仅次于胃癌。按病理类型，食管癌可分为鳞... 详细信息

目的：食管癌是世界上最常见的恶性肿瘤之一，其发病率有明显的地域性。我国是世界上食管癌发病率及死亡率最高的国家，其死亡率在我国恶性肿瘤中排名第四位，而在我国北方地区则高居第二位，仅仅次于胃癌。按病理类型，食管癌可分为鳞癌和腺癌。在我国食管鳞状细胞癌的发病率远远高于腺癌，约占食管癌的95%左右，并且初诊多为中晚期，其手术治疗后5年生存率25%左右，而早期癌，其手术治疗后5年生存率可高达90%。因此，加强对食管癌发病机制的研究，早期诊断及早期治疗有重要意义。通过近代分子生物学研究发现肿瘤的发生发展与癌细胞的凋亡受的抑制程度及肿瘤的血管生长等因素相关，其机制较复杂，涉及众多基因及蛋白。分化抑制因子简称id是由Robert Benezra团队于1990年从小鼠白血病细胞CDNA文库中发现的，是螺旋-环-螺旋(HLH)转录因子成员之一，并且以id-1，id-2，id-3，id-4四种子体存在于大多数哺乳动物细胞内（从酵母到人类的不同组织中不同子体作用存在差异），经研究发现HLH家族被认为具有影响转录调控的作用，而作为HLH家族成员之一的id基因则具有与癌基因类似的作用，id蛋白有促进细胞增殖和抑制细胞分化、进行细胞周期调控、诱导细胞凋亡、促进肿瘤发生、促进肿瘤血管形成、肿瘤转移及侵袭等功能。研究结果表明，id蛋白表达具有使细胞永生化的作用，其作用机制是通过抑制p16ink4a、p21WAF1转录水平，进而可促进CDK4和CDK2与pRb结合，使pRb磷酸化，继而E2F蛋白摆脱pRb的束缚进而活化，再次促进更多的癌基因的转录，使细胞进入S期，促进细胞过度增殖。再者大多数细胞的生物学过程都有id-3基因的参与，id-3在细胞分化的抑制，细胞增殖的促进及细胞凋亡诱导等方面均起到类似癌基因的作用，因此，id-3在肿瘤的发生及发展过程中起到重要作用。血管内皮因子(vascular endothelial growthelial growth factor，VEGF)是二聚体糖蛋白生长因子成员，能够促进内皮因子的增生，在肿瘤新生血管的诱导及血管通透性增加等方面起到重要作用。VEGF是至今已发现的正调节因子中比较重要和特异的细胞因子，它既能促进内皮细胞的增殖，又能促进血管渗漏，对于血管的形成起极其重要作用。从而通过血管的增多使肿瘤细胞获得大量的氧气及养料，进而实现肿瘤细胞增殖。目前在国内外的报道中，关于两者在食管鳞状细胞癌的研究较少，本研究通过westernblot方法检测2012年7月-2012年11月期间河北医科大学第四医院胸外科手术切除的40例食管鳞状细胞癌（ESCC）组织中，id-3及VEGF与食管癌（ESCC）发生发展的关系。方法：收集河北医科大学第四医院胸外科2012年7月-2012年11月期间手术切除的食管鳞状细胞癌（ESCC）组织40例，术后病理均经河北医科大学第四医院病理科诊断证实。取10例正常组织（手术切除的距离癌变部位5cm以上的组织）作为正常对照。应用western blotting方法检测标本中蛋白id-3和VEGF的表达情况，根据其性别、年龄、分化程度、肿瘤的浸润程度及有无淋巴结转移等，分别进行分组对照。结果：1id-3在食管癌癌组织中的阳性表达为0.8255±0.10982，而在癌旁组织中的阳性表达率为0.1910±0.00876， P组织类型=0.000，二者之间的差异具有统计学意义（P id-3的阳性表达分别为：高中分化癌中0.7888±0.07570、低分化癌0.9986±0.07403,P病理分级=0.000，两者之间的差异具有统计学意义（Pid-3与VEGF在食管鳞状细胞癌中的表达呈正相关（P id-3的表达明显高于正常组织，提示id-3的高表达可能与ESCC发生有关。2id-3高表达可能与肿瘤的恶性程度有关，ESCC的组织分化越低id-3的表达越高。3ESCC组织中的VEGF的表达明显高于正常组织，提示VEGF的表达可能与ESCC有

关键词：食管鳞状细胞癌 id-3 VEGF 侵袭转移 western blot

id-3和VEGF的表达与食管鳞状细胞癌发生、发展及预后关系的研究

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Id-3和VEGF的表达与食管鳞状细胞癌发生、发展及预后关系的研究

作者：李永召河北医科大学

学位级别：硕士

目的:食管癌是来自于食管鳞状上皮的恶性肿瘤,是世界上最常见的恶性肿瘤之一,其死亡率占我国恶性肿瘤的第4位,年平均死亡率为14.59/10万,严重威胁人民生命健康。食管癌患者初诊多为中晚期,外科手术后5年生存率较低,而早期癌可达90%左右... 详细信息

目的:食管癌是来自于食管鳞状上皮的恶性肿瘤,是世界上最常见的恶性肿瘤之一,其死亡率占我国恶性肿瘤的第4位,年平均死亡率为14.59/10万,严重威胁人民生命健康。食管癌患者初诊多为中晚期,外科手术后5年生存率较低,而早期癌可达90%左右。因此,从分子水平探讨食管癌的发生,发展机制,提高早期诊断率,判断预后已成为食管癌研究的关键。近代分子生物学研究表明,恶性肿瘤的发生、发展、侵袭和转移是一种高度选择的非随机过程,与多个基因和多个分子表达水平密切相关。分化抑制因子(inhibitors of differentiation, id),又称DNA结合抑制因子,是1990年Robert Benezra等首先从小鼠红白血病(murine erythroleukemia, MEL)细胞cDNA文库中克隆出来的,属于螺旋-环-螺旋(helix-loop-helix, HLH)转录因子家族。id蛋白不但在正常细胞的生长发育中发挥着重要作用,而且对人类肿瘤细胞的增殖凋亡、侵袭转移、血管形成、治疗和预后也产生重要影响。血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)属于二聚体糖蛋白生长因子家族成员,对内皮细胞的增生有强烈的刺激作用,可诱导血管新生,增加血管的通透性,使肿瘤细胞通过血管获得大量的氧和养料,实现肿瘤细胞的指数增殖。目前,国内外同时研究两者在食管鳞癌(ESCC)中表达的报道甚少。本研究通过免疫组化检测2004年1月-2004年7月期间河北医科大学第四医院胸二科手术切除的122例食管鳞状细胞癌(esophageal squamous cell carcinoma,ESCC)存档蜡块中id-3和VEGF的表达,通过CD34染色计算ESCC微血管密度(microvessel density,MVD)研究这些基因蛋白与临床病理参数之间相关性及其相互关系,分析id-3和VEGF表达与MVD的关系,并结合临床随访资料综合分析与食管癌预后的关系。方法:采用免疫组织化学的方法对不同分期的食管鳞状细胞癌患者癌组织中的id-3和VEGF的表达产物进行半定量分析。采用CD34染色计算食管鳞状细胞癌微血管密度(MVD),分析id-3和VEGF与MVD的关系,通过Kaplan-Meier寿命表法分析与预后的关系。标本取自2004年1月-2004年7月期间河北医科大学第四医院胸二科手术切除食管鳞癌存档蜡块122例,其中取40例癌旁组织(离癌灶边缘>5cm)作为正常对照。上述122例食管鳞癌组织中,男性84例,女性38例,年龄34～78岁,中位年龄58岁。入组标准:根治性切除,完整临床资料并有术后随访,术前均未接受放疗及化疗。所有标本均经福尔马林固定,石蜡包埋,4um连续切片,分别进行HE及免疫组化染色,以PBS液作为阴性对照,只加二抗作为阳性对照。采用SPSS13.0统计软件,计数资料采用χ2检验或Fisher确切概率法,等级资料采用Spearman相关分析,析因分析交互作用,采用Kaplan-Meier法计算生存率和描绘生存率曲线,采用Log-rank检验分析生存率差异,Cox比例风险回归模型进行多因素分析。以Pid-3在ESCC组织中的阳性表达率为85.2%(104/122),而在癌旁正常食管组织中阳性表达率为7.5%(3/40),二者具有显著性差异(Pid-3在ESCC中的表达与患者的年龄、性别、浸润深度和有无淋巴结转移均无关(P>0.05);与ESCC的分化程度及MVD值呈正相关(P3 VEGF在ESCC组织中的阳性表达率为86.9%(106/122),而在癌旁正常食管组织中阳性表达率为22.5%(9/40),二者具有显著性差异(P0.05);与ESCC的分化程度及MVD值呈正相关(Pid-3的表达与VEGF表达呈正相关(r=0.397,Pid-3和VEGF均为影响患者预后的重要因素。结论:1 ESCC组织中的id-3的表达高于癌旁正常组织,提示id-3的高表达可能与ESCC有关。2 id-3的表达可能促进ESCC的血管生成,id-3高表达者预后差。3 VEGF在ESCC组织中的表达高于癌旁正常组

关键词：食管癌 id-3 VEGF CD34 免疫组化预后

id-1、id-3和MMP-9在脑转移瘤中的表达和意义

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Id-1、Id-3和MMP-9在脑转移瘤中的表达和意义

作者：董雅兰河北医科大学

学位级别：硕士

目的:通过检测脑转移瘤组织中分化抑制因子1(Inhibitors of differenti- ation-1,id-1)、分化抑制因子3(id-3)和基质金属蛋白酶9(Matrix Metallop- roteinase-9, MMP-9)的表达情况,探讨三者在脑转移瘤形成和侵袭过程中的作用。方法:1选... 详细信息

目的:通过检测脑转移瘤组织中分化抑制因子1(Inhibitors of differenti- ation-1,id-1)、分化抑制因子3(id-3)和基质金属蛋白酶9(Matrix Metallop- roteinase-9, MMP-9)的表达情况,探讨三者在脑转移瘤形成和侵袭过程中的作用。方法:1选取经手术切除脑转移瘤样本44例,另取正常人脑组织(脑疝患者行内减压切除的正常脑组织)样本10例,全部样本经10%福尔马林固定,常规石蜡包埋,连续切片。同时调取病理科存档的患者相应的原发灶肿瘤标本蜡块,连续切片。2设定脑转移瘤及原发肿瘤为观察组,正常脑组织为对照组,再根据其年龄、性别、原发肿瘤部位,分别进行分组对照。采用免疫组化法检测id-1、id-3和MMP-9蛋白在肿瘤原发灶、脑转移灶及正常脑组织中的表达。对每张切片在高倍镜(400x)下计数10个高倍视野,依据阳性细胞所占的百分比评定阳性等级,计算出阳性细胞率。3收集全部样本的临床病理资料。实验数据采用SPSS 13.0软件进行统计学处理,并分析id-1、id-3和MMP-9三者间表达的相关性。结果:1在44例脑转移瘤中,id-1、id-3、MMP-9阳性表达率分别为93.2%(41/44)、95.5%(42/44)、81.8%(36/44);自病理科调取到的7例原发灶肿瘤中,id-1、id-3、MMP-9阳性表达率分别为71.4%(5/7)、71.4%(5/7)、57.1%(4/7);正常脑组织中三者均无阳性表达。2 id-1、id-3、MMP-9在脑转移瘤与其原发灶中的表达均显著高于正常脑组织(P0.05)。依据患者年龄,性别及原发肿瘤的不同分组,id-1、id-3、MMP-9在不同组别脑转移瘤中的表达差异均无统计学意义(P>0.05)。3对所有脑转移瘤样本中id-1、id-3、MMP-9的表达情况行相关性分析显示,id-1与MMP-9表达呈显著正相关(γ=0.386,P=0.010),id-3与MMP-9表达呈正相关(γ=0.306,P=0.043),id-1和id-3表达亦呈正相关(0.319,P=0.035)。其中id-1与MMP-9的相关性最为显著。结论:id-1、id-3、MMP-9在脑转移瘤及其原发灶中均高表达,在正常脑组织中不表达,三者在脑转移瘤中的高表达与原发肿瘤的部位,患者的年龄和性别无关。在脑转移瘤组中id-1、id-3、MMP-9表达之间呈显著相关性, id-1与MMP-9两者之间相关性尤为显著。因此认为id-1和id-3,除本身参与脑转移瘤的形成和发展外,id-1还可通过调节MMP-9的表达,为转移瘤的形成提供条件。id-1、id-3、MMP-9的高表达在脑转移瘤形成中发挥了重要的生物学作用,且三者存在一定的协同作用关系,为脑转移瘤的发生机制提供了新的研究思路。

关键词： id-1 id-3 MMP-9 脑转移瘤免疫组织化学法

Claudin-1、id-1、id-3蛋白在胃癌中的表达及临床意义

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中国临床实用医学 2009年第2期3卷 13-15页

作者：王国荣吴永廉郑建盛福建省莆田市第一医院 351100 莆田学院医学院

目的研究胃癌组织Claudin-1、id-1、id-3表达与胃癌细胞分化、增殖、侵袭转移和预后的关系。方法应用免疫组织化学检测Claudin-1、id-1、id3-蛋白在胃癌组织中的表达。结果Claudin-1表达水平与胃癌组织学类型、肿瘤侵袭程度及淋巴结转... 详细信息

目的研究胃癌组织Claudin-1、id-1、id-3表达与胃癌细胞分化、增殖、侵袭转移和预后的关系。方法应用免疫组织化学检测Claudin-1、id-1、id3-蛋白在胃癌组织中的表达。结果Claudin-1表达水平与胃癌组织学类型、肿瘤侵袭程度及淋巴结转移相关（P〈0．05），id-1蛋白表达与胃癌淋巴结转移呈负相关（P〈0．05）；id-3蛋白表达在不同组织起源的胃癌之间差异有统计学意义（P〈0．05）；Claudin-1作为细胞间紧密连接的构成成份在胃癌组织中的表达作用与id蛋白表达正相关。结论Claudin-1表达上调以及在胃癌侵袭过程中表达转化提示参与肿瘤的生物学行为的转化；id-1在胃癌淋巴结转移的预测中有一定的应用价值；不同组织起源的胃癌id-3呈差异性表达；Claudin及id蛋白在胃癌的侵袭转移及临床治疗及预后判断有一定的应用价值。

关键词：胃癌 Claudin-1 id-1 id-3 免疫组化

分化抑制因子-1,-3在宫颈上皮内瘤变及宫颈鳞状细胞癌组织中的表达及其意义

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中华妇幼临床医学杂志（电子版） 2014年第2期10卷 47-50页

作者：陈艳艳张声江忠清泉州市妇幼保健院产科 362000 福建医科大学附属第一医院病理科福建医科大学附属第一医院妇产科

目的探讨id-1,-3在宫颈上皮内瘤变(CIN)及宫颈鳞状细胞癌(CSCC)中的表达及其意义。方法选择于福建医科大学附属第一医院病理科经组织病理学检查确诊为CIN与CSCC患者的组织标本分别为22例与67例为研究对象。采用SP免疫组化染色EnVision... 详细信息

目的探讨id-1,-3在宫颈上皮内瘤变(CIN)及宫颈鳞状细胞癌(CSCC)中的表达及其意义。方法选择于福建医科大学附属第一医院病理科经组织病理学检查确诊为CIN与CSCC患者的组织标本分别为22例与67例为研究对象。采用SP免疫组化染色EnVision二步法检测标本组织中id-1,-3蛋白表达水平(本研究遵循的程序符合福建医科大学附属第一医院人体试验委员会所制定的伦理学标准,得到该委员会批准)。按照国际妇产科联盟(FIGO)对CSCC的临床分期标准进行CSCC临床分期。本组CSCC患者中,FIGOⅠA、ⅠB、ⅡA、ⅡB期分别为4,29,28及6例。本组CIN标本中,CINⅠ～Ⅲ级分别为3例,5例和14例。结果在CINⅠ～Ⅲ级标本中,CINⅢ级(n=14)较CINⅠ～Ⅱ级(n=8)的id-1,-3表达水平均显著升高,且差异有统计学意义(Pid-1蛋白表达水平分别显著高于>40岁、FIGOⅢ期、无脉管浸润、无淋巴结转移患者,且差异均有统计学意义(Pid-1蛋白表达水平无影响(P>0.05)。若CSCC标本来源于伴淋巴结转移患者,则id-3表达水平显著高于无淋巴结转移者,且差异有统计学意义(Pid-3表达水平无影响(P>0.05)。结论 id-1,-3在CIN、CSCC中均有表达,表达水平与CIN级别及CSCC的发生发展、侵袭转移有关。id-1,-3或许可作为CIN、CSCC基因治疗的候选靶基因位点。

关键词：宫颈上皮内瘤样病变肿瘤,鳞状细胞宫颈肿瘤,原发性子宫颈 id-1 id-3