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对LHRH受体在靶细胞上表达量的分析

中国药理学通报 2010年第7期26卷 977-978页

作者：李亘松邓欣张国利中国医科大学基础医学院机能实验中心辽宁沈阳110001 军事医学科学院军事兽医研究所生物技术应用研究室吉林长春130062

我们把高表达LHRH受体的肿瘤细胞称为靶细胞, 以 LHRH受体为切入点, 将LHRH的DNA和绿脓杆菌外毒素 (PE40)的DNA用基因工程的方法连接起来, 并在大肠杆菌中将LHRH-PE40表达出来. LHRH-PE40中的LHRH可以与靶细胞上的LHRH受体结合, 然后使... 详细信息

我们把高表达LHRH受体的肿瘤细胞称为靶细胞, 以 LHRH受体为切入点, 将LHRH的DNA和绿脓杆菌外毒素 (PE40)的DNA用基因工程的方法连接起来, 并在大肠杆菌中将LHRH-PE40表达出来. LHRH-PE40中的LHRH可以与靶细胞上的LHRH受体结合, 然后使其中的PE40跨膜转运至细胞内特异性地消灭靶细胞, 在选择性地杀伤靶细胞的同时, 对正常细胞较少或无影响[1]

关键词：促黄体激素释放激素受体-绿脓杆菌外毒素 LHRH受体靶细胞 ic50 细胞毒性 MTT

Study on Cisplatin Aggravating DNA Damage and Causing a High Apoptosis Rate on Breast Cancer MCF-7 Cells

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Medicinal Plant 2017年第4期8卷 52-54,61页

作者： Liming YUAN Nan MA Jiaohuan CAO Yi WEN Xiangguang LIU Xianxian ZHOU Shuwen KUANG Mengjie YANG Wanxin OUYANG Shijie JIA Haibin WANG Xiaojun TAO Zhaojun ZENG Laboratory of Medicine Engineering Medical College of Hunan Normal University Molecular Biology Research Center Xiangya Medical CollegeCentral South University

[Objectives] To investigate the mechanism of DNA damage of cisplatin( DDP),a broad spectrum anticancer drug on breast cancer MCF-7 cells,and to study the mechanism of apoptosis induced by DDP.[Methods]MCF-7 cells were treated by DDP( 0 mg/L,2 mg/L,4 mg/L,6 mg/L,6 mg/L,and 10 mg/L) for 48 hours. MTT assay was used to detect the inhibitory effect of DDP on MCF-7 cells and ic50 value was calculated. Western blot was adopted to detect the expression of γ-H2 AX,which was the marker of DNA double stranded breaks( DSBs) and ATM( sensory molecules of DSBs),the apoptotic signal transduction molecule cleaved caspase-3,and the proteins associated with apoptosis calpain.[Results]DDP inhibited MCF-7 cell activity in a concentration-dependent manner and ic50 was 7. 57 mg/L. In contrast to the control group( without DDP treatment),MCF-7 cells with DDP treatment expressed more γ-H2 AX,ATM,cleaved caspase-3 and calpain.[Conclusions] DDP could inhibit the activity of breast cancer MCF-7 cells. Its mechanisms may be associated with inhibition of MCF-7 cell apoptosis,induction of DNA double strand breaking and the expression of pro-apoptotic protein up-regulation.

关键词： MCF-7 cells Cisplatin(DDP) DNA damage Breast cancer Proliferation Apoptosis ic50

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不同小麦品种对苯磺隆耐药性差异及其机理

植物保护学报 2005年第3期32卷 300-304页

作者：刘伟王金信杨广玲毕建杰隋标峰山东农业大学农药毒理与应用技术省级重点实验室泰安271018 山东农业大学农学院泰安271018

室内用砂培法测定11种小麦品种对苯磺隆的相对敏感性,其敏感性有较大差异。碧玛4号、维麦8号对苯磺隆有很强的耐药性,ic_(50)可分别达到502.6和409.3 ai μg/kg,济13号为156.9 ai μg/kg,鲁麦22号、黄县大粒对苯磺隆较为敏感,ic_(50)低... 详细信息

室内用砂培法测定11种小麦品种对苯磺隆的相对敏感性,其敏感性有较大差异。碧玛4号、维麦8号对苯磺隆有很强的耐药性,ic_(50)可分别达到502.6和409.3 ai μg/kg,济13号为156.9 ai μg/kg,鲁麦22号、黄县大粒对苯磺隆较为敏感,ic_(50)低于45.0 ai μg/kg。以上5种小麦离体 ALS 对苯磺隆的敏感性没有明显差异,敏感品种黄县大粒 ic_(50)为154.2nmol/L,甚至较维麦8号149.3nmol/L 略高。ALS 活体试验表明,小麦可以很快恢复苯磺隆对 ALS 活性的抑制,且耐药型品种恢复能力较强,碧玛4号、维麦8号 ALS 恢复活性只需1.5天,敏感品种需3天。碧玛4号、维麦8号除草剂解毒酶系 GSTs 相对于敏感品种对苯磺隆有较大的反应幅度和较短的反应时间,第2天就分别达到1.46、1.42的峰值,而济13号、鲁麦22号、黄县大粒变化幅度较小,第3天才达到峰值,活性分别为1.39、1.33和1.32。研究表明,小麦各品种对苯磺隆的耐药能力产生差异的主要原因之一是小麦 GSTs 对苯磺隆的代谢所致,而与小麦 ALS 对苯磺隆的敏感程度无关。

关键词：小麦苯磺隆耐药性谷胱甘肽-S-转移酶乙酰乳酸合成酶小麦品种相对敏感性鲁麦22号机理 ic50

香椿叶总黄酮的超声波辅助提取及其清除DPPH自由基能力的研究

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食品与机械 2007年第1期23卷 76-80页

作者：陈丛瑾黄克瀛李德良王丽霞广西大学化学化工学院广西南宁530004 中南林业科技大学材料科学与工程学院湖南株洲412006

研究运用超声波辅助提取香椿叶中总黄酮的工艺条件和提取物清除DPPH自由基的能力。在单因素试验的基础上,用正交试验法对香椿叶的超声波辅助提取工艺进行优选,选用L16(45)进行正交试验;以黄酮提取量为主,提取物以黄酮计的清除DPPH的ic5... 详细信息

研究运用超声波辅助提取香椿叶中总黄酮的工艺条件和提取物清除DPPH自由基的能力。在单因素试验的基础上,用正交试验法对香椿叶的超声波辅助提取工艺进行优选,选用L16(45)进行正交试验;以黄酮提取量为主,提取物以黄酮计的清除DPPH的ic50值为次参考指标;考察乙醇浓度、固液比、超声提取时间、提取温度、提取次数对香椿叶总黄酮提取量的影响。最佳工艺条件为:25g原料,以料液比1∶10加入70%的乙醇溶液,50℃下每次超声提取60min,提取4次。在此条件下,每克香椿叶可提取总黄酮22.2134mg,提取物以黄酮计的清除DPPH的ic50值为19.1327。

关键词：超声提取香椿叶总黄酮 DPPH ic50

利用BALB/c3T3细胞毒性预测急性经口毒性初试剂量的验证研究

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毒理学杂志 2012年第6期26卷 450-453页

作者：吴智君王雅文程娟中国疾病预防控制中心职业卫生与中毒控制所毒理室北京100050

目的依据经济合作与发展组织(OECD)2010年7月正式发布的导则No.129来验证"利用BALB/c 3T3成纤维细胞预测急性经口毒性试验初始剂量"在国内实验室的可行性和适用性,并为建立细胞毒性试验预测急性经口毒性试验初始剂量试验的操作规程提供... 详细信息

目的依据经济合作与发展组织(OECD)2010年7月正式发布的导则No.129来验证"利用BALB/c 3T3成纤维细胞预测急性经口毒性试验初始剂量"在国内实验室的可行性和适用性,并为建立细胞毒性试验预测急性经口毒性试验初始剂量试验的操作规程提供方法学上的依据。方法将BALB/c 3T3细胞接种于96孔板中,培养1 d后染毒。染毒2 d后,用中性红染色3 h后解吸,于540 nm下用酶标仪测定吸光度(A)值。将原始数据进行处理和拟合分析,得到ic50(抑制细胞活性50%的化学品浓度)后,代入预测模型计算,得到急性经口毒性的LD50推测值。试验所用受试物共8种,分别为二甲基亚砜,乙醇,氯化钠、葡萄糖以及4种本实验室用于大鼠急性经口毒性评价试验的样品。结果根据国内现行的毒性分级标准可知,利用细胞毒性试验得出的受试物的LD50值与文献所报道的或本实验进行的急性经口试验得到LD50值的毒性分级基本一致。结论利用BALB/c 3T3细胞毒性试验可以较为准确的判断急性经口毒性试验的初始剂量。

关键词：细胞实验急性经口毒性替代实验 LD50 ic50

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新型除草剂丙酯草醚的作用机理

植物保护学报 2005年第1期32卷 48-52页

作者：陈杰袁军刘继东付群梅吴军浙江化工科技集团有限公司杭州310023 浙江大学杭州310010 中科院上海有机化学研究所上海200032

采用常规的室内生测和生化方法,开展新型除草剂丙酯草醚的作用机理研究。试验结果表明:同时添加5mg/L 浓度的三种支链氨基酸即缬氨酸、亮氨酸和异亮氨酸能完全恢复丙酯草醚对高粱茎的生长抑制作用,而添加相同浓度的单一支链氨基酸只能... 详细信息

采用常规的室内生测和生化方法,开展新型除草剂丙酯草醚的作用机理研究。试验结果表明:同时添加5mg/L 浓度的三种支链氨基酸即缬氨酸、亮氨酸和异亮氨酸能完全恢复丙酯草醚对高粱茎的生长抑制作用,而添加相同浓度的单一支链氨基酸只能部分消除其抑制作用。离体条件下,丙酯草醚 ic_(50)>100mg/L,而双草醚 ic_(50)值为10^(-5)～10^(-4)mg/L,说明丙酯草醚对离体 ALS 没有抑制作用;活体条件下,丙酯草醚对 ALS 有一定的抑制作用,且随着处理时间的延长,酶活力降低,对 ALS 的抑制作用增加。因此,丙酯草醚使植物体内必需的支链氨基酸合成受阻,仍然属于 ALS 抑制剂,但其作用方式不同于磺酰脲类和嘧啶水杨酸类除草剂等典型的 ALS 抑制剂,它类似于前体农药,即在植物体内通过代谢活化来发挥作用。

关键词：丙酯草醚新型除草剂作用机理支链氨基酸生长抑制作用 ALS抑制剂植物体内生化方法机理研究试验结果异亮氨酸离体条件 ic50 处理时间水杨酸类磺酰脲类作用方式代谢活化缬氨酸双草醚酶活力 AIS 浓度添加

凡纳滨对虾乙酰胆碱酯酶组织分布及对有机磷农药敏感性分析

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上海海洋大学学报 2012年第1期21卷 60-66页

作者：王元周帅房文红周俊芳胡琳琳中国水产科学研究院东海水产研究所农业部海洋与河口渔业资源及生态重点开放实验室上海200090 上海海洋大学水产与生命学院上海201306

采用改进的ELLMAN法测定凡纳滨对虾(Litopenaeusvannamei)脑神经节乙酰胆碱酯酶(acetylcholinesterase,AChE)活性,确定其适宜测定条件,并在此基础上测定对虾不同组织AChE活性,比较毒死蜱、敌敌畏、辛硫磷和乙酰甲胺磷4种有机磷农药对凡... 详细信息

采用改进的ELLMAN法测定凡纳滨对虾(Litopenaeusvannamei)脑神经节乙酰胆碱酯酶(acetylcholinesterase,AChE)活性,确定其适宜测定条件,并在此基础上测定对虾不同组织AChE活性,比较毒死蜱、敌敌畏、辛硫磷和乙酰甲胺磷4种有机磷农药对凡纳滨对虾脑神经节AChE活性的影响。结果表明,温度35℃,磷酸缓冲液pH 7.5时,凡纳滨对虾的AChE活性最高,保温时间对酶活性影响很小;对虾AChE活性存在着明显的组织分布差异性,脑神经节AChE活性最高,为(49.73±8.42)nmol/(min.mg),分别是鳃、肌肉和肝胰腺的3倍、15倍和19倍;对虾AChE对敌敌畏最为敏感,ic50为0.19μg/mL,对毒死蜱和辛硫磷敏感性较强,ic50分别为7.20μg/mL和9.39μg/mL,AChE对乙酰甲胺磷敏感性最弱,ic50为136.77μg/mL。由此可见,对虾养殖中应注意防范敌敌畏、毒死蜱和辛硫磷等有机磷农药的毒性危害。研究亮点:有机磷农药是常用杀虫剂,其残留危害着水产养殖,以前对水产动物毒性研究主要集中在鱼类,很少关注对有机磷农药尤为敏感的对虾。本文优化建立了对虾AChE活性检测方法,评价分析了4种有机磷农药对对虾AChE活性的抑制作用,为今后开展对虾有机磷毒理学研究奠定了基础,也为健康养殖提供了技术支持。

关键词：凡纳滨对虾乙酰胆碱酯酶组织分布有机磷农药 ic50

5-氟尿嘧啶聚乳酸载药纳米微粒对人胃癌和结肠癌细胞株的体外杀伤效应

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中华实验外科杂志 2005年第5期22卷 606-608页

作者：黄开红赵晓龙朱兆华刘建化李东印闵军陈汝福常津刘晓燕中山大学附属第二医院消化科中山大学附属第二医院普外科天津大学材料科学与工程学院纳米生物技术研究所

目的探讨5-氟尿嘧啶聚乳酸载药纳米微粒(5-Fu-PLA-NP)对人胃癌和结肠癌细胞株的体外杀伤效应.方法超声乳化法制备5-Fu-PLA-NP载药纳米微粒;用噻唑蓝(MTT)比色法从1～10 d连续检测1×10-7、1×10-6、1×10-5、1×10-4mol/L浓度5-Fu-PLA-N... 详细信息

目的探讨5-氟尿嘧啶聚乳酸载药纳米微粒(5-Fu-PLA-NP)对人胃癌和结肠癌细胞株的体外杀伤效应.方法超声乳化法制备5-Fu-PLA-NP载药纳米微粒;用噻唑蓝(MTT)比色法从1～10 d连续检测1×10-7、1×10-6、1×10-5、1×10-4mol/L浓度5-Fu-PLA-NP和5-Fu对人胃癌细胞株MGC803和结肠癌细胞株SW620的体外杀伤效应,并计算出2种药物的半数抑制率浓度ic50和对肿瘤细胞的生长抑制率.结果 5-Fu-PLA-NP的体外累积药物释放率在7 d时为75.7%,10 d时达94.3%;5-Fu的杀伤效应在1～7 d时呈时间依赖关系,7 d后进入平台期;5-Fu-PLA-NP则在1～10 d均呈时间依赖关系;7 d时两者在不同剂量的杀伤效应均呈剂量依赖关系,并且两者间差异无统计学意义.结论 5-Fu-PLA-NP具有药物缓释效应,可延长药物对人胃癌与结肠癌细胞的有效作用时间;并且载药纳米微粒没有降低5-Fu成分的生物学活性.

关键词：载药纳米微粒体外杀伤效应结肠癌细胞株 5-氟尿嘧啶聚乳酸 MGC803 人胃癌细胞株 5-Fu 剂量依赖关系有效作用时间时间依赖超声乳化法 mol/L 生长抑制率生物学活性连续检测肿瘤细胞 ic50 不同剂量药物缓释比色法

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蒲公英内生真菌PG23抗癌活性的初步研究

动物医学进展 2012年第9期33卷 78-81页

作者：孙新城李丹罗宇张慧茹郑州轻工业学院食品与生物工程学院河南郑州450002 河南工业大学河南郑州450001 郑州大学河南郑州450001

研究药用植物蒲公英内生真菌PG23多糖对肺癌A549细胞的抑制作用。蒲公英内生真菌PG23通过培养,乙醇沉淀获得粗多糖、苯酚-硫酸法测定多糖含量,采用MTT法测定PG23多糖对肺癌A549细胞的抑制率,并计算半抑制浓度(ic50)。结果表明,PG23发酵... 详细信息

研究药用植物蒲公英内生真菌PG23多糖对肺癌A549细胞的抑制作用。蒲公英内生真菌PG23通过培养,乙醇沉淀获得粗多糖、苯酚-硫酸法测定多糖含量,采用MTT法测定PG23多糖对肺癌A549细胞的抑制率,并计算半抑制浓度(ic50)。结果表明,PG23发酵液中多糖得率为2.754%,多糖含量为26.82%;对A549肺癌细胞的抑制率以第1天为最高;抑制率不与多糖浓度成比例,最佳作用浓度为14.42μg/mL,抑制率为87.63%(Pic50为1.073mg/mL(24h)。PG23发酵液多糖对肺癌A549细胞具有较强的抑制能力。

关键词：蒲公英内生真菌PG23 多糖肺癌A549细胞 ic50