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黑水缬草对老年痴呆模型大鼠脑内iNOS、COX-2和iκb-α表达的影响

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中药材 2010年第4期33卷 581-583页

作者：张忠立左月明王秋红肖洪彬匡海学江西中医学院江西南昌330006 黑龙江中医药大学黑龙江哈尔滨150040

目的:探讨黑水缬草提取物对老年痴呆大鼠大脑皮质神经元和海马神经元炎性反应的影响。方法:利用多因素造成大鼠老年痴呆病理复合模型,采用免疫组化法观察老年痴呆大鼠大脑皮质神经元和海马神经元一氧化氮合酶(iNOS)、环氧合酶-2(COX-2)... 详细信息

目的:探讨黑水缬草提取物对老年痴呆大鼠大脑皮质神经元和海马神经元炎性反应的影响。方法:利用多因素造成大鼠老年痴呆病理复合模型,采用免疫组化法观察老年痴呆大鼠大脑皮质神经元和海马神经元一氧化氮合酶(iNOS)、环氧合酶-2(COX-2)及核因子NF-κb(iκb-α)表达的变化。结果:黑水缬草各剂量及阳性对照药均显示出一定的疗效,效果显著优于模型组和对照组(PiNOS过表达,抑制COX-2活性及减少对核因子NF-κb的激活来实现的。

关键词：黑水缬草老年痴呆一氧化氮合酶环氧合酶-2 iκb-α

芩柏汤通过调节TLR2/iκb-α/iL-1β通路保护溃疡性结肠炎大鼠肠黏膜的研究

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中成药 2022年第8期44卷 2659-2663页

作者：刘雯侯晨辉李江郑州铁路职业技术学院护理学院河南郑州451460 河南省天然药物提取和医疗技术应用工程研究中心河南郑州451460

目的研究芩柏汤是否可通过调节TLR2/iκb-α/iL-1β通路保护溃疡性结肠炎大鼠的肠黏膜。方法建立溃疡性结肠炎大鼠模型并随机分5组,另取9只SD大鼠记为正常组。美沙拉嗪组予以5%美沙拉嗪灌肠,芩柏汤低、中、高剂量组予以6%、12%、24%... 详细信息

目的研究芩柏汤是否可通过调节TLR2/iκb-α/iL-1β通路保护溃疡性结肠炎大鼠的肠黏膜。方法建立溃疡性结肠炎大鼠模型并随机分5组,另取9只SD大鼠记为正常组。美沙拉嗪组予以5%美沙拉嗪灌肠,芩柏汤低、中、高剂量组予以6%、12%、24%芩柏汤灌肠,模型组与正常组予以蒸馏水灌肠。记录DAi和结肠黏膜Luk评分,ELiSA法检测血清iL-1β、iL-4、iL-10水平,HE染色观察病理变化,RT-qRCR法检测TLR2、iκb-α、NF-κb、iL-1β mRNA表达,Western blot法检测蛋白表达及其磷酸化水平。结果美沙拉嗪组和芩柏汤各剂量组均可减轻结肠黏膜组织病理损伤。与模型组比较,美沙拉嗪与芩柏汤各剂量组DAi、Luk评分,血清iL-1β、iL-4水平,结肠黏膜组织TLR2、iκb-α、NF-κb、iL-1β mRNA表达,结肠黏膜组织TLR2、iκb-α、胞核NF-κb、iL-1β、p-iκb-α蛋白表达均降低(PiL-10水平和结肠黏膜组织胞浆NF-κb蛋白表达均升高(Piκb-α/iκb-α表达比值均升高(Piκb-α/iL-1β通路有关。

关键词：芩柏汤溃疡性结肠炎 TLR2 iκb-α iL-1β

曲古抑菌素对肿瘤坏死因子α诱导U937细胞iκb-α蛋白降解的影响

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中国医院药学杂志 2007年第3期27卷 285-288页

作者：崔国惠陈卫华陈燕华中科技大学同济医学院附属协和医院湖北武汉430022

目的:探讨组蛋白去乙酰化酶抑制剂曲古抑菌素(trichostatin A,TSA)与肿瘤坏死因子α(TNF-α)分别或联合作用于人类单核细胞白血病细胞株U937细胞前后,iκb-α蛋白的表达变化及其在NF-κb激活过程中的作用。方法:分别将TSA、TNF-α单独... 详细信息

目的:探讨组蛋白去乙酰化酶抑制剂曲古抑菌素(trichostatin A,TSA)与肿瘤坏死因子α(TNF-α)分别或联合作用于人类单核细胞白血病细胞株U937细胞前后,iκb-α蛋白的表达变化及其在NF-κb激活过程中的作用。方法:分别将TSA、TNF-α单独或联合作用于U937细胞,用免疫印迹法及荧光显微镜检测NF-κb/P65蛋白在该细胞中的表达及定位的变化;流式细胞术和免疫印迹法分析iκb-α蛋白表达的变化。结果:①荧光显微镜观察:分别作用45min后,NF-κb/P65蛋白分布于对照组及TSA处理组的细胞浆;而TNF-α处理组胞浆、胞核中均可见P65蛋白分布;TSA+TNF-α联合处理组仅胞浆表达P65蛋白。免疫印迹结果同样证实,作用相同时间后,TNF-α处理组细胞核表达P65蛋白,TSA+TNF-α联合处理组细胞核内P65蛋白表达较前者明显减少;②流式细胞术结果表明,经相同时间处理后,TSA+TNF-α联合处理组的iκb-α蛋白平均荧光强度较TNF-α处理组明显增高(Pin后,TNF-α处理组细胞iκb-α蛋白表达较对照组明显降低,TSA+TNF-α联合处理组细胞iκb-α的表达较前者明显增高,但在作用2h后二者iκb-α蛋白表达差异无显著性。结论:TSA能部分抑制TNF-α诱导的U937细胞iκb-α的降解,从而抑制NF-κb的激活。TSA有可能通过影响NF-κb信号途径发挥抗肿瘤作用。

关键词： TSA 肿瘤坏死因子α NF-κb/p65 iκb-α U937细胞株

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iκb-α转基因治疗急性肺损伤的研究

IκB-α转基因治疗急性肺损伤的研究

作者：朱自路南京医科大学

学位级别：硕士

急性肺损伤(Acute lung injury,ALi)是由感染等多种因素引起的以中性粒细胞浸润为主的肺组织的炎症反应。以前炎症因子大量释放和抗炎因子减少为特征的过度全身炎症反应，是危重病患者发生急性肺损伤的重要机制。核因子-κb(nuclear fac... 详细信息

急性肺损伤(Acute lung injury,ALi)是由感染等多种因素引起的以中性粒细胞浸润为主的肺组织的炎症反应。以前炎症因子大量释放和抗炎因子减少为特征的过度全身炎症反应，是危重病患者发生急性肺损伤的重要机制。核因子-κb(nuclear factor-kappa b,NF-κb)是大多数细胞因子表达的一个关键性转录调控因子，NF-κb的活化与急性肺损伤发病关系密切，阻断NF-κb活化有可能是治疗急性肺损伤的重要手段。NP-κb抑制蛋白(inhibitory NF-κb,iκb)是NF-κb的抑制剂，本研究克隆了中国人iκb-α基因，通过腺病毒介导iκb-α基因从体外、体内两个水平观察其对NF-κb抑制作用，为将来，临床应用iκb-α转基因治疗急性肺损伤提供实验依据。研究方法： 1．应用脂多糖(LPS)诱导制备小鼠急性肺损伤模型，观察NF-κb在脂多糖诱发的急性肺损伤中的表达。 2．应用RT-PCR从胎盘组织克隆中国人iκb-α基因，并对其进行优化，去除N端32、36位两个编码丝氨酸的密码子(即突变型的iκb-α，ΔN iκb-α)，构建pShuttle／ΔN iκb-α真核表达载体。 3．在以上工作基础上，进一步构建Ad-ΔNiκb-α重组腺病毒载体;同时构建Ad-LacZ重组腺病毒载体。 4．从体外、体内两个水平通过Westernblotting、ELiSA、免疫组化观察ΔNiκb-α对NF-κb抑制作用。南京医科大学硕士学位论文研究结果:1 .NF一Kb在脂多糖诱发的急性肺损伤中呈动态表达。脂多糖腹腔注射后NF一Kb表达在3，J、时达到高峰，随后开始下降。2.△N工Kb一a在细胞水平能明显抑制NF一Kb活化。3.腺病毒载体可以感染肺内的主要细胞(肺泡上皮细胞)，并高效表达目的基因。4.通过Ad一△N 1 Kb一a转基因可以抑制小鼠急性肺损伤炎症模型NF- Kb活化及支气管肺泡灌洗液中性粒细胞比例和TNF一a、工L一6含量的增高。结论: △N iKb一a通过抑制NF一Kb的活化，下调TNF一a、iL一6炎症因子的表达而发挥杭炎和防治急性肺损伤的作用。

关键词：急性肺损伤核因子-Kb iκb-α 腺病毒载体

三叶香茶菜介导iκb-α磷酸化对CCl;致大鼠肝纤维化的影响

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中国比较医学杂志 2022年

作者：周至品农汝楠覃乐刘代华王竟静陈勇王晓源广西医科大学附属柳州市人民医院右江民族医学院广西中医药大学

目的探讨三叶香茶菜通过影响iκb-α及其磷酸化下调核转录因子（nucleartranscriptionfactor，NF）-κb信号通路减轻四氯化碳诱导大鼠肝纤维化。方法采用CCl;肝纤维化大鼠模型，生化检测血清中谷丙转氨酶（ALT）、羟脯氨酸（HYP），ELiS... 详细信息

目的探讨三叶香茶菜通过影响iκb-α及其磷酸化下调核转录因子（nucleartranscriptionfactor，NF）-κb信号通路减轻四氯化碳诱导大鼠肝纤维化。方法采用CCl;肝纤维化大鼠模型，生化检测血清中谷丙转氨酶（ALT）、羟脯氨酸（HYP），ELiSA检测转化生长因子β1（TGF-β1）、α-平滑肌肌动蛋白（α-SMA）水平、白介素-6（iL-6）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α），荧光定量PCR法检测大鼠肝组织Toll样受体4（TLR4）mRNA、NF-κbp65mRNA、NF-κb抑制蛋白-α（iκb-α）mRNA的表达，Westernblot法检测大鼠肝组织中TLR4、NF-κbp65、p-iκb-α蛋白表达，HE染色评价肝组织病理损害。结果与模型组相比较，三叶香茶菜能够显著抑制肝纤维化大鼠中ALT、HYP、TGF-β1、α-SMA、iL-6、TNF-α水平，改善大鼠肝组织病理损害，显著抑制肝纤维化大鼠TLR4mRNA、NF-κbp65mRNA的表达，上调iκb-αmRNA的表达，下调TLR4、NF-κbp65蛋白表达，下调p-iκbα蛋白的表达。结论三叶香茶菜下调iκbα磷酸化，抑制NF-κb信号通路的活化，达到抗肝慢性炎症损伤作用。

关键词：三叶香茶菜肝纤维化 iκb-α p-iκbα NF-κb

三叶香茶菜介导iκb-α磷酸化对CCl_(4)致大鼠肝纤维化的影响

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中国比较医学杂志 2022年第2期32卷 10-15页

作者：周至品农汝楠覃乐刘代华王竟静陈勇王晓源广西医科大学附属柳州市人民医院广西柳州545006 右江民族医学院广西百色533000 广西中医药大学南宁530001

目的探讨三叶香茶菜通过影响iκb-α及其磷酸化下调核转录因子(nuclear transcription factor-κb,NF-κb)信号通路减轻四氯化碳诱导大鼠肝纤维化。方法采用CCl_(4)肝纤维化大鼠模型,生化检测血清中谷丙转氨酶(ALT)、羟脯氨酸(HYP),ELiS... 详细信息

目的探讨三叶香茶菜通过影响iκb-α及其磷酸化下调核转录因子(nuclear transcription factor-κb,NF-κb)信号通路减轻四氯化碳诱导大鼠肝纤维化。方法采用CCl_(4)肝纤维化大鼠模型,生化检测血清中谷丙转氨酶(ALT)、羟脯氨酸(HYP),ELiSA检测转化生长因子β1(TGF-β1)、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)水平、白介素-6(iL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α),荧光定量PCR法检测大鼠肝组织Toll样受体4(TLR_(4))mRNA、NF-κb p65 mRNA、NF-κb抑制蛋白-α(iκb-α)mRNA的表达,Western blot法检测大鼠肝组织中TLR_(4)、NF-κb p65、p-iκb-α蛋白表达,HE染色评价肝组织病理损害。结果与模型组相比较,三叶香茶菜能够显著抑制肝纤维化大鼠中ALT、HYP、TGF-β1、α-SMA、iL-6、TNF-α水平,改善大鼠肝组织病理损害,显著抑制肝纤维化大鼠TLR_(4)mRNA、NF-κb p65 mRNA的表达,上调iκb-αmRNA的表达,下调TLR_(4)、NF-κb p65蛋白表达,下调p-iκb-α蛋白的表达。结论三叶香茶菜下调iκb-α磷酸化,抑制NF-κb信号通路的活化,达到抗肝慢性炎症损伤作用。

关键词：三叶香茶菜肝纤维化 iκb-α p-iκb-α NF-κb

三氧化二砷对哮喘小鼠肺组织iκb-α表达和核因子κb激活的作用

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中国临床康复 2004年第24期8卷 5017-5019,F007页

作者：周林福殷凯生杨玉黄茂张希龙王彤朱自路冯振卿南京医科大学第一附属医院呼吸内科江苏省南京市210029 南京医科大学生化与分子生物学系江苏省南京市210029 南京医科大学病理学系江苏省南京市210029

目的研究三氧化二砷(As2O3)对哮喘小鼠肺组织核因子κb(NF-κb)激活和抑制蛋白iκb-α表达的影响,探讨As2O3抗炎作用的可能机制以及哮喘防治的新思路。方法bALb/c小鼠36只随机分为对照组、哮喘组(卵蛋白末次激发后1,4,12和24h)和As2O3... 详细信息

目的研究三氧化二砷(As2O3)对哮喘小鼠肺组织核因子κb(NF-κb)激活和抑制蛋白iκb-α表达的影响,探讨As2O3抗炎作用的可能机制以及哮喘防治的新思路。方法bALb/c小鼠36只随机分为对照组、哮喘组(卵蛋白末次激发后1,4,12和24h)和As2O3治疗组(4mg/kg),每组6只。Diff-Quick染色观察支气管肺泡灌洗液(bronchoalveolarlavagefluid,bALF)中嗜酸细胞募集特点,电泳迁移率实验和免疫印迹实验分别检测肺组织NF-κb活性和iκb-α表达水平。结果①哮喘组bALF中嗜酸细胞募集[(48.72±5.38)%]较对照组[(0.56±0.21)%]增加(q=33.46,Pb活性均较对照组增加(q=41.84,72.75,61.61,16.32,Piκb-α表达较对照组减少(q=30.94,PbALF中嗜酸细胞募集、肺组织NF-κb活性与iκb-α表达水平均呈负相关(r=-0.82,-0.94,Pb过度激活可能是哮喘慢性气道炎症持续存在的基础;诱导肺组织iκb-α表达和抑制NF-κb激活,可能是As2O3发挥广泛抗炎作用的重要机制。

关键词：三氧化二砷哮喘小鼠肺组织 iκb-α 核因子κb激活

溃结灵对溃疡性结肠炎大鼠结肠黏膜iκb-α蛋白表达的作用

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辽宁中医杂志 2008年第7期35卷 1100-1102页

作者：李红杜群王汝俊王建华李燕舞巫燕莉广州中医药大学中药学院广东广州510006 广州中医药大学脾胃研究所广东广州510405

目的:观察溃结灵对溃疡性结肠炎(UC)大鼠结肠黏膜核转录因子-κb(NF-κb)的抑制蛋白(iκb)-α蛋白表达的作用,对其作用机制进行初步探讨。方法:采用三硝基苯磺酸(TNbS)法制作UC大鼠模型,大鼠随机分为以下6组:正常对照组、模型对照组、... 详细信息

目的:观察溃结灵对溃疡性结肠炎(UC)大鼠结肠黏膜核转录因子-κb(NF-κb)的抑制蛋白(iκb)-α蛋白表达的作用,对其作用机制进行初步探讨。方法:采用三硝基苯磺酸(TNbS)法制作UC大鼠模型,大鼠随机分为以下6组:正常对照组、模型对照组、溃结灵低剂量组、中剂量组、高剂量组、阳性药柳氮磺胺吡啶(SASP)组。治疗10天后处死大鼠取结肠组织,采取免疫组化(iHC)法检测iκb-α的阳性细胞表达率。结果:模型组结肠黏膜iκb-α蛋白阳性细胞表达率明显高于正常对照组(Piκb-α蛋白阳性细胞表达率明显低于模型组(PbS法UC大鼠模型结肠黏膜iκb-α蛋白阳性细胞率明显降低,这可能是其治疗UC作用的机理之一。

关键词：溃结灵溃疡性结肠炎大鼠模型 iκb-α

益气化瘀清热方及其拆方对大鼠肾系膜细胞iκb-α mRNA及蛋白信号通路的影响

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中华中医药杂志 2016年第9期31卷 3742-3744页

作者：翟文生梁丽张霞张建郭庆寅杨濛宋纯东李前前张冰洁河南中医药大学第一附属医院儿科郑州450000 河南中医药大学郑州450000

目的:对益气化瘀清热方进行拆方,观察各类含药血清对脂多糖(LPS)诱导下体外培养的大鼠肾小球系膜细胞(Ms C)表达iκb-αm RNA及其蛋白的影响,探讨不同中药的作用强度以及益气化瘀清热方治疗肾小球肾炎的作用机制。方法:采用RT-PCR法检... 详细信息

目的:对益气化瘀清热方进行拆方,观察各类含药血清对脂多糖(LPS)诱导下体外培养的大鼠肾小球系膜细胞(Ms C)表达iκb-αm RNA及其蛋白的影响,探讨不同中药的作用强度以及益气化瘀清热方治疗肾小球肾炎的作用机制。方法:采用RT-PCR法检测各组含药血清对Ms C表达iκb-αm RNA的影响,Wersten blot法检测各组含药血清对大鼠Ms C表达iκb-α蛋白的影响。结果:各组含药血清均能上调体外培养的Ms C表达iκb-αm RNA及蛋白,清热组作用大于化瘀组、益气组,其中益气组作用最弱,三者之间的差异均有统计学意义(Piκb-αm RNA及其蛋白,复方组作用明显优于其他组,清热组、雷公藤多苷组次之,益气组最弱。

关键词：系膜增生性肾小球肾炎益气化瘀清热方拆方肾小球系膜细胞 iκb-αm RNA iκb-α