检索结果-南通市图书馆

中华皮肤科杂志 2013年第11期46卷 795-799页

作者：王颖樊建勇杨慧兰广州军区广州总医院皮肤科 510010

目的探讨hsa—mir-634在Vero细胞中的功能与作用机制。方法运用生物信息学方法在线预测hsa—mir-634的潜在靶基因细胞周期蛋白Dl（CyclinDl，CCNDl）的结合位点，将含有hsa—mir-634结合位点的CCNDl的3’UTR片段连人psi—CHECK2载体，... 详细信息

目的探讨hsa—mir-634在Vero细胞中的功能与作用机制。方法运用生物信息学方法在线预测hsa—mir-634的潜在靶基因细胞周期蛋白Dl（CyclinDl，CCNDl）的结合位点，将含有hsa—mir-634结合位点的CCNDl的3’UTR片段连人psi—CHECK2载体，构建双荧光报告基因载体。通过定点突变的方法突变hsa—mir-634和CCNDl的结合位点，构建双荧光报告突变基因载体。将构建的重组质粒转染293T细胞，进行双荧光检测；将化学合成的hsa—mir-634模拟物转染Vero细胞，荧光定量PCR和Western印迹法检测hsa—mir-634对内源性CCNDlmRNA水平和蛋白水平表达的影响，MTS法检测hsa—mir-634对Veto细胞增殖能力的影响，流式细胞仪检测hsa—mir-634对Vero细胞凋亡的影响。结果用生物信息学方法成功预测到hsa—mir-634与CCNDl的结合位点；测序结果显示，野生型及突变型CCND13’UTR序列成功连接到psi—CHECK2报告基因载体；双荧光检测结果显示，过表达hsa—mir-634可以抑制荧光素酶的表达。过表达hsa—mir-634后，其靶基因CCNDl在mRNA水平上无明显变化，但可以显著影响CCNDl蛋白的表达。过表达hsa—mir-634可抑制Vero细胞增殖，这种抑制作用在转染后第4天最为明显。另外，过表达hsa—mir-634可诱导Veto细胞的凋亡，空白细胞组、阴性对照组及hsa—mir-634过表达组晚期凋亡的比例分别为8．03％、7．96％和17．33％。结论hsa—mir-634通过影响CCND1的表达影响Vero细胞的增殖和凋亡。

关键词：细胞周期蛋白D1 Vero细胞细胞凋亡细胞增殖疱疹病毒2型人 hsa—mir-634

来源：

维普期刊数据库

同方期刊数据库评论

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

欢迎您,

建议与咨询留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

时间限定

文献类型

馆藏选择

核心期刊

语言

文献类型

帮助

文字说明：

检索规则说明：

检索范例：

分类表

所选分类

限定检索结果

文献类型

馆藏范围

日期分布

学科分类号

主题

机构

作者

语言

在线全文

请选择保存的检索档案：

请选择收藏分类：

通借通还

欢迎您,

建议与咨询 留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

时间限定

文献类型

馆藏选择

核心期刊

语言

文献类型

帮助

文字说明：

检索规则说明：

检索范例：

分类表

所选分类

限定检索结果

文献类型

馆藏范围

日期分布

学科分类号

主题

机构

作者

语言

在线全文

请选择保存的检索档案： 新增检索档案 确定 取消

请选择收藏分类： 新增自定义分类 确定 取消

通借通还

建议与咨询留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

请选择保存的检索档案：

请选择收藏分类：