检索结果-南通市图书馆

世界科学技术-中医药现代化 2024年第5期 1233-1241页

作者：石萍张德利邢康康游华建谭发银鲁增辉重庆中医药学院重庆市中药研究院中国中医科学院中药资源中心重庆分中心

目的克隆获得水蛭Hirudo nipponia弹性蛋白酶抑制剂（guamerin）基因hngua，并对其进行生物信息学分析、蛋白原核表达、时空表达模式等研究，以期为揭示水蛭抗凝类小分子物质生物合成途径、分子调控机理机制奠定基础。方法以日本医蛭... 详细信息

目的克隆获得水蛭Hirudo nipponia弹性蛋白酶抑制剂（guamerin）基因hngua，并对其进行生物信息学分析、蛋白原核表达、时空表达模式等研究，以期为揭示水蛭抗凝类小分子物质生物合成途径、分子调控机理机制奠定基础。方法以日本医蛭为研究对象，基于前期转录组数据，采用cDNA末端快速扩增方法（Rapid amplification of cDNA ends,RACE）获取hngua基因全长，并进行生物信息学分析；构建原核表达载体pET32a-hngua，并转化至大肠杆菌E. coli BL21(DE3)感受态细胞，诱导重组蛋白的表达；通过实时荧光定量检测了水蛭不同吸食阶段4个组织的hngua基因表达模式。结果 hngua基因cDNA全长507 bp(GenBank登录号OP490295)，开放阅读框（Open reading frame,ORF）231 bp，编码76个氨基酸，蛋白分子量和理论等电点分别为8.17 kDa和4.44，包含一段长19个氨基酸的信号肽序列。多重比对分析结果显示，hngua蛋白与其他蛭类抑制剂基因编码蛋白具有较高的同源性。原核表达分析结果显示，构建的pET32ahngua载体能在大肠杆菌BL21(DE3)中成功表达，SDS-PAGE结果显示，诱导的重组表达蛋白相对分子质量在6 kDa左右，与预测大小一致。实时荧光定量PCR结果表明，hngua基因存在时空表达差异，其主要在皮肤和嗉囊组织中表达。结论该研究首次在日本医蛭中克隆得到hngua基因，使其重组蛋白在大肠杆菌中成功表达，并且进一步研究了该基因的时空表达模式，为后续深入研究该基因功能奠定基础，同时对于不依赖于水蛭药材直接生产活性成分，加快实现中药现代化进程具有重要的理论和实践意义。

关键词：日本医蛭 hngua 生物信息学分析原核表达表达模式

来源：

同方期刊数据库

同方期刊数据库评论

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

欢迎您,

建议与咨询留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

时间限定

文献类型

馆藏选择

核心期刊

语言

文献类型

帮助

文字说明：

检索规则说明：

检索范例：

分类表

所选分类

限定检索结果

文献类型

馆藏范围

日期分布

学科分类号

主题

机构

作者

语言

在线全文

请选择保存的检索档案：

请选择收藏分类：

通借通还

欢迎您,

建议与咨询 留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

时间限定

文献类型

馆藏选择

核心期刊

语言

文献类型

帮助

文字说明：

检索规则说明：

检索范例：

分类表

所选分类

限定检索结果

文献类型

馆藏范围

日期分布

学科分类号

主题

机构

作者

语言

在线全文

请选择保存的检索档案： 新增检索档案 确定 取消

请选择收藏分类： 新增自定义分类 确定 取消

通借通还

建议与咨询留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

请选择保存的检索档案：

请选择收藏分类：