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heymann肾炎受体相关蛋白的研究进展

第二军医大学学报 2001年第5期22卷 484-486页

作者：冯金忠赵学智解放军第98医院内科浙江湖州313000 第二军医大学长征医院肾内科上海200003

gp330 (m egalin)和受体相关蛋白 (RAP)组成 Heym ann肾炎抗原复合物 (HNA C) ,它们以二聚体复合物的形式共同暴露于肾近曲小管刷状缘和肾小球上皮足突被膜小凹处。RAP可以和 gp330及低密度脂蛋白受体相关蛋白 (L RP)结合。通过 RAP肝... 详细信息

gp330 (m egalin)和受体相关蛋白 (RAP)组成 Heym ann肾炎抗原复合物 (HNA C) ,它们以二聚体复合物的形式共同暴露于肾近曲小管刷状缘和肾小球上皮足突被膜小凹处。RAP可以和 gp330及低密度脂蛋白受体相关蛋白 (L RP)结合。通过 RAP肝素结合位点 ,肾小球上皮下免疫复合物脱落与肾小球基底膜结合 ,最终导致基底膜的损害。RAP在氨基端及羧基端均存在病理性表型 ,参与被动性

关键词：肾小球肾炎受体相关蛋白病理性抗原 heymann肾炎

heymann肾炎原位免疫复合物形成机理的分子学研究

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中华肾脏病杂志 1996年第1期12卷 7-10页

作者：朱爱平张卫苏蒋季杰李晓宇达展云胡迎青南通医学院附属医院肾内科南通医学院附属医院分子生物研究室

通过受体相关蛋白（ＲＡＰ）ｃＤＮＡ探针，用组织原位杂文技术首次证明了ＲＡＰｍＲＮＡ在肾小球细胞中的表达。进一步通过ＲＡＰ融会蛋白抗血清的体外间接免疫荧光，免疫电镜和体内结合试验的直接免疫荧光和免疫电镜表明肾小球细胞中... 详细信息

通过受体相关蛋白（ＲＡＰ）ｃＤＮＡ探针，用组织原位杂文技术首次证明了ＲＡＰｍＲＮＡ在肾小球细胞中的表达。进一步通过ＲＡＰ融会蛋白抗血清的体外间接免疫荧光，免疫电镜和体内结合试验的直接免疫荧光和免疫电镜表明肾小球细胞中表达ＲＡＰ细胞为肾小球上皮足突细胞，循环抗体能与其结合形成免疫复合物并刺激足突细胞内新抗原的不断合成，使得免疫复合物不断增大。从基因水平为Ｈｅｙｍａｎｎ肾炎（ＨＮ）原位免疫复合物形成机理提供了实验依据，也为今后的基因抑制治疗提供了可能性。

关键词： heymann肾炎受体相关蛋白原位杂交免疫复合物

heymann肾炎自身单克隆抗体C_（3－6）制备和特征

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中华肾脏病杂志 1996年第6期12卷 343-346页

作者：朱爱平张卫苏蒋季杰刘运义钱桐荪南通医学院附属医院肾内科

为了进一步研究Ｈｅｙｍａｎｎ肾炎（ＨＮ）的病理损伤机制，发展有效的治疗手段。方法应用大鼠肾小管刷状缘抗原ＦＸＩＡ免疫近交系Ｌｅｗｉｓ大鼠，诱导了主动型ＨＮ模型。并用该ＨＮ大鼠的淋巴细胞与小鼠ＳＰ２／０骨髓瘤细胞融合，... 详细信息

为了进一步研究Ｈｅｙｍａｎｎ肾炎（ＨＮ）的病理损伤机制，发展有效的治疗手段。方法应用大鼠肾小管刷状缘抗原ＦＸＩＡ免疫近交系Ｌｅｗｉｓ大鼠，诱导了主动型ＨＮ模型。并用该ＨＮ大鼠的淋巴细胞与小鼠ＳＰ２／０骨髓瘤细胞融合，建立异种大鼠／小鼠之间的杂交瘤细胞株，产生了大鼠抗致病原Ｃ３－６自身单克隆抗体（ＭｃＡｂ）。结果ＳＤＳ－ＰＡＧＥ和Ｗｅｓｔｅｒｎ－Ｂｌｏｔ显示，ＭｃＡｂＣ３－６识别分子量为３３００００的刷状缘抗原。ＭｃＡｂＣ３－６诱导的被动型ＨＮ大鼠免疫组化和免疫电镜表明该ＭｃＡｂＣ３－６在体内识别肾小球基底膜上皮足突表面抗原，并与之结合形成免疫沉积，其识别的抗原分布与文献报导ｇｐ３３０抗原分布相似。结论证明ＭｃＡｂＣ３－６是针对致病原ｇｐ３３０的自身ＭｃＡｂ。

关键词：肾炎 heymann肾炎单克隆抗体致病原

heymann肾炎RAP全长及氨基端融合蛋白表达载体的构建及表达

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山东医药 2009年第4期49卷 32-35页

作者：达展云范亚平董海霞施岚施辉陈晓岚南通大学附属医院江苏南通226001

目的构建大鼠heymann肾炎致病源RAP全长和氨基端多肽原核融合表达载体,表达并纯化融合蛋白。方法采用RT-PCR法获得RAP全长的cDNA,将其与pGEM-T克隆载体连接并转化,筛选阳性克隆测序;设计针对RAP全长和氨基端的引物进行PCR扩增,获得相应... 详细信息

目的构建大鼠heymann肾炎致病源RAP全长和氨基端多肽原核融合表达载体,表达并纯化融合蛋白。方法采用RT-PCR法获得RAP全长的cDNA,将其与pGEM-T克隆载体连接并转化,筛选阳性克隆测序;设计针对RAP全长和氨基端的引物进行PCR扩增,获得相应的DNA。纯化后与PGEX-4T-1载体连接,亚克隆到感受态细菌BL21中,经IPTG诱导,表达融合蛋白并纯化,经SDS-PAGE和Western Blot检验。结果酶切分析、PCR及DNA序列测定结果表明成功构建了重组原核表达载体pGEX-4T-1-RAP1083/258,并表达出RAP全长70kD和氨基端36kD的融合蛋白。Western Blot结果显示分别在70、36 kD处出现特异性条带,与理论相符。结论RAP1083/258与pGEX-4T-1融合基因表达载体的成功构建及其融合蛋白在大肠杆菌中的高效表达,为后续研究RAP不同区段在heymann肾炎发病机制中的作用奠定了基础。

关键词： heymann肾炎受体相关蛋白原核表达载体融合蛋白

heymann肾炎受体相关蛋白融合蛋白的实验研究

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上海免疫学杂志 2000年第2期20卷 97-100页

作者：达展云张卫苏南通医学院附属医院江苏南通 226001 南通医学院分子生物学研究室江苏南通

通过Ｈｅｙｍａｎｎ肾炎受体相关蛋白的研究，探讨Ｈｅｙｍａｎｎ肾炎的分子发病机制。运用基因重组技术，将编码受体相关蛋白羧基端１０８个氨基酸多肽的ｃＤＮＡ克隆到大直菌高效表达载体ｐＧＥＸ。通过异丙基硫代－β－Ｄ－半乳糖苷... 详细信息

通过Ｈｅｙｍａｎｎ肾炎受体相关蛋白的研究，探讨Ｈｅｙｍａｎｎ肾炎的分子发病机制。运用基因重组技术，将编码受体相关蛋白羧基端１０８个氨基酸多肽的ｃＤＮＡ克隆到大直菌高效表达载体ｐＧＥＸ。通过异丙基硫代－β－Ｄ－半乳糖苷（ＩＰＴＧ）诱导，表达了分子量为４４×１０＾３的融合蛋白。经ＧＳＴ－Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ４Ｂ亲和性层析柱，纯化了融合蛋白。

关键词： heymann肾炎受体相关蛋白重组融合蛋白

heymann肾炎致病原受体相关蛋白羧基端病理性抗原决定簇的定位

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肾脏病与透析肾移植杂志 1997年第1期6卷 23-26页

作者：达展云钱桐荪蒋季杰朱爱平南通医学院附属医院肾内科

目的：探讨Ｈｅｙｍａｎｎ肾炎（ＨＮ）致病原受体相关蛋白（ＲＡＰ）羧基端１０８个氨基酸多肽链上是否存在致肾炎的抗原决定簇。方法：应用ＮｅｓｔｅｄＰＣＲ技术，扩增了编码ＲＡＰ羧基端１０８个氨基酸多肽链的ｃＤＮＡ。应用基因... 详细信息

目的：探讨Ｈｅｙｍａｎｎ肾炎（ＨＮ）致病原受体相关蛋白（ＲＡＰ）羧基端１０８个氨基酸多肽链上是否存在致肾炎的抗原决定簇。方法：应用ＮｅｓｔｅｄＰＣＲ技术，扩增了编码ＲＡＰ羧基端１０８个氨基酸多肽链的ｃＤＮＡ。应用基因重组及亚克隆技术，高效表达了特异性的ＲＡＰ融合蛋白（ＲＡＰ－ｆｐ），并制备了针对该ＲＡＰ－ｆｐ的多抗血清。结果：该多抗血清体外免疫荧光定位于肾小管刷状缘。体内结合试验的直接免疫荧光和免疫电镜表明，在肾小球足突细胞和肾小球基膜之间，形成了典型的被动型Ｈｅｙｍａｎｎ肾炎（ＰＨＮ）免疫复合物。结论：本实验说明天然羧基端ＲＡＰ在体内能被循环抗体结合，在原位形成免疫复合物。首次证明了在ＲＡＰ羧基端１０８个氨基酸多肽链上至少存在一个病理性抗原决定簇。

关键词： heymann肾炎受体相关蛋白病理性抗原决定簇

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heymann肾炎抗原的研究进展

肾脏病与透析肾移植杂志 1996年第4期5卷 55-58页

作者：姚小丹南京军区南京总医院210002

Ｈｅｙｍａｎｎ肾炎抗原的研究进展姚小丹关键词Ｈｅｙｍａｎｎ肾炎抗原膜性肾病中图法分类号Ｒ－３３Ｈｅｙｍａｎｎ（ＨＮ）肾炎是人类原发性膜性肾病的经典动物肾炎模型。１９５９年，Ｈｅｙ－ｍａｎｎ和其同僚采用肾皮质均浆及Ｆｒ... 详细信息

Ｈｅｙｍａｎｎ肾炎抗原的研究进展姚小丹关键词Ｈｅｙｍａｎｎ肾炎抗原膜性肾病中图法分类号Ｒ－３３Ｈｅｙｍａｎｎ（ＨＮ）肾炎是人类原发性膜性肾病的经典动物肾炎模型。１９５９年，Ｈｅｙ－ｍａｎｎ和其同僚采用肾皮质均浆及Ｆｒｅｕｎｄ佐剂免疫大鼠，在６～８周后...

关键词： heymann肾炎抗原膜性肾病肾疾病

石榴皮鞣质对被动型heymann肾炎大鼠肾组织足细胞nephrin和podocin表达的影响

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中国药学杂志 2021年第5期56卷 351-358页

作者：李巧玲周静吴玥周本宏武汉大学药学院武汉430072 武汉大学人民医院药学部武汉430060

目的通过构建被动型heymann肾炎(passive heymann nephritis,PHN)大鼠模型,观察石榴皮鞣质对PHN大鼠肾组织足细胞nephrin和podocin表达的影响。方法将健康雄性SD大鼠随机分为6组(n=6):假手术组、模型组、贝那普利组(10 mg·kg^(-1))、... 详细信息

目的通过构建被动型heymann肾炎(passive heymann nephritis,PHN)大鼠模型,观察石榴皮鞣质对PHN大鼠肾组织足细胞nephrin和podocin表达的影响。方法将健康雄性SD大鼠随机分为6组(n=6):假手术组、模型组、贝那普利组(10 mg·kg^(-1))、石榴皮鞣质高、中、低剂量组(60,40,20 mg·kg^(-1))。造模成功后,每天灌胃给药1次,直至第5周处死大鼠,取肾脏,免疫组化法检测转化生长因子-β1(TGF-β1)和C3的表达,免疫荧光检测IgG的沉积情况,RT-PCR和Western blot法检测足细胞nephrin和podocin mRNA及蛋白表达情况。结果实验结果显示,与假手术组相比,模型组大鼠TGF-β1和C3表达显著性增多,IgG在肾组织中的沉积也显著性增加,且nephrin和podocin的mRNA及蛋白表达明显降低;与模型组相比,贝那普利组和石榴皮鞣质各剂量组TGF-β1和C3表达显著性降低,IgG的沉积得到改善,nephrin和podocin mRNA及蛋白表达明显升高。结论石榴皮鞣质对被动型heymann肾炎大鼠有较好的治疗作用。

关键词：石榴皮鞣质 heymann肾炎 nephrin podocin

活性氧及转化生长因子-β1在进行性被动heymann肾炎发病中的作用

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中华病理学杂志 2005年第3期34卷 175-176页

作者：邓红李兆丽张东生樊翔刘东风苏宁东南大学基础医学院病理学与病理生理学系

通过建立进行性被动heymann肾炎(ppHN)模型,用牛磺酸进行抗氧化干预,通过对肾小球中转化生长因子-β1(TGF-β1)及Ⅳ型胶原和纤连蛋白(FN)的表达和血清过氧化物歧化酶(SOD)及MDA水平的检测,探讨活性氧与TGF-β1在ppHN发生发展中的作用。

关键词：进行性 heymann肾炎转化生长因子-β1 HN TGF-β1 发病活性氧 SOD 表达纤连蛋白