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中国现代医学杂志 2009年第20期19卷 3071-3074页

作者：杨一涛唐罗生曾祥云董晓光李学喜袁思奇张海清宋华赣南医学院第一附属医院眼科江西赣州341000 中南大学湘雅二医院眼科湖南长沙410011 山东省眼科研究所(山东省眼科学重点实验室-省部共建国家重点实验室培育基地) 山东青岛266071 福建省泉州市一八零医院眼科福建泉州362000

目的建立视网膜母细胞瘤hxo-rb44细胞裸鼠皮下移植瘤模型,观察不同浓度hxo-rb44细胞的致瘤效果。方法将90只试验动物随机分成A、B、C3个组,每组裸鼠分别皮下注射浓度为1.0×108/mL、2.0×108/mL和3.0×108/mL的hxo-rb44细胞悬液各0.2mL... 详细信息

目的建立视网膜母细胞瘤hxo-rb44细胞裸鼠皮下移植瘤模型,观察不同浓度hxo-rb44细胞的致瘤效果。方法将90只试验动物随机分成A、B、C3个组,每组裸鼠分别皮下注射浓度为1.0×108/mL、2.0×108/mL和3.0×108/mL的hxo-rb44细胞悬液各0.2mL。观察hxo-rb44细胞的成瘤时间、肿瘤生长情况、肿瘤大小及裸鼠摄食和活动状况。结果观察4周后,A组裸鼠无一成瘤。B组裸鼠仅5只成瘤。C组裸鼠有27只造模成功,成瘤率达90.00%。B组裸鼠的平均成瘤时间为21、34、5d,C组裸鼠的平均成瘤时间为18、32、3d,B、C两组时间之间进行比较,Phxo-rb44细胞裸鼠皮下移植瘤的致瘤效果与细胞浓度密切相关。

关键词：视网膜母细胞瘤 hxo-rb44细胞裸鼠皮下移植瘤

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hxo-rb_(44)细胞上清液对ARPE-19细胞内VEGF表达的影响

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眼科研究 2009年第10期27卷 878-882页

作者：杨一涛曾祥云唐罗生李学喜赣南医学院第一附属医院眼科赣州341000 中南大学湘雅二医院眼科长沙410011 泉州市一八○医院眼科 362000

目的探讨hxo-rb44细胞上清液对人视网膜色素上皮(RPE)细胞系ARPE-19细胞内血管内皮生长因子(VEGF)表达的影响及其相关机制。方法分别利用含有10%胎牛血清的RPMI-1640培养基及MEM培养基对hxo-rb44细胞及ARPE-19细胞进行培养,在ARPE-19细... 详细信息

目的探讨hxo-rb44细胞上清液对人视网膜色素上皮(RPE)细胞系ARPE-19细胞内血管内皮生长因子(VEGF)表达的影响及其相关机制。方法分别利用含有10%胎牛血清的RPMI-1640培养基及MEM培养基对hxo-rb44细胞及ARPE-19细胞进行培养,在ARPE-19细胞内加入100μL hxo-rb44细胞上清液,分别干预0、4、8、12、24 h,利用RT-PCR、免疫荧光细胞化学、Western blot等方法,检测不同浓度的MLT干预后24 h ARPE-19细胞内VEGF mRNA及蛋白的表达情况。结果hxo-rb44细胞上清液加入后的不同时间点,VEGF mRNA的表达差异有统计学意义(F=195.072,P=0.000)。随着hxo-rb44细胞上清液作用时间的延长,ARPE-19细胞内VEGF mRNA表达逐渐增高(Phxo-rb44细胞上清液加入后4、8、12、24 h,ARPE-19细胞内VEGF蛋白表达显著增加(F=160.687,P=0.000),其表达与ARPE-19细胞内VEGF mRNA表达方式相同(Phxo-rb44细胞上清液作用时间的延长,ARPE-19细胞内绿荧光蛋白强度逐渐增加。结论hxo-rb44细胞上清液能促进ARPE-19细胞内VEGF的表达。

关键词：视网膜母细胞瘤血管内皮生长因子 ARPE-19 hxo-rb44细胞

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TRAIL联合DDP对人视网膜母细胞瘤株hxo-rb44的增殖抑制作用

TRAIL联合DDP对人视网膜母细胞瘤株HXO-Rb44的增殖抑制作用

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作者：单将成昆明医学院

学位级别：硕士

目的：通过研究TRAIL对人视网膜母细胞瘤株hxo-rb44细胞的增殖抑制率、细胞周期的影响、诱导细胞凋亡的情况等,探讨TRAIL对hxo-rb44细胞的增殖抑制作用。通过研究TRAIL与DDP联合应用对hxo-rb44细胞的增殖抑制作用,探讨TRAIL与DDP联合化... 详细信息

目的：通过研究TRAIL对人视网膜母细胞瘤株hxo-rb44细胞的增殖抑制率、细胞周期的影响、诱导细胞凋亡的情况等,探讨TRAIL对hxo-rb44细胞的增殖抑制作用。通过研究TRAIL与DDP联合应用对hxo-rb44细胞的增殖抑制作用,探讨TRAIL与DDP联合化疗方案如何减少药物的用药剂量,增强药物疗效,并为临床应用提供细胞学研究依据。方法：体外培养人视网膜母细胞瘤细胞株hxo-rb44细胞,采用对数生长期的细胞进行实验。TRAIL以五种不同浓度(10ng/ml、50ng/ml、100ng/ml、200ng/ml、500ng/ml), DDP以四种不同浓度(1.0mg/L、10.0 mg/L、20.0 mg/L和50.0mg/L),分别单独作用于hxo-rb44细胞,在24小时、48小时、72小时后,用MTT比色法检测相应的肿瘤细胞增殖抑制率,并观察在不同时间段TRAIL与DDP对细胞形态及凋亡的影响。根据上述实验结果,选取对hxo-rb44细胞有明显抑制作用的TRAIL浓度T(200ng/ml TRAIL)和DDP浓度D(10.0 mg/L DDP)为基准,分别设计三种浓度梯度为：1/2T、T、2T,1/2D、D、2D,分别作用于hxo-rb44细胞,并分别在24小时、48小时、72小时后,用流式细胞术PI单染法测定细胞周期变化,TUNEL法检测细胞凋亡的情况。倒置显微镜下观察hxo-rb44细胞的微观形态学改变。选用T浓度TRAIL作用48小时的hxo-rb44细胞进行透射电镜观察。取TRAIL(T代表200ng/ml TRAIL的浓度)与DDP(D代表10.0 mg/L DDP的浓度)分别配成四种方案,即实验组(T+1/2D、T+D、1/2T+D、2T+D),并设阴性对照组和阳性对照组(D、1/2T、T、2T),以上各组分别作用于hxo-rb44细胞,分别在24小时、48小时、72小时后,用MTT法检测细胞增殖抑制率。结果：一、TRAIL作用于hxo-rb44细胞对其增殖抑制作用较为明显。TRAIL浓度为200ng/ml时,细胞抑制率明显增加。TRAIL作用于hxo-rb44细胞48小时对该细胞的增殖抑制率最大,之后细胞增殖抑制率有下降趋势。流式细胞仪细胞周期检测显示：TRAIL作用24小时、48小时、72小时后G2/M期、G0/G1期及S期细胞所占比率,分别与对照组比较,差异缺乏统计学意义(P>0.05)。流式细胞仪TUNEL法检测细胞凋亡显示：100ng/ml TRAIL作用于hxo-rb44细胞24小时、48小时、72小时后,细胞凋亡率分别是：3.13%±0.09%、26.17%±1.04%、50.04%±0.91%、200ng/ml*TRAIL作用于hxo-rb44细胞24小时、48小时、72小时后,细胞凋亡率分别是：3.43%±0.37%、29.25%±0.67%、58.91%±0.2%。400ng/ml TRAIL作用于hxo-rb44细胞24小时、48小时、72小时后,细胞凋亡率分别是：23.89%±0.85%、51.65%±1.06%、60.32%±0.63%。三个TRAIL实验组的细胞凋亡率在48小时、72小时均高于对照组,两两比较差异有统计学意义(P细胞凋亡率两两比较差异有统计学意义(P细胞凋亡率增加,呈量效时效相关性。倒置显微镜下观察：细胞逐渐减少甚至稀疏,粘附成团的细胞结合力下降,出现松散漂浮个体。随着用药浓度的增加和作用时间的延长,细胞有越来越稀疏的趋势。透射电镜下观察：细胞核发生染色体边集、固缩,新月体形成,电子密度增强,线粒体体积增大,肿胀呈空泡状,可见细胞丫生出泡现象,形成典型的凋亡小体。二、MTT法检测不同药物浓度方案在24小时、48小时、72小时后对hxo-rb44细胞的增殖抑制率显示：实验组TRAIL与DDP搭配的治疗方案,细胞抑制率均有明显提高,分别与单独应用TRAIL和DDP的阳性对照组比较显著性差异有统计学意义(P细胞增殖抑制率均在48小时时最大,之后有下降趋势。结论：1. TRAIL对hxo-rb44细胞有增殖抑制作用,48小时内抑制作用随时间延长而增大,其后抑制作用有逐渐降低趋势。2. TRAIL对hxo-rb44的细胞周期没有明

关键词： hxo-rb44细胞 TRAIL DDP 细胞周期凋亡

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褪黑素对裸鼠hxo-rb_(44)细胞皮下移植瘤的抑制作用

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眼科新进展 2009年第11期29卷 815-820页

作者：杨一涛唐罗生曾祥云董晓光李学喜袁思奇刘艳芳赣南医学院第一附属医院眼科江西省赣州市341000 中南大学湘雅二医院眼科湖南省长沙市410011 山东省眼科研究所山东省眼科学重点实验室山东省青岛市266071 福建省泉州市180医院眼科 362000

目的研究褪黑素(melatonin,MLT)对裸鼠hxo-rb44细胞皮下移植瘤的生长抑制作用及其相关机制。方法50只裸鼠视网膜母细胞瘤(retinoblastoma,rb)皮下移植瘤模型,随机分成5组,每组10只:A组为阴性对照组;B组、C组、D组分别为低、中、高浓度ML... 详细信息

目的研究褪黑素(melatonin,MLT)对裸鼠hxo-rb44细胞皮下移植瘤的生长抑制作用及其相关机制。方法50只裸鼠视网膜母细胞瘤(retinoblastoma,rb)皮下移植瘤模型,随机分成5组,每组10只:A组为阴性对照组;B组、C组、D组分别为低、中、高浓度MLT治疗组;E组为阳性对照组。低、中、高浓度MLT治疗组分别按每只每次腹腔注射MLT20 ***-1、***-1、60 ***-1各2 mL进行给药,阴性对照组注射等量生理盐水,阳性对照组每只每次腹腔注射等量足叶乙甙(4 ***-1);每天给药1次,共7 d。观察各组裸鼠皮下移植瘤生长情况、裸鼠体质量的变化。采用组织病理学检查,观察裸鼠移植瘤的形态学特征;采用免疫组织化学、Western blotting检测肿瘤细胞血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)、细胞间黏附分子-1(intercellular adhesion molecule-1,ICAM-1)的表达情况。结果E组白细胞、血红蛋白、血小板计数值及谷丙转氨酶、谷草转氨酶、次黄嘌呤核苷值与A组相比,差异均有统计学意义(P均0.05);不同时间点B组、C组、D组裸鼠体质量与A组比较,差异无统计学意义(P>0.05);B组裸鼠皮下移植瘤肿瘤质量与A组相比,差异无统计学意义(P>0.05),表明低剂量的MLT对裸鼠移植瘤的生长无抑制作用,C组、D组与A组进行比较,差异均有显著统计学意义(P均44.52%;组织病理学检查发现MLT治疗组及E组肿瘤内出血、坏死的程度明显高于阴性对照组,免疫组织化学及Western blotting检测发现MLT治疗组VEGF、ICAM-1及其蛋白的表达明显低于阴性对照组;MLT的治疗剂量与VEGF、ICAM-1蛋白的表达呈高度负相关。结论MLT对hxo-rb44细胞皮下移植瘤生长有抑制作用;MLT能抑制裸鼠移植瘤内VEGF、ICAM-1蛋白的表达,其浓度与VEGF、ICAM-1蛋白的表达呈高度负相关。

关键词：褪黑素 hxo-rb44细胞裸鼠移植瘤

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