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Asian Pacific Journal of Tropical Biomedicine 2020年第7期10卷 333-340页

作者： Bhavana Sivakumar Sri Rahavi Boovarahan Gino A Kurian Vascular Biology Lab School of Chemical and BiotechnologySASTRA Deemed UniversityThanjavurIndia

Objective:To compare the anti-proliferative effect of sodium thiosulfate on human colorectal cancer cells(HT-29)and normal small intestine cells(IEC6).Methods:Cells(HT-29 and IEC6)were treated with different concentrations of sodium thiosulfate ranging from 0.5 m M to 80 m M for 24 h.Cell viability was measured via crystal violet and MTT assays.HT-29 cells were further treated in the presence and absence of mitochondrial electron transport chain(ETC)inhibitors,KATP channel opener and closer and H2S inhibitors for 24 h followed by sodium thiosulfate in order to study their respective roles in the anti-proliferative activity of sodium thiosulfate.Results:The IC50 values of sodium thiosulfate on HT-29 cells were 40.93 m M and 42.45 m M by crystal violet and MTT assay whereas,in the case of IEC6 cells,the values were 45.17 m M and 47.22 m M.The inhibition of endogenous H2S enzymes and KATP channel induced no change in the anti-proliferative capacity of sodium thiosulfate.However,the anti-proliferative activity of sodium thiosulfate was enhanced in the presence of mitochondrial ETC inhibitors.Conclusions:HT-29 cell growth is effectively attenuated by sodium thiosulfate and the anti-proliferative activity of sodium thiosulfate is enhanced in the presence of mitochondrial ETC inhibitors.

关键词： Colorectal cancer Sodium thiosulfate HT-29 IEC6 Mitochondria Rotenone Clonogenic assay

萝卜硫素下调结直肠癌中eIF4F翻译起始复合物的表达

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安徽医科大学学报 2022年第10期57卷 1645-1649,1655页

作者：邢运周大臣贺良崔笑喻宗繁安徽医科大学第二附属医院普外科合肥230601

目的研究eIF4F复合物的表达与人类结直肠癌(CRC)的相关性,以及萝卜硫素(SFN)影响CRC细胞增殖的可能机制。方法应用免疫组织化学染色法检测12例CRC患者的肿瘤组织与癌旁组织中eIF4F复合物相关蛋白的表达水平;MTT比色法检测经SFN处理后CR... 详细信息

目的研究eIF4F复合物的表达与人类结直肠癌(CRC)的相关性,以及萝卜硫素(SFN)影响CRC细胞增殖的可能机制。方法应用免疫组织化学染色法检测12例CRC患者的肿瘤组织与癌旁组织中eIF4F复合物相关蛋白的表达水平;MTT比色法检测经SFN处理后CRC细胞的活性;Western blot法检测经SFN处理后CRC细胞中eIF4F复合物相关蛋白的表达;动物实验(裸鼠成瘤)比较腹腔注射SFN后裸鼠皮下肿瘤的生长情况,采用免疫组织化学染色法检测PI3K/AKT/mTOR/4EBP1信号通路相关蛋白和eIF4F复合物相关蛋白的表达。结果在CRC患者标本中,eIF4F复合物相关蛋白在肿瘤组织细胞中表达高于癌旁组织,差异有统计学意义(P<0.01)。SFN对CRC细胞的增殖起抑制作用,且浓度越高,抑制能力越强。SFN能抑制CRC细胞生长发育,并下调CRC细胞中eIF4F复合物的表达。结论eIF4F复合物的表达与CRC的发展密切相关,SFN可能通过PI3K/AKT/mTOR/4EBP1信号通路影响eIF4F复合物的上调,从而影响CRC细胞的发展。

关键词：结直肠癌萝卜硫素 eIF4F复合物 HT-29 4EBP1 免疫组化

Anticancer potential of Alternanthera sessilis extract on HT-29 human colon cancer cells

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Asian Pacific Journal of Tropical Biomedicine 2018年第8期8卷 394-402页

作者： Sivapragasam Gothai Katyakyini Muniandy Norhaizan Mohd Esa Suresh Kumar Subbiah Palanisamy Arulselvan Laboratory of Vaccines and Immunotherapeutics Institute of Bioscience Universiti Putra Malaysia Department of Nutrition and Dietetics Faculty of Medicine and Health Sciences Universiti Putra Malaysia Department of Medical Microbiology and Parasitology Faculty of Medicine and Health Sciences Universiti Putra Malaysia Muthayammal Centre for Advanced Research Muthayammal College of Arts and Science Scigen Research and Innovation Pvt. Ltd. Periyar Technology Business Incubator

Objective: To identify the bioactive extracts from Alternanthera sessilis and investigate its cytotoxicity potential against colon cancer cells, HT-29. Methods: This study examined the effects of three parts(aerial, leaf, stem) of whole plant on HT-29 colon cancer cell lines. Three different extracts from the plant parts were prepared by maceration technique using 80% ethanol. The anticancer activities were determined using MTT, clonogenic, cell motility and AOPI assay. The chemical composition profiling was analyzed by GC-MS. Results: Among three plant part extracts, leaf extract greatly suppressed the growth of colon cancer cells in time and dosage-dependent manner, followed by aerial and stem. The cytotoxicity results were rationalized with clonogenic, cell motility and AO/PI assay, where extract showed the most active activity compared to aerial and stem extracts. GC-MS analysis of leaf extract showed there were various recognized anti-cancer, anti-oxidant and anti-inflammatory compounds. Conclusions: Amid the screened extracts, the leaf extract exhibits the credible cytotoxic, anti-proliferative and apoptotic activity and hence, our findings call for additional research to conclude the active compounds and their mechanisms determining the apoptotic activity.

关键词： Alternanthera sessilis Colorectal cancer Anticancer HT-29 Apoptosis

清肠化湿方对HT-29细胞IL-6/JAK2/STAT3的影响

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中国药理学通报 2015年第6期31卷 883-885页

作者：赵青春沈洪程海波朱磊李沐涵南京中医药大学第一临床医学院江苏南京210046 江苏省中医院消化内科江苏南京210029

溃疡性结肠炎（ulcerative colitis,UC）是一种反复发作的肠道慢性非特异性炎症性疾病,发病机制尚未明确,细胞因子IL-6及其介导的信号通路在非可控性肠道炎症过程中起关键作用[1]。导师沈洪教授所拟清肠化湿方（QHR）,治疗轻、中度UC,... 详细信息

溃疡性结肠炎（ulcerative colitis,UC）是一种反复发作的肠道慢性非特异性炎症性疾病,发病机制尚未明确,细胞因子IL-6及其介导的信号通路在非可控性肠道炎症过程中起关键作用[1]。导师沈洪教授所拟清肠化湿方（QHR）,治疗轻、中度UC,取得良好效果[2]。

关键词：清肠化湿方溃疡性结肠炎 HT-29 IL-6 JAK2 STAT3

基于三维细胞模型的反式白藜芦醇对HT-29增殖凋亡影响及机制研究

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营养学报 2018年第4期40卷 366-370页

作者：李美英冯观萍王弘杨瑞丽孙远明华南农业大学食品学院广东省食品质量安全重点实验室广州510642

目的探讨反式白藜芦醇(trans-resveratrol,trans-Res)对人结肠癌HT-29细胞的生长抑制和凋亡诱导作用及机制。方法以鼠尾I型胶原为支架建立HT-29三维细胞模型,以5氟尿嘧啶(5-Fu)为阳性对照,采用CCK-8(Cell Counting Kit-8)方法、Annexin ... 详细信息

目的探讨反式白藜芦醇(trans-resveratrol,trans-Res)对人结肠癌HT-29细胞的生长抑制和凋亡诱导作用及机制。方法以鼠尾I型胶原为支架建立HT-29三维细胞模型,以5氟尿嘧啶(5-Fu)为阳性对照,采用CCK-8(Cell Counting Kit-8)方法、Annexin V/PI双染法观察不同剂量trans-Res对人源结肠癌HT-29细胞系的生长和凋亡率的影响,运用实时荧光定量PCR(Real-time Quantitative PCR, qPCR)检测HT-29细胞的Lgr5、Bcl-2、Caspase-3mRNA表达水平。结果不同剂量trans-Res均具有显著的抑制HT-29细胞增殖的作用,同时诱导HT-29细胞凋亡,呈现时间与剂量依赖性(PHT-29细胞Lgr5表达下调(PHT-29细胞的体外增殖,诱导肿瘤细胞凋亡,其作用可能与Lgr5、Bcl-2、Caspase-3mRNA的表达改变有关。

关键词：反式白藜芦醇三维细胞模型 HT-29 抗增殖细胞凋亡

乳酸菌胞外多糖对结肠癌HT-29细胞增殖的影响

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食品研究与开发 2019年第7期40卷 7-15页

作者：张将蒋凌霜孙梦莹牟光庆李新玲钱方妥彦峰大连工业大学食品学院辽宁大连116034 新疆天润乳业股份有限公司新疆乌鲁木齐830000

从15株大连工业大学大连市益生菌功能研究重点实验室保藏植物乳杆菌中筛选出对人结肠癌细胞HT-29抑制率最高的乳杆菌胞外多糖,对其进行分离纯化并研究多糖对HT-29细胞增殖的影响。通过苯酚硫酸法测定15种乳酸菌胞外多糖产量、3-(4,5-二... 详细信息

从15株大连工业大学大连市益生菌功能研究重点实验室保藏植物乳杆菌中筛选出对人结肠癌细胞HT-29抑制率最高的乳杆菌胞外多糖,对其进行分离纯化并研究多糖对HT-29细胞增殖的影响。通过苯酚硫酸法测定15种乳酸菌胞外多糖产量、3-(4,5-二甲基吡啶-2-基)-5-(3-羧基甲氧基苯基)-2-(4-磺苯基)-2H-四唑[3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-5-(3-carboxymethoxyphenyl)-2-(4-sulfophenyl)-2H-tetrazolium,MTS]测定不同浓度的粗多糖对HT-29细胞的抑制率,最终筛选出高产胞外多糖、对HT-29细胞增殖抑制率高的菌株Lactobacillus plantarum12所产胞外多糖,其胞外多糖的糖含量为54%、蛋白含量为3.6%。对其胞外多糖进行DEAE-Sepharose Fast Flow离子柱和Sepharose CL-6B凝胶柱的分离纯化,得到中性多糖组分EPS12-1和酸性多糖组分EPS12-2,2个多糖组分的糖含量分别为31.82%和35.21%,通过MTS法测定L. plantarum12菌所产粗多糖、多糖组分EPS12-1和EPS12-2分别在50、100、250、500μg/mL浓度时对HT-29细胞的抑制率,发现多糖浓度为250μg/mL时,对HT-29细胞增殖达到了最佳抑制效果,抑制率分别为27.58%、7.11%、12.00%。当多糖浓度为250μg/mL时,HT-29细胞凋亡率、活性氧(reactive oxygen species,ROS)水平、caspase 8活性,均处在较高水平。L. plantarum12胞外多糖通过增加ROS酶活和激活caspase 8来抑制HT-29增殖。

关键词：乳酸菌胞外多糖肿瘤 HT-29 凋亡

萝卜硫素影响结直肠癌中eIF4F翻译起始复合物的机制研究

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萝卜硫素影响结直肠癌中eIF4F翻译起始复合物的机制研究

作者：邢运安徽医科大学

学位级别：硕士

目的结直肠癌是结肠和直肠粘膜上皮和腺体发生的恶性肿瘤,发病率和死亡率均较高,累计肝转移超过15%,为很多国家带来了沉重的健康压力。目前,结直肠癌的主要治疗方法为手术治疗+放化疗,但是继续寻找新的治疗方法却从未停止过脚步。本课... 详细信息

目的结直肠癌是结肠和直肠粘膜上皮和腺体发生的恶性肿瘤,发病率和死亡率均较高,累计肝转移超过15%,为很多国家带来了沉重的健康压力。目前,结直肠癌的主要治疗方法为手术治疗+放化疗,但是继续寻找新的治疗方法却从未停止过脚步。本课题主要研究萝卜硫素对结直肠癌细胞系中eIF4F翻译起始复合物的影响,深入研究相关机制,为萝卜硫素在结直肠癌的治疗提供理论依据。方法(1)收集安医大二附院2015-2017年度结直肠癌患者手术标本,共12例,制成组织芯片,免疫组织化学染色检测肿瘤组织与癌旁组织中4EBP1、P-4EBP1、eIF4E、P-eIF4E、eIF4G的表达情况与光密度值的比较。(2)12只健康雄性裸鼠随机分为实验组(n=6)与对照组(n=6)。实验组与对照组均腋下注射培养好混匀的结直肠癌细胞(HT-29)0.1ml,自第3天开始,实验组每天腹腔注射溶解于DMSO的萝卜硫素(0.5mg·kg),对照组腹腔注射溶剂DMSO(0.5mg·kg),共注射14天。14天后处死裸鼠,取出皮下移植瘤,测量大小体积,-80℃冰箱中保存。(3)HE染色观察裸鼠皮下肿瘤的形态结构。(4)免疫组化检测皮下移植瘤组织中AKT、P-AKT、P-mTOR、4EBP1、P-4EBP1、eIF4E、P-eIF4E、eIF4G蛋白的表达情况。(5)结直肠癌细胞系HT-29细胞的培养。(6)MTT法检测萝卜硫素对HT-29活性的影响。(7)Western blot法检测萝卜硫素对于HT-29细胞PI3K、AKT、P-AKT、mTOR、P-mTOR、4EBP1、P-4EBP1、eIF4E、P-eIF4E、eIF4G蛋白表达的影响。结果(1)人类结直肠癌芯片免疫组织化学染色显示肿瘤组织中4EBP1、P-4EBP1、eIF4E、P-eIF4E、eIF4G均比癌旁组织高,且差异显著(pHT-29细胞的活性,且效果呈剂量依赖。(6)萝卜硫素(15、30μmol·L)作用48h,降低了HT-29细胞中AKT、mTOR、4EBP1、P-4EBP1、eIF4E、P-eIF4E蛋白的表达,提高P-AKT、P-mTOR蛋白的表达,而对PI3K的表达无明显影响。结论eIF4F翻译起始复合物在结直肠癌的发生发展中起重要作用。萝卜硫素可以通过PI3K/AKT/mTOR/4EBP1信号通路影响结直肠癌细胞中eIF4F翻译起始复合物的上调影响其发展,具体机制与4EBP1的磷酸化有关。

关键词：结直肠癌萝卜硫素 eIF4F复合物 HT-29 4EBP1 免疫组化

参山固体饮料对人结直肠癌HT-29细胞株增殖、凋亡和迁移的影响

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参山固体饮料对人结直肠癌HT-29细胞株增殖、凋亡和迁移的影响

作者：赵晶晶湖南中医药大学

学位级别：硕士

目的:参山固体饮料是由8种中药材水提物组成的以健脾益肾为主的辅助结直肠癌患者康复的药食同源饮料。其中有些药材具有抗肿瘤活性,为此,本研究的目的就是通过研究参山固体饮料对人结直肠癌细胞株HT-29的影响来探讨其潜在的临床价值。方... 详细信息

目的:参山固体饮料是由8种中药材水提物组成的以健脾益肾为主的辅助结直肠癌患者康复的药食同源饮料。其中有些药材具有抗肿瘤活性,为此,本研究的目的就是通过研究参山固体饮料对人结直肠癌细胞株HT-29的影响来探讨其潜在的临床价值。方法:1.通过采用不同浓度参山固体饮料处理体外培养的人结直肠癌细胞株HT-29 48小时后,运用CCK-8试剂检测HT-29増殖情况并计算参山固体饮料干预HT-29细胞増殖的IC50值,为后续实验提供参考浓度。2.采用参山固体饮料低浓度组和高浓度组（5.0、10.0 mg/ml）对HT-29细胞进行干预,24小时后,在倒置光学显微镜下观察细胞的形态变化并拍照。3.应用Hoechst 33258染色法检测参山固体饮料低浓度组和高浓度组（5.0、10.0 mg/ml）干预后HT-29细胞凋亡情况。4.采用Transwell小室法检测参山固体饮料低浓度组和高浓度组（5.0、10.0 mg/ml）对人结直肠癌细胞株HT-29迁移能力的影响。结果:1.参山固体饮料对人结直肠癌HT-29细胞增殖具有抑制作用,并呈一定的剂量依赖性,其IC50值为8.96 mg/ml。根据其IC50值,选择参山固体饮料5.0 mg/ml和10.0 mg/ml作为后期实验干预的低浓度和高浓度。2.倒置显微镜下,HT-29细胞随着参山固体饮料浓度增加细胞形态发生明显的变化,出现变圆、变小、脱落等现象。3.Hoechst 33258染色法实验结果显示:参山固体饮料能够诱导人结直肠癌HT-29细胞的凋亡。4.Transwell小室法实验结果显示:参山固体饮料组到达T r a n s w e l l小室底部的HT-29细胞数量明显减少（P＜0.05）。参山固体饮料能够抑制HT-29细胞的迁移能力。结论:参山固体饮料可以抑制人结直肠癌HT-29细胞的体外增殖,诱导细胞凋亡,并减弱HT-29细胞的迁移能力。

关键词：参山固体饮料 HT-29 细胞增殖细胞凋亡细胞迁移

植物乳杆菌35对大肠杆菌在肠上皮细胞HT-29上黏附及刺激产生促炎细胞因子的影响

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现代食品科技 2017年第3期33卷 14-21页

作者：郭远骥妥彦峰牟光庆蒋淑娟钱方刘鹏盛晓芳大连工业大学食品学院辽宁大连116034 东北农业大学食品安全与营养协同创新中心黑龙江哈尔滨150030

本论文采用肠上皮细胞模型HT-29细胞系研究8株植物乳杆菌在HT-29细胞上的黏附性,并研究黏附性较强的菌株及其胞外多糖(Exopoly Saccharides,EPS)抑制大肠杆菌(E.coli ATCC25922)在HT-29细胞上黏附及刺激HT-29细胞产生炎性因子的作用。... 详细信息

本论文采用肠上皮细胞模型HT-29细胞系研究8株植物乳杆菌在HT-29细胞上的黏附性,并研究黏附性较强的菌株及其胞外多糖(Exopoly Saccharides,EPS)抑制大肠杆菌(E.coli ATCC25922)在HT-29细胞上黏附及刺激HT-29细胞产生炎性因子的作用。结果表明8株植物乳杆菌在HT-29细胞上的黏附性差异较大:黏附性最强的植物乳杆菌35通过取代、竞争和排阻方式抑制大肠杆菌在HT-29细胞上黏附,抑制黏附率分别为30%、33%和59%,其EPS在作用浓度为500μg/mL时对大肠杆菌的抑制黏附率为32%。植物乳杆菌35可抑制大肠杆菌刺激HT-29细胞产生IL-8,通过取代、竞争、排阻方式抑制大肠杆菌刺激HT-29细胞产生IL-8,抑制率分别为3%、28%和40%;其EPS抑制大肠杆菌刺激HT-29细胞产生IL-8具有浓度效应,浓度为500μg/mL时抑制率最高,为50%。而对于IL-10表达量的影响均不显著。结果表明植物乳杆菌35具有抑制大肠杆菌引起肠炎的潜在益生功能。

关键词：乳酸杆菌 HT-29 大肠杆菌黏附

Gambogic acid induces apoptosis and inhibits colorectal tumor growth via mitochondrial pathways

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World Journal of Gastroenterology 2015年第20期21卷 6194-6205页

作者： Guang-Ming Huang Yu Sun Xin Ge Xin Wan Chun-Bo Li Department of General Surgery Heilongjiang Provincial Hospital

AIM: To investigate the effect of gambogic acid(GA) on apoptosis in the HT-29 human colon cancer cell line. METHODS: H-29 cells were used for in vitro experiments in this study. Relative cell viability was assessed using MTT assays. Cell apoptosis was detected by terminal deoxynucleotidyl transferase d UTP nick end labeling and Hoechst 33342 staining, and quantified by flow cytometry. Cellular ultrastructure was observed by transmission electron microscopy. Real-time PCR and Western blot analyses were used to evaluate gene and protein expression levels. For in vivo experiments, BALB/c nude mice received subcutaneous injections of HT-29 cells in the right armpit. When well-established xenografts were palpable with a tumor size of 75 mm3, mice were randomly assigned to a vehicle(negative) control, positive control or GA treatment group(n = 6 each). The animals in the treatment group received one of three dosages of GA(in saline; 5, 10 or 20 mg/kg) via the caudal vein twice weekly, whereas animals in the negative and positive control groups were given equal volumes of 0.9% saline or 10 mg/kg docetaxel, respectively, via the caudal vein once weekly. RESULTS: The cell viability assay showed that GA inhibited proliferation of HT-29 cells in a dose- and time-dependent manner after treatment with GA(0.00, 0.31, 0.62, 1.25, 2.50, 5.00 or 10.00 μmol/L) for 24, 48 or 72 h. After 48 h, the percentage of apoptotic cells in cells treated with 0.00, 1.25, 2.50 and 5.00 μmol/L GA was 1.4% ± 0.3%, 9.8% ± 1.2%, 25.7% ± 3.3% and 49.3% ± 5.8%, respectively. Ultrastructural analysis of HT-29 cells treated for 48 h with 2.5μmol/L GA revealed apoptotic bodies and condensed and fragmented nuclei. Levels of caspase-8,-9 and-3 m RNAs were significantly increased after treatment with GA(1.25, 2.50 or 5.00 μmol/L) for 48 h(P < 0.05 for all). Protein levels of apoptosis-related factors Fas, Fas L, FADD, cytochrome c, and Apaf-1 were increased in GA-treated cells, whereas levels of pro-caspase-8,-9 and-3 were significantly decreased(P < 0.05

关键词： Apoptosis Death receptor pathway Flowcytometry Gambogic acid Hoechst 33342 HT-29 cells Mitochondrial pathway MTT Terminal deoxynucleotidyltransferase dUTP nick end labeling