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Journal of Molecular Cell Biology 2020年第3期12卷 216-229页

作者： Yuan Wu Xiudan Zheng Yubo Ding Min Zhou Zhuang Wei Tao Liu Kan Liao Key Laboratory of Systems Biology CAS Center for Excellence in Molecular Cell ScienceShanghai Institute of Biochemistry and Cell BiologyChinese Academy of SciencesUniversity of Chinese Academy of SciencesShanghai 200031China Department of Ophthalmology Eye and ENT Hospital of Fudan UniversityShanghai 200031China

Heat shock protein 90(hsp90)is an abundant molecular chaperone with two isoforms,hsp90α and ***90β deficiency causes embryonic lethality,whereas hsp90α deficiency causes few abnormities except male *** this paper,we reported that hsp90α was exclusively expressed in the retina,testis,and *** deficiency caused retinitis pigmentosa(RP),a disease leading to *** hsp90α-deficient mice,the retina was deteriorated and the outer segment of photoreceptor was *** staining and electron microscopic analysis revealed disintegrated Golgi and aberrant intersegmental vesicle transportation in hsp90α-deficient *** analysis identified microtubule-associated protein IB(MAP1B)as an hsp90α-associated protein in *** deficiency increased degradation of MAP1B by inducing its ubiquitination,causing a-tubulin deacetylation and microtubule ***,the treatment of wild-type mice with 17-DMAG,an hsp90 inhibitor of geldanamycin derivative,induced the same retinal degeneration as hsp90α *** together,the microtubule destabilization could be the underlying reason for hsp90α deficiency-induced RP.

关键词： hsp90α retinitis pigmentosa Golgi disintegration vesicle transportation MAP1B acetylatedα-tubulin microtubule cytoskeleton

hsp90α通过调控气道上皮细胞内质网应激加重屋尘螨诱导的哮喘气道炎症

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南方医科大学学报 2022年第3期42卷 347-353页

作者：黄浩华乔妤婕黄奕董航明南方医科大学南方医院呼吸与危重症医学科广东广州510515

目的探讨热休克蛋白90(hsp90α)参与屋尘螨(HDM)诱导的哮喘气道炎症的作用及调控气道上皮细胞内质网应激的机制。方法人气道上皮细胞HBE体外培养,由HDM诱导哮喘体外模型,浓度梯度刺激24 h,分为正常对照组;200 U/mL组;400 U/mL组;800 U... 详细信息

目的探讨热休克蛋白90(hsp90α)参与屋尘螨(HDM)诱导的哮喘气道炎症的作用及调控气道上皮细胞内质网应激的机制。方法人气道上皮细胞HBE体外培养,由HDM诱导哮喘体外模型,浓度梯度刺激24 h,分为正常对照组;200 U/mL组;400 U/mL组;800 U/mL组。随后分别使用sihsp90α干扰序列转染及hsp90抑制剂17-AAG干预,分为HBE正常对照组、HBE+HDM组(800 U/mL,24 h)、HBE+HDM(800 U/mL,24 h)+sihsp90α(50 nmol,12 h)组、HBE+HDM(800 U/mL,24 h)+17-AAG(900 nmol,6 h)组,测定hsp90α以及内质网应激标志物的表达水平。C57BL/6小鼠由HDM诱导哮喘体内模型,分为正常对照组、17-AAG滴鼻组、HDM滴鼻组、HDM+17-AAG滴鼻组,测定气道炎症水平与内质网应激标志物的表达水平。结果在HDM诱导的HBE细胞哮喘体外模型中,蛋白电泳结果显示hsp90α(P=0.011)表达上调,琼脂糖凝胶电泳结果显示内质网应激标志物XBP-1(P=0.044)、ATF-6α(P=0.030)和GRP-78(P=0.027)表达水平显著上调;而敲低hsp90α和使用17-AAG会显著抑制HDM诱导的XBP-1(P=0.008)上调;在HDM诱导的哮喘小鼠模型中,相较于HDM组,H&E染色和瑞氏-姬萨姆染色显示HDM+17-AAG组的气道炎症改善,炎症细胞聚集明显减少。肺泡灌洗液计数显示,炎症细胞数量显著减少(P=0.014)。ELISA法显示肺泡灌洗液中炎症因子IL-4(P=0.030)、IL-5(P=0.035)显著降低。免疫组织化学染色显示气道上皮细胞XBP-1和GRP-78表达明显减少。结论 hsp90α加重HDM诱导的哮喘气道炎症,可能通过上调内质网应激实现的。

关键词：哮喘内质网应激 hsp90α 屋尘螨

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hsp90α的表达对食管癌细胞侵袭转移能力的影响

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世界华人消化杂志 2014年第31期22卷 4719-4725页

作者：郭雨李秀娟张琪琪张志强新疆医科大学第一附属医院消化科新疆医科大学病理生理教研室新疆医科大学第五附属医院消化科

目的:探讨热休克蛋白90α(heat shock protein 90α,hsp90α)在食管癌(esophageal carcinoma,EC)细胞侵袭转移中的作用机制.方法:分别采用RT-PCR和Western blot检测hsp90α在具有不同侵袭转移潜能的EC细胞株CE81T-0和CE81T-4中mRNA水平和蛋白质水平的表达差异;细胞转染技术将siRNA-hsp90α转染入CE81T-4细胞中,并分为实验组、阴性对照组、空白对照组;并用RT-PCR和Western blot检测3组细胞中hsp90αmRNA水平和蛋白质水平的表达差异,验证是否转染成功.MTT法检测3组细胞的增殖活力,流式细胞术分析细胞周期、凋亡的改变,划痕实验和Transwell体外侵袭实验检测转染后CE81T-4细胞迁移和侵袭的变化.结果:CE81T-4细胞中的hsp90α的mRNA和蛋白质表达水平明显高于CE81T-0细胞(Phsp90α成功转染CE81T-4细胞后,RT-PCR和Western blot检测3组结果显示,实验组中hsp90αmRNA水平和蛋白水平表达量显著低于空白对照组和阴性对照组(Phsp90α基因表达沉默后,细胞凋亡率为32.67%,较空白对照组和阴性对照组明显增加(Phsp90α的下调会降低EC细胞的转移侵袭能力.

关键词：食管癌 hsp90α 侵袭转移

hsp90α抑制剂17-AAG抑制甲状腺癌细胞增殖和迁移机制探讨

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中华肿瘤防治杂志 2019年第1期26卷 6-11页

作者：李云芳董婷婷孔霞张国安王业全侯森庞潜潜崔文济南大学山东省医学科学院医学与生命科学学院山东济南250062 青岛大学医学部山东青岛266000 济宁市第一人民医院药学部山东济宁272111 济宁医学院法医学与医学检验学院山东济宁272067

目的在体内,热休克蛋白90α(heat shock protein 90α,hsp90α)对肿瘤的发生发展起着重要的作用。hsp90α抑制剂在体内可阻断肿瘤赖以生存的信号通路网络。本研究探讨hsp90α特异性抑制剂烯丙胺基-17-去甲氧基格尔德(17-allyl-amino-17-... 详细信息

目的在体内,热休克蛋白90α(heat shock protein 90α,hsp90α)对肿瘤的发生发展起着重要的作用。hsp90α抑制剂在体内可阻断肿瘤赖以生存的信号通路网络。本研究探讨hsp90α特异性抑制剂烯丙胺基-17-去甲氧基格尔德(17-allyl-amino-17-demethoxygeldanamycin,17-AAG)对甲状腺癌细胞增殖和迁移的影响及相关信号分子的调控机制。方法体外培养甲状腺乳头状癌细胞TPC-1和甲状腺未分化癌细胞TAK,分别给予0.001～10.000μmol/L浓度的17-AAG作用24和48h。MTT实验、划痕实验观察细胞生长和迁移情况。蛋白质印迹法检测细胞hsp90α及信号传导及转录激活因子(signal transducers and activators of transcription,STAT3)、丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶(serine/threonine protein kinase,AKT)、细胞外调节蛋白激酶(extracellular regulated protein kinases,ERK)相关信号蛋白的表达及磷酸化水平变化。结果与未处理的细胞相比,经0.001～10.000μmol/L浓度的17-AAG作用24和48h的TPC-1和TAK细胞增殖能力降低,且有明显的时间和剂量依赖性。TPC-1(F=7.326,P=0.005)和TAK细胞(F=22.770,P0.05。结论 17-AAG通过下调甲状腺癌细胞hsp90α相关信号蛋白STAT3/AKT/ERK磷酸化水平,从而抑制甲状腺癌细胞的增殖和迁移能力。

关键词：甲状腺癌 TPC-1 TAK hsp90α 17-AAG STAT3/AKT/ERK

麻鸭hsp90α基因的原核表达、纯化及磷脂结合活性的鉴定

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食品科学 2018年第2期39卷 99-104页

作者：张玉梅李鹏鹏张牧焓王晶晶王道营徐为民江苏省农业科学院农产品加工研究所江苏南京210014 南京农业大学肉品加工与质量控制教育部重点实验室江苏南京210095 江苏省肉类生产与加工质量安全控制协同创新中心江苏南京210095

为研究麻鸭(Anas platyrhynchas)热休克蛋白hsp90α结合肌内磷脂及抑制磷脂水解的作用机制,采用反转录聚合酶链式反应(reverse transcription-polymerase chain reaction,RT-PCR)技术,以麻鸭骨骼肌细胞cDNA为模板扩增hsp90α基因,构建重组表达质粒在大肠杆菌中诱导表达,镍柱亲和层析和凝胶层析纯化可溶性重组蛋白。结果表明,获得的hsp90α开放阅读框全长为2 187 bp,编码728个氨基酸,预测的理论等电点约为5。构建的原核表达载体pCold1-hsp90α在大肠杆菌中成功可溶性表达了麻鸭hsp90α,并获得了高纯度的重组hsp90α蛋白。运用薄层层析证明该重组蛋白具有稳定结合磷脂酰胆碱的活性,并且该蛋白能显著削弱磷脂酶A2对磷脂的水解作用。该研究成功克隆并建立了麻鸭hsp90α基因的原核表达体系,制备了具有磷脂结合活性的重组蛋白,为进一步研究hsp90α与磷脂的相互作用及对肉品加工中磷脂的保护效应提供了理论支持。

关键词：麻鸭 hsp90α 原核表达纯化磷脂结合

凋亡相关蛋白Livin、hsp90α在自身免疫性甲状腺疾病中的表达

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第二军医大学学报 2009年第2期30卷 229-230页

作者：赵艳利张会娟郑州大学第一附属医院内分泌科郑州450052

Graves病(GD)和桥本甲状腺炎(Hashimoto thyroiditis,HT)是临床上最常见的自身免疫性甲状腺疾病(autoimmune thyroid diseases,AITD),但其发病机制尚未完全阐明。近年研究发现.细胞凋亡受体的激活及调节细胞凋亡的因子参与AITD的发病过... 详细信息

Graves病(GD)和桥本甲状腺炎(Hashimoto thyroiditis,HT)是临床上最常见的自身免疫性甲状腺疾病(autoimmune thyroid diseases,AITD),但其发病机制尚未完全阐明。近年研究发现.细胞凋亡受体的激活及调节细胞凋亡的因子参与AITD的发病过程。[第一段]

关键词：格雷夫斯病桥本甲状腺炎 Livin hsp90α 免疫组织化学

东方田鼠hsp90α和KPNA2基因表达及体内抗日本血吸虫效果比较观察

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中国寄生虫学与寄生虫病杂志 2019年第5期37卷 552-555,562页

作者：成钢王芊薄龚强熊德慧湖南文理学院/生命与环境科学学院动物学湖南省高校重点实验室湖南文理学院环洞庭湖生物资源保育与利用研究中心湖南文理学院生命与环境科学学院动物健康养殖研究所湖南文理学院农业生物大分子研究中心常德415000 中南大学生物科学与技术学院分子生物学研究中心长沙410078

目的比较东方田鼠抗日本血吸虫基因hsp90α和KPNA2的表达差异及体内抗虫效果差异。方法RT-PCR扩增并比较健康东方田鼠新分离的心、肝、脾、肺、肾、脑、肌肉、皮肤、骨髓组织中hsp90α和KPNA2的表达情况。40只雄性昆明小鼠随机分为空白... 详细信息

目的比较东方田鼠抗日本血吸虫基因hsp90α和KPNA2的表达差异及体内抗虫效果差异。方法RT-PCR扩增并比较健康东方田鼠新分离的心、肝、脾、肺、肾、脑、肌肉、皮肤、骨髓组织中hsp90α和KPNA2的表达情况。40只雄性昆明小鼠随机分为空白对照组(DMEM培养基)、阴性对照组(pLXSN质粒转染病毒)、pLXSN-hsp90α组和pLXSN-KPNA2组等4组,每组10只,各组分别于第1、3、7 d每鼠尾静脉注射重组质粒转染病毒(2×10^6 cfu/ml)或培养基0.2 ml。注射后第2天,各组小鼠腹部皮肤感染日本血吸虫尾蚴(30±2)尾/鼠。感染后第42天,剖杀小鼠,门脉灌注检获成虫,测量死亡后合抱及单性虫体长度,计算虫荷、减虫率、每克肝虫卵数(LEPG)、肝脏减卵率,HE染色观察肝脏病理变化,观察比较hsp90α和KPNA2对日本血吸虫感染小鼠的保护效果。结果RT-PCR结果显示,hsp90α在东方田鼠脑、骨髓中高表达,而KPNA2在心、肾和肌肉中高表达。体内实验结果显示,pLXSN-hsp90α组和pLXSN-KPNA2组小鼠的肝脏颜色分别呈灰黄色和灰黑色,虫荷分别为(11.3±1.1)、(11.6±1.3)条,血吸虫成虫体长分别为(1.19±0.04)、(1.21±0.05)cm,LEPG分别为1852.0±392.4、1035±485.4,与阴性对照组[(16.7±1.3)条、(1.39±0.06)cm、3644.0±523.6]比较差异均有统计学意义(P0.05),而LEPG指标差异有统计学意义(P0.05),肝减卵率分别为57.9%和76.5%(Phsp90α组和pLXSN-KPNA2组小鼠的肝脏虫卵结节数量均远少于阴性对照。结论东方田鼠抗日本血吸虫基因hsp90α和KPNA2在脑、骨髓、心脏、肾脏和肌肉组织中表达存在差异;两者对日本血吸虫感染小鼠保护效果在减卵率和LEPG存在差异。

关键词：东方田鼠 hsp90α KPNA2 日本血吸虫基因表达

hsp90α、hsp90β在人胃癌组织中的表达

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安徽医科大学学报 2014年第12期49卷 1754-1758页

作者：吴梦婕张红姚元春秦蓉安徽医科大学基础医学院病理学教研室合肥230032 吉首大学医学院病理学教研室吉首416000

目的探讨hsp90α、hsp90β蛋白与mRNA在人胃癌组织中的表达及其与胃癌生物学行为的关系。方法采用免疫组化SP法检测两者蛋白在胃癌组织及癌旁正常组织的表达。采用RT-PCR法检测两者的mRNA在胃癌组织及癌旁正常组织的表达。结果 hsp90α... 详细信息

目的探讨hsp90α、hsp90β蛋白与mRNA在人胃癌组织中的表达及其与胃癌生物学行为的关系。方法采用免疫组化SP法检测两者蛋白在胃癌组织及癌旁正常组织的表达。采用RT-PCR法检测两者的mRNA在胃癌组织及癌旁正常组织的表达。结果 hsp90α、hsp90β主要定位于细胞质,其阳性率分别为82.9%和80.0%(Phsp90α、hsp90βmRNA在胃癌中的表达明显高于癌旁正常组织(Phsp90α、hsp90β蛋白在胃癌组织中的阳性表达以及其与胃癌生物学行为的关系提示hsp90α、hsp90β可能作为判断胃癌恶性程度的重要指标。hsp90α、hsp90βmRNA的高表达,且两者均与胃癌的发生、发展关系密切,可能与胃癌组织中的转录调控相关。

关键词： hsp90α hsp90β 免疫组织化学逆转录聚合酶链式反应胃肿瘤

hsp90α与MMP-2相互作用对甲状腺未分化癌细胞生长和转移的影响

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临床与实验病理学杂志 2019年第12期35卷 1456-1459页

作者：李云芳董婷婷李胜王业全张国安庞潜潜崔文济宁医学院法医学与医学检验学院

目的探讨hsp90α对甲状腺未分化癌TAK细胞生长和转移的影响及相关信号分子的调控机制。方法通过hsp90α的非渗透特异性抑制剂17-丙烯胺-17-去甲氧格尔德霉素(17-allyl-amino-17-demethoxygeldanamycin,17-AAG)处理TAK细胞,分别给予不同... 详细信息

目的探讨hsp90α对甲状腺未分化癌TAK细胞生长和转移的影响及相关信号分子的调控机制。方法通过hsp90α的非渗透特异性抑制剂17-丙烯胺-17-去甲氧格尔德霉素(17-allyl-amino-17-demethoxygeldanamycin,17-AAG)处理TAK细胞,分别给予不同浓度(0.001~10μmol/L)和不同作用时间(24 h和48 h),采用MTT实验、平板克隆形成实验和Transwell实验观察细胞生长和转移情况。Western blot法检测细胞内和细胞外hsp90α和MMP-2蛋白表达和分泌水平。明胶酶谱实验检测细胞外MMP-2蛋白的活性。结果与未处理组细胞相比,经0.001~10μmol/L的17-AAG作用24 h和48 h的TAK细胞活力降低,且呈明显的时间和剂量依赖性(Phsp90α蛋白表达增加,细胞外hsp90α和MMP-2蛋白表达明显降低,细胞外MMP-2蛋白活性明显降低。结论分泌型hsp90α与细胞外MMP-2蛋白协同作用促进甲状腺未分化癌细胞的增殖、迁移和侵袭,导致细胞恶性生长。

关键词：甲状腺肿瘤未分化癌 hsp90α 17-丙烯胺-17-去甲氧格尔德霉素 MMP-2

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hsp90α蛋白在人结肠癌中的表达

世界华人消化杂志 2005年第4期13卷 567-569页

作者：李海军戴洁张林西金春亭李玉珍河北北方学院病理学教研室河北省张家口市075029 首都医科大学教务处北京市100054

目的:探讨hsp90α在我国结肠癌中的表达特点,为应用hsp90α抑制剂治疗结肠癌提供依据. 方法:应用免疫组化SP方法对88例人结肠癌组织中hsp90α的表达进行检测. 结果:hsp90α在结肠癌细胞质表达,胞质被染成深浅不一的棕黄色.hsp90α表达... 详细信息

目的:探讨hsp90α在我国结肠癌中的表达特点,为应用hsp90α抑制剂治疗结肠癌提供依据. 方法:应用免疫组化SP方法对88例人结肠癌组织中hsp90α的表达进行检测. 结果:hsp90α在结肠癌细胞质表达,胞质被染成深浅不一的棕黄色.hsp90α表达在不同Dukes分期阳性率差异显著(Phsp90α表达分别与患者性别、年龄、癌发部位、癌细胞分化程度及浸润深度等无显著相关性(P>0.05). 结论:hsp90α的表达与结肠癌的浸润进展密切相关, hsp90α抑制剂可用于结肠癌的辅助治疗.

关键词： hsp90α 表达特点人结肠癌阳性率治疗蛋白 Dukes分期结论中国目的