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宫颈癌中hpv16变异的CTSE与hpv16物理状态关系的分析

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细胞与分子免疫学杂志 2003年第5期19卷 513-514页

作者：刘文康楚雍烈杨娥刘湘郑建武西安交通大学医学院微生物学教研室陕西西安710061

宫颈癌是最常见的女性生殖道恶性肿瘤，高危型人乳头瘤病毒16型（Human papillomavirus 16, hpv16）感染与其密切相关。该病毒的长控制区（long control region, LCR）内有细胞型特异性增强子（cell-type-specific enhancer, CTSE），是... 详细信息

宫颈癌是最常见的女性生殖道恶性肿瘤，高危型人乳头瘤病毒16型（Human papillomavirus 16, hpv16）感染与其密切相关。该病毒的长控制区（long control region, LCR）内有细胞型特异性增强子（cell-type-specific enhancer, CTSE），是LCR的重要组成部分，参与诱导启动子P_（97）的活性，从而调控转化基因E_6/E_7转录的水平。本研究旨在检测hpv16 CTSE变异株在宿主细胞内的物理状态和CTSE变异的关系，探讨两者在宫颈癌发生、发展中的地位和作用，为深入揭示hpv的致癌机制奠定基础。

关键词：宫颈癌 hpv16 CTSE变异物理状态

hpv16/18E_6和P_(53)基因蛋白在喉鳞癌中的表达及其相关性研究

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山东医药 2005年第12期45卷 11-12页

作者：桑建中娄卫华郑州大学第一附属医院河南郑州450052

目的　探讨人乳头瘤病毒16 / 18型早期蛋白E6 (hpv16 / 18E6 )、P53基因蛋白在喉鳞癌(L SCC)中的表达及其相关性。方法　免疫组化SABC法检测hpv16 / 18E6 和P53基因蛋白在L SCC及声带息肉中的表达。结果　hpv16 / 18E6 在声带息肉中未... 详细信息

目的　探讨人乳头瘤病毒16 / 18型早期蛋白E6 (hpv16 / 18E6 )、P53基因蛋白在喉鳞癌(L SCC)中的表达及其相关性。方法　免疫组化SABC法检测hpv16 / 18E6 和P53基因蛋白在L SCC及声带息肉中的表达。结果　hpv16 / 18E6 在声带息肉中未见表达,在L SCC中的表达率为4 0 .0 % ,差异有显著性(P hpv16 / 18E6 及P53基因蛋白的表达与L SCC临床分期、淋巴结转移有关。二者的表达无明显相关性。结论　hpv 16 / 18型感染和P53基因异常与L SCC发生、发展有关。hpv16 / 18E6 与P53基因功能异常无明显相关性。

关键词： P^53基因蛋白表达及喉鳞癌相关性研究 hpv16 18E6 免疫组化SABC法 LSCC 人乳头瘤病毒声带息肉淋巴结转移临床分期基因异常功能异常显著性表达率 8型

口咽鳞癌组织中hpv16感染和p16，HSP70蛋白表达的临床意义

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口咽鳞癌组织中HPV16感染和p16，HSP70蛋白表达的临床意义

作者：崔湘凝中南大学

学位级别：硕士

目的：检测口咽鳞癌中hpv16感染及p16、HSP70蛋白的表达,分析其临床意义,初步探讨hpv相关口咽癌对放疗敏感的分子机制。方法：选择中南大学湘雅医院病理科存档并满足入组条件的口咽鳞癌标本95例,同时收集病人的临床资料。采用原位... 详细信息

目的：检测口咽鳞癌中hpv16感染及p16、HSP70蛋白的表达,分析其临床意义,初步探讨hpv相关口咽癌对放疗敏感的分子机制。方法：选择中南大学湘雅医院病理科存档并满足入组条件的口咽鳞癌标本95例,同时收集病人的临床资料。采用原位杂交法检测肿瘤组织中hpv16感染状况,通过免疫组化法检测p16、HSP70蛋白的表达情况,分析三者的相关性,Western blot和单细胞克隆形成实验检测口咽鳞癌细胞hpv16下调后HSP70表达及放疗敏感性改变。采用SPSS17.0软件进行统计分析,总结p16蛋白阳性肿瘤的临床病理特点及预后,以总体生存率（OS）和无瘤生存率（DFS）作为观察指标,单因素分析采用Kaplan-Meier方法和log-rank检验,多因素分析采用Cox比例风险回归模型进行生存分析。结果：口咽鳞癌组织中hpv16感染率为48.3%,p16蛋白阳性率为52.6%, p16蛋白表达和hpv16感染存在显著相关性（P＜0.001）。单因素分析提示p16蛋白表达对口咽鳞癌病人预后有提示意义,P16蛋白阳性组3年总体生存率及无瘤生存率优于p16蛋白阴性组,总体生存率和无瘤生存率分别为70.4%对比40.0%（P=0.008）和63.0%对比25.7%（P=0.004）。无瘤生存率多因素分析提示,p16蛋白阴性病人死亡风险是p16蛋白阳性病人的2.36倍（HR0.432,95%CI0.201-0.891,P=0.024）,p16蛋白是影响无瘤生存率的独立预后因子。P16表达阴性的口咽鳞癌组织中HSP70蛋白主要位于细胞浆,而p16表达阳性的癌组织中HSP70主要位于细胞膜,hpv16被有效靶向下调后HSP70表达上调,且细胞放疗敏感性降低。结论：口咽鳞癌病人hpv16感染率为48.3%,p16蛋白阳性表达率为52.6%,p16蛋白表达和hpv16感染存在显著相关性,可将p16作为hpv16感染状态比较理想的替代物,p16表达阳性的口咽鳞癌病人具有良好的生存优势,p16可能成为评估口咽鳞癌病人预后的重要指标,随hpv16下调后HSP70表达增加且放疗敏感性降低,提示HSP70下调可能是hpv相关口咽癌对放疗敏感的一个关键因素。图8幅,表5个,参考文献37篇

关键词：口咽鳞癌 hpv16 p16蛋白 HSP70蛋白预后放疗敏感性

HEK293细胞的传代、建库与高效表达重组hpv16-E6E7腺病毒的研究

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中国现代应用药学 2015年第4期32卷 399-403页

作者：吴洁李剑波高孟金素凤潘海桦陈刚姜云水庄昉成浙江省医学科学院病毒病研究所杭州310013 浙江普康生物技术股份有限公司杭州310053

目的对HEK293细胞进行三级细胞库的建立,并高效表达重组的hpv16-E6E7腺病毒。方法进行HEK293细胞传代培养,并建立三级细胞库,按中国药典2010年版III部要求进行常规检验;培养重组hpv16-E6E7腺病毒,测定滴度,插入目的基因以及基因组酶切... 详细信息

目的对HEK293细胞进行三级细胞库的建立,并高效表达重组的hpv16-E6E7腺病毒。方法进行HEK293细胞传代培养,并建立三级细胞库,按中国药典2010年版III部要求进行常规检验;培养重组hpv16-E6E7腺病毒,测定滴度,插入目的基因以及基因组酶切图谱鉴定。结果 HEK293细胞传代符合其生长形态,建立的三级细胞库和不同细胞库之间的传代数,细胞浓度和装量均符合疫苗基质制备的要求;能高效表达重组hpv16-E6E7腺病毒,种子滴度>3.0×109 IU·m L?1;表达的目的基因和目的蛋白稳定。结论建立的HEK293三级细胞库符合疫苗用细胞基质的要求。

关键词： HEK293 细胞库 hpv16 重组腺病毒高效表达

宫颈鳞状细胞癌hpv16/18、p53、p21表达及意义

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临床与实验病理学杂志 2004年第5期20卷 557-559页

作者：陆磊陈秋勤范娟杨瑞飞上海市中西医结合医院病理科上海200028

目的　探讨人乳头状瘤病毒 (hpv) 16型、18型及 p5 3、p2 1基因蛋白的表达情况以及与宫颈癌的关系。方法　应用免疫组化二步法检测 5 0例宫颈鳞癌、4 0例正常宫颈黏膜中hpv16、hpv18、p5 3、p2 1的表达。肿瘤组分 <6 0岁和≥ 6 0岁 2... 详细信息

目的　探讨人乳头状瘤病毒 (hpv) 16型、18型及 p5 3、p2 1基因蛋白的表达情况以及与宫颈癌的关系。方法　应用免疫组化二步法检测 5 0例宫颈鳞癌、4 0例正常宫颈黏膜中hpv16、hpv18、p5 3、p2 1的表达。肿瘤组分 hpv感染情况。结果　宫颈鳞癌中hpv16、hpv18、p5 3、p2 1表达分别为 4 8%、2 0 %、5 4 %和 5 0 % ,而正常宫颈黏膜中的表达分别为 10 %、0、0、10 % ,两者经统计学比较差异有显著性 (P hpv16阳性率分别为 84 2 %和 2 5 8% ,年青组明显高于年老组 ,经统计学比较差异有显著性 (P hpv16、hpv18感染有密切关系 ,提示检测宫颈hpv16、hpv18感染情况对于宫颈鳞癌的随访和早期诊断有着重要的参考价值。 (2 )提示宫颈黏膜在hpv感染后 ,可能在p5 3、p2 1多种癌基因的共同作用导致宫颈鳞癌的发生发展。

关键词：宫颈鳞状细胞癌 hpv16 hpv18 p53 p21 基因表达

FHIT、p16基因表达异常与hpv16感染在宫颈癌变中的交互效应

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FHIT、p16基因表达异常与HPV16感染在宫颈癌变中的交互效应

作者：李颖山西医科大学

学位级别：硕士

目的宫颈癌是严重危害妇女健康的生殖系统恶性肿瘤。目前已明确高危型hpv(HR-hpv)持续感染是宫颈癌发生的主要原因。抑癌基因启动子区CpG岛甲基化是导致抑癌基因失活的重要机制，抑癌基因p16和FHIT与宫颈癌关系密切，但其在宫颈癌中的... 详细信息

目的宫颈癌是严重危害妇女健康的生殖系统恶性肿瘤。目前已明确高危型hpv(HR-hpv)持续感染是宫颈癌发生的主要原因。抑癌基因启动子区CpG岛甲基化是导致抑癌基因失活的重要机制，抑癌基因p16和FHIT与宫颈癌关系密切，但其在宫颈癌中的表达不尽一致，且在宫颈癌中的表达与hpv16感染的关系尚存争议。关于FHIT、p16基因表达异常与hpv16感染在宫颈癌变中交互效应的研究目前报道甚少且观点不一。本研究旨在探讨FHIT、p16蛋白异常表达与hpv16感染的关系以及在宫颈癌变中的交互效应。方法选择2009年9月-2011年3月在山西医科大学肿瘤医院就诊的宫颈鳞状细胞癌新发病人100例，在山西医科大学第二医院妇科、太原市妇幼保健院和介休市妇幼保健院妇科就诊的宫颈上皮内瘤样变(CIN)患者142例(其中CINⅠ72例，CINⅡ/Ⅲ70例)及宫颈炎症患者108例为研究对象。采用结构式问卷收集研究对象的人口学特征、性行为、卫生及生殖因素等资料，采集手术或活检宫颈组织标本。用多重PCR法检测hpv16感染状况，甲基化特异性PCR(MSP)法检测FHIT、p16基因CpG岛甲基化状态，Western blotting法检测FHIT和p16蛋白表达，实时荧光定量PCR(real time PCR)法检测hpv16E6/E7、FHIT和p16的mRNA水平。使用SPSS13.0软件对资料进行整理分析，正态分布资料采用方差分析，方差不齐的采用Welch检验，分类资料采用χ检验和趋势χ检验，宫颈癌相关因素采用单因素和多因素Logistic回归分析，用交互作用的相加模型进行交互效应分析。结果 (1) hpv16感染率在CINⅠ组(45.8%)、CINⅡ/Ⅲ组(68.6%)和宫颈癌组(73.0%)均高于宫颈炎组(28.7%)(χ=5.452，P=0.020;χ=25.607，P﹤0.001;χ=37.788，P﹤0.001)，随宫颈病变程度加重，hpv16感染率逐渐升高(χ趋势=47.623，Phpv16E6mRNA的表达分别高于宫颈炎组(Phpv16E7mRNA的表达分别高于宫颈炎组(Phpv16感染在不同宫颈病变组均有正相加作用。hpv16E6和FHIT mRNA表达存在负相关，r=-0.142(P=0.008)。 (3) p16CpG岛甲基化率在宫颈炎组、CINⅠ组、CINⅡ/Ⅲ组和宫颈癌组分别为0.9%、11.1%、18.6%和35.0%，随宫颈病变程度加重，p16CpG岛甲基化率逐渐升高(χ趋势=44.976，P﹤0.001)。p16蛋白表达在CINⅠ组(1.231±0.410)，CINⅡ/Ⅲ组(1.967±0.617)和宫颈癌组(2.123±0.524)均高于宫颈炎组(0.780±0.333)(均为P﹤0.001)。p16mRNA表达在宫颈癌组和CINⅡ/Ⅲ组高于宫颈炎组(P﹤0.001，P=0.030)，宫颈癌组的表达高于CINⅡ/Ⅲ组和CINⅠ组(P=0.029，P﹤0.001)。p16CpG岛甲基化、p16蛋白高表达和hpv16感染在不同宫颈病变组有正相加作用。hpv16E7和p16mRNA表达存在正相关，r=0.397，(P＜0.001)。 (4)将单因素分析有统计学意义的因素，包括宫颈癌变相关因素和p16CpG岛甲基化、p16蛋白、p16mRNA、FHITCpG岛甲基化、FHIT蛋白、FHITmRNA、hpv16等进行多因素Logistic回归分析。影响CINⅠ的主要危险因素有FHIT mRNA、蛋白低表达，p16蛋白高表达，FHITCpG岛高甲基化，洗阴频率低，性生活后不清洗，产次多，有肿瘤家族史;影响CINⅡ/Ⅲ的主要危险因素有hpv16感染，FHIT mRNA、蛋白低表达，p16mRNA、蛋白高表达，FHITCpG岛高甲基化，务农，洗阴频率低，孕次多，有人工流产史、妇科病史和肿瘤家族史;影响宫颈癌的主要危险因素有hpv16感染，FHI

关键词：宫颈癌变 p16/FHIT甲基化蛋白表达 hpv16 交互效应

hpv16阳性的女阴尖锐湿疣继发鳞状细胞癌1例

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中国皮肤性病学杂志 2011年第7期25卷 547-548页

作者：贾常莎张跃袁伟遵义医学院附属医院皮肤科贵州遵义563003

患者女,32岁。外阴出现菜花样赘生物3年,伴疼痛3个月。大、小阴唇有菜花样赘生物,呈淡红色或肤色,质坚,压痛明显,摩擦后易出血,并出现破溃和恶臭。皮损组织病理示:尖锐湿疣继发鳞状细胞癌(外阴)。人乳头状瘤病毒分型检测示hpv16阳性。

关键词：鳞状细胞癌外阴 hpv16

术前同步化疗对宫颈残端癌组织中Smad2/3、hpv16 E7表达的影响及临床意义

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实用医学杂志 2015年第18期31卷 3007-3009页

作者：许海湖北中医药大学黄家湖医院武汉市430071

目的:探讨术前同步化疗对宫颈残端癌组织中Smad2/3、hpv16 E7表达的影响及临床意义。方法:收集2011年1月至2015年1月间宫颈残端癌患者120例,随机分为两组,其中对照组60例,予宫颈癌根治手术治疗;试验组60例,在宫颈癌根治手术前,予博来霉... 详细信息

目的:探讨术前同步化疗对宫颈残端癌组织中Smad2/3、hpv16 E7表达的影响及临床意义。方法:收集2011年1月至2015年1月间宫颈残端癌患者120例,随机分为两组,其中对照组60例,予宫颈癌根治手术治疗;试验组60例,在宫颈癌根治手术前,予博来霉素、顺铂配合5-氟尿嘧啶进行同步化疗,5 d为1个疗程,治疗2个疗程。治疗结束后,对比治疗后两组患者宫颈残端癌组织病理情况以及Smad2/3、hpv16 E7蛋白表达情况。结果 :手术后病理情况比较,试验组宫旁浸润、阴道浸润及淋巴结转移的发生率(3.3%、6.7%、31.7%)均小于对照组(10.0%、11.7%、51.7%),差异有统计学意义(Phpv16 E7蛋白的表达率与对照组比较,明显下降(51.7%vs.78.3%,Phpv16 E7的表达,提高手术疗效,对临床具有指导意义,值得临床推广。

关键词：宫颈残端癌术前同步化疗 Smad2/3表达 hpv16 E7表达

重组人干扰素α2b联合洁悠神对宫颈持续hpv感染患者端粒酶与hpv16/18 E6蛋白表达的影响

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中国现代医学杂志 2017年第25期27卷 23-27页

作者：朱丽娟周树林江希萍江苏省常州市第一人民医院妇科江苏常州213003 江苏省人民医院妇科江苏南京210029

目的对重组人干扰素α2b(rh IFN-α2b)联合洁悠神治疗宫颈持续hpv感染的临床效果及其对端粒酶与hpv16/18 E6蛋白表达的影响进行研究。方法随机选取2015年1月-2016年1月于常州市第一人民医院进行治疗的宫颈持续人乳头瘤病毒(hpv)感染的10... 详细信息

目的对重组人干扰素α2b(rh IFN-α2b)联合洁悠神治疗宫颈持续hpv感染的临床效果及其对端粒酶与hpv16/18 E6蛋白表达的影响进行研究。方法随机选取2015年1月-2016年1月于常州市第一人民医院进行治疗的宫颈持续人乳头瘤病毒(hpv)感染的108例患者,按照数字随机表法分为观察组和对照组各54例,对照组使用rh IFN-α2b治疗,观察组在对照组的基础上使用洁悠神治疗。分别对两组患者的疗效、临床指标进行统计,并检测端粒酶与hpv16/18 E6蛋白的表达水平。结果观察组治疗有效率与对照组比较,差异有统计学意义(χ~2=5.240,P=0.022);观察组患者治愈时间周、阴道排液时间以及出血时间与对照组比较,差异有统计学意义(t=3.485、4.765、4.365,P=0.001、0.000和0.000),观察组均短于对照组;治疗后观察组的hpvDNA负荷量低于对照组,并且转阴率与对照组比较,差异有统计学意义(χ~2=6.546,P=0.000);治疗后两组患者的端粒酶阳性率和hpv16/18 E6蛋白阳性率均降低,差异有统计学意义(χ~2=4.746、4.964,均P=0.000),其中观察组患者端粒酶阳性率和hpv16/18 E6蛋白阳性率均低于对照组。结论联合使用rh IFN-α2b和洁悠神治疗宫颈持续hpv感染具有良好的治疗效果,可有效降低端粒酶和hpv16/18 E6蛋白阳性率,并可降低患有宫颈癌的风险。

关键词：重组人干扰素α2b 宫颈癌宫颈持续hpv感染端粒酶 hpv16 hpv18 hpvE6