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DETECTION OF hpv 16 E_6G ENE IN CERVICAL CANCER TISSUE

Journal of Pharmaceutical Analysis 1995年第1期9卷 14-15,34页

作者：袁育康刘汉馨刘正风楚雍烈

In this study 82 bioely tissues of cervical cancer were examined for the Presence of hpv16 E6 gene by *** Positive rate was 73.2%(60/82).The hpv 16 E6 DNA amplified by PCR waslabeled and used as probe to detect hpv E6 gene in the *** by dot-blot bybridization,thepositive rate was 54.9(45/82).Our rescults showed that the peltive rate of detectiod of hpv 16 E6gene was high in cervical cancer tissue of the Chinese women and cofirmed the close association ofhpv 16 E6 gene with development of cervical cancer.

关键词： hpv 16 PCR cervical cancer

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hpv16型重组表位疫苗的研制

HPV16型重组表位疫苗的研制

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作者：高广宇吉林大学

学位级别：硕士

人乳头瘤病毒(Human Papillomavirus,hpv)是一类感染人类表皮和粘膜鳞状上皮的小DNA病毒,可引起疣和乳头状肿瘤,其中hpv相关性宫颈癌已经成为威胁全球女性生命的第二大癌症。接种疫苗是预防病毒感染、减少宫颈癌发生的有效方式。目前,... 详细信息

人乳头瘤病毒(Human Papillomavirus,hpv)是一类感染人类表皮和粘膜鳞状上皮的小DNA病毒,可引起疣和乳头状肿瘤,其中hpv相关性宫颈癌已经成为威胁全球女性生命的第二大癌症。接种疫苗是预防病毒感染、减少宫颈癌发生的有效方式。目前,hpv疫苗是真核细胞表达系统表达的重组hpv衣壳蛋白L1通过自组装形成的病毒样颗粒(Virus-Like Particles,VLPs),接种后能刺激机体产生hpv中和抗体。然而,hpv的型别很多,表达hpv不同型别L1是目前制备多价疫苗的主要方法,且尚无采用原核表达系统制备hpv疫苗的报道。为了简化hpv疫苗的制备工艺,本研究以hpv 16型L1蛋白为研究靶点,以前期工作中通过表位串联方式构建的3个候选疫苗基因片段为基础,分别构建了三个疫苗蛋白的原核表达载体,并在大肠杆菌BL21(DE3)中成功表达了这三个疫苗蛋白,分别命名为rR5、rR6和rR8。由于三个蛋白主要以包涵体方式表达,在纯化过程中采用了变复性方法。为了检验以原核表达系统制备的hpv疫苗蛋白是否具有生物学活性,我们采用杆状病毒表达系统制备了hpv 16型L1 VLPs,经电泳分离及转膜后,以疫苗蛋白免疫的小鼠血清进行Western blot检测,结果表明rR5和rR6的免疫血清能特异性识别L1蛋白。说明以串联抗原表位的方式在原核细胞中可制备有潜在生物学活性的hpv疫苗,为hpv多价疫苗的研制提供了一个新思路。

关键词： hpv 16 表位疫苗 L1蛋白杆状病毒昆虫细胞

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人乳头瘤病毒16型纳米抗体的筛选及鉴定

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中国肿瘤生物治疗杂志 2025年

作者：王若瑜白崇智仲启明范瑞文牛林茹韩鹏程山西省中医药研究院中心实验室山西农业大学羊驼生物工程实验室君研生物科技(山西)有限公司东南大学附属中大医院医学院

目的：构建hpv16L1蛋白纳米抗体初级文库，通过筛选鉴定获得一株hpv16L1特异性纳米抗体。方法：以hpv16L1蛋白为抗原进行羊驼免疫，采用噬菌体展示技术构建初级文库。经3轮淘选，采用ELISA法鉴定阳性克隆，将阳性反应最强克隆的VHH序列... 详细信息

目的：构建hpv16L1蛋白纳米抗体初级文库，通过筛选鉴定获得一株hpv16L1特异性纳米抗体。方法：以hpv16L1蛋白为抗原进行羊驼免疫，采用噬菌体展示技术构建初级文库。经3轮淘选，采用ELISA法鉴定阳性克隆，将阳性反应最强克隆的VHH序列进行真核表达。经亲和纯化、凝胶过滤层析纯化、SDS-PAGE和WB法鉴定，获得目的纳米抗体；表面等离子共振技术（SPR）检测纳米抗体与hpv 16 L1蛋白之间的亲和力；CCK-8法检测纳米抗体对人永生化角质细胞HaCat的毒性；荧光素酶报告基因实验检测纳米抗体对hpv 16假病毒的中和活性。结果：初级文库库容为1.304×1010，丰度为6.5×109个/mL，ELISA法鉴定获得36个阳性克隆。表达、纯化获得蛋白单体与二聚体，经鉴定为目的纳米抗体（Nb）。Nb与hpv 16 L1蛋白结合的亲和力为35.41 nmol/L。Nb实验组HaCat细胞增殖活力与空白组没有显著性差异（p≥0.01）。与阴性组比较，0.1 μmol、1 μmol Nb均能抑制假病毒感染293T细胞。结论：本研究成功获得一株纯度较好、亲和力较高，对上皮细胞没有毒性作用、有效抑制hpv 16假病毒感染293T细胞的纳米抗体Nb，为防治hpv 16感染提供了有效的候选抗体类药物。

关键词： hpv 16 噬菌体展示技术纳米抗体亲和力

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The Relationship between p53 Expression and Human Papillomavirus in Premalignant and Malignant Uterine Cervical Lesions

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Open Journal of Pathology 2016年第2期6卷 73-78页

作者： Beyhan Varol Mollamehmetoglu Havva Erdem Muzaffer Keles Department of Pathology Kanuni Training and Research Hospital Trabzon Turkey Department of Pathology Faculty of Medicine Ordu University Ordu Turkey Department of Pathology Faculty of Medicine Ataturk University Erzurum Turkey

Objective: We aimed to retrospectively examine a series of premalignant and malignant cervical tissues to study a high-risk hpv 16 infection that, among cervical tissue lesions, carries the greatest risk of conversion to cancer, and the presence of p53 protein immunoreactivity, a tumor suppressor gene product. Methods: Paraffin blocks were studied via immunohistochemical (IHC) method to explore the presence of hpv 16 in 59 premalignant and malignant cervical lesions as well as immunoreactivity of the p53 oncoprotein, the most common cellular tumor suppressor gene product in human cancers. Results: In our series, mutant p53 positivity rate was 35.3% for low-grade CIL, 40% for high-grade CIL, and 46.8% for invasive carcinoma cases. Immune staining for high-risk hpv 16 type yielded a positive staining rate of 47% in low-grade CIL, 80% in high-grade CIL, and 50% in invasive carcinoma. Conclusion: The results of our study indicate a progressive increase in p53 oncoprotein reactivity from cervical intraepithelial neoplasia to invasive carcinoma. This suggests the clinical importance of p53 immunoreactivity in dysplastic progression and neoplastic transformation. hpv is the most commonly encountered oncogenic type in cervical lesions, especially in high-grade CIL and invasive carcinomas. Results of the previous reports suggest that hpv-positive carcinomas release wild type p53 and hpv-negative ones release mutant type p53 were not confirmed by our results, which indicated a mutant type p53 reactivity in hpv- 16 positive carcinoma cases.

关键词： Cervical Intraepithelial Lesion Cervix Carcinoma hpv 16 p53 Immunohistochemistry

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