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中国农业科学 2012年第6期45卷 1199-1205页

作者：徐继英杨志强陈化琦刘俊林邢娟李建喜李宏胜西北民族大学生命科学与工程学院中国农业科学院兰州畜牧与兽药研究所中国农业科学院兰州兽医研究所

【目的】研究奶牛乳腺炎源大肠杆菌中耶尔森菌hpi携带情况及其与O血清型的关系,并对部分菌株的相关基因序列进行分析。【方法】从中国北京、内蒙古、甘肃、四川、重庆、云南、贵州等7个省市部分地区1 260份临床型和隐性奶牛乳腺炎奶样... 详细信息

【目的】研究奶牛乳腺炎源大肠杆菌中耶尔森菌hpi携带情况及其与O血清型的关系,并对部分菌株的相关基因序列进行分析。【方法】从中国北京、内蒙古、甘肃、四川、重庆、云南、贵州等7个省市部分地区1 260份临床型和隐性奶牛乳腺炎奶样中分离得到190株大肠杆菌,对分离菌株进行耶尔森菌强毒力岛核心区irp2基因、fyuA基因及hpi毒力岛在大肠杆菌染色体中插入位置的鉴定,分析hpi毒力岛的携带情况及其与分离菌株O血清型之间的关系。【结果】190株大肠杆菌分离株中,irp2基因阳性率为26.31%(50/190),fyuA基因阳性率为18.94%(36/190)。50株hpi+分离株中检出asntRNAintB基因32株,阳性率为64%(32/50)。本试验克隆的irp2基因(273 bp)、fyuA基因(1 071 bp)、asntRNAintB基因(1 512 bp)均与已发表序列高度同源,同源性分别在97.1%、98.2%、97.2%以上,且其hpi毒力岛大多位于大肠杆菌染色体的asntRNA位点上。【结论】耶尔森菌hpi在奶牛乳腺炎源大肠杆菌中广泛流行分布,但也存在差异,而不同血清型菌株携带hpi的倾向性可能只与特定的血清型有一定的关系。

关键词：奶牛乳腺炎大肠杆菌 hpi毒力岛 O血清型

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利用Red重组系统敲除APEC毒力岛irp2基因

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安徽农业大学学报 2012年第6期39卷 854-858页

作者：李叶芳涂健邵颖刘红梅祁克宗安徽农业大学动物科技学院合肥230036

应用质粒pKD46介导的Red同源重组系统,以质粒pKD3为模板,设计irp2基因序列敲除引物,引物5′端有51 bp的拟敲除基因的同源臂,3′端为扩增引物,扩增两侧含FRT位点的氯霉素抗性基因,通过第1次同源重组将拟敲除的irp2基因替换为氯霉素抗性基... 详细信息

应用质粒pKD46介导的Red同源重组系统,以质粒pKD3为模板,设计irp2基因序列敲除引物,引物5′端有51 bp的拟敲除基因的同源臂,3′端为扩增引物,扩增两侧含FRT位点的氯霉素抗性基因,通过第1次同源重组将拟敲除的irp2基因替换为氯霉素抗性基因,再通过重组酶质粒pCP20在FRT位点发生第2次同源重组,消除抗性基因。结果表明,利用该重组系统成功敲除了禽致病性大肠杆菌hpi毒力岛irp2基因。为深入研究irp2基因在禽致病性大肠杆菌致病过程中所发挥的作用打下基础。

关键词：禽致病性大肠杆菌 hpi毒力岛 Red同源重组酶 irp2 缺失

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广州市市售食品中致泻性大肠埃希氏菌污染状况调查分析

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华南预防医学 2002年第4期28卷 37-39页

作者：严纪文朱海明宋曼丹赖蔚苳戴昌芳广州广东省疾病预防控制中心 510300

目的　了解广州市市售食品中致泻性大肠埃希氏菌 (EPEC、ETEC、EIEC、ESIEC、EHEC)的污染状况。方法　 1998年 8月至 1999年 2月分别用常规方法和以ipaB、irp - 2基因为探针 ,用菌落原位杂交法对广州市的 310份市售食品进行了致泻性大... 详细信息

目的　了解广州市市售食品中致泻性大肠埃希氏菌 (EPEC、ETEC、EIEC、ESIEC、EHEC)的污染状况。方法　 1998年 8月至 1999年 2月分别用常规方法和以ipaB、irp - 2基因为探针 ,用菌落原位杂交法对广州市的 310份市售食品进行了致泻性大肠埃希氏菌的分离和鉴定。结果　在广州市采集的 310份市售食品中共检出致泻性大肠埃希氏菌 6 5株 ,总检出率高达 2 0 97% ,其中以贝壳类的检出率最高 ,达 5 0 % ;生禽肉的检出率为 45 16 % ,远高于生畜肉的检出率 2 0 93% (P <0 0 5 ) ;生肉中的检出率 (2 7 35 % )高于熟肉制品 (9 0 9% ) (P <0 0 5 ) ;生牛奶的检出率 (2 0 0 0 % )高于消毒奶 (0 ) (P<0 0 5 )。在检出的 6 5株致泻性大肠埃希氏菌株中 ,EPEC 9株 ,ETEC 15株 ,EIEC 19株 ,ESIEC 2 2株 ,分别占阳性菌株的 13 85 %、2 3 0 8%、2 9 2 3%、33 80 % ,ESIEC的检出率最高。结论　广州市市售食品中致泻性大肠埃希氏菌的污染十分普遍 ,今后应加强对食品中致泻性大肠埃希氏菌的监测。

关键词：广州市市售食品致泻性大肠埃希氏菌污染状况调查 hpi毒力岛

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