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miR-23a promotes invasion of glioblastoma via hoxd10-regulated glial-mesenchymal transition

Signal Transduction and Targeted Therapy 2018年第1期3卷 1-10页

作者： Kazuhiro Yachi Masumi Tsuda Shinji Kohsaka Lei Wang Yoshitaka Oda Satoshi Tanikawa Yusuke Ohba Shinya Tanaka Department of Cancer Pathology Faculty of MedicineHokkaido UniversitySapporoJapan Global Station for Soft Matter Global Institution for Collaborative Research and EducationHokkaido UniversitySapporoJapan Institute for Chemical Reaction Design and Discovery(WPI-ICReDD) Hokkaido UniversitySapporoJapan Department of Cell Physiology Faculty of MedicineHokkaido UniversitySapporoJapan Present address:Division of Cellular Signaling National Cancer Center Research InstituteTokyoJapan

Glioblastoma is the most aggressive and invasive brain tumor and has a poor prognosis;elucidating the underlying molecular mechanisms is essential to select molecular targeted therapies.Here,we investigated the effect of microRNAs on the marked invasiveness of glioblastoma.U373 glioblastoma cells were infected with 140 different microRNAs from an OncomiR library,and the effects of the invasion-related microRNAs and targeted molecules were investigated after repeated Matrigel invasion assays.Screening of the OncomiR library identified miR-23a as a key regulator of glioblastoma invasion.In six glioblastoma cell lines,a positive correlation was detected between the expression levels of miR-23a and invasiveness.A luciferase reporter assay demonstrated that homeobox D10(hoxd10)was a miR-23a-target molecule,which was verified by high scores from both the PicTar and miRanda algorithms.Forced expression of miR-23a induced expression of invasion-related molecules,including uPAR,RhoA,and RhoC,and altered expression of glial-mesenchymal transition markers such as Snail,Slug,MMP2,MMP9,MMP14,and E-cadherin;however,these changes in expression levels were reversed by hoxd10 overexpression.Thus,miR-23a significantly promoted invasion of glioblastoma cells with polarized formation of focal adhesions,while exogenous hoxd10 overexpression reversed these phenomena.Here,we identify miR-23a-regulated hoxd10 as a pivotal regulator of invasion in glioblastoma,providing a novel mechanism for the aggressive invasiveness of this tumor and providing insight into potential therapeutic targets.

关键词： hoxd10 invasion miR

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hoxd10在消化系统肿瘤中的研究进展

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现代肿瘤医学 2023年第24期31卷 4654-4657页

作者：周盼梁军杨海霞空军军医大学唐都医院放疗科陕西西安710038 陕西省肿瘤医院放疗科陕西西安710061 西安市胸科医院放疗科陕西西安710100

消化系统肿瘤是我国导致癌症相关死亡的重要原因之一,其发生和发展的分子机制在临床和基础研究领域引发了广泛关注。同源异型盒(homeobox,HOX)D10基因作为HOX家族中的一员,在消化系统肿瘤发生和发展中扮演着重要角色。本篇综述系统总结... 详细信息

消化系统肿瘤是我国导致癌症相关死亡的重要原因之一,其发生和发展的分子机制在临床和基础研究领域引发了广泛关注。同源异型盒(homeobox,HOX)D10基因作为HOX家族中的一员,在消化系统肿瘤发生和发展中扮演着重要角色。本篇综述系统总结了hoxd10在消化系统肿瘤中的研究进展,包括其表达调控机制、生物学功能以及潜在的临床应用,以期为hoxd10在消化系统肿瘤的基础研究和临床转化中提供新的思路。

关键词： HOX hoxd10 食管癌胃癌肝癌胆管癌胰腺癌结直肠癌

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健脾消癌方通过miRNA-10b/hoxd10/RhoC信号调控人结肠癌细胞的迁移

健脾消癌方通过miRNA-10b/HOXD10/RhoC信号调控人结肠癌细胞的迁移

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作者：李颖英湖南中医药大学

学位级别：硕士

目的:研究健脾消癌方对人结肠癌细胞miRNA-10b/hoxd10/RhoC信号通路的调控,探讨健脾消癌方抑制CRC迁移的作用机制。方法:先用实时荧光定量PCR检测miR-10b和hoxd10 mRNA在NCM460、SW480、SW620、HCT116四种不同结肠癌细胞系中的表达情况... 详细信息

目的:研究健脾消癌方对人结肠癌细胞miRNA-10b/hoxd10/RhoC信号通路的调控,探讨健脾消癌方抑制CRC迁移的作用机制。方法:先用实时荧光定量PCR检测miR-10b和hoxd10 mRNA在NCM460、SW480、SW620、HCT116四种不同结肠癌细胞系中的表达情况。从以上四种细胞中选出miRNA-10b表达量最高的细胞。然后分别用10%、15%、20%健脾消癌方含药血清和1 5%的空白血清培养筛选出的细胞,培养24小时后实时荧光定量PCR检测各组细胞miR-10b及hoxd10 mRNA的表达情况,免疫印迹检测法检测各组细胞hoxd10、RhoC蛋白表达情况。结果:根据实时荧光定量PCR检测miR-10b和hoxd10 mRNA在NCM460、SW480、SW620、HCT116四种不同结肠癌细胞系中的表达结果知,与NCM460细胞株相比,细胞株SW480、SW620、HCT116的hoxd10 mRNA的相对表达水平降低（P＜0.01）,miR-10b的相对表达水平有所升高（SW480P＜0.05,SW620、HCT116 P＜0.01）,与细胞株SW480、SW620相比,HCT116细胞株hoxd10 mRNA的相对表达水平有所下降（SW480P＜0.01,SW620 P＜0.05）,miR-10b相对表达水平升高（SW480 P＜0.01,SW620 P＜0.05）。HCT116细胞miR-10b表达水平在四种细胞中最高,所以选择HCT116细胞作为本次实验的研究对象来进行下一步的研究。分别用1 0%、15%、20%健脾消癌方含药血清和1 5%的空白血清培养HCT116细胞,培养24小时后实时荧光定量PCR检测各组细胞miR-10b及hoxd10 mRNA的表达情况,结果提示与空白组比较,健脾消癌方1 0%浓度组miR-10b的相对表达量降低,hoxd10 mRNA的相对表达量有所升高,但差异都没有统计学意义。健脾消癌方1 5%、20%浓度组miR-10b的相对表达降低（P＜0.01）;hoxd10 mRNA相对表达升高（15%浓度组P＜0.05,20%浓度组P＜0.01）。和空白组相比,健脾消癌方10%、15%浓度组hoxd10蛋白相对表达量有所升高,RhoC蛋白相对表达量也有降低,但差异并没有统计学意义,健脾消癌方20%浓度组hoxd10蛋白相对表达量升高（P＜0.05）,RhoC蛋白相对表达量明显降低（P＜0.01）。结论:1.四种结肠癌细胞miR-10b、hoxd10 mRNA表达量不同,且两者呈负相关。2.健脾消癌方抑制结肠癌的迁移作用可能是通过下调miR-10b、RhoC,上调hoxd10实现的。

关键词：健脾消癌方结肠癌 miR-10b hoxd10 RhoC

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子宫内膜癌组织中hoxd10甲基化状态及临床意义

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临床肿瘤学杂志 2023年第6期28卷 530-536页

作者：王晨辉于婷陈丽艳王秀莹嘉兴市妇幼保健院妇科浙江嘉兴314000 大连市妇女儿童医疗中心(集团)妇科肿瘤诊疗中心 116000

目的探究同源异形盒(HOX)D10在子宫内膜癌(EC)组织中的表达和基因甲基化状态,分析其与临床病理特征及生存预后的关系。方法采用基因表达谱动态分析(GEPIA)工具分析美国公共癌症基因数据库(TCGA)中hoxd10 mRNA在EC组织和正常组织中的... 详细信息

目的探究同源异形盒(HOX)D10在子宫内膜癌(EC)组织中的表达和基因甲基化状态,分析其与临床病理特征及生存预后的关系。方法采用基因表达谱动态分析(GEPIA)工具分析美国公共癌症基因数据库(TCGA)中hoxd10 mRNA在EC组织和正常组织中的表达差异及预后信息。选取2016年5至2018年4月在我院治疗的EC患者148例,另选同期30例子宫内膜增生症患者作为良性病变组,收集患者临床资料及新鲜组织标本。采用实时荧光定量PCR(qPCR)、甲基化定量PCR、免疫组织化学染色法检测组织hoxd10 mRNA、基因启动子甲基化状态、蛋白表达。结果 TCGA数据集中,174例EC组织中hoxd10 mRNA表达量显著低于91例正常子宫内膜组织中的表达量(Phoxd10 mRNA表达与患者中位总生存期(OS)和无进展生存时间(PFS)之间的关系(P>0.05)。临床研究中,EC组织中的hoxd10 mRNA表达均显著低于良性病变组织(0.229±0.237 vs. 1.018±0.265),但hoxd10 mRNA启动子甲基化水平(0.166±0.237 vs. 0.041±0.033)和甲基化率(50.0%vs. 10.0%)均显著高于良性病变组织(Phoxd10 mRNA启动子高甲基化的癌组织样本中hoxd10 mRNA及蛋白阳性表达率显著降低(Phoxd10 mRNA甲基化与国际妇产科联合会(FIGO)分期、组织学分级、淋巴结转移、肌层浸润程度相关(Phoxd10蛋白阳性表达率在不同FIGO分期、微卫星不稳定的EC患者间存在有统计学意义的差异(Phoxd10 mRNA启动子高甲基化是影响EC患者OS的独立危险因素(Phoxd10 mRNA启动子高甲基化预示着EC患者更短的OS(Phoxd10mRNA启动子甲基化水平明显升高,这可能是导致hoxd10蛋白低表达的部分原因。且其高甲基化状态与EC患者临床病理特征及生存结局相关,可作为EC恶性程度和预后的潜在生物学标志物。

关键词：子宫内膜癌 hoxd10 甲基化临床病理特征预后

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hoxd10对虫草素在不同类型人乳腺癌细胞的作用及其机制

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中华实验外科杂志 2019年第12期36卷 2170-2172页

作者：张远起郁丽妍陈智丹黄胜超颜泽铭税晓容梁忠锃黄宝怡罗康维于淼黄海林陈小东李建文广东医科大学附属医院乳腺外科湛江524001

目的探讨虫草素对人乳腺癌细胞株MDA-MB-231和MCF-7细胞增殖、迁移和侵袭的抑制和促进凋亡的作用以及hoxd10信号通路在其中所发挥的调控作用.方法虫草素处理MDA-MB-231和MCF-7细胞后,以细胞计数试剂盒(CCK-8)、流式细胞术和Transwell等... 详细信息

目的探讨虫草素对人乳腺癌细胞株MDA-MB-231和MCF-7细胞增殖、迁移和侵袭的抑制和促进凋亡的作用以及hoxd10信号通路在其中所发挥的调控作用.方法虫草素处理MDA-MB-231和MCF-7细胞后,以细胞计数试剂盒(CCK-8)、流式细胞术和Transwell等方法检测乳腺癌细胞增殖、凋亡、迁移和侵袭能力的变化.通过小干扰RNA(siRNA)下调hoxd10基因的内源性表达,然后加入虫草素,用CCK-8、流式细胞术和Transwell等方法检测乳腺癌细胞增殖、凋亡、迁移和侵袭能力的变化,计量资料以均值±标准差(Mean±SD)表示.结果虫草素干预MCF-7和MDA-MB-231细胞后,实验组吸光度(A)值显著低于对照组(DMSO组)细胞的A值(MCF-7细胞为0.665±0.004比0.733±0.005,t=10.450,MDA-MB-231细胞为0.632±0.005比0.722±0.005,t=13.330,P10.760,P10,Phoxd10的表达可促进虫草素对乳腺癌细胞增殖、凋亡、迁移和侵袭的作用.

关键词：虫草素 hoxd10 乳腺癌信号通路

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miRNA-224通过hoxd10影响Hep3B细胞迁移

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第三军医大学学报 2014年第13期36卷 1365-1369页

作者：丁琛琛李琼王阁第三军医大学大坪医院野战外科研究所肿瘤中心重庆400042 第三军医大学基础医学部教学实验中心重庆400038

目的探讨miR-224影响肝癌细胞迁移的可能机制。方法采用双荧光素酶实验、载体构建和Western blot实验等对预测的miR-224靶基因进行验证。qRT-PCR检测正常肝细胞株L02和肝癌细胞株Hep3B中miR-224的表达；划痕实验观察miR-224对肝癌细胞... 详细信息

目的探讨miR-224影响肝癌细胞迁移的可能机制。方法采用双荧光素酶实验、载体构建和Western blot实验等对预测的miR-224靶基因进行验证。qRT-PCR检测正常肝细胞株L02和肝癌细胞株Hep3B中miR-224的表达；划痕实验观察miR-224对肝癌细胞迁移的影响。结果qRT-PCR结果显示，与正常肝细胞株L02比较，miR-224在肝癌细胞株Hep3B中明显高表达（相对表达倍数1.679 2，P〈0.05）；划痕实验显示，与miR-224 mimics阴性对照组（迁移率：56.43%~58.33%）以及空白组（迁移率：60.48%~66.94%）比较， miR-224 mimics组（迁移率：80.12%~82.02%）的Hep3B细胞迁移能力明显增强（P〈0.05），反之亦然，提示miR-224表达水平和肝癌细胞的迁移能力成正相关；双荧光素酶实验结果显示：与对照组比较， miR-224 mimics组细胞的荧光信号明显下降（P〈0.05）；Western blot实验结果显示：与对照组比较，上调miR-224的表达水平后hoxd10表达下降，下调其表达水平hoxd10表达上升（P〈0.05）。结论 miR-224通过调控靶基因hoxd10的表达，参与调节肝癌细胞的迁移。

关键词：肝细胞肝癌 miRNA-224 hoxd10 迁移

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hoxd10在肝外胆管癌中的表达及其临床意义

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实用医学杂志 2018年第18期34卷 3006-3010页

作者：周九鹏王英霞西安市胸科医院西安710000 昆明医科大学第一附属医院昆明650000

目的探讨肝外胆管癌(ECC)中同源异型盒10(hoxd10)的表达及其临床意义。方法应用免疫组织化学(IHC)方法检测174例ECC手术切除组织的hoxd10表达。分析hoxd10表达与临床病理特征的相关性,包括生存分析。结果 hoxd10在ECC组织的表达较正常... 详细信息

目的探讨肝外胆管癌(ECC)中同源异型盒10(hoxd10)的表达及其临床意义。方法应用免疫组织化学(IHC)方法检测174例ECC手术切除组织的hoxd10表达。分析hoxd10表达与临床病理特征的相关性,包括生存分析。结果 hoxd10在ECC组织的表达较正常的胆道上皮细胞明显下调(P=0.001)。hoxd10的高表达与低组织学分级(P hoxd10高表达与更好的总生存期显著相关(P hoxd10表达是总生存期的独立危险因素(P=0.002,HR=1.830)。结论 hoxd10高表达与ECC良性临床病理特征密切相关,是ECC总生存期的独立预后因素。

关键词：肝外胆管癌 hoxd10 临床病理特征总生存期

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miR-1269a调控hoxd10基因抑制胆管癌细胞侵袭的作用及其机制

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肿瘤防治研究 2018年第11期45卷 894-899页

作者：杨海霞米建强梁军邵秋菊齐宇红王启明常浩李恩孝第四军医大学唐都医院放疗科西安710038 第四军医大学肿瘤研究所西安710038 河南科技大学第一附属医院病理科洛阳471003 西安交通大学第一附属医院肿瘤内科西安710062

目的探讨miR-1269a对hoxd10基因的调控作用及对胆管癌细胞侵袭能力的影响。方法预测并筛选出调控hoxd10基因的miR-1269a作为研究对象;转染miR-1269a模拟物(mimic)及抑制剂(inhibitor)至胆管癌细胞系后检测hoxd10mRNA及蛋白的表达变化,... 详细信息

目的探讨miR-1269a对hoxd10基因的调控作用及对胆管癌细胞侵袭能力的影响。方法预测并筛选出调控hoxd10基因的miR-1269a作为研究对象;转染miR-1269a模拟物(mimic)及抑制剂(inhibitor)至胆管癌细胞系后检测hoxd10mRNA及蛋白的表达变化,并观察miR-1269a对胆管癌细胞侵袭能力的影响。双荧光素酶报告基因实验验证miR-1269a与hoxd10之间的靶向作用关系。结果miR-1269a在胆管癌组织中表达显著高于癌旁组织(P=0.0023);miR-1269a模拟物可显著降低胆管癌细胞中hoxd10 mRNA(Mz-CHA-1:P=0.0025; RBE:P=0.0038)及蛋白表达水平,且细胞的侵袭能力较对照组显著增强(Mz-CHA-1:P=0.004; RBE:P=0.004)。miR-1269a抑制剂转染则出现相反的结果(QBC939:P=0.16; HCCC9810:P=0.13)。miR-1269a明显抑制野生型hoxd10-3’UTR的荧光素酶活性,而对突变型质粒转染细胞的荧光素酶活性无影响。结论 miR-1269a靶向负性调控hoxd10基因,在胆管癌细胞侵袭过程中发挥重要作用。

关键词：胆管细胞癌 miR-1269a hoxd10 侵袭

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microRNA-10b及靶基因hoxd10在肝癌细胞中的表达及侵袭能力的影响

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中国现代医学杂志 2016年第6期26卷 11-14页

作者：熊建宁胡立春王亚兵段雪飞广东省佛山市南海区第三人民医院肝胆外科广东佛山528244

目的探讨micro RNA-10b(mi R-10b)及其靶基因同源异性盒基因hoxd10在肝癌细胞中的表达及转染mi R-10b对肝癌细胞侵袭性能力的影响。方法分析hoxd10基因在3种肝癌细胞株Huh7、Hep G2、SMMC-7721中的基础表达量,筛选出hoxd10基础表达量高... 详细信息

目的探讨micro RNA-10b(mi R-10b)及其靶基因同源异性盒基因hoxd10在肝癌细胞中的表达及转染mi R-10b对肝癌细胞侵袭性能力的影响。方法分析hoxd10基因在3种肝癌细胞株Huh7、Hep G2、SMMC-7721中的基础表达量,筛选出hoxd10基础表达量高的Hep G2作为后续研究对象。设计合成外源性mi R-10b序列,用脂质体瞬时转染肝癌细胞株,设置mi R-10b转染组、无关序列转染组(阴性对照组)和未处理组(对照组)。用RT-PCR及Western blot检测肝癌细胞转染mi R-10b后hoxd10基因及蛋白表达量的变化,细胞侵袭实验研究转染mi R-10b对肝癌细胞侵袭能力。结果在基因水平和Western blot分析蛋白水平hoxd10基因表达量2-ΔΔCT分别是(1.24±0.23)、(1.00±0.02),P>0.05差异无统计学意义。在蛋白分析Hep G2细胞灰度计算值是值分别是653.492和1 968.742,蛋白水平表达降低。hoxd10基因在肝癌细胞株Hep G2的表达量显著高于Huh7和SMMC-7721;mi R-10b成功转染Hep G2后,hoxd10基因表达水平与对照组比较无明显变化,但hoxd10蛋白表达量与对照组比较下降及侵袭性也增强。结论 mi R-10b可能通过抑制靶基因hoxd10表达发挥作用,促进肝癌细胞的侵袭。

关键词：肝癌细胞 microRNA-10b hoxd10 侵袭

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砷对hoxd10基因表达的影响

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中国职业医学 2017年第5期44卷 542-546页

作者：尚莉平妮娜张若冰史丽霞罗神利何越峰昆明医科大学公共卫生学院云南昆明650500

目的探讨砷对周围血淋巴细胞中及人肺腺癌细胞系A549细胞中同源异型盒D10(hoxd10)基因表达的影响。方法 (1)采用判断抽样方法,抽取某砒霜厂职业性接触砷的59名工人为接触组,以无职业性接触砷的17名当地居民为对照组。采用氢化物发生-冷... 详细信息

目的探讨砷对周围血淋巴细胞中及人肺腺癌细胞系A549细胞中同源异型盒D10(hoxd10)基因表达的影响。方法 (1)采用判断抽样方法,抽取某砒霜厂职业性接触砷的59名工人为接触组,以无职业性接触砷的17名当地居民为对照组。采用氢化物发生-冷肼捕集-原子吸收法检测2组人群尿中形态砷水平,采用实时荧光定量聚合酶链式反应(qRT-PCR)法检测周围血淋巴细胞中hoxd10的表达。(2)以浓度为0.0、0.1、0.5、1.0、2.0μmol/L的三氧化二砷(As_2O_3)处理A549细胞,采用比色法检测细胞存活率,采用qRT-PCR法检测hoxd10的表达。结果 (1)接触组人群尿中无机砷、一甲基砷酸、二甲基砷酸、总砷水平和周围血淋巴细胞中hoxd10 mRNA相对表达水平均高于对照组(Phoxd10mRNA相对表达水平呈现剂量依赖性上调(Phoxd10 mRNA相对表达水平呈负相关,相关系数为-0.777(Phoxd10表达上调。As_2O_3可抑制A549细胞增殖,可能与上调hoxd10表达有关。

关键词：砷三氧化二砷 hoxd10 甲基化细胞存活率

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