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hoxa-10在人月经周期分泌中期子宫内膜腺上皮表达下降

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生殖与避孕 2001年第3期21卷 149-152,I002页

作者：陆阳杰罗宏志朱篷第王介东国家计生委科研所北京100081

目的 :对同源异型框基因 hoxa-1 0在月经周期各阶段人子宫内膜的表达形式进行观察。方法 :通过原位杂交方法测定了 5例增殖期、9例分泌期的人子宫内膜 hoxa-1 0的表达。结果 :hoxa-1 0基因在人子宫内膜均有表达。但在各周期阶段 ,其表... 详细信息

目的 :对同源异型框基因 hoxa-1 0在月经周期各阶段人子宫内膜的表达形式进行观察。方法 :通过原位杂交方法测定了 5例增殖期、9例分泌期的人子宫内膜 hoxa-1 0的表达。结果 :hoxa-1 0基因在人子宫内膜均有表达。但在各周期阶段 ,其表达的强度和部位却有所不同。首次发现 hoxa-1 0在对应于着床期的分泌中期以及分泌晚期子宫内膜腺上皮的表达明显降低或不表达。结论 :hoxa-1 0在人类着床过程中可能具有重要功能。

关键词： hoxa-10 月经周期子宫内膜着床同源框基因

hoxa-10在早孕小鼠子宫内膜中的表达及在胚胎着床过程中作用的研究

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HOXa-10在早孕小鼠子宫内膜中的表达及在胚胎着床过程中作用的研究

作者：贾咏存重庆医科大学

学位级别：硕士

3背景:胚泡着床是指胚泡通过与子宫内膜的相互作用而侵入子宫内膜的过程。是人类和哺乳类动物生殖过程中的重要环节,是决定妊娠成功与否的关键,然而其机制尚未完全明了。当受精卵发育到胚泡阶段后,胚泡外面的透明带解体,其表面的滋养层... 详细信息

3背景:胚泡着床是指胚泡通过与子宫内膜的相互作用而侵入子宫内膜的过程。是人类和哺乳类动物生殖过程中的重要环节,是决定妊娠成功与否的关键,然而其机制尚未完全明了。当受精卵发育到胚泡阶段后,胚泡外面的透明带解体,其表面的滋养层细胞与子宫内膜上皮细胞直接接触,而黏附于子宫表面,进而侵入子宫内膜,这一过程包括胚泡与子宫内膜上皮的识别、黏附和侵入子宫内膜等环节。在“着床窗口期”胚泡的成功植入取决于处于容受状态的子宫内膜和具有侵入性胚泡间的同步发育。这一过程受极其复杂而精细的多因素的调节。在“着床窗口期”,由于受到卵巢激素的作用,子宫内膜上皮和基质增殖、分化,子宫内膜变成一个能吸附胚泡的表面,而间质细胞准备向蜕膜细胞转变。胚泡附着于子宫内膜促使胚泡周围的子宫内膜发生蜕膜反应,子宫内膜处于“容受性”状态,利于胚泡的着床。但子宫内膜“容受性”状态产生的分子机制还不清楚。近年来研究发现,hoxa-10基因对子宫内膜容受性变化的形成及胚泡着床可能有一定影响。同源框基因(Homeobox HOX)是McGinnis[1]和Scott[2]等在果蝇体内发现的一类与果蝇体节突变相关的基因,属于多基因家族的转录调节基因,通过和DNA结合激活或抑制目的基因,其重要功能是决定细胞的定向分化与增殖。HOX基因均含有一个约183个核苷酸组成的同源框序列,编码61个氨基酸构成的同源域结构,通过螺旋-转角-螺旋的结构作为DNA的结合域,于下游靶基因的DNA序列(TTAT或TAAT)相识别,从而激活或抑制下游基因的转录[3]。作为一种多效性的转录调节因子, hoxa-10基因在生殖过程中的作用近年来逐渐受到瞩目,如在胚胎的发育与分化、子宫内膜的增殖与分化、子宫内膜蜕膜化的等。然而在妊娠早期中的表达情况及其对胚胎着床的影响国内外报道较少。因此,有必要对hoxa-10基因在早孕小鼠子宫内膜中的表达规律及其在胚胎着床过程中的作用进行研究。目的:本课题旨在通过研究hoxa-10基因在小鼠子宫内膜表达的规律性变化及其对胚泡植入的影响,初步探讨它在小鼠生殖中的作用。方法:1.收集未孕(记为D0)和早孕1、2、3、4、5、7天小鼠(分别记为D1、D2、D3、D4、D5、D7)子宫内膜,共7组,每组20只小鼠。①运用实时荧光定量PCR (Real-time fluorescence quantitative PCR ,FQ-PCR)分别检测以上各组小鼠子宫内膜hoxa-10基因表达;②免疫组织化学SP法检测以上各组小鼠子宫内膜中hoxa-10蛋白的表达情况;2.用DNA/脂质体复合物分别转染一个可以持续表达hoxa-10基因的质粒和针对hoxa-10基因的反义寡脱氧核苷酸到受孕D2小鼠子宫角内,于孕7天观察小鼠的胚泡着床数。结果:1. FQ-PCR测得随着小鼠妊娠天数的增加,子宫内膜hoxa-10基因表达量也逐渐增高,在孕D4达到峰值,孕D5开始下降,孕D7时表达已接近未孕状态,单因素方差分析结果显示D0、D1和D7各组之间无显著差异(P>0.05),D0、D1和D7三组与其余各组的差异均有显著性差异(Phoxa-10蛋白在小鼠子宫内膜中表达规律与FQ-PCR结果一致,但在早孕小鼠不同时期的子宫内膜中hoxa-10蛋白的表达有以下特点:在小鼠未孕D0至孕D1时,hoxa-10蛋白在子宫腔上皮及腺上皮上有表达,在子宫肌层不表达;在孕D2至D3时,hoxa-10在子宫腔上皮及腺上皮中强表达,在子宫肌层中低表达;从孕D4开始,hoxa-10蛋白在子宫内膜的表达发生转移,子宫上皮表达量开始下降,间质开始表达;孕D5时,在子宫上皮中表达转阴,间质细胞上有表达;孕D7时,hoxa-10在蜕膜间质中继续表达。2.用hoxa-10DNA质粒/脂质体转染孕D2小鼠子宫角,以增强hoxa-10基因表达,小鼠的胚泡着床数明显增加,着床率(%)为79.1±7.14;用hoxa-10反义寡脱氧核苷酸/脂质体转染孕D2小鼠子宫角,抑制hoxa-10基因表达,小鼠的胚泡着床数明显减少,胚泡着床率为33.5±3.72;正常对照组小鼠胚泡着床率为70.8±6.65。各组差异具有统计学意义。结论:hoxa-10基因及蛋白在小鼠子宫内膜中的表达从孕D1至孕D7有从逐渐升高到下降的一个过程,且hoxa-10蛋白随着子宫内膜蜕膜化的完成由子宫腔上皮及腺上皮中强表达转移至子宫肌层间质细胞的低表达,这与胚泡着床时子宫内膜的蜕膜化过程完全一致。表明它可能促进了间质细胞

关键词： hoxa-10 子宫内膜实时荧光定量PCR 反义寡核苷酸

hoxa-10和IL-11Rα在犬子宫中的表达与调节

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Hoxa-10和IL-11Rα在犬子宫中的表达与调节

作者：郭斌吉林大学

学位级别：硕士

本实验通过原位杂交方法对hoxa-10和IL-11Rα基因在发情周期及早期妊娠犬子宫内的表达进行了研究,并利用激素处理模型研究了这些基因的表达是否受卵巢分泌的激素所调控。结果表明,hoxa10主要在犬子宫内膜腺上皮和肌层中表达,且hoxa-10 m... 详细信息

本实验通过原位杂交方法对hoxa-10和IL-11Rα基因在发情周期及早期妊娠犬子宫内的表达进行了研究,并利用激素处理模型研究了这些基因的表达是否受卵巢分泌的激素所调控。结果表明,hoxa10主要在犬子宫内膜腺上皮和肌层中表达,且hoxa-10 mRNA在胚胎着床期表达量最高;在发情期hoxa-10的表达量明显高于休情期;在卵巢切除犬子宫内,雌激素和孕酮均能诱导其表达。IL-11Rα主要在犬子宫内膜腺上皮和胎盘中表达,在犬发情期,IL-11Rα基因的表达量明显高于休情期,IL-11RαmRNA在犬胚胎着床期表达量显著增强,在胎盘形成期表达量达到最高;卵巢切除后犬子宫中雌激素可抑制IL-11Rα基因表达,而孕酮可诱导其表达。这些结果将为犬不孕症的治疗和犬繁殖率的提高等提供一定的理论依据。

关键词： hoxa-10 IL-11Rα 犬子宫胚胎着床

GnRH-a控制性超促排卵(COH)对小鼠着床期hoxa-10基因表达的影响

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生殖与避孕 2012年第7期32卷 438-442,463页

作者：付正英卢建荣苏晓华武警后勤学院附属医院天津300162 天津中医药大学天津300193

目的:研究GnRH-a长方案控制性超促排卵(COH)对小鼠妊娠率、胚胎着床率及着床期hoxa-10基因表达的影响,探讨COH影响胚胎着床的机制。方法:实验动物随机分为实验组(GnRH-a+hMG+hCG)和对照组(生理盐水),雌、雄合笼后观察小鼠阴栓率,于着床... 详细信息

目的:研究GnRH-a长方案控制性超促排卵(COH)对小鼠妊娠率、胚胎着床率及着床期hoxa-10基因表达的影响,探讨COH影响胚胎着床的机制。方法:实验动物随机分为实验组(GnRH-a+hMG+hCG)和对照组(生理盐水),雌、雄合笼后观察小鼠阴栓率,于着床期取小鼠子宫,观察妊娠率及胚胎着床数,计算着床率;应用RT-PCR、Real-time PCR方法及免疫组织化学法分别检测小鼠着床期子宫内膜hoxa-10 mRNA及蛋白的表达。结果:实验组小鼠阴栓率及妊娠率均明显低于对照组(Phoxa-10mRNA及蛋白表达下降,与对照组比较均有明显差异(Phoxa-10表达下降,导致子宫内膜容受性降低,从而影响小鼠妊娠及胚胎着床。

关键词： GnRH-a长方案控制性超促排卵(COH) 胚胎着床 hoxa-10 子宫内膜容受性

不同卵巢癌hoxa-10和PTEN及p53的特异性表达差异及意义

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中华肿瘤防治杂志 2015年第B22期22卷 44-45页

作者：范小华程文俊南京医科大学第一附属医院妇产科江苏南京210029 镇江市第四人民医院妇产科江苏镇江212000

目的比较透明细胞癌合并子宫内膜异位症，卵巢子宫内膜样癌合并子宫内膜异位症，为临床特殊合并症的诊断及治疗提供依据。方法选取2010—12—2014—12患者共i00例，应用免疫组化技术检测各组PTNE、hoxa-10和p53的表达情况。结果PTEN在... 详细信息

目的比较透明细胞癌合并子宫内膜异位症，卵巢子宫内膜样癌合并子宫内膜异位症，为临床特殊合并症的诊断及治疗提供依据。方法选取2010—12—2014—12患者共i00例，应用免疫组化技术检测各组PTNE、hoxa-10和p53的表达情况。结果PTEN在正常妇女、单纯子宫内膜异位症、卵巢透明细胞癌和透明细胞癌合并子宫内膜异位症患者及卵巢子宫内膜样癌合并子宫内膜异位症中的表达逐渐降低。结论PTEN突变与表达缺失与卵巢癌发生发展有关，PTEN蛋白低表达和卵巢癌的侵袭、转移有关。

关键词：卵巢癌子宫内膜异位症 PTEN基因 hoxa-10 p53

不同条件下小鼠子宫内膜中hoxa-10的表达及子宫内膜容受性的变化

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不同条件下小鼠子宫内膜中HOXA-10的表达及子宫内膜容受性的变化

作者：高国强大连医科大学

学位级别：硕士

目的:本课题旨在通过检测hoxa-10在假妊娠和妊娠组小鼠子宫内膜表达的差异,探讨不同条件(促排卵药物、精液及胚胎等)对hoxa-10基因表达的影响及意义方法:将小鼠分为假妊娠组(包括自然周期组、促排卵组、双侧输卵管结扎组)和妊娠组(即单... 详细信息

目的:本课题旨在通过检测hoxa-10在假妊娠和妊娠组小鼠子宫内膜表达的差异,探讨不同条件(促排卵药物、精液及胚胎等)对hoxa-10基因表达的影响及意义方法:将小鼠分为假妊娠组(包括自然周期组、促排卵组、双侧输卵管结扎组)和妊娠组(即单侧输卵管结扎组),运用逆转录PCR(Reserve transcription PCR,RT-PCR)分别检测各组小鼠妊娠第2-7天子宫内膜上hoxa-10基因表达情况并进行比较分析。结果:假妊娠组和妊娠组小鼠子宫内膜上均有hoxa-10基因表达,但两组hoxa-10基因表达存在着明显差异。1.自然周期组,小鼠分泌期子宫内膜hoxa-10基因表达阳性且表达强度在交配后第2-7天未见明显变化(P>0.05)。2.与自然周期相比,促排卵组及双侧输卵管结扎组的小鼠子宫内膜hoxa-10基因表达无明显差异(P>0.05)。3.妊娠组小鼠子宫内膜hoxa-10基因表达在孕第3天开始明显上升,孕第4天达到峰值(Phoxa-10基因表达高峰平台期延长(D4-5),下降缓慢;左侧未孕子宫组的hoxa-10基因表达规律与右侧妊娠子宫组基本一致。结论:1. hoxa-10基因对子宫内膜细胞的分化、蜕膜化和子宫内膜容受性的形成起重要作用。2.促排卵药物、精液及精浆对小鼠子宫内膜hoxa-10基因的表达无明显影响。3.胚胎对小鼠子宫内膜hoxa-10基因的表达有明显促进作用,胚胎可能通过胚胎来源因子影响子宫内膜hoxa-10基因的表达,其表达规律与着床窗一致,提示胚胎有直接及间接促进子宫内膜容受性的作用。

关键词： hoxa-10 子宫内膜容受性逆转录PCR

孕酮诱导hoxa-10基因表达及转基因猪制备研究

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孕酮诱导HOXa-10基因表达及转基因猪制备研究

作者：宋德超华中农业大学

学位级别：硕士

母猪产仔数是衡量母猪生产力非常重要的指标,也是决定养殖业经济和社会效益的关键因素之一。传统育种耗时长限制性较大,而更准确更有预见性的转基因育种技术是传统育种技术的延伸与突破,也可大大缩短育种周期,加快育种进程。经研究表明,... 详细信息

母猪产仔数是衡量母猪生产力非常重要的指标,也是决定养殖业经济和社会效益的关键因素之一。传统育种耗时长限制性较大,而更准确更有预见性的转基因育种技术是传统育种技术的延伸与突破,也可大大缩短育种周期,加快育种进程。经研究表明,hoxa-10基因对生殖系统的发育、子宫内膜形态构建、胚胎发育、子宫容受性的建立、胚胎定位及附植等发挥重要作用,且受雌激素、孕激素和白血病抑制因子等多种因素调控。本实验选取与繁殖性状密切相关的hoxa-10基因作为研究对象,采用孕酮注射诱导hoxa-10基因表达以及采用显微注射转基因猪制备及在染色体水平的检测的研究,主要获得以下结果： 1、妊娠期小鼠注射孕酮激素提高hoxa-10基因的表达研究。从小鼠怀孕起,通过腹腔对小鼠进行孕酮注射,提取子宫内膜RNA进行RT-PCR分析发现,在妊娠第4天注射4 mg孕酮与未处理正常小鼠相比,hoxa-10基因差异表达显著升高（P＜0.05）,注射2 mg孕酮组hoxa-10基因的表达与正常小鼠差异不显著;而在第5天注射2 mg（P＜0.05）与4mg（P＜0.05）和未处理正常妊娠小鼠相比,hoxa-10基因差异显著,在妊娠第6天,注射孕酮与正常妊娠的小鼠hoxa-10基因表达差异不显著。上述研究表明在小鼠妊娠期,hoxa-10基因上调表达受孕酮调控,在小鼠胚胎附植期增加孕酮浓度可以上调hoxa-10基因表达,但是在附植结束后,孕酮对hoxa-10的表达不起作用,可能孕酮仅对在附植期间的hoxa-10表达起作用。 2、采用原核受精卵显微注射方法,手术取卵直接移植,总共移植13头受体母猪,总计移植1细胞胚胎260个,2细胞胚胎68个,合计328个胚胎,平均每头受体母猪移入胚胎数25.23个。最终3头受体猪妊娠足月分娩,共产仔19头,其中1头木乃伊死胎,3头弱仔。妊娠率为23.08%,胚胎正常生长发育并能长成猪仔出生率为5.79%。 3、转基因阳性猪检测采用PCR和Southern杂交技术,从19个仔猪样品中,通过在载体启动子CMV区域和第一外显子设计引物,检测得到PCR阳性猪1头;而Southern杂交探针标记在特异CMV启动子上,得到阳性1头,两者检测结果相同。

关键词：转基因猪小鼠生物模型 hoxa-10 孕酮显微注射

甲氧滴滴涕染毒对小鼠着床期hoxa-10基因表达的影响

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甲氧滴滴涕染毒对小鼠着床期HOXA-10基因表达的影响

作者：翟青枝第四军医大学

学位级别：硕士

环境污染已对人类健康构成严重威胁,研究持久性有机污染物对人类健康与繁衍的不良影响已成为全球普遍关注的焦点。环境有害因素能够长期地、综合地作用于人体,干扰生殖发育的环节,危害生殖健康。已经证实多种化学物质的职业性或环境性... 详细信息

环境污染已对人类健康构成严重威胁,研究持久性有机污染物对人类健康与繁衍的不良影响已成为全球普遍关注的焦点。环境有害因素能够长期地、综合地作用于人体,干扰生殖发育的环节,危害生殖健康。已经证实多种化学物质的职业性或环境性接触会影响人类的生殖功能,使人类的生育能力发生显著改变,导致性欲低下或丧失、不良妊娠结局、不孕不育、后代畸形及肿瘤等[1]。甲氧滴滴涕(MXC)是人们主动投放到环境中数量最大、毒性最广的化学物质。近年来研究发现长期接触MXC可通影响各个环节导致生育能力下降[2,3]。 hoxa-10基因属于腹部B组HOX基因,参与雌性生殖系统的发育,正常子宫内膜形态的构建,并对子宫内膜的增殖与分化、子宫内膜容受性的建立、胚胎的定位及黏附、胞饮突的形成、子宫内膜的蜕膜化以及血管通透性的增强发挥着重要作用[4]。目的: (1)研究MXC染毒对小鼠胚胎着床的影响。 (2)研究MXC对胚胎着床中hoxa-10基因表达及蛋白表达的影响。 (3)探讨MXC影响胚胎着床的分子机制。方法: (1)采用腹腔注射MXC染毒法,根据我科前期试验,将40只雌性性成熟昆明小鼠分为对照组(芝麻油组)、低剂量组(MXC 16mg/(kg·d)组)、中剂量组(MXC 32mg/(kg·d)组)、高剂量组(MXC 64mg/(kg·d)组)进行染毒,并在染毒过程中给予雌:雄2:1合笼处理,于孕5天处死小鼠,观察胚胎着床情况。 (2)采用HE染色法对各组小鼠子宫形态进行比较。 (3)采用实时定量荧光PCR法对各组小鼠子宫组织中的hoxa-10 mRNA进行检测。 (4)采用免疫荧光及western blotting法对各组小鼠子宫组织中hoxa-10蛋白的表达进行检测。结果: (1)MXC染毒小鼠子宫形态及胚胎着床数明显下降。对照组胚胎着床数量大且分布均匀,染毒组胚胎着床分布不均,且着床数有不同程度的减少。其中,中、高剂量组与对照组相比差异明显(phoxa-10蛋白表达的定性分析,免疫荧光显示,子宫蜕膜有绿色荧光,呈现阳性反应,平滑肌层未见明显阳性反应。虽各组均有显色,但对照组荧光明显亮于各染毒组。染毒组荧光强度随染毒剂量增加而减弱,但染毒组之间无明显统计学意义。 (4)MXC染毒对受孕小鼠子宫组织中hoxa-10 mRNA表达的影响,实时定量荧光PCR明显的显示:中、高剂量组均显著降低hoxa-10 mRNA的表达水平,且有统计学意义(phoxa-10 mRNA的表达水平有所降低,但无统计学意义,中、高剂量组与低剂量组相比,hoxa-10 mRNA的表达水平明显降低,且有统计学意义(phoxa-10蛋白表达量的影响,western blotting结果表明:hoxa-10基因编码55KD及16KD两种蛋白。各剂量组两种蛋白表达量与hoxa-10 mRNA的表达相一致。但16KD蛋白的表达量低于55KD的蛋白。讨论: (1)MXC染毒后小鼠胚胎着床数减少,且中、高剂量组减少明显,有统计学意义。MXC表现出微弱的雌激素样作用,改变了子宫内环境,扰乱正常子宫容受性窗口期,从而干扰胚胎着床,使胚胎着床数下降。 (2)MXC染毒后虽然影响胚胎着床,然而并不影响胚胎着床后着床处子宫的正常组织结构。根据所得H-E染色结果考虑MXC染毒对胚胎着床的影响主要是改变着床期子宫内环境,着床后对子宫组织的影响较小。 (3)hoxa-10 mRNA在各剂量组受孕子宫中均有表达。随着MXC染毒剂量的增加,hoxa-10 mRNA的表达量降低。考虑MXC影响胚胎着床的机制是降低hoxa-10 mRNA的表达量从而影响着床期子宫内环境,使子宫容受性窗口期开放时间及持续时间与胚胎发育不同步,从而降低着床数。 (4)hoxa-10蛋白在各剂量组受孕子宫的蜕膜组织中均有表达。MXC染毒可降低hoxa-10蛋白的表达但作用效果不全相同。hoxa-10基因编码55KD及16KD两种蛋白表达量的改变与hoxa-10 mRNA的改变相一致,考虑两种蛋白均与hoxa-10基因对胚胎着床的作用有关。而16KD蛋白的表达量小于55KD的蛋白,且受MXC的抑制作用更为明显。

关键词：甲氧滴滴涕 hoxa-10 生殖毒性胚胎着床免疫荧光实时荧光PCR 蛋白印记法

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hoxa-10在早孕小鼠子宫内膜中的表达

重庆医科大学学报 2007年第12期32卷 1260-1264页

作者：贾咏存周生建魏莎莉杨戎陈晓玲李南重庆医科大学公共卫学院生殖生物学研究室重庆400016 重庆市渝中区人口和计划生育生殖健康中心重庆400010 重庆医科大学公共卫生学院生殖生物学研究室重庆400016

目的:探讨hoxa-10基因在小鼠胚胎着床过程中的作用。方法:分别应用FQ-PCR和免疫组化方法检测未孕及早孕第1、2、3、4、5、7天小鼠子宫内膜hoxa-10基因及蛋白的表达。结果:FQ-PCR测得随着小鼠妊娠天数的增加,子宫内膜hoxa-10基因表达量... 详细信息

目的:探讨hoxa-10基因在小鼠胚胎着床过程中的作用。方法:分别应用FQ-PCR和免疫组化方法检测未孕及早孕第1、2、3、4、5、7天小鼠子宫内膜hoxa-10基因及蛋白的表达。结果:FQ-PCR测得随着小鼠妊娠天数的增加,子宫内膜hoxa-10基因表达量也逐渐增高,在孕4天达到峰值免疫组化分析显示hoxa-10蛋白在子宫内膜的表达规律与FQ-PCR结果一致。结论:在小鼠胚胎着床过程中,hoxa-10在子宫内膜中高表达,可能对子宫内膜容受性变化有重要的调节作用。

关键词： hoxa-10 胚胎着床实时荧光定量PCR 免疫组织化学