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中国兽医科学 2011年第8期41卷 771-777页

作者：马米玲郝雪峰关贵全刘志杰李有全刘爱红中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室农业部草食动物疫病重点开放实验室甘肃省动物寄生虫病重点实验室甘肃兰州730046

利用RT-PCR方法扩增得到猪繁殖障碍与呼吸综合征病毒(PRRSV)hn-hw分离株全长基因组的17个片段。拼接后发现该毒株基因组全长为15 334nt(包括poly A尾巴),与国内外14株美洲型PRRSV分离株全序列相似性介于85.3%～99.4%之间,而与欧洲型PRRS... 详细信息

利用RT-PCR方法扩增得到猪繁殖障碍与呼吸综合征病毒(PRRSV)hn-hw分离株全长基因组的17个片段。拼接后发现该毒株基因组全长为15 334nt(包括poly A尾巴),与国内外14株美洲型PRRSV分离株全序列相似性介于85.3%～99.4%之间,而与欧洲型PRRSV Lelystad Virus(M96262)和SD01-08(DQ489331)分离株全序列相似性仅为59.7%和59.9%。序列分析表明,该毒株包括189nt的5′UTR,14 981nt的蛋白编码区和150nt的3′UTR及14nt的poly(A)尾巴。同美洲标准株ATCC VR-2332相比,Nsp2存在30个氨基酸的缺失。本研究结果补充了PRRSV毒株的基因组信息数据,为深入研究该毒株的遗传与变异及其与生物学特性的关系奠定了基础。

关键词：猪繁殖与呼吸综合征病毒 hn-hw株全基因组特征

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猪繁殖障碍与呼吸综合征病毒hn-hw株ORF2-7基因的克隆与序列分析

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华北农学报 2009年第4期24卷 36-40页

作者：郝雪峰关贵全李有全马米玲刘爱红马新龙江丽丽殷宏罗建勋中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室甘肃省动物寄生虫病重点实验室甘肃兰州730046 内蒙古呼和浩特市新城区畜牧兽医局内蒙古呼和浩特010050

为了研制有效的PRRS疫苗,参照GenBank中公布的猪繁殖障碍与呼吸综合征病毒（PRRSV）美洲型ATCCVR-2332基因序列,用Primer 5.0软件分别设计合成了针对PRRSVORF2、ORF3、ORF4、ORF5、ORF6和ORF7基因的特异性引物,利用RT-PCR从hn-hw株分别... 详细信息

为了研制有效的PRRS疫苗,参照GenBank中公布的猪繁殖障碍与呼吸综合征病毒（PRRSV）美洲型ATCCVR-2332基因序列,用Primer 5.0软件分别设计合成了针对PRRSVORF2、ORF3、ORF4、ORF5、ORF6和ORF7基因的特异性引物,利用RT-PCR从hn-hw株分别扩增得到了大小约771,904,564,670,619和586 bp的片段,并将扩增的片段插入pGEM-Teasy载体,然后转化到大肠杆菌JM109感受态细胞中,挑取阳性克隆PCR和酶切鉴定后进行测序。利用DNAStar软件将hn-hw株ORF2-7基因的核苷酸序列和推导氨基酸序列与ATCC VR-2332、JX-A1、CH-1a、BJ-4、HB-1、HB-2、HEB-1、HUB-1、HUB-2、SP、P129、MN184A、RespPRRS MLV、Prime Pac、LV等毒株相应序列进行了同源性分析,并绘制系统进化树。结果显示,hn-hw株与美洲型ATCC VR-2332核苷酸同源性为88.9%-94.9%,与欧洲型LV核苷酸同源性为64.0%-69.0%;推导氨基酸序列与ATCC VR-2332株同源性为82.4％～96．0％，与LV株的同源性为34．5％～78．9％。系统进化树表明，hn—hw株属于美洲型，与JXA1、HUB-1、HUB-2、HEB-1亲缘关系较近。

关键词：猪繁殖障碍与呼吸综合征病毒 hn-hw株 ORF2-7 克隆与序列分析

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猪繁殖与呼吸综合征病毒hn-hw株的分离与鉴定

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华北农学报 2010年第5期25卷 38-41页

作者：马米玲郝雪峰关贵全李有全刘志杰刘爱红任巧云牛庆丽刘军龙殷宏罗建勋中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室甘肃省动物寄生虫病重点实验室甘肃兰州730046

用细胞传代的方法从湖南省宁乡县发病猪所采病料中分离到一株猪繁殖和呼吸综合征病毒(PRRSV)毒株。该毒株能在Marc-145细胞上增殖并产生特征性的细胞病变,RT-PCR检测可扩增出670bp的特异性的ORF5基因片段,经美洲型PRRSV荧光抗体染色呈... 详细信息

用细胞传代的方法从湖南省宁乡县发病猪所采病料中分离到一株猪繁殖和呼吸综合征病毒(PRRSV)毒株。该毒株能在Marc-145细胞上增殖并产生特征性的细胞病变,RT-PCR检测可扩增出670bp的特异性的ORF5基因片段,经美洲型PRRSV荧光抗体染色呈阳性反应,电镜观察其超微结构显示,病毒粒子大小为50～60nm。命名该分离毒株为hn-hw株。

关键词：猪繁殖与呼吸综合征病毒 hn-hw株分离鉴定

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