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Growth suppression and radiosensitivity increase by HMGB1 in breast cancer

Acta Pharmacologica Sinica 2007年第12期28卷 1957-1967页

作者： Yang JIAO~2,Hai-chao WANG~3,Sai-jun FAN~(2,4,5)~2 School of Radiology and Public Health,Soochow University,Suzhou 215123,China ~3 Department of Emergency Medicine,North ShoreUniversity Hospital,New York University School of Medicine,Manhasset,New York 11030,USA ~4 Department of Oncology,LombardiComprehensive Cancer Center,Georgetown University,Washington DC,Washington 20057,USA SchoolofRadiologyandPublicHealth SoochowUniversitySuzhou215123China DepartmentofEmergencyMedicine NorthShoreUniversityHospitalNewYorkUniversitySchoolofMedicineManhassetNewYork11030USA

Aim:HMGB 1 （high-mobility group box-1） is a nuclear protein containing a con-sensus RB （retinoblastoma）-binding LXCXE *** this study,we studied thepotential association of HMGB 1 and RB and the in vitro and in vivo activities ofHMGB 1 in human breast cancer ***:The protein-protein interactionwas determined by immunoprecipitation-Western blotting and glutathione-S-trans-ferase capture assays;cell growth and radiosensitivity were examined by cellcounts,MTT assay,and clonogenic assay;cell cycle progression and apoptosiswere evaluated using flow cytometry;and the antitumor activity of HMGB 1 wasexamined with tumor xenografts in nude ***:HMGB 1 was associatedwith RB via a LXCXE motif-dependent *** 1 enhanced the abilityof RB for E2F and cyclin A transcription *** increased expression ofHMGB 1 conferred an altered phenotypes characterized by the suppression of cellgrowth;G1arrest and apoptosis was induced in MCF-7 cells containing the wild-type retinoblastoma （Rb） gene,but showed no activities in BT-549 cells contain-ing the Rb gene *** HMGB 1-induced apoptosis accompanied by caspase3 activation and PARP (poly（ADP-ribose）polymerase) *** 1 elevatedthe radiosensitivity of breast cancer cells in both the MCF-7 and BT-549 cell *** enhanced expression of HMGB 1 caused a suppression of growth of MCF-7tumor xenografts in nude mice,while LXCXE-defective HMGB 1 completely lostantitumor growth ***:HMGB 1 functions as a tumor suppressorand radiosensitizer in breast cancer.A HMGB 1-RB interaction is critical for theHMGB 1-mediated transcriptional repression,cell growth inhibition,G1cell cyclearrest,apoptosis induction,and tumor growth suppression,but is not required ***,it may be possible to design new therapies for thetreatment of breast cancer that exert their effects by modulating the HMGB 1 andRB regulatory pathway and HMGB 1-related gene therapy.

关键词： hmgbi RB breast cancer cell growth

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电针胆下合穴阳陵泉等对AC模型豚鼠α7nAchR及TNF-α的影响

电针胆下合穴阳陵泉等对AC模型豚鼠α7nAchR及TNF-α的影响

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作者：过灵香湖南中医药大学

学位级别：硕士

目的:对比观察电针急性胆囊炎(AC)模型豚鼠阳陵泉、上巨虚、下巨虚、足三里穴对胆囊组织中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、烟碱型乙酰胆碱受体α7(α7nAchR)及血清中的高迁移率族蛋白B1(HMGB1)表达水平的影响,探讨胆之下合穴阳陵泉治疗胆腑... 详细信息

目的:对比观察电针急性胆囊炎(AC)模型豚鼠阳陵泉、上巨虚、下巨虚、足三里穴对胆囊组织中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、烟碱型乙酰胆碱受体α7(α7nAchR)及血清中的高迁移率族蛋白B1(HMGB1)表达水平的影响,探讨胆之下合穴阳陵泉治疗胆腑病是否存在相对特异性。方法:将72只健康SD豚鼠随机分为空白、模型、阳陵泉、上巨虚、下巨虚、足三里组共六组,每组12只,雌雄各半。除空白组外均胆囊注射大肠杆菌建立豚鼠急性胆囊炎模型,造模成功并治疗5天后,取胆囊组织进行HE染色,观察各组豚鼠胆囊形态学变化,运用Western blot法检测豚鼠胆囊组织α7 nAchR受体的表达,免疫组化法检测胆囊组织中TNF-α的表达,ELISA法检测豚鼠血清中HMGB1水平。结果:1.光镜下胆囊形态学的观察(10x40倍),结果显示:空白组:粘膜上皮细胞为单层柱状上皮,排列整,固有膜较薄,含部分小血管和淋巴管,固有膜及粘膜下层无淤血扩张,基层排列不规整,浆膜完整,无炎症反应。模型组:有大量粘膜上皮坏死脱落,充血水肿,固有层有大量炎性细胞浸润。阳陵泉组:粘膜上皮大部分完好,固有层松弛,有充血水肿,部分淋巴细胞浸润,有较少中性粒浸润,肌层和浆膜层充血。其他穴位组:粘膜上皮有部分脱落,固有层及粘膜下层及肌层有中性粒细胞浸润,血管明显扩张淤血。2.各组豚鼠组织α7nAch R含量检测,结果显示:与空白组比,余组胆囊组织中α7nAchR表达水平均明显偏低(P<0.01),差异有显著的统计学意义(P<0.01)。电针治疗后与模型组比较,各电针治疗组胆囊组织中α7nAchR表达均明显偏高(P<0.01),差异有显著的统计学意义(P<0.01)。与阳陵泉比较,上巨虚、下巨虚、足三里组豚鼠胆囊组织中α7nAchR表达均偏低,差异有统计学意义(P<0.01或P<0.05)。3.各组豚鼠血清HMGB1含量检测,结果显示:与空白组比,血清中HMGB1含量表达均明显偏高,差异有显著的统计学意义(P<0.01)。与模型组比较,各电针治疗组血清中HMGB1含量表达均明显偏低,差异有显著的统计学意义(P<0.01)。与阳陵泉比较,上巨虚、下巨虚、足三里组血清中HMGB1含量表达均偏高,差异有显著的统计学意义(P<0.01)。4.各组组织中TNF-α的表达检测,结果显示:与空白组比,胆囊组织中TNF-α表达均明显偏高,差异有显著的统计学意义(P<0.01)。电针治疗后与模型组比,胆囊组织中TNF-α表达均明显偏低,差异有显著的统计学意义(P<0.01)。与阳陵泉组比,上巨虚组、下巨虚组、足三里组胆囊组织中TNF-α表达均偏高,差异有统计学意义(P<0.01或P<0.05)。结论1.电针消化系相关的内腑下合穴对AC豚鼠均可产生不同程度的治疗作用,其机制可能是通过调节α7nAchR、TNF-α表达及HMGB1含量而达到抑制炎症因子、减轻炎症反应、保护AC模型豚鼠胆囊粘膜实现的2.对比可知电针阳陵泉对AC豚鼠炎症干预效果优于上巨虚、下巨虚及足三里穴,表明电针阳陵泉穴治疗AC具有一定的相对特异性。

关键词：电针 AC模型豚鼠下合穴 α7nAchR TNF-α hmgbi 合治内府

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LPS诱导原代培养肝实质细胞与枯否细胞表达和释放HMGB1

LPS诱导原代培养肝实质细胞与枯否细胞表达和释放HMGB1

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广东省肝脏病学会2007年年会

作者：赵中夫韩德五刘明社张国英张芸杨慧长治医学院肝病研究所山西医科大学肝病研究所

目的观察LPS诱导HMGB1在肝实质细胞与枯否细胞的表达和细胞外释放。方法培养瓶中分别培养原代肝实质细胞和枯否细胞,24 h后收获对照组和500 ng／ml LPS诱导组两种细胞,反复冻融,用半定量PT-PCR和Western blot法检测HMGB1-mRNA水平和HMGB... 详细信息

目的观察LPS诱导HMGB1在肝实质细胞与枯否细胞的表达和细胞外释放。方法培养瓶中分别培养原代肝实质细胞和枯否细胞,24 h后收获对照组和500 ng／ml LPS诱导组两种细胞,反复冻融,用半定量PT-PCR和Western blot法检测HMGB1-mRNA水平和HMGB1表达水平;接种原代肝实质细胞和枯否细胞于24孔板中,继续培养6 h、12 h、24 h和48 h,Western blot法检测各时间点对照组和 500 ng／ml LPS诱导组培养液中HMGB1含量。结果 LPS诱导24 h后,与相应对照组比较,肝实质细胞和枯否细胞HMGB1-mRNA表达水平明显增强(t=31．32和45．90,P0．05),但培养随时间延长,其含量明显增高(F=42．74,P<0．05),且在12 h、24 h和48 h均明显高于对照组(t分别= 21．95,32.39,44．16,P<0．05)。结论 LPS可诱导肝实质细胞和枯否细胞HMGB1表达增强,肝实质细胞不主动释放HMGB1,而枯否细胞能主动释放HMGB1到细胞外。

关键词：肝实质细胞枯否细胞 hmgbi LPS

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