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中国免疫学杂志 2002年第11期18卷 772-775页

作者：李卫党范丽安上海第二医科大学上海市免疫学研究所上海200025

目的 :构建人白细胞抗原 (hla c)基因真核细胞表达载体 ,在JAR细胞表面表达 ,并对其功能进行探讨。方法 :用RT PcR从人外周血淋巴细胞的总mRNA中逆转录扩增hla c的cDNA ,克隆到PBluescriptSK + -噬菌粒中 ;测序鉴定后 ,定向亚克隆到真... 详细信息

目的 :构建人白细胞抗原 (hla c)基因真核细胞表达载体 ,在JAR细胞表面表达 ,并对其功能进行探讨。方法 :用RT PcR从人外周血淋巴细胞的总mRNA中逆转录扩增hla c的cDNA ,克隆到PBluescriptSK + -噬菌粒中 ;测序鉴定后 ,定向亚克隆到真核细胞表达载体pcDNA3中。经脂质体转染JAR细胞 ,G4 18筛选阳性克隆 ,FAcS检测hla c分子的表达。转染hla c分子的JAR细胞再与分离的NK细胞进行细胞毒试验。结果 :限制性内切酶酶切和序列分析表明 ,克隆到真核细胞表达载体pcDNA3中的hla c等位基因是hla cw 0 6 0 2 ,该分子在JAR细胞株获得高效表达。直接分离的PBL细胞对JAR细胞以及表达hla c分子的JAR细胞无细胞毒作用 ;而IL 2活化的NK细胞对这些细胞都有细胞毒作用。结论 :hla c基因的成功表达为研究hla c分子与NK细胞受体 (KIR)之间的关系奠定了基础 ,NK细胞对JAR细胞的杀伤可能存在不依赖hla c分子的机制。

关键词： hla-c基因真核细胞 RT-PcR 基因克隆基因表达载体构建鉴定

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五例样本hla-c基因测序分型中等位基因丢失及其原因分析

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中华医学遗传学杂志 2009年第5期26卷 562-566页

作者：曾健强徐筠娉王大明邹红岩邓志辉杨宝成广东省深圳市血液中心深圳市组织配型与免疫遗传重点实验室518035

目的探讨hla-c基因测序分型时等位基因漏检和丢失的原因，以提高hla测序分型的成功率和准确性。方法620份随机选择的深圳健康捐血者血样，采用AlleleSEQRhla—cplus测序分型试剂盒进行检测，对无完全匹配、分型结果“异常”的标本，采... 详细信息

目的探讨hla-c基因测序分型时等位基因漏检和丢失的原因，以提高hla测序分型的成功率和准确性。方法620份随机选择的深圳健康捐血者血样，采用AlleleSEQRhla—cplus测序分型试剂盒进行检测，对无完全匹配、分型结果“异常”的标本，采用分子克隆和测序方法进行全长单倍体序列分析；对未检出新的碱基点突变的样本，进一步采用自行设计的PcR引物和AlleleSEQR试剂盒中的测序引物进行再测序，分析测序分型结果“异常”的原因。结果620份经AlleleSEQRhla—c测序分型的样本中，发现5例样本无完全匹配的基因型，与之最接近的多种等位基因型均存在单个碱基的不匹配；并且在第4外显子出现碱基杂合，但第2和第3外显子区域内无杂合碱基。经分子克隆和单倍体测序，以及采用自行设计的PcR引物和AlleleSEQR试剂盒中的测序引物再测序，证实了5例标本均存在cw＊0706等位基因漏检和丢失现象，未发现新的碱基点突变。结论hla-c基因测序分型时，因PcR引物与模板DNA不匹配会导致等位基因的漏检和丢失。根据中国人群hlac分子全长序列特点，开发适合于中国人群的测序分型试剂十分必要。

关键词：人类白细胞抗原 hla-c基因测序分型克隆测序分析等位基因丢失

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山东地区汉族人群hla-c基因分组与梅毒的相关性研究

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中国输血杂志 2013年第5期26卷 450-452页

作者：刘丽庄云龙乔文本刘虹张毅刘艳聂向民宋永红朱传福王大见山东省血液中心山东济南250014 济南市皮肤病防治院

目的探讨hla-c基因分组与梅毒的相关性,以期发现梅毒的抗性基因型。方法采用序列特异性引物聚合酶链反应(PcR-SSP)法,对山东汉族231例梅毒患者和247例健康个体的hla-c基因分组进行检测和分析。结果梅毒患者组hla-c1c1基因型频率显著低... 详细信息

目的探讨hla-c基因分组与梅毒的相关性,以期发现梅毒的抗性基因型。方法采用序列特异性引物聚合酶链反应(PcR-SSP)法,对山东汉族231例梅毒患者和247例健康个体的hla-c基因分组进行检测和分析。结果梅毒患者组hla-c1c1基因型频率显著低于对照组(Phla-c1c2和hla-c2c2以及hla-c1组和hla-c2组的基因型频率在2人群中相比差异无统计学意义。结论在山东汉族人群中hla-c1c1可能是梅毒的抗性基因型。

关键词： hla-c基因序列特异性引物聚合酶链反应梅毒

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自然杀伤细胞免疫球蛋白样受体及其配体hla-c与HcV感染的相关性研究

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临床血液学杂志（输血与检验） 2020年第3期33卷 377-380页

作者：邵雷马玲史丽莉林红江苏省血液中心输血研究室南京210042

目的:自然杀伤细胞免疫球蛋白样受体(KIRs)是自然杀伤(NK)细胞上介导天然免疫的主要受体,同时KIRs也在T细胞上表达,与获得性免疫相关。本研究在对KIRs及其配体hla-c进行分型的基础上,探讨KIRs、hla-cw的基因分型及其联合体与HcV感染的... 详细信息

目的:自然杀伤细胞免疫球蛋白样受体(KIRs)是自然杀伤(NK)细胞上介导天然免疫的主要受体,同时KIRs也在T细胞上表达,与获得性免疫相关。本研究在对KIRs及其配体hla-c进行分型的基础上,探讨KIRs、hla-cw的基因分型及其联合体与HcV感染的相关性。方法:采用序列特异性引物聚合酶链反应(PcR-SSP)法,对江苏献血人群中164例抗-HcV酶联免疫吸附试验(ELISA)双试剂反应性献血者(抗-HcV阳性组)和241例合格献血者(对照组)的KIRs和hla-c的基因型进行检测和分析。结果:hla-cw的基因分型在抗-HcV阳性组和对照组中的分布无统计学意义;KIRs中与hla-c配对的KIR基因分型仅有KIR2DS2在2组中的表达频率有差异(对照组21.2%vs抗-HcV阳性组37.8%),差异有统计学意义(Phla-c1c1与KIR2DS2的配对组合在2组中差异有统计学意义(22.1%vs 42.0%,PcV感染的相关基因;hlac1c1/KIR2DS2的配对组合可能激活了NK细胞和其他免疫细胞的功能,抑制病毒复制或促进HcV清除的功能,有待进一步实验证实。

关键词： HcV感染 hla-c基因 KIRs基因献血者

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