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应用基因芯片技术进行hla-a抗原DNA分型

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中华血液学杂志 2004年第5期25卷 316-317页

作者：李成涛谭建明杨颖康敏华李瑶上海博星基因芯片研究所 200092 上海市第一人民医院上海市器官移植研究中心上海市血液中心

血清学方法是hla-A位点的经典分型方法[1].血清学之间的交叉反应,尤其是A19分裂子之间较强的交叉反应以及淋巴细胞膜抗原的弱表达,常常使分型出现技术上的困难和判断误差,因此hla-A位点的基因分型成为必然趋势.我们在成功研制了DR位点... 详细信息

血清学方法是hla-A位点的经典分型方法[1].血清学之间的交叉反应,尤其是A19分裂子之间较强的交叉反应以及淋巴细胞膜抗原的弱表达,常常使分型出现技术上的困难和判断误差,因此hla-A位点的基因分型成为必然趋势.我们在成功研制了DR位点基因分型芯片的基础上[2],研制了hla-A位点的基因分型芯片并进行了临床验证和应用,现报告如下。

关键词：基因芯片技术 hla-a抗原 DNA分型血清学

hla-a抗原在喉癌鳞状细胞癌中的表达及临床意义

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医学信息（医学与计算机应用） 2014年第11期18卷 164-165页

作者：王丽进沈阳市第一人民医院辽宁沈阳110041

目的检测人类白细胞抗原-A抗原(hla-A)在喉鳞状细胞癌中的表达及临床意义。方法采用免疫组化SP法和流式细胞术,观察20例正常喉组织和58例喉鳞状细胞癌组织中hla-a抗原的表达,并结合患者的临床病理资料对其结果进行分析。结果①hla-A抗... 详细信息

目的检测人类白细胞抗原-A抗原(hla-A)在喉鳞状细胞癌中的表达及临床意义。方法采用免疫组化SP法和流式细胞术,观察20例正常喉组织和58例喉鳞状细胞癌组织中hla-a抗原的表达,并结合患者的临床病理资料对其结果进行分析。结果①hla-a抗原在后鳞状细胞癌和正常喉组织中的阳性表达率分别为72.4%(42/58),100%(20/20),二者之间差异有统计学意义。(hla-a抗原在各级喉鳞状细胞癌中均有表达,且表达的阳性率随喉癌分化程度的下降而下降,在不同病理分级之间的阳性率有显著性差异(hla-a抗原的平均荧光指数分别为(±)(4.53±0.85)和(8.24±1.30),两组比较具有显著性差异(hla-a抗原可能作为喉鳞状细胞癌发生,发展不同时期的一个标志物,并对判断喉鳞状细胞癌的预后有一定的价值,为临床诊断治疗提供一定的理论依据。

关键词：喉肿瘤癌鳞状细胞 hla-a抗原免疫组化技术流式细胞术

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hla—A抗原与白塞病的相关性分析

中华临床医药杂志（北京） 2002年第16期3卷 34-35页

作者：汪运山亓国钢等山东大学临床医学院济南市中心医院250013 山东大学第二医院

目的：探讨hla－A抗原与白塞病之间的相关性。方法：应用微量淋巴细胞毒试验对20名符合国际白塞病委员会分类诊断标准的白塞病患者的hla－A抗原进行了检测。同时以30例正常人作对照组。结果：在白塞病患者中，hla－A2和A26表型频率与对... 详细信息

目的：探讨hla－A抗原与白塞病之间的相关性。方法：应用微量淋巴细胞毒试验对20名符合国际白塞病委员会分类诊断标准的白塞病患者的hla－A抗原进行了检测。同时以30例正常人作对照组。结果：在白塞病患者中，hla－A2和A26表型频率与对照组相比无统计学意义（P值均＜0．05,相对危险度分别为1．8和2．7）。结论：hla－A抗原与白塞病的易感性无相关。

关键词： hla-a抗原白塞病 BD 微量淋巴细胞毒试验易感性

重庆地区汉族hla-A,B抗原频率调查及分析

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重庆医学 2002年第12期31卷 1268-1269页

作者：王蓉感毛伟余梅贵重庆市血液中心 400014

重庆是我国人口最多,地域最广的直辖市.汉族人口近3 000万,目前还没有对重庆汉族人群hla-A,B抗原频率和基因频率的报道.此次调查首次对重庆地区汉族人群hla-A,B抗原频率和基因频率进行调查、分析.填补了此方面数据的空白.同时与四川汉... 详细信息

重庆是我国人口最多,地域最广的直辖市.汉族人口近3 000万,目前还没有对重庆汉族人群hla-A,B抗原频率和基因频率的报道.此次调查首次对重庆地区汉族人群hla-A,B抗原频率和基因频率进行调查、分析.填补了此方面数据的空白.同时与四川汉族人群hla-A,B基因频率进行统计学分析、比较,对于巴蜀文化的历史、起源和发展提供支持.

关键词：重庆汉族调查 hla-a抗原 hla-B抗原

三种白癜风抗原肽hla-A*0201四聚体的构建和临床初步应用

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浙江大学学报（医学版） 2014年第5期43卷 553-558页

作者：吴俊琪石佳董剑峰蒋亦秀庄顺红杨军浙江大学金华医院检验科浙江金华321000 北京旷博生物技术有限公司北京100176 金华市第五医院皮肤科浙江金华321000 杭州师范大学医学院公共卫生系浙江杭州310016

目的：体外构建三种白癜风抗原肽hla-A ＊ 0201复合物四聚体,并用其检测白癜风患者外周血中抗原特异性细胞毒性CD8＋T细胞（CTL）.方法：取原核表达hla0201＊-BSP和β2M蛋白,分别同MelanA 26-35、gp100 209-217、tyrosinase 1-9三种白... 详细信息

目的：体外构建三种白癜风抗原肽hla-A ＊ 0201复合物四聚体,并用其检测白癜风患者外周血中抗原特异性细胞毒性CD8＋T细胞（CTL）.方法：取原核表达hla0201＊-BSP和β2M蛋白,分别同MelanA 26-35、gp100 209-217、tyrosinase 1-9三种白癜风抗原肽进行体外复性折叠,形成可溶性抗原肽hla-A＊0201复合物,经BirA酶作用并通过凝胶过滤层析法纯化得复合物单体,再与藻红蛋白标记的链霉亲合素按4：1比例耦合成四聚体,并采用斑点印迹法对上述构建的四聚体进行鉴定.运用流式细胞术检测分析该四聚体结合白癜风患者外周血中特异性CTL的能力.结果：斑点印迹检测显示三种具有天然构象的生物素化的白癜风抗原肽hla-A＊0201四聚体复合物构建成功;流式细胞术检测结果显示所制备的四聚体可与白癜风患者血液中抗原特异性CTL结合.结论：成功制备了三种具有完整构象的生物素化白癜风抗原肽hla-A＊ 0201四聚体,此四聚体均可检测白癜风抗原特异性CTL.

关键词：白癜风 hla-a抗原 β2微球蛋白抗原抗体复合物 T淋巴细胞,细胞毒性聚合物肽类

内蒙古汉族Stevens-Johnson综合征/中毒性表皮坏死松解症患者致敏药物及hla基因筛查

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中华皮肤科杂志 2020年第9期53卷 680-684页

作者：李欣韩建文内蒙古医科大学附属医院皮肤科呼和浩特010010

目的总结内蒙古汉族Stevens-Johnson综合征/中毒性表皮坏死松解症(SJS/TEN)患者致敏药物及筛查易感基因。方法内蒙古医科大学附属医院皮肤科2015—2019年确诊的68例汉族SJS/TEN患者,抽取外周血提取DNA,采用PCR筛查hla-B*5801、hla-B*150... 详细信息

目的总结内蒙古汉族Stevens-Johnson综合征/中毒性表皮坏死松解症(SJS/TEN)患者致敏药物及筛查易感基因。方法内蒙古医科大学附属医院皮肤科2015—2019年确诊的68例汉族SJS/TEN患者,抽取外周血提取DNA,采用PCR筛查hla-B*5801、hla-B*1502、hla-A*3101等位基因。收集患者的临床资料,参照基因分型,分析致敏药物。结果68例SJS/TEN患者,男36例,女32例,年龄46.06±19.97(3~84)岁。检出hla-B*5801阳性5例,4例为别嘌醇致敏;hla-B*1502阳性14例,5例为卡马西平、4例为拉莫三嗪致敏,5例致敏/可疑致敏药物为抗菌药物、解热镇痛药等;hla-A*3101阳性1例,可疑致敏药物为中药活血针剂,成分不清。结论hla-B*5801对别嘌醇、hla-B*1502对卡马西平和拉莫三嗪的预测性良好,建议用药前筛查,而hla-A*3101在本地区人群阳性率不高。

关键词： Stevens-Johnson综合征表皮坏死松解症中毒性 hla-a抗原 hla-B抗原基因型卡马西平别嘌呤醇

急性HIV感染者hla-A、B携带Bw4簇对CD4 T细胞计数、病毒载量的影响

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中华医学杂志 2010年第32期90卷 2242-2245页

作者：张欣闫惠平杨红兵李伟华张海萍计云霞崔丹首都医科大学附属北京佑安医院感染与免疫研究中心 100069 英国牛津大学医学研究所

目的观察急性人类免疫缺陷病毒（HIV）感染者人类白细胞抗原（hla）A、hla-B携带Bw4簇对其CD4 T细胞计数、病毒载量的影响.方法用序列特异性引物-聚合酶链反应（SSP-PCR）对2006-2009年北京及其周边地区的95例急性HIV感染者的hla-A、... 详细信息

目的观察急性人类免疫缺陷病毒（HIV）感染者人类白细胞抗原（hla）A、hla-B携带Bw4簇对其CD4 T细胞计数、病毒载量的影响.方法用序列特异性引物-聚合酶链反应（SSP-PCR）对2006-2009年北京及其周边地区的95例急性HIV感染者的hla-A、B等位基因分型,检测CD4 T细胞计数和病毒载量,分析hla-A、B携带Bw4对急性HIV感染者CD4 T细胞计数、病毒载量的影响.结果（1）在95例急性HIV感染者中,hla-A、hla-B携带Bw4分别占32.6%（31/95）、60.0%（57/95）.hla-B携带Bw4/4、Bw4/6、Bw6/6的感染者分别为21.1%（20/95）、38.9%（37/95）、40.0%（38/95）.（2）与CD4 T细胞计数＜500个/μl患者比较,CD4 T细胞计数≥500个/μl患者携带Bw4数量更多（平均秩次：56.7比41.6,U=749.5,P＜0.01）.最少的感染者是hla-A、B携带3个Bw4且CD4 T细胞＜500个/μl（1例）,其次是hla-A、B携带0或3个Bw4且CD4 T细胞≥500个/μl（均为7例,x2=12.6,P＜0.01）.（3）hla-A、B携带0或1个Bw4的感染者其CD4 T细胞计数均低于携带3个Bw4的感染者（中位数：430、425个/μl比651个/μl）,而病毒载量均高于携带3个Bw4的感染者（对数值,中位数：4.48、4.40比3.43,均P＜0.05）.但是hla-A、B携带2个或3个Bw4的感染者CD4T细胞计数和病毒载量差异均无统计学意义（均P＞0.05）.（4）不考虑hla-A是否携带Bw4,hla-B携带Bw4/4纯合子的感染者其CD4 T细胞计数（中位数：538个/μl））显著高于hla-B携带Bw4/6或Bw6/6的感染者（433、427个/μl）而病毒载量（对数值,中位数：3.53）显著低于hla-B携带Bw4/6或Bw6/6的感染者（4.29、4.48,均P＜0.05）.而不考虑hla-B是否携带Bw4,hla-A携带Bw4与不携带Bw4的感染者比较,CD4 T细胞计数和病毒载量差异无统计意义（P＞0.05）.结论 Bw4可能与HIV感染者高CD4 T细胞计数、低病毒载量有关,并且可能是hla-B携带Bw4/4纯合子起作用,从而延缓疾病进展.

关键词： HIV感染 hla-a抗原 hla-B抗原 Bw4

肾移植术后5年内移植肾功能丧失与受者hla多态性的相关性分析

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中华器官移植杂志 2014年第5期35卷 261-266页

作者：付绍杰罗敏于立新肖露露王亦斌杜传福苗芸叶俊生南方医科大学南方医院器官移植科广州510515

目的研究肾移植术后5年内移植肾功能丧失与hla多态性的相关性。方法以2000年1月至2009年2月间的肾移植受者为对象，其中移植肾功能丧失的受者50例（移植肾功能丧失组），移植肾功能正常的受者701例（对照组）。采用序列特异引物聚合酶... 详细信息

目的研究肾移植术后5年内移植肾功能丧失与hla多态性的相关性。方法以2000年1月至2009年2月间的肾移植受者为对象，其中移植肾功能丧失的受者50例（移植肾功能丧失组），移植肾功能正常的受者701例（对照组）。采用序列特异引物聚合酶链反应（PCR-SSP）技术进行HL艮A、hla-B、hla-DRB1基因低到中分辨水平分型，对存在易感基因的样本采用聚合酶链反应-碱基序列分析（PCR-SBT）技术进行hla高分辨分型。应用SPSS统计软件分析两组间hla分布的差异。结果移植肾功能丧失组共表达47个hla基因，hla-A、hla-B、hla-DRB1位点分别表达16、19和12个基因，其中基因表现型频率（PF）≥0．1的hla基因最多，占总基因数的42．55％（20／47），0．1〉PF≥0．05和PF〈0．05的hla基因分别占34．04％（16／47）和23．40％（11／47）。移植肾功能丧失组hla-DRB1＊17（03）的频率显著高于对照组（基因型频率分别为0．213和0．062，Pc=0．000），PCR-SBT检测携带hla-DRB1＊17（03）的样本，发现移植肾功能丧失组受者该基因的高分辨分型100％（19／19）为DRB1＊03：01，对照组中98．81％（83／84）为DRB1＊03：01，移植肾功能丧失组DRB1＊03：01的频率显著高于对照组[Pc=0．000，比值比=4．564，95％可信区间为（2．466，8．444）]。结论肾移植术后5年内移植肾功能丧失的受者中，hla-DRB1＊03：01等位基因的频率显著增高，说明hla-DRB1＊03：01等位基因本身可能就是导致移植肾5年内功能丧失的易感基因。

关键词：肾移植肾功能衰竭 hla-a抗原 hla-B抗原 hla-DRB1抗原

聚合酶链反应方法检测外周血淋巴细胞hla-A mRNA方法学的建立及在肾移植中的初步应用

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中华检验医学杂志 2006年第12期29卷 1074-1078页

作者：李晓丽邹雄杨晓静张义庄学伟单宁宁王洪春赵胜梅山东大学齐鲁医院检验科济南250012

目的通过建立检测宿主外周血淋巴细胞(PBL)表面hla-AmRNA表达程度的实时荧光定量逆转录聚合酶链反应(RT-FQ-PCR)方法,检测肾移植患者移植后外周血淋巴细胞表面hla-AmRNA的表达程度,探讨其在诊断移植后早期排斥反应的发生的价值及机体免... 详细信息

目的通过建立检测宿主外周血淋巴细胞(PBL)表面hla-AmRNA表达程度的实时荧光定量逆转录聚合酶链反应(RT-FQ-PCR)方法,检测肾移植患者移植后外周血淋巴细胞表面hla-AmRNA的表达程度,探讨其在诊断移植后早期排斥反应的发生的价值及机体免疫状态的关系。方法以6-磷酸葡萄糖脱氢酶(G6PDH)作内参照,用Taqman探针荧光定量技术,建立检测PBLhla-AmRNA的RT-FQ-PCR方法;并检测35例随访移植患者的不同时间的60个标本和60名正常人的阈循环数(Ct),然后用REST软件分析PBLhla-AmRNA的表达水平。结果正常人和51个移植标本的PBLhla-AmRNA对G6PDH的相对表达量分别为0·036±0·012和0·026±0·015(双侧t=1·981,Phla-AmRNA表达减弱,机体免疫状态低,无排斥反应发生但易导致感染、肿瘤等并发症的产生;其中9个移植标本的PBLhla-AmRNA对G6PDH的相对表达量为0·042±0·017(双侧t=2·002,Phla-AmRNA表达增强的患者,经病例回访查询发现该5例移植患者在这期间有排斥反应(根据临床表现、肾功能检查、影像学及核医学检查的临床排斥反应期)的发生,其中1例在移植后6个不同时间的标本显示2次有增高,每次经治疗后均降低。结论建立的宿主PBLhla-AmRNART-FQ-PCR检测方法简便、特异、重复性好、可信度高,可用于肾移植后PBLhla-AmRNA表达水平的检测,评估机体的免疫状态,预测排斥反应的发生。

关键词：淋巴细胞 hla-a抗原肾移植聚合酶链反应移植物排斥 RNA 信使