检索结果-南通市图书馆

基于miRNA-30的RNAi表达框架的构建及其有效性验证

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

临床检验杂志 2016年第8期34卷 625-629页

作者：李亚红赵丹丹李思佳覃淇邱彤彤彭剑雄中南大学湘雅医学院医学检验系长沙410013

目的构建基于人源性miRNA-30,针对EGFP基因的RNAi表达框架并验证其有效性。方法融合PCR构建RNAi表达框架,经凝胶电泳、测序比对及二级结构预测后,将该表达框架与p EGFP-N2质粒共转染A549、hct116及HEK-293细胞,48 h后倒置荧光显微镜观察... 详细信息

目的构建基于人源性miRNA-30,针对EGFP基因的RNAi表达框架并验证其有效性。方法融合PCR构建RNAi表达框架,经凝胶电泳、测序比对及二级结构预测后,将该表达框架与p EGFP-N2质粒共转染A549、hct116及HEK-293细胞,48 h后倒置荧光显微镜观察EGFP的表达情况并用流式细胞仪检测平均荧光强度。结果凝胶电泳和测序比对均显示RNAi表达框架与设计的相符,二级结构预测显示,新型RNAi表达框架与人源性miRNA-30的二级结构高度相似;共转染该表达框架与p EGFP-N2质粒48 h后,倒置荧光显微镜观察结果显示,3种细胞的荧光强度均明显减弱,流式细胞仪检测结果显示,3种细胞中共转染组与单独转染组相比平均荧光强度的差异均有统计学意义(Phct116和HEK-293细胞中的表达。

关键词： RNAi 人工miRNA表达框架 A549细胞 hct116细胞 HEK-293细胞

丁香活性组分体外抗结肠癌活性及对细胞自噬的影响

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

西南医科大学学报 2023年第2期46卷 167-170,179页

作者：王健刘琳杨小会张红赵革刘明华西南医科大学药学院药理教研室泸州646000 西南医科大学附属医院药学部泸州646000

目的体外实验评价丁香活性组分(active fraction from clove,AFC)的抗结肠癌活性,探讨AFC对敏感结肠癌细胞自噬的影响。方法采用Cell Counting Kit-8 assay检测AFC对多株结肠癌细胞LOVO、hct116、hct8、SW620增殖的抑制作用,体外筛选敏... 详细信息

目的体外实验评价丁香活性组分(active fraction from clove,AFC)的抗结肠癌活性,探讨AFC对敏感结肠癌细胞自噬的影响。方法采用Cell Counting Kit-8 assay检测AFC对多株结肠癌细胞LOVO、hct116、hct8、SW620增殖的抑制作用,体外筛选敏感的人结肠癌细胞。GFP-LC3转染后荧光显微镜检测自噬水平的强弱,透射电镜观察自噬体和自噬溶酶体的形成,Western Blot检测自噬相关蛋白LC3、Beclin-1的表达。结果AFC对LOVO、hct116、hct8、SW620细胞的IC50分别是280.90±12.61、113.50±7.83、211.71±7.29、174.92±9.52μg/mL,最敏感的细胞是hct116,最佳干预时间为48 h。AFC处理细胞48 h后,荧光显微镜观察到hct116细胞GFP-LC3转染后出现明显自噬斑点,透射电镜观察到hct116细胞大量的自噬体和自噬溶酶体形成。Western blot结果表明,hct116细胞AFC处理组自噬相关蛋白LC3Ⅱ/LC3Ⅰ、Beclin-1相对表达量明显增高,呈现一定的时间与浓度依赖性,与对照组细胞比较差异明显(Phct116细胞最敏感,可能与其上调自噬相关蛋白LC3Ⅱ/LC3Ⅰ、Beclin-1的表达,诱导hct116细胞发生自噬有关。

关键词：丁香活性组分 hct116细胞增殖自噬

含氮查尔酮类细胞周期蛋白依赖性激酶抑制剂的合成及抗癌活性研究Ⅳ

同方期刊数据库博看期刊评论

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

中国药物化学杂志 2011年第5期21卷 358-361页

作者：李艳玲方浩徐文方山东大学药学院山东济南250012 包头医学院药学院内蒙古包头014000

目的寻找活性更好的类黄酮细胞周期蛋白依赖激酶(CDKs)抑制剂。方法利用Mannich反应制得8个查尔酮类黄酮。结果与结论目标化合物的结构经IR1、H-NMR、质谱确证,并测定了化合物对CDK1的抑制活性以及对hct116肿瘤细胞的体外抗肿瘤活性,其... 详细信息

目的寻找活性更好的类黄酮细胞周期蛋白依赖激酶(CDKs)抑制剂。方法利用Mannich反应制得8个查尔酮类黄酮。结果与结论目标化合物的结构经IR1、H-NMR、质谱确证,并测定了化合物对CDK1的抑制活性以及对hct116肿瘤细胞的体外抗肿瘤活性,其中有7个化合物对CDK1抑制活性高于阳性对照fla-vopiridol,所有化合物对hct116肿瘤细胞均显示出较强的抑制活性。

关键词：查尔酮 CDK1抑制作用 hct116细胞抗肿瘤活性

β-榄香烯调节上皮间质转化抑制结直肠癌细胞侵袭转移研究

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

中医药导报 2022年第12期28卷 1-4,21页

作者：陈果夏黎明邓恒王叶鹏安徽中医药大学研究生院安徽合肥230001 安徽中医药大学第一附属医院安徽合肥230001 安徽中医药大学第二附属医院安徽合肥230001

目的:研究β-榄香烯抑制结直肠癌细胞侵袭和转移的作用及可能的机制。方法:用20、40、80、160、320μg/mL的β-榄香烯处理人结肠癌hct116细胞,采用MTT法检测细胞的增殖抑制率,划痕实验检测细胞迁移率,Transwell小室体外迁移实验检测细... 详细信息

目的:研究β-榄香烯抑制结直肠癌细胞侵袭和转移的作用及可能的机制。方法:用20、40、80、160、320μg/mL的β-榄香烯处理人结肠癌hct116细胞,采用MTT法检测细胞的增殖抑制率,划痕实验检测细胞迁移率,Transwell小室体外迁移实验检测细胞迁移率,Transwell小室体外侵袭实验检测细胞侵袭率;蛋白免疫印记法(Western blotting)检测细胞Vimentin、E-cadherin、N-cadherin、β-catenin表达;实时荧光定量聚合酶链式反应(Realtime PCR)检测细胞Vimentin mRNA、E-cadherin mRNA、N-cadherin mRNA、β-catenin mRNA表达。结果:β-榄香烯浓度越高,处理时间越长,抑制hct116细胞增殖活性越明显(Phct116细胞迁移率、侵袭率、划痕愈合率,N-cadherin、Vimentin、β-catenin蛋白表达降低,E-cadherin蛋白表达升高,细胞增殖抑制率升高(P细胞系hct116中EMT信号通路来抑制细胞增殖,并抑制其侵袭转移能力。

关键词：结直肠癌 hct116细胞 β-榄香烯莪术上皮间质转化侵袭转移 EMT信号通路

FSEO体内外对人结肠癌生长抑制作用及机制研究

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

FSEO体内外对人结肠癌生长抑制作用及机制研究

结直肠癌发生与分泌型卷曲蛋白2和β-链蛋白的相关性

中国药理学会第十一届全国化疗药理学术研讨会

作者：姜忠良王思斯杨云霞朱玲四川大学华西基础与法医学院

目的观察FSEO是否有抑制人大肠癌细胞(hct116)的作用及对裸小鼠hct116移植性肿瘤的抑制作用,并初步探讨FSEO抗肿瘤的机制。方法 (1)采用MTT比色法观察不同浓度的FSEO对hct116、A549、Hep、HELA、CACO2、SGC7901、SMMC7721、T24、HBE、AD... 详细信息

目的观察FSEO是否有抑制人大肠癌细胞(hct116)的作用及对裸小鼠hct116移植性肿瘤的抑制作用,并初步探讨FSEO抗肿瘤的机制。方法 (1)采用MTT比色法观察不同浓度的FSEO对hct116、A549、Hep、HELA、CACO2、SGC7901、SMMC7721、T24、HBE、AD293 10株细胞的生长抑制情况;采用Wright-Giemsa染色方法观察FSEO对hct116细胞形态学的影响。(2)建立裸小鼠hct116肠癌移植瘤模型,并将动物随机分为模型对照组、环磷酰胺(CTX)组及FSEO高、中、低(4 g/kg,2 g/kg,1 g/kg)剂量组共5组。采用相同实验方法各组分别隔日灌胃不同药物,共6次,12 d后处死,测瘤重,计算抑瘤率。(3)采用HE染色观察裸鼠实体瘤切片形态学变化:(4)采用RT-PCR和Western-blotting检测肿瘤组织中和体外条件下经不同浓度FSEO处理后的hct116细胞中p53、Bcl-2、Bax以及Cyclin d1的mRNA及蛋白表达水平;(5)采用siRNA体外经瞬时转染沉默hct116细胞系p53基因,24 h后采用RT-PCR测定体外hct116细胞中p53、Bcl-2、Bax基因的表达情况。结果 (1)药物对hct116细胞的生长抑制与药物浓度有一定的依赖关系,随着药物浓度增加,生长抑制率增加;不同浓度FSEO均可诱导hct116细胞凋亡。(2)FSEO低、中、高剂量组对裸小鼠hct116移植性肿瘤有一定的抑制作用,抑制率分别为21.86%(Phct116细胞的效应并能诱导细胞凋亡。(2)体内抗肿瘤实验,FSEO各组对裸小鼠hct116肠癌移植瘤均有一定的抑制作用,均能促进hct116细胞凋亡。(3)FSEO可诱导hct116肠癌细胞凋亡机制与,上调p53,下调Cyclin d1,下调Bcl-2,上调Bax mRNA及蛋白的表达水平,降低Bcl-2/Bax比值有关,并且提示FSEO可能经p53依赖通路诱导hct1 16细胞凋亡。

关键词： FSEO hct116细胞结肠癌凋亡

来源： cnki会议评论

在线全文

cnki会议

学校读者我要写书评

暂无评论

中华实验外科杂志 2019年第9期36卷 1671-1671页

作者：史友权王道荣大连医科大学 116044 江苏省苏北人民医院胃肠外科扬州225001

分泌型卷曲蛋白2(sFRP2)与卷曲蛋白结构上相似,可竞争性的与Wnt蛋白结合,使Wnt/β-链蛋白(β-catenin)通路激活,促进结直肠癌的发生发展1]一、材料与方法通过对结直肠癌组织(54例)和正常黏膜组织(32例)行免疫组织化学实验,检测sFRP2及β... 详细信息

分泌型卷曲蛋白2(sFRP2)与卷曲蛋白结构上相似,可竞争性的与Wnt蛋白结合,使Wnt/β-链蛋白(β-catenin)通路激活,促进结直肠癌的发生发展1]一、材料与方法通过对结直肠癌组织(54例)和正常黏膜组织(32例)行免疫组织化学实验,检测sFRP2及β-catenin的表达。通过质粒转染,上调sFRP2在hct116细胞中的表达水平,然后行蛋白质印迹法(Western blot)、细胞计数试剂盒(CCK-8)、划痕、Transwell实验。

关键词： β-链蛋白结直肠癌分泌型 β-catenin 相关性癌发生 Transwell hct116细胞

LEF1-AS1对结肠癌细胞增殖和凋亡的影响及其机制

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

中华实验外科杂志 2022年第1期39卷 176-176页

作者：赵文波刘振郑红暘山西医科大学第一医院普外科太原030001

本实验旨在探讨长链非编码RNA(long non-coding RNA,lncRNA)LEF1-AS1对结肠癌细胞增殖和凋亡的影响及机制,现报道如下。一、材料与方法1.材料:结肠癌细胞hct116购自美国ATCC;RPMI 1640培养基、细胞计数试剂盒(CCK-8)购自美国Sigma公司。... 详细信息

本实验旨在探讨长链非编码RNA(long non-coding RNA,lncRNA)LEF1-AS1对结肠癌细胞增殖和凋亡的影响及机制,现报道如下。一、材料与方法1.材料:结肠癌细胞hct116购自美国ATCC;RPMI 1640培养基、细胞计数试剂盒(CCK-8)购自美国Sigma公司。hct116细胞用RPMI 1640培养液培养,将si-NC、si-LEF1-AS1、微小RNA(microRNA,miR)-NC、miR-605-3p分别转染至hct116细胞中,命名为si-NC组、si-LEF1-AS1组、miR-NC组、miR-605-3p组;将si-LEF1-AS1分别与anti-miR-NC、anti-miR-605-3p共转染至hct116细胞中,命名为si-LEF1-AS1+anti-miR-NC组、si-LEF1-AS1+anti-miR-605-3p组。

关键词： hct116细胞细胞增殖和凋亡结肠癌细胞计数试剂盒材料与方法

通过药物基因组学鉴别直肠癌化疗中新的反应决定因子

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

中国处方药 2006年第5期5卷 25-25页

作者： Boyer J Allen WL McLean EG 菅鑫妍

使用5-氟尿嘧啶(5-fluorouracil,5-FU)或者奥沙利铂(oxaliplatin)治疗结肠直肠癌,挑选其中抗药的细胞hct116,通过DNA微阵列分析hct116细胞的转录谱。通过生物信息学分析鉴别在抗药细胞中构成失调的以及亲本细胞急性照射后短暂改变的基... 详细信息

使用5-氟尿嘧啶(5-fluorouracil,5-FU)或者奥沙利铂(oxaliplatin)治疗结肠直肠癌,挑选其中抗药的细胞hct116,通过DNA微阵列分析hct116细胞的转录谱。通过生物信息学分析鉴别在抗药细胞中构成失调的以及亲本细胞急性照射后短暂改变的基因集合。我们认为这些基因集合可能代表着对5-FU和oxaliplatin敏感的生物标记。[第一段]

关键词：药物基因组学结肠直肠癌 hct116细胞决定因子 oxaliplatin 鉴别 DNA微阵列分析生物信息学分析反应化疗

二甲双胍激活AMPK/p53调节尿素循环抑制结肠癌细胞增殖

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

解剖学杂志 2021年第S1期44卷 195-195页

作者：张滔胡玲徐航唐加峰冉建华重庆医科大学基础医学院神经科学研究中心重庆400016 重庆三峡医药高等专科学校

本研究探讨二甲双胍(metformin,Met)对结肠癌细胞hct116增殖的抑制作用及可能的机制。不同浓度Met处理体外培养的结肠癌细胞hct116,CCK-8法检测Met对细胞活力的影响;细胞克隆形成实验检测其对细胞增殖能力的影响;流式细胞术检测细胞周... 详细信息

本研究探讨二甲双胍(metformin,Met)对结肠癌细胞hct116增殖的抑制作用及可能的机制。不同浓度Met处理体外培养的结肠癌细胞hct116,CCK-8法检测Met对细胞活力的影响;细胞克隆形成实验检测其对细胞增殖能力的影响;流式细胞术检测细胞周期和凋亡;免疫荧光观察磷酸化腺苷酸激活蛋白激酶(p-AMPK)的表达分布,蛋白免疫印迹法(Western blotting)检测AMPK/p53及尿素循环关键酶的表达水平。结果表明:10~80mmol/L浓度的Met对hct116细胞有明显的生长抑制作用,并呈浓度和时间依赖性;10~40mmol/L浓度的Met能不同程度诱导细胞发生凋亡,并诱导肿瘤细胞G1期周期阻滞;Met处理组hct116细胞胞浆及胞核内p-AMPK的表达增加;Met使细胞p-AMPK、p53蛋白表达水平上调,尿素循环酶精氨酸酶1(ARG1)、鸟氨酸脱羧酶(ODC)蛋白的表达下调。

关键词： hct116细胞尿素循环周期阻滞二甲双胍 AMPK 腺苷酸激活蛋白激酶蛋白免疫印迹法 p53