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解放军医学杂志 2003年第6期28卷 493-497页

作者：何晓嫱陈光明黄英杨富强吴乐园莫国玉解放军第458医院全军肝病研究中心

为构建以人白细胞介素 2 /γ干扰素(hIL 2 /hIFN γ)融合基因为佐剂的治疗型hbvdna疫苗 ,采用dna重组技术分别构建含有hbv包膜中蛋白 (preS2 ·S)抗原和hIL 2 /hIFN γ融合蛋白的真核表达质粒即pcdnaS2 ·S和pcdnaIIF ,酶谱和测序分析... 详细信息

为构建以人白细胞介素 2 /γ干扰素(hIL 2 /hIFN γ)融合基因为佐剂的治疗型hbvdna疫苗 ,采用dna重组技术分别构建含有hbv包膜中蛋白 (preS2 ·S)抗原和hIL 2 /hIFN γ融合蛋白的真核表达质粒即pcdnaS2 ·S和pcdnaIIF ,酶谱和测序分析表明克隆的preS2 ·S和hIL 2 /hIFN γ融合蛋白基因片段的方向、序列与预期相符。用脂质体转染试剂转染COS 7细胞 ,并用ELISA检测转染细胞培养上清中目的基因表达水平。结果显示 ,质粒转染后 4 8h达峰值 ,分别为HBsAg(P/N) =7.6 3、IL 2 =1 0 .35ng/ml、IFN γ =7.90ng/ml。以CTLL 2依赖细胞株/MTT比色法和微量细胞病变抑制法 (WISH VSV)检测pcdnaIIF转染后 4 8h培养上清中IL 2及IFN γ活性 ,结果分别为 998U/ml和 2 4 9U/ml。证明构建的重组质粒pcdnaS2 ·S和pcdnaIIF结构正确。

关键词：疫苗 dna 肝炎病毒乙型治疗型 hbv-dna疫苗

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治疗型hbv dna疫苗的研究与应用

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解放军医学杂志 2003年第6期28卷 489-492页

作者：陈光明杨富强解放军第458医院全军肝病研究中心

综述治疗型乙型肝炎病毒 (hbv)疫苗研究概况 ,重点阐述治疗型hbvdna疫苗研究进展、治疗乙型肝炎的依据、作用机制和与传统疫苗的比较等。

关键词：免疫疗法疫苗 dna 肝炎病毒乙型治疗型 hbv-dna疫苗电脉冲技术

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hbv dna vaccine with adjuvant cytokines induced specific immune responses against hbv infection

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World Journal of Gastroenterology 2003年第1期9卷 108-111页

作者： De-WeiDu Zhan-Shengjia Guang-YuLi Yong-YingZhou DepartmentofInfectiousDiseases TangduHospitalFourthMilitaryMedicalUniversity'Xi'an710038ShaanxiProvinceChina DepartmentofInfectiousDiseases TangduHospitalFourthMilitaryMedicalUniversity'Xi'an710038ShaanxiProvinceChina

AIM:To seek for an effective method to improve the immune responses induced by dna vaccine expressing hbv surface antigen(pCR3.1-S)in Balb/c mice(H-2~d). METHODS:The pCR3.1-S plasmid and the eukaryotic expression vectors expressing murine IL-2(pDOR-IL-2)or IL-12(pWRG3169)were injected into mice subcutaneously. The immune responses to pCR3.1-S and the adjuvant effect of the cytokines plasmid were *** the effect of pCR3.1-S on anti-translated subcutaneous tumor of P815 mastocytoma cells stably expressing HBsAg(P815-hbv-S) was also ***-HBs in serum was detected by enzyme- linked immunoadsordent assay(ELISA)and HBsAg specific cytotoxic T lymphocytes(CTLs)activity was measured by ^(51)Cr release *** three weeks of dna immunization,the cells of P815-hbv-S were inoculated into mice subcutaneously and the tumor growth was measured every five *** survival rate and living periods of mice were also calculated. RESULTS:After 8 wk dna immunization,the A 450 nm values of sera in mice immunized with pCR3.1,pCR3.1-S and pCR3.1-S codeliveried with IL-2 or IL-12 plasmids were 0.03+0.01,1.24±0.10,1.98±0.17 and 1.67±0.12 *** in mice codeliveried pCR3.1-S with IL-2 or IL-12 plasmids were significantly higher than that of mice injected pCR3.1 or pCR3.1-S *** HBsAg specific CTL activities in mice coinjected with pCR3.1-S and IL-2 or IL- l2 eukaryotic expression vectors were(61.9±7.1)% and (73.3±8.8)%,which were significantly higher than that of mice injected with pCR3.1(10.1±2.1)% or pCR3.1-S(50.5 ±6.4)%.The HBsAg specific CTL activities in mice injected with pCR3.1,pCR3.1-S,pCR3.1-S combined with IL-2 or IL- l2 eukaryotic expression vectors decreased significantly to (3.2±0.8)%,(10.6±1.4)%,(13.6±1.3)% and(16.9±2.3) % respectively after the spleen cells were treated by anti- CD8^+ monoclonal antibody,but presented no significant change to anti-CD4^+ monoclonal antibody or unrelated to monoclonal *** hbv-S dna vaccine(pCR3.1-S

关键词：乙型肝炎 hbv-dna疫苗免疫反应细胞因子酶联免疫法

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