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细胞与分子免疫学杂志 2007年第10期23卷 901-903页

作者：翟志芳郝飞姜友昭钟白玉阎衡钟华第三军医大学西南医院皮肤科重庆400038 第三军医大学西南医院内分泌科重庆400038

目的:构建靶向hax-1基因的短发夹状干扰RNA(short hairpin RNA,shRNA)表达载体pGenesil-hax-1,并探讨siRNA靶向抑制hax-1基因表达的作用。方法:根据shRNA设计的原则,在hax-1全长序列中选取含19个核苷酸靶序列,设计形成siRNA的DNA模板并... 详细信息

目的:构建靶向hax-1基因的短发夹状干扰RNA(short hairpin RNA,shRNA)表达载体pGenesil-hax-1,并探讨siRNA靶向抑制hax-1基因表达的作用。方法:根据shRNA设计的原则,在hax-1全长序列中选取含19个核苷酸靶序列,设计形成siRNA的DNA模板并克隆到shRNA表达载体pGenesil-1中,获得可靶向抑制hax-1基因的重组shRNA表达载体。采用LipofectamineTM2000转染试剂将pGenesil-hax-1导入HeLa细胞中;分别采用RT-PCR以及Western blot从mRNA和蛋白水平上检测干扰效果。结果:半定量PCR及Western blot结果表明,siRNA可使hax-1mRNA的转录水平得到显著抑制(Phax-1蛋白的表达较对照组减少约70%。结论:靶向hax-1基因的重组shRNA表达载体pGene-sil-hax-1介导的siRNA可显著抑制hax-1基因在人宫颈癌HeLa细胞中的表达。

关键词：短发夹状干扰RNA hax-1基因 HeLa细胞

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寻常性银屑病患者hax-1基因多态性的研究

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中国皮肤性病学杂志 2008年第4期22卷 201-203页

作者：陈小英牛振民黄薇郑捷上海交通大学医学院附属瑞金医院皮肤科上海200025 国家人类基因组南方研究中心上海201203

目的通过检测hax-1基因序列研究基因多态性与银屑病的相关性。方法提取银屑病患者(247例)和正常人(102例)基因组DNA并进行扩增,通过自动测序的方法测定hax-1基因及启动子区域的序列,检测其SNP位点,并以SPSS软件进行统计处理。结果①测... 详细信息

目的通过检测hax-1基因序列研究基因多态性与银屑病的相关性。方法提取银屑病患者(247例)和正常人(102例)基因组DNA并进行扩增,通过自动测序的方法测定hax-1基因及启动子区域的序列,检测其SNP位点,并以SPSS软件进行统计处理。结果①测序结果:测序总长度5313bp,发现1个位于5’UTR的高频SNP。②病例-对照关联分析结果:5’UTR区的SNP位点-104T>G多态性的T等位基因频率在寻常性银屑病患者组和正常对照组间的频率分别为53.4%和48.5%,在两组间无显著性差异(P>0.05)。结论银屑病患者与正常人hax-1基因5’UTR区的SNP位点-104T>G基因频率无显著差异。

关键词：银屑病 hax-1基因单核苷酸多态性

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hax-1对MRL／lpr小鼠狼疮活动性影响的研究

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中华医学杂志 2008年第6期88卷 406-410页

作者：翟志芳周春丽钟白玉敖俊红郝飞第三军医大学西南医院皮肤科重庆400038

目的观察抗凋亡蛋白hax-1对MRL／lpr狼疮鼠狼疮活动性的影响。方法重组腺病毒Adhax-1经腹腔注射MRL／lpr小鼠，每周2次，连续注射4周。分别在注射前、注射2周后及4周后检测小鼠血清中抗核抗体（ANA）、循环免疫复合物（CIC）、抗双链DN... 详细信息

目的观察抗凋亡蛋白hax-1对MRL／lpr狼疮鼠狼疮活动性的影响。方法重组腺病毒Adhax-1经腹腔注射MRL／lpr小鼠，每周2次，连续注射4周。分别在注射前、注射2周后及4周后检测小鼠血清中抗核抗体（ANA）、循环免疫复合物（CIC）、抗双链DNA抗体（抗dsDNA抗体）、抗组蛋白抗体和干扰素γ（IFN-γ）水平，并检测注射前及注射后外周血的白细胞计数及尿蛋白水平；经RNAi使hax-1表达下调后，观察脾脏淋巴细胞的增殖以及IFN-γ的分泌水平。结果hax-1可使MRL／lpr小鼠的尿蛋白以及抗dsDNA抗体、ANA、抗组蛋白抗体、CIC明显升高，且产生IFN-γ水平升高，除抗组蛋白抗体及CIC外，其余指标与磷酸盐缓冲液对照组（PBS组）及对照腺病毒组（AdEGFP组）相比较，差异均有统计学意义（均P〈0．05）。重组腺病毒组（Adhax-1组）小鼠肾小球内免疫复合物沉积强度明显较强且阳性肾小球数目较多，与对照组比较差异均有统计学意义（均P〈0．05）。Adhax-1组肾小球的平均病变积分达1．50±0．34，与对照组（PBS组：0．67±0．14；AdEGFP组：0．81±0．26）比较差异均有统计学意义（均P〈0．01）。pGenesil-hax-1可使淋巴细胞的增殖率明显降低（P〈0．05），IFN-γ分泌水平明显下降（P〈0．01）。结论hax-1是调节系统性红斑狼疮淋巴细胞凋亡的一个重要因素，重组Adhax-1可使MRL／lpr小鼠狼疮样症状加重，下调hax-1表达可使病情减轻。

关键词：红斑狼疮系统性小鼠 hax-1基因

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hax-1对Jurkat细胞的抗凋亡作用研究

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免疫学杂志 2008年第5期24卷 507-510,514页

作者：翟志芳郝飞第三军医大学西南医院皮肤科重庆400038

目的研究hax-1过表达在T淋巴瘤细胞株Jurkat细胞中的抗凋亡作用。方法构建hax-1真核表达载体pEGFP-C3-hax-1并转染Jurkat细胞。分别采用RT-PCR以及Western blot从mRNA和蛋白水平上检测hax-1的表达,然后通过光镜、电镜以及TUNEL法检测在... 详细信息

目的研究hax-1过表达在T淋巴瘤细胞株Jurkat细胞中的抗凋亡作用。方法构建hax-1真核表达载体pEGFP-C3-hax-1并转染Jurkat细胞。分别采用RT-PCR以及Western blot从mRNA和蛋白水平上检测hax-1的表达,然后通过光镜、电镜以及TUNEL法检测在去血清培养、电子线照射以及地塞米松诱导等不同处理因素下hax-1过表达Jurkat细胞的凋亡情况。结果构建的表达载体经酶切和测序鉴定序列正确,载体构建成功;PCR及Western blot结果表明,转染后hax-1的表达水平明显高于对照组(P1);经检测过表达hax-1的Jurkat细胞具有明显的抗凋亡作用,能够对抗去血清培养、电子线照射以及地塞米松诱导等的凋亡诱导作用。结论hax-1基因在Jurkat细胞中过表达具有明显的抗凋亡作用。

关键词： hax-1基因 Jurkat细胞细胞凋亡抗凋亡蛋白

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