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Clinical Predictors for Diagnosing Pandemic (h1n1) 2009 and Seasonal Influenza (h3n2) in Fever Clinics in Beijing,China

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Biomedical and Environmental Sciences 2012年第1期25卷 61-68页

作者： DAI Xiao Qiu LIU Min ZhAnG Tuo hong YAnG Xue Song LI Song Lin LI Xiao Guang LI Yu Ling KADEERBAI hai San WU huang Department of Epidemiology and Bio-statistics School of Public Health Peking University Health Science Center Beijing 100191 China Department of health Policy and Management School of Public Health Peking University Health Science Center Beijing 100191 China Third hospital Peking University Beijing 100191 China Civil Aviation General hospital Beijing 100025 China

Objective Symptomatic predictors of influenza could assess risks and improve decisions about isolation and outpatient treatment. To develop such predictors, we undertook a prospective analysis of pandemic （hIn1） 2009 and seasonal influenza （h3n2） in patients attending fever clinics. Methods From 1 May 2009 to 1 January 2010, all adult patients admitted to fever clinics for suspected influenza, confirmed by real time RT-PCR, were enrolled. Predictors of influenza virus infection were selected with logistic regression models. Measures of sensitivity, specificity, positive and negative likelihood ratios （LRs） were calculated to identify the best predictors. Results The clinical features and routine blood test results of influenza （h1n1） 2009 and seasonal influenza were similar. The positive and negative LRs of current US CDC influenza-like illness （ILl） criteria were modest in predicting influenza infection. Our modified clinic predictors improved the ability of the positive and negative LRs to recognize pandemic （hIn1） 2009 and seasonal influenza. The revised criteria are： fever ~ 38 ~C accompanied by at least one of the following--cough, arthralgia or relative iymphopenia. Conclusion Patients with symptoms and signs that meet the new criteria are likely to have influenza and timely antiviral therapy may be appropriate. In addition, physicians should ascertain if influenza is circulating within the community or if there is a contact history of influenza and combine this information with the newly developed criteria to clinically diagnose influenza.

关键词： Diagnosis Fever Influenza A, h1n1 h3n2 Signs, Symptoms

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Molecular evolution of influenza A (h3n2) viruses cir-culated in Fujian Province, China during the 1996-2004 period

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Science China(Life Sciences) 2008年第4期51卷 373-380页

作者： XIU WenQiong, WEn YuWei, ShEn Xiaona, XIE JianFeng, YAnG ShiQin, WU BingShan & WAnG MeiAi Fujian Center for Disease Control & Prevention, Fuzhou 350001, China Fujian Center for Disease Control & Prevention Fuzhou China

We studied the genetic and epidemic characteristics of influenza A (h3n2) viruses circulated in human in Fujian Province, south of China from 1996 to 2004. Phylogenetic analysis was carried out for genes encoding hemagglutinin1 (hA1) of influenza A virus (14 new and 11 previously reported reference se-quences). Our studies revealed that in the 8 flu seasons, the mutations of hA1 genes occurred from time to time, which were responsible for about four times of antigenic drift of influenza h3n2 viruses in Fujian, China. The data demonstrated that amino acid changes were limited to some key codons at or near antibody binding sites A through E on the hA1 molecule. The changes at the antibody binding site B or A or sialic acid receptor binding site 226 were critical for antigenic drift. But the antigenic sites might change and the key codons for antigenic drift might change as influenza viruses evolve. It seems important to monitor new h3 isolates for mutations in the positively selected codons of hA1 gene in south of Asia.

关键词： Influenza virus h3n2 hemagglutinin phylogenetic analysis drift key codons

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h3n2型猪流感病毒M2蛋白表达分析

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生物工程学报 2010年第1期26卷 16-21页

作者：王晓杜陈培君沈阳邱亚峰邓绪芳史子学彭丽娜罗金燕刘超马志永中国农业科学院上海兽医研究所上海200241

流感病毒的M2蛋白在流感病毒复制中起着重要作用,是抗流感病毒的靶标分子。本研究以提取的病毒基因组RnA作为模板,RT-PCR扩增h3n2亚型猪流感病毒M2基因,分别构建了重组原核表达载体和重组真核表达载体,建立了M2蛋白的原核和真核表达系... 详细信息

流感病毒的M2蛋白在流感病毒复制中起着重要作用,是抗流感病毒的靶标分子。本研究以提取的病毒基因组RnA作为模板,RT-PCR扩增h3n2亚型猪流感病毒M2基因,分别构建了重组原核表达载体和重组真核表达载体,建立了M2蛋白的原核和真核表达系统。通过大肠杆菌表达系统,制备了M2重组蛋白,并免疫大鼠制备了多克隆抗体。Western blotting和间接免疫荧光方法检测表明所制备的抗体能识别真核表达的M2蛋白和病毒感染细胞后表达M2蛋白,具有良好的特异性。重组M2真核表达载体转染Vero细胞,表达的重组M2蛋白大小为20kDa,定位于细胞浆中,与病毒感染细胞中的M2蛋白定位相同。Western blotting检测表明M2蛋白在病毒感染细胞12h后才能检出,晚于nS1、nP和M1,属于病毒复制的晚期蛋白,可作为病毒复制晚期的指示分子。本研究为弄清M2蛋白在病毒复制过程中的生物学功能奠定了基础。

关键词： h3n2 猪流感病毒 M2蛋白多克隆抗体

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h3n2亚型人甲型流感病毒hA1序列进化正向选择位点研究

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中华流行病学杂志 2007年第4期28卷 385-389页

作者：许慧琳张文彤赵耐青姜庆五复旦大学公共卫生学院卫生统计与社会医学教研室上海200032 复旦大学公共卫生学院流行病学教研室上海200032

目的筛选h3n2亚型人甲型流感病毒红细胞凝聚素（hA1）序列中的正向选择位点,为进一步揭示流感病毒的变异规律。方法从nCBI GenBank和流感数据库中下载甲型流感病毒h3亚型RnA4节段序列,用两步聚类法将全部序列分为6个年代类别,使用固定... 详细信息

目的筛选h3n2亚型人甲型流感病毒红细胞凝聚素（hA1）序列中的正向选择位点,为进一步揭示流感病毒的变异规律。方法从nCBI GenBank和流感数据库中下载甲型流感病毒h3亚型RnA4节段序列,用两步聚类法将全部序列分为6个年代类别,使用固定效应似然比检验模型分别筛选每一类中的正向选择位点,并使用两步聚类法归纳所筛选出位点的正向选择压力变化模式。结果各年代类别筛选出的正向选择位点不完全相同,共有50个位点在进化过程中经历过正向选择,其中有42个位点属于5个抗原决定簇之一,A、B抗原决定簇在各年代均有较多的位点入选,且承受较大的免疫选择压力。50个位点可被归纳为7种变化模式,前6种模式的位点依次在某一个时间段存在正向选择,第7种模式则在多个年代中均存在正向选择。结论分析结果提示流感病毒hA1序列在进化过程中的正向选择位点并非恒定,而是在不同年代中存在更替趋势。抗原决定簇A、B的变异在流感进化过程中起关键作用,8个位于非抗原决定簇正向选择位点有可能是未被识别的抗原决定簇位点。

关键词：甲型流感病毒亚型 h3n2 正向选择位点

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h3n2甲型流感245例临床特点及流行病学特征分析

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中华结核和呼吸杂志 2019年第7期42卷 510-514页

作者：颜琴书钟金树周华周建英浙江大学医学院附属第一医院呼吸内科杭州310003 浙江省永康市第一人民医院院感染科金华321300 浙江省永康卫生学校附属医院呼吸内科金华321300

目的分析h3n2甲型流感患者的临床特点与流行病学特征。方法收集2014年1月至2017年12月浙江省金华地区哨点医院发热门诊就诊的急性呼吸道感染病例,采集咽拭子标本进行病原学检测,对h3n2甲型流感患者的临床特点及发病特征进行描述性分析,... 详细信息

目的分析h3n2甲型流感患者的临床特点与流行病学特征。方法收集2014年1月至2017年12月浙江省金华地区哨点医院发热门诊就诊的急性呼吸道感染病例,采集咽拭子标本进行病原学检测,对h3n2甲型流感患者的临床特点及发病特征进行描述性分析,并与流感病毒阴性组进行对比。组间比较采用独立样本t检验或χ2检验。结果 2014—2017年浙江省金华地区哨点医院共报告急性呼吸道感染病例3 803例,其中实验室确诊h3n2甲型流感病例245例(6.4%)。245例中,男153例,女92例;年龄0.5~95.0岁,平均(50.1±15.7)岁,分为5个年龄段:0.5~17.0岁59例,男35例,女24例;18~39岁36例,男25例,女11例;40~59岁43例,男22例,女21例;60~79岁48例,男30例,女18例;≥80岁59例,男41例,女18例。不同年龄段h3n2病例的性别构成比较差异无统计学意义(χ2=4.581,P=0.333)。h3n2甲型流感的发病季节高峰主要集中在夏季(6—9月),其余月份均呈散发状态;2014—2017年4年间共出现4个发病高峰,分别出现在7—9、7—8、6—8和6—8月。245例中,179例(73.1%)的体温在38.0~38.9 ℃,表现为不同程度的咽部充血和扁桃体肿大、发热、咳嗽、咳痰、头晕、疲乏、咽痛、头痛、恶寒、气促、流涕、肌痛及鼻塞。h3n2甲型流感患者的淋巴细胞计数平均为(1.1±0.5)× 109/L,血小板平均为(157±39)×109/L,低于其他流感病毒阳性患者的(1.2±0.6)和(165±42)×109/L;中性粒细胞计数为(3.6±0.8)×109/L,高于其他流感病毒阳性患者的(3.4±1.0)×109/L(均Ph3n2流感的临床表现为不同程度的咽部充血和扁桃体肿大、发热、咳嗽及咳痰等;发病季节高峰主要集中在夏季(6—9月);60岁及以上老年人为易感人群。

关键词：流行病学特征 h3n2 甲型流感临床特点中性粒细胞计数阳性患者急性呼吸道扁桃体肿大

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h1n1、h3n2亚型流感病毒Mosaic-hA1的表达及对小鼠的免疫原性评价

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生物工程学报 2024年第11期40卷 4042-4056页

作者：韩菲焦鹏涛林润山李和桥马嘉宁裴汉中张鹤孙蕾罗廷荣郑敏范文辉刘文军广西大学动物科学技术学院广西南宁530004 深圳湾实验室广东深圳518000 中国科学院微生物研究所病原微生物与免疫学重点实验室北京100101 中国科学院大学北京100049

流感病毒给全球公共卫生带来了严重威胁,疫苗接种是预防流感及严重并发症的有效手段。本研究分析了北半球2012–2022年间人类甲型流感病毒(influenza A virus,IAV)流行株血凝素(hemagglutinin,hA)中hA1亚基的氨基酸突变趋势和抗原显性... 详细信息

流感病毒给全球公共卫生带来了严重威胁,疫苗接种是预防流感及严重并发症的有效手段。本研究分析了北半球2012–2022年间人类甲型流感病毒(influenza A virus,IAV)流行株血凝素(hemagglutinin,hA)中hA1亚基的氨基酸突变趋势和抗原显性位点变化情况。基于世界卫生组织(World health Organization,WhO)公布的2022年北半球流感疫苗推荐株A/Wisconsin/588/2019(h1n1)和A/Darwin/6/2021(h3n2)的hA1氨基酸序列,通过马赛克(mosaic)遗传算法设计了3种Mosaic-hA1抗原并将其在293F细胞中进行表达、纯化。将纯化后的Mosaic-hA1抗原与明矾佐剂以1:1的体积比混合制备亚单位疫苗并免疫BALB/c小鼠以评价免疫效果。酶联免疫吸附实验表明Mosaic-hA1抗原能产生同时结合两种亚型hA1的IgG,其中结合h3蛋白、h1蛋白的特异性效价IgG效价分别达到10~5、10~3以上,攻毒实验表明Mosaic-hA1能抵抗h3n2和h1n1流行毒株的攻击。本研究通过对不同亚型IAV毒株hA1中免疫显性位点进行重新组合,为多价亚单位流感疫苗开发提供了新思路。

关键词： h1n1 h3n2 hA1亚基重组蛋白免疫原性评价

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甲型流感病毒h3n2抗原进化研究进展

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中华微生物学和免疫学杂志 2023年第6期43卷 479-484页

作者：张梦怡李岚舒黄维金赵晨燕中国食品药品检定研究院艾滋病性病病毒疫苗室北京102629

流感病毒是引起人类呼吸道感染的常见病原体。在4种季节性流感毒株中,甲型流感病毒h3n2感染已成为季节性流感疾病和死亡的主要原因,严重影响公共卫生和社会经济。自1968年首次出现并造成大流行后,h3n2一直在人群中反复流行,不断通过抗... 详细信息

流感病毒是引起人类呼吸道感染的常见病原体。在4种季节性流感毒株中,甲型流感病毒h3n2感染已成为季节性流感疾病和死亡的主要原因,严重影响公共卫生和社会经济。自1968年首次出现并造成大流行后,h3n2一直在人群中反复流行,不断通过抗原漂移来逃避宿主免疫系统的攻击,从而导致低疫苗效力。本文从甲型流感病毒h3n2的抗原进化、抗原进化对疫苗株选择的影响及一些预测流感病毒进化的模型等方面进行分析和综述,为流感病毒抗原进化分析和未来疫苗研发等工作提供参考。

关键词：流感病毒 h3n2 疫苗株抗原性预测模型

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h3n2亚型SIV血凝蛋白单克隆抗体的制备

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西北农林科技大学学报（自然科学版） 2016年第1期44卷 31-36页

作者：周云飞朱春平李燕常婧竹崔保安李新生河南农业大学牧医工程学院河南郑州450002

【目的】制备h3n2亚型猪流感病毒(SIV)的单克隆抗体,为SIV的鉴别诊断奠定基础。【方法】将A/swine/henan/1/2010(h3n2)猪流感病毒初步浓缩后,免疫6周龄的BALB/c小鼠,取小鼠脾细胞与瘤细胞nS0融合,采用间接ELISA方法筛选杂交瘤细胞,对杂... 详细信息

【目的】制备h3n2亚型猪流感病毒(SIV)的单克隆抗体,为SIV的鉴别诊断奠定基础。【方法】将A/swine/henan/1/2010(h3n2)猪流感病毒初步浓缩后,免疫6周龄的BALB/c小鼠,取小鼠脾细胞与瘤细胞nS0融合,采用间接ELISA方法筛选杂交瘤细胞,对杂交瘤细胞分泌的单克隆抗体进行Western blot检验和抗原结合活性检测。【结果】经过3次有限稀释法克隆纯化,最终得到1株能稳定分泌单克隆抗体的阳性细胞株,命名为1C10,经检测其腹水抗体效价为1∶51 200。单克隆抗体亚型鉴定结果表明,1C10为IgG1亚型,轻链类型为κ链。Western blot检测结果表明,这株单克隆抗体能与h3n2特异性结合,而且能特异性识别血凝素蛋白(hA),而不与h1n1亚型猪流感病毒、伪狂犬病毒、猪圆环病毒2型、猪细小病毒发生交叉反应。【结论】制备获得1株抗猪流感h3n2病毒hA蛋白的单克隆抗体,可用于猪流感病毒鉴别诊断方法的建立。

关键词： h3n2 猪流感病毒单克隆抗体

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类人源猪h3n2亚型流感病毒hA,nA遗传进化分析

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中国兽医学报 2011年第8期31卷 1175-1179,1188页

作者：樊娇李鑫张泉鹏王广美丛彦龙丁壮吉林大学畜牧兽医学院吉林长春130062

2007-2008年从吉林省某猪场采集疑似流感发病猪的鼻咽拭子,经病毒分离鉴定获得3株h3n2亚型流感病毒,分别命名为A/swine/Jilin/5/2007(Sw/Jilin/5/07)、A/swine/Jilin/19/2007(Sw/Jilin/19/07)、A/swine/Jilin/37/2008(Sw/Jilin/37/08)。hA进化树分析结果表明:3株h3n2亚型流感病毒属于近代人源病毒谱系;但是在nA进化树中,Sw/Jilin/37/08株与早期人源和近代人源关系密切,暗示它可能是早期人源和近代人源h3n2亚型猪流感病毒之间的过渡毒株,进一步证实猪在流感病毒种间传播过程中充当"中间宿主"作用。

关键词：猪流感病毒 h3n2 遗传分析

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h3n2亚型犬流感病毒hA1基因的优化表达与间接ELISA检测方法的建立

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畜牧与兽医 2024年第11期56卷 114-120页

作者：秦海斌包喜军朱骞陈舒贺星亮南京警察学院/警犬技术公安部重点实验室江苏南京210012

为开展h3n2亚型犬流感的血清流行病学调查,本研究拟原核表达犬流感病毒(CIV)血凝素1(hA1)基因,建立一种灵敏、准确、稳定的ELISA检测方法。对地方毒株的hA1基因进行氨基酸序列优化,采用化学合成法合成目的基因,插入pET30a中并转化至大... 详细信息

为开展h3n2亚型犬流感的血清流行病学调查,本研究拟原核表达犬流感病毒(CIV)血凝素1(hA1)基因,建立一种灵敏、准确、稳定的ELISA检测方法。对地方毒株的hA1基因进行氨基酸序列优化,采用化学合成法合成目的基因,插入pET30a中并转化至大肠杆菌表达,对蛋白进行纯化、鉴定,建立CIV间接ELISA方法。结果显示:优化后的hA1基因序列密码子对原核表达系统的CAI指数升至0.88,无复杂二级结构,蛋白可获得高效表达;原核表达后蛋白主要存在于包涵体中,经纯化、复性后的蛋白具备作为诊断抗原的应用价值;建立的间接ELISA方法检测国内采集的1690份犬血清,显示h3n2亚型CIV整体阳性率为9.23%,与商品化试剂盒符合率为97.9%。提示:建立的间接ELISA方法可靠,具备良好的应用前景。

关键词：犬流感 h3n2 血凝素1 原核表达间接ELISA

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