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中国免疫学杂志 2024年第6期40卷 1222-1227页

作者：芦文静李振郝慧琴高玉亭王泽刘进山西中医药大学中西医结合基础实验室晋中030619 山西中医药大学基础医学院晋中030619

目的:探讨经方二妙散(EMS)对胶原诱导型关节炎(CIA)大鼠脾脏和关节中免疫调控基因gnαq表达的影响。方法:建立CIA大鼠模型,并随机分为模型组(CIA组)、1.5、3.0和4.5 g/kg二妙散组(L-EMS、M-EMS和H-EMS组)、阳性对照组(MTX,氨甲蝶呤),各... 详细信息

目的:探讨经方二妙散(EMS)对胶原诱导型关节炎(CIA)大鼠脾脏和关节中免疫调控基因gnαq表达的影响。方法:建立CIA大鼠模型,并随机分为模型组(CIA组)、1.5、3.0和4.5 g/kg二妙散组(L-EMS、M-EMS和H-EMS组)、阳性对照组(MTX,氨甲蝶呤),各组给予相应药物进行治疗,同时设立健康对照组(Control组)与模型组给予等量生理盐水灌胃。ELISA技术检测各组炎症因子IL-1β、IL-6和TNF-α的表达,使用qRT-PCR和Western blot分析gnαq mRNA和蛋白的表达,免疫组化技术对脾脏和关节中的gnαq进行定位。结果:CIA组大鼠关节出现明显组织受损、组织增生与炎症浸润等特征改变;MTX组和EMS组关节组织破坏及增生减轻;CIA组IL-1β、IL-6和TNF-α的表达显著升高(Pgnαq mRNA和蛋白表达显著高于Control组(Pgnαq mRNA和蛋白表达显著低于CIA组(Pgnαq mRNA和蛋白的表达量明显低于其他组(Pgnαq表达增强可能导致炎症反应,可能通过下调gnαq减轻CIA大鼠炎症反应。

关键词：二妙散 gnαq 类风湿关节炎脾脏关节

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经方二妙散对CIA大鼠脾脏和关节中免疫调控基因gnαq表达的影响

经方二妙散对CIA大鼠脾脏和关节中免疫调控基因Gnαq表达的影响

引用

作者：芦文静山西中医药大学

学位级别：硕士

目的:探讨不同浓度二妙散(EMS)对胶原诱导型关节炎(CIA)大鼠脾脏和关节中免疫调控基因gnαq表达的影响,为临床靶向治疗RA及应用经方二妙散治疗RA提供实验基础。方法:通过建立CIA大鼠模型,对符合标准的雌性Wistar大鼠进行灌胃治疗,72只... 详细信息

目的:探讨不同浓度二妙散(EMS)对胶原诱导型关节炎(CIA)大鼠脾脏和关节中免疫调控基因gnαq表达的影响,为临床靶向治疗RA及应用经方二妙散治疗RA提供实验基础。方法:通过建立CIA大鼠模型,对符合标准的雌性Wistar大鼠进行灌胃治疗,72只大鼠为(42±2)日龄、健康状况良好、且体重相近(160±10 g),随机分为6组,I组,健康组(Con,n=12):饲喂基础日粮+水;II组,CIA组(CIA,n=12):多点皮下注射牛II型胶原;III组,甲氨蝶呤对照组(MTX,n=12):CIA造模成功后,予以甲氨蝶呤腹腔注射,剂量为0.9 mg·kg,1周1次;IV、V、VI组,低(1.5 g·kg)、中(3.0 g·kg)、和高浓度(4.5 g·kg)二妙散组(L-ems、M-ems、H-ems,n=12):分别灌胃CIA大鼠,甲氨蝶呤作为阳性对照组。3周后,麻醉后脱颈处死,采用ELISA检测各组大鼠血清中IL-1β、IL-6和TNF-α的表达,分别采用q RT-PCR和Western blotting技术分析大鼠脾脏和关节中gnαq mRNA和蛋白水平表达,免疫组化技术对大鼠脾脏和关节组织中gnαq定位。结果:(1)Masson染色结果显示,CIA组较Control组,大鼠关节中出现了明显的炎症和组织破坏的关节炎特征。与CIA组相比,MTX组和不同浓度EMS组大鼠关节破坏及组织增生减轻,MTX组和1.5 g·kgEMS组大鼠关节炎特征及组织增生较MTX组和1.5g·kgEMS组治疗效果较明显。说明本实验成功构建CIA大鼠模型,二妙散治疗CIA大鼠最佳浓度是1.5 g·kg。(2)不同实验组大鼠血清中炎症因子存在差异(P0.05)。(3)不同实验组大鼠脾脏和关节中gnαq mRNA和蛋白水平表达结果显示,gnαq在不同的实验组大鼠的脾脏和关节中均有不同程度的表达。CIA组大鼠脾脏和关节中gnαq mRNA和蛋白的表达极显著高于健康组(Pgnαq mRNA和蛋白的表达显著高于不同浓度EMS组和MTX组(Pgnαq表达量(极)显著低于3.0和4.5 g·kgEMS组(Pgnαq可能通过介导炎性因子的形成和发展,参与了CIA大鼠炎症反应的形成。。(4)免疫组化结果显示,不同实验组大鼠脾脏和关节组织中均可检测到不同程度的阳性信号。CIA组脾脏和关节中gnαq的表达均极显著高于健康组(Pgnαq的表达(极)显著低于CIA组(Pgnαq的表达(显著)低于3.0和4.5 g·kgEMS组(Pgnαq的表达,进而减轻RA的发生和发展。结论:本实验初步证实gnαq参与CIA大鼠炎性反应的形成,介导类风湿关节炎炎性因子的形成和发展;不同浓度二妙散均可抑制炎性因子和gnαq的表达,二妙散最佳作用浓度是1.5 g·kg。二妙散可能通过调控RA调控基因gnαq的表达,进而抑制RA的发生和进展;本实验可为临床靶向治疗RA及应用经方二妙散治疗RA提供实验基础。

关键词：二妙散类风湿关节炎 gnαq 大鼠

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