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gadd45β和gadd45γ在亚砷酸钠所致的MIHA细胞周期改变中的作用

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现代预防医学 2022年第12期49卷 2254-2261页

作者：刘诗文王文静孙宝飞张爱华魏绍峰贵州医科大学公共卫生与健康学院环境污染与疾病监控教育部重点实验室

目的探索gadd45β和gadd45γ在亚砷酸钠所致的MIHA细胞周期改变中的作用，为砷中毒的人群防治提供依据。方法收集贵州省兴仁县雨樟镇交乐病区砷中毒人群以及格沙屯正常人群分别作为砷中毒组和对照组，实时荧光定量PCR检测各组人群Gad... 详细信息

目的探索gadd45β和gadd45γ在亚砷酸钠所致的MIHA细胞周期改变中的作用，为砷中毒的人群防治提供依据。方法收集贵州省兴仁县雨樟镇交乐病区砷中毒人群以及格沙屯正常人群分别作为砷中毒组和对照组，实时荧光定量PCR检测各组人群gadd45β和gadd45γ基因mRNA表达水平。同时，分别以不同剂量亚砷酸钠、不同时间处理MIHA细胞，流式细胞术测定细胞周期改变情况，实时荧光定量PCR和免疫印迹法分别检测gadd45β和gadd45γ基因m RNA表达水平和蛋白表达情况。在上述实验基础上，针对gadd45β和gadd45γ基因分别设计的siRNA作用于染砷的MIHA细胞，反向验证gadd45β和gadd45γ基因在砷致细胞周期改变过程中的影响。统计学分析采用独立样本t检验比较两组间差异，采用单因素方差比较多组间差异。结果人群实验研究发现，与对照组相比，砷中毒患者gadd45β和gadd45γ基因m RNA表达水平升高（t=2.576,P=0.011;t=2.312,P=0.022）;MIHA细胞中，随亚砷酸钠染毒剂量、染毒时间增加，细胞G2/M期比例明显升高（F剂量=340.136,Pgadd45β和gadd45γ基因m RNA和蛋白表达水平随染砷剂量、染砷时间升高而升高，超过该浓度范围和作用时间后，出现表达下降的现象（gadd45β:F剂量-蛋白=37.568,Pgadd45γ:F剂量-蛋白=12.989,P=0.001;F剂量-m RNA=23.613,Pgadd45β和gadd45γ的表达后，细胞周期都出现G2/M期比例下调（t=3.053,P=0.038;t=14.47,Pgadd45β和gadd45γ基因表达水平升高在其诱导MIHA细胞出现G2/M期阻滞过程中发挥重要作用。

关键词：砷 gadd45β gadd45γ 细胞周期 MIHA细胞

大鼠野生型gadd45γ基因和gadd45γshRNA真核表达质粒的构建及鉴定

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南京医科大学学报（自然科学版） 2009年第5期29卷 594-599页

作者：车楠邱文夏梅赵聃王迎伟南京医科大学微生物与免疫学系江苏南京210029

目的:构建大鼠野生型gadd45γ基因和其特异性短发卡状小干涉RNA(shRNA)真核表达质粒,并观察其在大鼠肾小球系膜细胞(GMC)中过表达及沉默gadd45γ基因的情况。方法:用DNA重组技术将针对大鼠gadd45γ基因的cds区序列或针对其不同位点所设... 详细信息

目的:构建大鼠野生型gadd45γ基因和其特异性短发卡状小干涉RNA(shRNA)真核表达质粒,并观察其在大鼠肾小球系膜细胞(GMC)中过表达及沉默gadd45γ基因的情况。方法:用DNA重组技术将针对大鼠gadd45γ基因的cds区序列或针对其不同位点所设计的4对shRNA序列分别克隆到真核表达质粒pcDNA3.1/HA或***中。在酶切分析及序列测定正确后,用GenEscortTMⅢ转染试剂将上述两种质粒分别转染至大鼠GMCs中,用免疫细胞化学和Western blot检测HA-gadd45γ融合蛋白的表达及筛选最佳沉默效率的shRNA。结果:限制性酶切及核酸序列分析证明两种重组质粒均构建正确。免疫细胞化学和Western blot分析表明构建的pcDNA3.1/gadd45γ质粒在大鼠GMCs中能够表达;gadd45γshRNA-3具有最佳沉默效率。结论:成功构建了大鼠野生型gadd45γ基因和其特异性的shRNA真核表达质粒,该实验结果为进一步研究gadd45γ基因的生物学功能奠定了基础。

关键词： gadd45γ shRNA 肾小球系膜细胞

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肝细胞性肝癌中gadd45γ的表达及其抑制肝癌细胞生长的信号通路研究

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肝细胞性肝癌中Gadd45γ的表达及其抑制肝癌细胞生长的信号通路研...

作者：邵燕南京医科大学

学位级别：硕士

原发性肝癌是最常见的恶性肿瘤之一，严重危害人类的健康。我国是原发性肝癌的高发国家，目前在我国的恶性肿瘤发病中居第二位。其中，肝细胞性肝癌(hepatocellular carcinoma，HCC)是最主要的组织类型。探讨HCC组织中异常表达基因的分... 详细信息

原发性肝癌是最常见的恶性肿瘤之一，严重危害人类的健康。我国是原发性肝癌的高发国家，目前在我国的恶性肿瘤发病中居第二位。其中，肝细胞性肝癌(hepatocellular carcinoma，HCC)是最主要的组织类型。探讨HCC组织中异常表达基因的分子生物学机制，对于了解其发生、发展过程以及诊断和治疗，有着重要的理论和实际意义。新近发现，gadd45γ可以诱导人肝癌细胞HepG2发生G2／M期阻滞，但是具体的机制尚不清楚，故此，本研究就gadd45γ在HCC组织中的表达及其抑制肝癌细胞生长的信号通路进行了初步探讨。第一部分肝癌组织中gadd45γ的表达及紫外线诱导对人肝癌细胞中gadd45γ的影响目的：观察HCC组织中gadd45γ的蛋白表达水平及人肝癌细胞HepG2中gadd45γ基因对紫外线的应激反应。方法：首先，选取临床HCC标本30例，运用免疫组织化学方法检测其中gadd45γ蛋白表达水平;其次，在体外以人肝癌细胞HepG2为实验对象，给予UVB照射，分别在照射后1h、2h和4h收获细胞mRNA和总蛋白，同时设未给予UVB照射的细胞为对照组。运用RT-PCR和Western blot分别检测各组gadd45γmRNA和蛋白表达水平。结果：(1)免疫组织化学染色显示，30例HCC癌组织中gadd45γ的蛋白表达明显低于癌旁正常组织，其中17例出现了gadd45γ表达缺失，缺失率约为57％。(2)经UVB照射后，gadd45γmRNA和蛋白的表达均有明显上调，于照射后1h达到高峰(分别为0.91±0.24和0.55±0.14);此后gadd45γmRNA和蛋白表达下降，至4h时，gadd45γmRNA水平(0.4±0.05)与对照组(0.23±0.03)仍有差异，而蛋白表达(0.33±0.09)与对照组(0.34±0.12)相比已无统计学意义。结论：在肝细胞性肝癌组织中存在gadd45γ蛋白水平异常下调;UVB可以迅速诱导人肝癌细胞HepG2中gadd45γmRNA和蛋白的表达上调。第二部分gadd45γ诱导人肝癌细胞G2／M期阻滞的相关信号转导通路研究目的：探讨gadd45γ抑制肝癌细胞生长可能涉及的信号转导通路，为研究抑制肝癌细胞生长的基因提供初步理论依据。方法：体外培养人肝癌细胞HepG2，分别转染质粒pCMV-tag2B-gadd45γ和pCMV-tag2B至细胞，采用western blot方法检测gadd45γ及其下游基因P38、p-P38、JNK和p-JNK的表达变化;然后，给予信号通路的抑制剂(SB203580和SP600125)分别特异性阻断P38和JNK的磷酸化，再运用流式细胞仪检测并比较各组细胞周期，进而分析gadd45γ诱导肝癌细胞HepG2 G2／M期阻滞可能涉及的信号通路。结果：(1)将质粒pCMV-tag2B-gadd45γ转染至人肝癌细胞HepG2 48h后，gadd45γ蛋白表达至峰值为0.48±0.04，其下游的P38和JNK磷酸化水平也都明显提高。(2)运用特异性抑制剂使P38和JNK的磷酸化表达降低，达到对照组磷酸化水平，但细胞仍表现为G2／M阻滞，阻滞程度较非抑制剂组明显减弱。结论：在HepG2细胞中高表达gadd45γ蛋白可以激活gadd45γ-P38和gadd45γ-JNK信号转导通路;gadd45γ-P38和gadd45γ-JNK通路参与了gadd45γ诱导的肝癌细胞G2／M期阻滞。

关键词： gadd45γ HCC UVB HepG2 gadd45γ HepG2 G2/M P38 p-P38 JNK p-JNK

SublyticC5b-9诱导gadd45γ表达对Thy-1肾炎GMCs凋亡病变的影响

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SublyticC5b-9诱导Gadd45γ表达对Thy-1肾炎GMCs凋亡病变的影响

作者：车楠南京医科大学

学位级别：硕士

目的:构建大鼠野生型生长阻滞及DNA损伤诱导基因45γ（growth arrest and DNA damage-inducible gene 45γ, gadd45γ）和其特异性小发夹RNA （short hairpin RNA, shRNA）真核表达质粒,并观察其在大鼠肾小球系膜细胞（glomerular mesan... 详细信息

目的:构建大鼠野生型生长阻滞及DNA损伤诱导基因45γ（growth arrest and DNA damage-inducible gene 45γ, gadd45γ）和其特异性小发夹RNA （short hairpin RNA, shRNA）真核表达质粒,并观察其在大鼠肾小球系膜细胞（glomerular mesangial cells, GMCs）中过表达及沉默gadd45γ基因的情况。方法:用DNA重组技术将针对大鼠gadd45γ基因的cds区序列或针对其不同位点所设计的4对shRNA序列分别克隆到真核表达质粒pcDNA3.1/HA或***中。在酶切分析及序列测定正确后,用GenEscortⅢ转染试剂将上述两种质粒分别转染至大鼠GMCs中,用免疫细胞化学和Western blot检测HA-gadd45γ融合蛋白的表达及筛选最佳沉默效率的shRNA。结果:限制性酶切及核酸序列分析证明,两种重组质粒均构建正确。免疫细胞化学和Western blot分析表明,构建的pcDNA3.1/gadd45γ质粒在大鼠GMCs中能够表达;gadd45γshRNA-3具有最佳沉默效率。结论:成功构建了大鼠野生型gadd45γ基因和其特异性的shRNA真核表达质粒,该实验结果为进一步研究gadd45γ基因的生物学功能奠定了基础。目的:体外探讨亚溶解型C5b-9 （sublytic C5b-9）刺激诱导GMCs凋亡并上调gadd45γ基因的表达,同时确定gadd45γ过表达或基因沉默对sublytic C5b-9诱发大鼠GMCs凋亡病变的影响。方法:先体外培养大鼠GMCs并给予sublytic C5b-9刺激（实验设不同处理对照）,用流式细胞术（flow cytometry, FCM）分析GMCs的凋亡情况并用Real-time PCR和Western blot检查受sublytic C5b-9刺激的GMCs合成gadd45γmRNA丰度及蛋白水平。然后,将pgadd45γ质粒或gadd45γshRNA质粒分别转染GMCs,筛选pgadd45γ和gadd45γshRNA转染最佳时间,并将GMCs作相应的分组处理。定期检查各组gadd45γmRNA丰度和蛋白表达情况,并定量分析GMCs的凋亡率。结果:大鼠GMCs在sublytic C5b-9刺激后3h,细胞凋亡率明显增高。同时,gadd45γmRNA及蛋白表达也明显上升。Sublytic C5b-9刺激组和pgadd45γ质粒转染组的GMCs凋亡率显著高于对照组;转染pgadd45γ质粒的GMCs再给予sublytic C5b-9刺激后,上述现象更为明显。与之相反,转染gadd45γshRNA质粒的GMCs再给予sublytic C5b-9刺激后,凋亡率显著低于其他对照组。结论:Sublytic C5b-9刺激可诱导大鼠GMCs的凋亡;由sublytic C5b-9诱导的GMCs凋亡与其表达上调gadd45γ有一定的关系。目的:探讨用gadd45γshRNA沉默大鼠肾组织内gadd45γ基因对Thy-1肾炎（Thy-1 nephritis, Thy-1N）大鼠GMCs凋亡病变的抑制作用。方法:首先,复制大鼠Thy-1N模型,定期用Real-time PCR和Western blot方法检查其肾组织中gadd45γ的表达水平。然后应用肾动脉注射加电穿孔方法,将gadd45γshRNA质粒导入大鼠肾组织,再注射抗大鼠胸腺细胞血清（即anti-Thy-1 Ab）复制大鼠Thy-1N。分别取anti-Thy-1 Ab注射后3h和5d时的大鼠肾组织,应用Real-time PCR测定其gadd45γmRNA丰度,从事Western blot和免疫荧光检查其gadd45γ蛋白的表达水平。此外,应用末端转移酶介导的dUTP缺口末端标记（terminal deoxynucleotidyl transferase dUTP nick end labeling, TUNEL）技术和电镜检查大鼠肾组织病理学改变,并用自动生化分析仪测定各组大鼠5d时24h尿蛋白总量的变化。结果:大鼠Thy-1N病变40min时,肾组织中gadd45γ表达水平开始升高,实验3h时升高更为明显。将gadd45γshRNA质粒导入大鼠肾组织再复制Thy-1N,定期取标本检查发现,gadd45γshRNA处理的Thy-1N大鼠（ gadd45γshRNA+Thy-1N组）,其肾组织中的gadd45γ基因表达显著低于Thy-1N模型组。形态学观察（TUNEL和电镜）还发现,gadd45γshRNA+Thy-1N组大鼠,其发病后的肾小球内GMCs凋亡数量显著减少;5d时,24h尿蛋白分泌也明显下降。结论

关键词：生长阻滞及DNA损伤诱导基因45γ(gadd45γ) 小发夹RNA (shRNA) 肾小球系膜细胞(GMCs) 亚溶解型C5b-9(sublytic C5b-9) GMCs gadd45γ 凋亡 gadd45γ Thy-1肾炎(Thy-1N) 组织病理学变化

分别携带gadd45α、gadd45γ基因的溶瘤腺病毒在肿瘤治疗中的研究

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分别携带GADD45α、GADD45γ基因的溶瘤腺病毒在肿瘤治疗中的研究

作者：席璐浙江理工大学

学位级别：硕士

当今,恶性肿瘤已经成为危害人类生命和健康的头号杀手,每年肿瘤疾病的发病率和死亡率都在急剧增加着。传统的手术、放疗和化疗对恶性肿瘤的治疗仍然于事无补,所以肿瘤的复发率和致死率仍然是肿瘤治疗的最大死穴。肿瘤的传统治疗方法要... 详细信息

当今,恶性肿瘤已经成为危害人类生命和健康的头号杀手,每年肿瘤疾病的发病率和死亡率都在急剧增加着。传统的手术、放疗和化疗对恶性肿瘤的治疗仍然于事无补,所以肿瘤的复发率和致死率仍然是肿瘤治疗的最大死穴。肿瘤的传统治疗方法要想得以发展已经寸步难行,现在人类迫切的需要寻找到更加有效安全的治疗思路和方法。然而,随着对肿瘤发生发展的一步步认识的加深,人们对于克服并治疗肿瘤提出了很多新的思路和方法,其中基因治疗和病毒治疗得到了长足的发展。肿瘤特异性增殖腺病毒（即溶瘤腺病毒）,已经成为目前最具前景的靶向基因治疗载体之一。刘新垣院士于2001年首次正式提出了癌症的靶向基因-病毒治疗的概念:通过溶瘤腺病毒载体携带一个或多个肿瘤治疗基因来实现对肿瘤细胞的有效杀伤,在肿瘤临床上拥有极其广阔的应用前景。生长阻滞和DNA损伤基因（growth arrest and DNA damage, gadd）又名DNA损伤诱导基因（DNA damage inducible transcript 1, DDIT1 ）基因家族拥有gadd45α、gadd45β和gadd45γ3个成员,是第一个被发现的p53下游基因。其中,gadd45α可由多种DNA损伤因素和生长阻滞因素作用于细胞通过不同的传导通路快速诱导产生,受p53和BRCA1的调节,与维持基因组稳定性中有重要关系,从而抑制肿瘤的恶性发展。gadd45β主要与p53和JNK的调控有关,从而参与抑制细胞生长及细胞凋亡的过程,在细胞周期控制、DNA损伤修复及信号转导过程中发挥重要作用。gadd45γ在电离辐照、紫外线、多种DNA碱基损伤剂和诱变剂等刺激下诱导表达,它通过细胞周期阻滞和细胞凋亡对细胞生长发挥负向调控,具有抑制细胞增殖和促进凋亡的作用。gadd45蛋白通过多种方式参与对细胞基因组稳定性的调节与细胞生存、凋亡、转化和肿瘤的形成有着密切的关系。基于癌症的靶向基因-病毒治疗的观点,在肿瘤特异性增殖病毒中加入抗癌基因,将肿瘤的基因治疗与病毒治疗结合起来。我们将gadd45α和gadd45γ基因分别插入到溶瘤腺病毒载体ZD55中,构建出重组病毒ZD55 -gadd45α、ZD55-gadd45γ。体外实验表明ZD55 -gadd45α、ZD55- gadd45γ对肿瘤细胞如肝癌,结肠癌具有杀伤作用,而对正常细胞的杀伤力很弱。Hoechest染色实验发现ZD55 -gadd45α、ZD55- gadd45γ引起细胞凋亡,所以实验使用western blot方法探讨gadd45α、gadd45γ所相关的细胞凋亡信号通路上相关蛋白的变化。说明携带gadd45α、gadd45γ基因的溶瘤腺病毒ZD55 -gadd45α、ZD55- gadd45γ对肿瘤细胞具有较好的杀伤效果,为肿瘤治疗提供了参考。

关键词： gadd45α gadd45γ 溶瘤腺病毒肿瘤癌症的靶向基因-病毒治疗

NF-κB，gadd45γ蛋白在肝癌中的差异表达及其意义

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NF-κB，Gadd45γ蛋白在肝癌中的差异表达及其意义

作者：韩敏辉第四军医大学

学位级别：硕士

背景:肝细胞肝癌是世界范围内常见的恶性肿瘤之一,常见的病因有HBV感染,HCV感染等,在我国90%原发性肝癌患者的血清或肝组织中可检测到HBV的标志物。核转录因子κB (NF-κB)是一种分布广泛,参与众多生理和病理过程的转录因子, NF-κB的... 详细信息

背景:肝细胞肝癌是世界范围内常见的恶性肿瘤之一,常见的病因有HBV感染,HCV感染等,在我国90%原发性肝癌患者的血清或肝组织中可检测到HBV的标志物。核转录因子κB (NF-κB)是一种分布广泛,参与众多生理和病理过程的转录因子, NF-κB的持续活化可促进肿瘤细胞的增生,抑制肿瘤细胞的凋亡,促进血管新生,提高肿瘤细胞的转移能力,在肿瘤发生、发展的多个环节均起重要的作用。在肝癌中HBx可反式激活NF-κB。gadd45γ是生长抑制及DNA损伤诱导基因(Growth arrest and DNA damage-inducible genes,gadd45)家族的成员。对细胞的生长起负性调控作用,既往研究发现gadd45γ在肝癌中低表达,但其与HBV感染及NF-κB表达之间的关系尚不明确。目的:通过研究NF-κB,gadd45γ蛋白在肝脏癌旁组织及HBV感染型与HBV非感染型肝癌中的表达情况及其意义,分析其在两种肝癌组织中的表达差异及相关性,并在细胞水平抑制NF-κB的活性后,检测gadd45γ的表达及细胞凋亡情况,为进一步阐明HBV感染和NF-κB、gadd45γ在原发性肝癌发生发展过程中的作用机理提供实验依据。方法:1收集肝细胞肝癌病理标本64例,肝癌旁组织标本48例。并根据血清学HBSAg的检查结果及肝癌的临床病理特征进行分组。2采用免疫组化快捷Maxvision二步法检测肝癌组织及癌旁组织中NF-κB,gadd45γ蛋白表达情况。并通过卡方检验,Fisher确切概率法及spearman秩相关进行统计分析,探讨二者的表达与临床病理特征及HBV感染的关系及二者之间的相关性。3培养肝癌细胞HepG2及持续表达HBV的HepG2215细胞,RT-PCR检测NF-κB,gadd45γmRNA的表达,Western blot检测NF-κB,gadd45γ蛋白的表达。验证其表达与HBV感染的关系。4 NF-κB抑制剂PDTC干预HepG2215细胞后检测gadd45γ表达的变化,探讨其与NF-κB活性的关系。5 PDTC干预HepG2215细胞后,流式细胞仪检测细胞凋亡的变化,分析NF-κB活性受抑制后对细胞增殖与凋亡的影响。结果:1免疫组化结果显示:NF-κB蛋白在HBSAg阳性癌旁组织、HBSAg阳性肝癌和HBSAg阴性肝癌组织中的阳性表达率分别为27.03%、63.83%、29.41%。gadd45γ蛋白在HBSAg阳性癌旁组织、HBSAg阳性肝癌和HBSAg阴性肝癌组织中的阳性表达率分别为40.54%、4.26%、29.41%。NF-κB蛋白在肝癌中表达高于癌旁组织,与HBSAg阴性肝癌组织相比,NF-κB蛋白在HBSAg阳性肝癌组织中表达更高。gadd45γ蛋白在肝癌中表达低于癌旁组织,与HBSAg阳性肝癌组织相比,gadd45γ蛋白在HBSAg阴性肝癌组织中表达更高。NF-κB蛋白表达阳性率与肝癌的病理分级,肝癌的转移相关,分化低的,转移能力强的肝癌NF-κB阳性表达率高,gadd45γ蛋白的表达与肝癌的临床病理特征之间无相关性。NF-κB与gadd45γ的表达存在负相关。 2 NF-κB mRNA和总蛋白中NF-κB的含量在HepG2和HepG2215细胞中未见明显差异,但HepG2215细胞核蛋白中NF-κB的量高于HepG2细胞。gadd45γmRNA和总蛋白在HepG2细胞中高于HepG2215细胞。与组织水平上的检测结果类似。 3 PDTC干预HepG2215细胞24小时后核内NF-κB蛋白减少,细胞总蛋白中gadd45γ的量增加。 4 PDTC干预HepG2215细胞24小时后,细胞凋亡增多。结论:1本实验证明HBV感染可以诱导NF-κB的活化,抑制gadd45γ的表达。NF-κB的活化与gadd45γ的低表达与肝癌尤其是HBV感染型肝癌的发生有关,活化的NF-κB可能增加肝癌的恶性程度,促进其转移。NF-κB与gadd45γ的表达存在负相关,提示活化的NF-κB可能抑制gadd45γ的表达。 2通过检测HepG2和HepG2215细胞中NF-κB与gadd45γ的表达,进一步证明HBV感染可诱导NF-κB的活化,下调gadd45γ的表达。 3 PDTC通过抑制NF-κB的入核而抑制其转录活性,从而诱导gadd45γ的表达上调,细胞凋亡增多。提示NF-κB可通过某些信号通路调控gadd45γ的表达,活化的NF-κB可促进细胞增殖,抑制细胞凋亡。

关键词：肝细胞癌 NF-κB gadd45γ

NF-κB,gadd45γ蛋白在肝癌中的差异表达及其意义

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现代肿瘤医学 2010年第4期18卷 732-735页

作者：韩敏辉张伟张贺龙姚丽张峰李晓惠刘睿冯英明第四军医大学唐都医院肿瘤科陕西西安710038 第四军医大学唐都医院病理科陕西西安710038

目的:分析NF-κB,gadd45γ蛋白在肝细胞性肝癌中的差异表达,探讨其在肝癌尤其是HBV感染型肝癌发生发展中的意义。方法:应用免疫组化方法检测NF-κB,gadd45γ蛋白在64例肝癌和48例癌旁组织中的表达情况,并结合HBV感染状态与临床病理资料... 详细信息

目的:分析NF-κB,gadd45γ蛋白在肝细胞性肝癌中的差异表达,探讨其在肝癌尤其是HBV感染型肝癌发生发展中的意义。方法:应用免疫组化方法检测NF-κB,gadd45γ蛋白在64例肝癌和48例癌旁组织中的表达情况,并结合HBV感染状态与临床病理资料进行分析。结果:NF-κB在感染型肝癌组织中的表达率高于癌旁组织和非感染型肝癌。gadd45γ在感染型肝癌组织中的表达率低于癌旁组织和非感染型肝癌组织,差别具有统计学意义(Pgadd45γ表达呈负相关(Pgadd45γ的低表达并NF-κB部分介导的gadd45γ表达下调共同参与了肿瘤的发生发展。

关键词： NF-κB gadd45γ 肝细胞性肝癌免疫组化

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紫外线对人肝癌HepG2细胞中gadd45α/γ表达的影响

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临床检验杂志 2007年第2期25卷 135-137页

作者：邵燕朱娜孙路虹南京医科大学微生物与免疫学系南京210029

目的探讨人肝癌HepG2细胞经紫外线照射后gadd45α和gadd45γ表达的改变。方法体外培养的HepG2细胞,经紫外线照射(254nm,10J/m2)1、2、4h后收获细胞,采用RT-PCR半定量法检测gadd45α和gadd45γmRNA的表达水平,west-ern blot检测其蛋白水... 详细信息

目的探讨人肝癌HepG2细胞经紫外线照射后gadd45α和gadd45γ表达的改变。方法体外培养的HepG2细胞,经紫外线照射(254nm,10J/m2)1、2、4h后收获细胞,采用RT-PCR半定量法检测gadd45α和gadd45γmRNA的表达水平,west-ern blot检测其蛋白水平的改变。结果经紫外线照射后,gadd45α和gadd45γmRNA表达峰值分别出现在4h和1h,gadd45α/γ蛋白在照射后1h达高峰。结论紫外线诱导了HepG2细胞中gadd45α和gadd45γ的表达升高。

关键词：紫外线 gadd45α gadd45γ

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The gene expression profile and overexpression of apoptosis-related genes (NGFI-B and gadd 45γ) in early phase of Thy-1 nephritis model

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The gene expression profile and overexpression of apoptosis-...