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植物病理学报 2004年第4期34卷 352-355页

作者：李永丽吴茂森王振跃张文蔚成卓敏中国农业科学院植物保护研究所植物病虫害生物学国家重点实验室北京100094 河南农业大学植物保护学院郑州450002

根据已报道的大麦黄矮病毒gpv株系 (BYDV gpv)相关基因序列设计合成引物 ,利用RT PCR方法获得ORF4基因 ,并将其克隆到原核表达载体 pET 5a中。经IPTG诱导、SDS PAGE分析 ,结果表明 :ORF4基因在大肠杆菌BL2 1(DE3)pLysS中获得了高效表达 ... 详细信息

根据已报道的大麦黄矮病毒gpv株系 (BYDV gpv)相关基因序列设计合成引物 ,利用RT PCR方法获得ORF4基因 ,并将其克隆到原核表达载体 pET 5a中。经IPTG诱导、SDS PAGE分析 ,结果表明 :ORF4基因在大肠杆菌BL2 1(DE3)pLysS中获得了高效表达 ,分子量为 17kDa。以回收的表达产物为抗原免疫家兔 ,制备了BYDV gpv 17kDa蛋白的特异性抗血清。Westernblot检测结果 ,制备的抗血清可用于检测BYDV gpv侵染后在燕麦体内表达的

关键词：大麦黄矮病毒 gpv株系 ORF4基因大肠杆菌基因表达

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小麦黄矮病毒gpv株系的提纯及血清学研究

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病毒学报 1986年第3期 275-277+293页

作者：成卓敏周广和中国农科院植保所

小麦黄矮病是危害我国小麦生产的一种重要病毒病害。国内对此病毒的形态结构和提纯方法方面的研究工作已有报道。但对广为应用的蔗糖密度梯度离心法纯化该病毒、提纯病毒的产量估算以及血清学检测技术的研究报告却极少。本文报道我们有... 详细信息

小麦黄矮病是危害我国小麦生产的一种重要病毒病害。国内对此病毒的形态结构和提纯方法方面的研究工作已有报道。但对广为应用的蔗糖密度梯度离心法纯化该病毒、提纯病毒的产量估算以及血清学检测技术的研究报告却极少。本文报道我们有关这方面的研究

关键词：小麦黄矮病毒 gpv株系

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大麦黄矮病毒gpv株系的序列分析及其抗病毒转基因小麦的获得(英文)

大麦黄矮病毒GPV株系的序列分析及其抗病毒转基因小麦的获得(英文...

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农业生物化学与分子生物分会第六次学术交流会

作者：成卓敏何小源吴茂森陈彩层许雷周广和中国农业科学院植物保护研究所植物病虫害生物学国家重点实验室中国农业科学院研究生院

gpv是大麦黄矮病毒(Barley yellow dwarf virus,BYDV)中国分离物,与国外的MAV、PAV、SGV、RPV、RMV的抗血清不发生免疫反应.本研究对gpv的序列进行分析鉴定并推测了其氨基酸序列.编码RdRP的ORF1长度为1953nt,编码一个71.4kD的蛋白:ORF2... 详细信息

gpv是大麦黄矮病毒(Barley yellow dwarf virus,BYDV)中国分离物,与国外的MAV、PAV、SGV、RPV、RMV的抗血清不发生免疫反应.本研究对gpv的序列进行分析鉴定并推测了其氨基酸序列.编码RdRP的ORF1长度为1953nt,编码一个71.4kD的蛋白:ORF2长度为1872nt,编码一个70.1kD的蛋白.gpv的外壳蛋白,分子量为22.2kD,由长度为603nt的ORF3编码.与MAV、PAV和RPV一样,在gpv外壳蛋白编码区内存在一个次级阅读框ORF4,编码的17kD蛋白可能与VPg有关.ORF4的长度为***5长度为1326nt,紧接在外壳蛋白之后,编码一个72.2kD的蛋白,与蚜虫传毒专化性有关.gpv的核苷酸及氨基酸序列与RPV的同源性要高于PAV和MAV.根据BYDV gpv 的序列,我们应用RT-PCR获得了外壳蛋白基因和复制酶基因的cDNA.将cDNA插入到不同的质粒构建了其表达载体.通过花粉管通道法,建立了一个可快速、高效地获得抗BYDV的转基因小麦的技术体系.

关键词：大麦黄矮病毒 gpv株系序列转基因小麦

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大麦黄矮病毒gpv外壳蛋白基因序列分析及其植物表达质粒的构建

大麦黄矮病毒GPV外壳蛋白基因序列分析及其植物表达质粒的构建

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作者：成卓敏何小源吴茂森周广和 Paul Keese P.M.Waterhouse

大麦黄矮病毒gpv株系是我国特有的一个株系,与国外已报道的大麦黄矮病毒MAV、PAV、SGV、RPV和RMV在血清学上无反应。通过对gpv外壳蛋白基因的序列分析,明确了病毒的外壳蛋白基因由603个核苷酸组成,编码201个氨基酸,分子量为22218D。同MA... 详细信息

大麦黄矮病毒gpv株系是我国特有的一个株系,与国外已报道的大麦黄矮病毒MAV、PAV、SGV、RPV和RMV在血清学上无反应。通过对gpv外壳蛋白基因的序列分析,明确了病毒的外壳蛋白基因由603个核苷酸组成,编码201个氨基酸,分子量为22218D。同MAV、PAV、RPV株系一样,在gpv外壳蛋白基因框架中(ORF)含有一个Vpg框架结构,分子量为17024D。外壳蛋白基因序列同源性比较结果显示,gpv株系和RPV株系同源性较高,核苷酸和氨基酸的同源性分别为83.7%和77.5%。而与PAV和MAV株系同源性较低,核苷酸和氨基酸的同源性分别为56.9%、53.2%和44.1%、43.8%。按照gpv外壳蛋白基因序列,设计寡聚核苷酸引物,通过RT～PCR反应,得到gpv外壳蛋白基因全长cDNA,克隆到表达质粒,构建了高等植物表达载体pPPI1、pPPI2和pPPI5。

关键词：大麦黄矮病毒 gpv株系外壳蛋白基因植物表达载体

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小麦抗黄矮病基因工程育种

小麦抗黄矮病基因工程育种

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第四届全国植物分子育种学术研讨会

作者：成卓敏何小源吴茂森陈彩层贾力田苗英刘太国张文蔚肖红周广和中国农业科学院植物保护研究所植物病虫害生物学国家重点实验室

gpv是大麦黄矮病毒(barley yellow dwarf virus,BYDV)中国分离物,引起的小麦黄矮病是小麦上最重要的病毒病害。根据BYDV gpv的序列,我们应用RT-PCR获得了外壳蛋白基因和复制酶基因的cDNA。将cDNA插入到不同的质粒构建了其表达载体。通... 详细信息

gpv是大麦黄矮病毒(barley yellow dwarf virus,BYDV)中国分离物,引起的小麦黄矮病是小麦上最重要的病毒病害。根据BYDV gpv的序列,我们应用RT-PCR获得了外壳蛋白基因和复制酶基因的cDNA。将cDNA插入到不同的质粒构建了其表达载体。通过花粉管通道法,建立了一个可快速、高效地获得抗BYDV的转基因小麦的技术体系。

关键词：大麦黄矮病毒 gpv株系序列转基因小麦

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