检索结果-南通市图书馆

Targeting gpr65 alleviates hepatic inflammation and fibrosis by suppressing the JNK and NF-κB pathways

Military Medical Research 2024年第4期11卷 500-520页

作者： Kun Zhang Meng-Xia Zhang Xiao-Xiang Meng Jing Zhu Jia-Jun Wang Yi-Fan He Ye-Hua Li Si-Cong Zhao Zhe-Min Shi Li-Na Zheng Tao Han Wei Hong Department of Histology and Embryology School of Basic Medical SciencesTianjin Medical UniversityTianjin 300070China Department of Hepatology and Gastroenterology Tianjin Union Medical CenterTianjin Medical UniversityTianjin Union Medical Center Affiliated to Nankai UniversityTianjin 300000China

Background:G-protein coupled receptors(GPCRs)are recognized as attractive targets for drug ***,it remains poorly understood how GPCRs,except for a few chemokine receptors,regulate the progression of liver ***,we aimed to reveal the role of gpr65,a proton-sensing receptor,in liver fibrosis and to elucidate the underlying ***:The expression level of gpr65 was evaluated in both human and mouse fibrotic ***,gpr65-deficient mice were treated with either bile duct ligation(BDL)for 21 d or carbon tetrachloride(CCl4)for 8 weeks to investigate the role of gpr65 in liver fibrosis.A combination of experimental approaches,including Western blotting,quantitative real-time reverse transcription-polymerase chain reaction(qRT-PCR),and enzyme-linked immunosorbent assay(ELISA),confocal microscopy and rescue studies,were used to explore the underlying mechanisms of gpr65’s action in liver ***,the therapeutic potential of gpr65 inhibitor in the development of liver fibrosis was ***:We found that hepatic macrophage(HM)-enriched gpr65 was upregulated in both human and mouse fibrotic ***,knockout of gpr65 significantly alleviated BDL-and CCl4-induced liver inflammation,injury and fibrosis in vivo,and mouse bone marrow transplantation(BMT)experiments further demonstrated that the protective effect of gpr65knockout is primarily mediated by bone marrow-derived macrophages(BMMs).Additionally,in vitro data demonstrated that gpr65 silencing and gpr65 antagonist inhibited,while gpr65 overexpression and application of gpr65 endogenous and exogenous agonists enhanced the expression and release of tumor necrosis factor-α(TNF-α),interleukin-6(IL-6)and transforming growth factor-β(TGF-β),all of which subsequently promoted the activation of hepatic stellate cells(HSCs)and the damage of hepatocytes(HCs).Mechanistically,gpr65 overexpression,the acidic pH and gpr65 exogenous agonist induced up-regulation of

关键词： gpr65 Hepatic fibrosis Hepatic macrophages Inflammation c-Jun N-terminal kinase Nuclear factorκB

来源：

维普期刊数据库

同方期刊数据库评论

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

gpr65通过β-catenin/YAP轴促进肾癌转移的分子机制

GPR65通过β-catenin/YAP轴促进肾癌转移的分子机制

引用

作者：白书瑜内蒙古大学

学位级别：硕士

肾细胞癌(renal cell carcinoma,RCC)是一种原发性肾脏的恶性肿瘤,具有高侵袭性,高死亡率。然而肾癌早期症状不明显,大多数肾癌患者被确诊时已经发生转移,且肾癌对现有的后续治疗手段均不敏感。因此,找到肾癌早期诊断和治疗的分子靶标... 详细信息

肾细胞癌(renal cell carcinoma,RCC)是一种原发性肾脏的恶性肿瘤,具有高侵袭性,高死亡率。然而肾癌早期症状不明显,大多数肾癌患者被确诊时已经发生转移,且肾癌对现有的后续治疗手段均不敏感。因此,找到肾癌早期诊断和治疗的分子靶标是关键。G-蛋白偶联受体65(G protein coupled-receptor65,gpr65)是一种质子感知受体,在炎症和肿瘤中上调,能够感知细胞外p H值在p H 6-8之间的变化,并参与调节炎症、肿瘤生物学和纤维化的关键过程。我们研究组前期研究发现,gpr65能够在酸性环境下被诱导激活,提高肿瘤细胞的生存能力,但gpr65是否在肾癌发展中同样具有促进作用,以及如何参与在肾癌转移的调控机制仍未可知。本研究通过大数据分析gpr65在肾癌中的作用,发现gpr65在肾癌中高表达,并与肾癌患者生存相关。为了进一步探索gpr65在肾癌细胞中的作用及肾癌转移的分子机制,构建gpr65过表达质粒并建立了RCC过表达gpr65稳转细胞系(786-O-gpr65,ACHN-gpr65)。用划痕实验、趋化小室迁移实验、Transwell小室侵袭实验检测在酸性环境下gpr65对786-O和ACHN两种肾癌细胞伤口愈合、迁移及侵袭的影响;q PCR(Quantitative Real-time-PCR)法和Western Blot法用于检测上皮-间充质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)的影响,通过q PCR法和Western Blot验证与肾癌细胞的转移相关的信号通路YAP、β-catenin与gpr65之间的关系,并通过拮抗剂验证促肾癌转移信号通路上下游之间的关系。实验结果显示,在酸性条件(p H6.8)下gpr65促进肾癌细胞的伤口愈合、迁移、侵袭和EMT,表明gpr65具有促进肾癌发生与转移的能力。在机制研究中发现,酸性环境下gpr65通过抑制Hippo信号通路,促进YAP核移位,近而参与肾癌的发生。YAP抑制剂Verteporfin能够抑制gpr65诱导的细胞迁移、侵袭和EMT作用。同时gpr65增强了Wnt信号通路中β-catenin的表达,使用Wnt/β-catenin抑制剂XAV-939显著抑制了gpr65介导的肾癌细胞的迁移、侵袭以及EMT。使用Wnt/β-catenin抑制剂XAV-939,抑制了p-β-catenin的磷酸化水平以及YAP的入核,而使用YAP的特异性抑制剂Verteporfin对Wnt信号通路相关基因表达无影响。综上所述,本研究发现gpr65是通过β-catenin/YAP信号轴介导肾癌细胞转移相关的迁移、侵袭和EMT。因此,gpr65有望成为检测肾癌转移潜在的分子靶点或药物靶标,为肾癌的诊断与治疗提供新的理论依据。

关键词： gpr65 肾癌信号通路 EMT

来源：

同方学位论文库评论

在线全文

同方学位论文库

学校读者我要写书评

暂无评论

酸感受器gpr65调控胶质瘤恶性增殖机制及预后相关性研究

酸感受器GPR65调控胶质瘤恶性增殖机制及预后相关性研究

引用

作者：王洪祥第二军医大学

学位级别：硕士

研究背景及目的：脑胶质瘤是中枢神经系统最常见的原发性恶性肿瘤,约占脑内所有恶性肿瘤的80%,其中恶性程度和发病率最高者(65%)为胶质母细胞瘤(GBM, WHO IV级)。其预后不佳,死亡率极高,使恶性胶质瘤成为目前神经外科疾病治疗的重点和... 详细信息

研究背景及目的：脑胶质瘤是中枢神经系统最常见的原发性恶性肿瘤,约占脑内所有恶性肿瘤的80%,其中恶性程度和发病率最高者(65%)为胶质母细胞瘤(GBM, WHO IV级)。其预后不佳,死亡率极高,使恶性胶质瘤成为目前神经外科疾病治疗的重点和难点。传统的治疗策略包括手术切除及辅以术后放化疗,以替莫唑胺(TMZ)联合放疗为标准方案的术后辅助治疗也在一定程度上延长了患者总体生存时间(OS)。然而由于胶质瘤高度复发、恶性侵袭的特性及TMZ等化疗药耐药等因素,GBM和间变型胶质细胞瘤(WHO Ⅲ级)患者中位生存时间仍然分别只有12～15个月和2-5年。如何改善胶质瘤患者的预后一直是神经外科领域的难题。随着分子生物学和基因组学的发展,对与肿瘤发生过程中的基因事件及分子机制的研究也更加深入,靶向肿瘤细胞内核心信号通路中的关键分子,抑制受体激活、阻断信号传导等,从而抑制肿瘤血管生成和肿瘤生长,促进肿瘤细胞凋亡,已成为肿瘤研究的热点。由此,阐明胶质瘤的分子病理机制,寻找能够有效治疗胶质瘤的关键分子靶点显得十分重要。高通量技术的快速发展无疑为实现分子靶向治疗提供了强有力的支持。利用二代测序、基因芯片、组织芯片等技术,分析肿瘤样本中基因及分子水平变化,结合详细患者随访资料,比较病例的疗效及生存时间迥异,进而筛选出差异表达基因,是寻找肿瘤分子靶标的可靠手段。TCGA数据库即是在此背景下由美国国家癌症研究所和美国国家人类基因组研究所于2005年共同发起建立,旨在通过高通量技术研究加深对肿瘤分子基础的理解,而GBM是该项目重点聚焦并最先开展深入研究的肿瘤。通过聚类分析、差异表达分析和生存分析,整合脑胶质瘤患者的基因芯片数据及TCGA数据库中GBM样本的基因表达谱数据和患者临床相关资料,以此寻找那些在脑胶质瘤中表达异常并与患者预后相关的基因。这些结果不仅能够有助于我们理解脑胶质瘤发生的分子病理机制,同时还可能揭示一些对脑胶质瘤预后有判断价值的分子标记物,进而帮助实现真正意义上的个体化治疗。G-蛋白偶联受体-65(gpr65)为G-蛋白偶联受体(GPCRs)家族中的一个重要成员,是一类敏感的质子传感器。既往研究显示恶性肿瘤细胞生长代谢迅速,造成氧乏进入糖酵解途径产能,含有大量乳酸的代谢产物堆积,使得肿瘤细胞周围形成微酸性环境。GRP65能够感受这种细胞外环境中pH的变化,及时调整下游能量代谢和协调炎症反应、免疫应答等过程,从而使肿瘤细胞获得更多的生存优势,促进肿瘤细胞增殖。然而,目前国内外文献中均无gpr65在胶质瘤中相关的研究报道。我们拟通过数据库及多样本信息筛选及验证gpr65对胶质瘤患者预后判断的价值,并利用体外实验研究gpr65在胶质瘤恶性增殖中的作用机制。研究方法及结果：前期我们收集了15例的胶质瘤样本,经病理证实WHO Ⅰ级1例,WHO Ⅱ级7例,WHO Ⅲ级2例及WHO Ⅳ级5例,并对患者进行随访获得生存期,截止随访终点,共有7名患者死亡,8名患者仍健在,15名患者生存期为5-85个月,中位生存时间65个月。继而将肿瘤组织裂解、抽提RNA及转化cDNA,制备成基因芯片,通过杂交测序方法获得表达谱基因信号值。根据患者随访截止时的生存状态分组,对两组患者的每个基因进行t检验、差异倍数计算及热图分析,在p值小于0.015水平,两组间基因表达差异2倍时,发现134个基因能够明确区分预后不同的两组胶质瘤患者。在TCGA的528例GBM及10例正常脑组织中,我们利用秩和检验、Kaplan-Meier生存分析及log-rank检验来验证这134个基因在肿瘤中的表达及与患者生存期的相关性。经过逐个基因验证分析,我们发现gpr65在GBM组织中表达明显上调(pgpr65高表达者中位OS明显短于低表达者(中位OS 11.7个月vs.14.2个月,p=0.003)。通过在自主建立的基因芯片及公开的TCGA数据库中初步筛选,我们发现gpr65基因在胶质瘤中表达明显上调,并可作为预后因子预测GBM患者预后,提示其可能在胶质瘤发生及进展过程中扮演重要角色。随后,我们收集经病理证实的300例胶质瘤样本(WHO Ⅰ级11例,WHO Ⅱ级109例,WHO Ⅲ级47例,WHO Ⅳ级133例)及16例正常脑组织制备成高通量组织芯片,并对脑胶质瘤患者跟踪随访,再利用免疫组化的方法进一步验证gpr65的表达及预后判断作用。随访结果显示285名患者获得完整随访数据,截止2013年9月随访结束,39.3%患者仍存活,35.4%患者影像学未见明显肿瘤复发,患者中位总体生存时间(OS)为30个月,中位无进展生存期(PFS)为26个月。免疫组化显示gpr65主要定位于靶细胞的细胞浆,其在脑胶质瘤中表达水平明显上调(免疫组化得分4.295±3.063 vs

关键词： gpr65 TCGA 胶质瘤组织芯片增殖临床预后

来源：

同方学位论文库评论

在线全文

同方学位论文库

学校读者我要写书评

暂无评论

欢迎您,

建议与咨询留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

时间限定

文献类型

馆藏选择

核心期刊

语言

文献类型

帮助

文字说明：

检索规则说明：

检索范例：

分类表

所选分类

限定检索结果

文献类型

馆藏范围

日期分布

学科分类号

主题

机构

作者

语言

在线全文

在线全文

在线全文

请选择保存的检索档案：

请选择收藏分类：

通借通还

欢迎您,

建议与咨询 留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

时间限定

文献类型

馆藏选择

核心期刊

语言

文献类型

帮助

文字说明：

检索规则说明：

检索范例：

分类表

所选分类

限定检索结果

文献类型

馆藏范围

日期分布

学科分类号

主题

机构

作者

语言

在线全文

在线全文

在线全文

请选择保存的检索档案： 新增检索档案 确定 取消

请选择收藏分类： 新增自定义分类 确定 取消

通借通还

建议与咨询留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

请选择保存的检索档案：

请选择收藏分类：