检索结果-南通市图书馆

gpi锚定蛋白生物合成抑制剂类新型抗真菌化合物设计合成与构效关系研究

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

GPI锚定蛋白生物合成抑制剂类新型抗真菌化合物设计合成与构效关...

作者：赵晶福建中医药大学

学位级别：硕士

侵袭性真菌感染已成为临床医生面临的严重问题。文献报道侵袭性白念珠球菌感染已经跃升为全球范围内血液感染的第三位,其中乡村地区侵袭性真菌的感染率远高于城市。过去几十年中,随着诊断学、流行病学的不断深入研究及新型抗真菌药物的... 详细信息

侵袭性真菌感染已成为临床医生面临的严重问题。文献报道侵袭性白念珠球菌感染已经跃升为全球范围内血液感染的第三位,其中乡村地区侵袭性真菌的感染率远高于城市。过去几十年中,随着诊断学、流行病学的不断深入研究及新型抗真菌药物的发现和发展,医学真菌学研究水平得到了大幅度的提升。早在1950s时期发现的制霉菌素与两性霉素B (Aamphotericin B)等抗真菌药物,由于其肝毒性较大限制了此类药物的疗效。80s年代发现的唑类抗真菌药物改革了医学真菌学,该类药物对早期多烯类药物不敏感的真菌病原体均有较好效果。整个1990s年代,抗真菌药物的发展主要集中于唑类药物及两性霉素B的改造,出现了疗效好、抗菌谱广的第二代三唑类药物和两性霉素B脂质体。这些药物降低了细胞毒性,并且改善了体内药物代谢动力学和药效学。2000年后,棘球白素类药物进入临床。作为第一个作用于细胞壁成分1,3-β-葡聚糖的药物,棘球白素类药物的安全性有了很大的提高,这种新作用机制的发现给后续的抗真菌药物的发展提供了启示。除了真菌特有的细胞壁结构,真菌细胞的结构、代谢都与哺乳动物细胞非常相似,因而很难寻找到特异的作用靶点。另一方面,临床上抗真菌药物的发展受限于对罕见的真菌致病菌感染的及时确诊和耐药性真菌致病菌感染的治疗。尽管出现了这么多问题,抗真菌药物的发展仍在继续。gpi锚定蛋白(Glycosylphosphatidylionsitol-anchored protein)是普遍存在于真核生物中一类通过其羧基末端的糖基化磷脂酰肌醇结构锚定于细胞膜表面的蛋白。文献报道发现真核生物的细胞膜或细胞壁上存在多种gpi锚定蛋白,包括各种功能蛋白如细胞表面的酶、受体、粘附分子和特异性抗原等。随着对gpi锚定蛋白的深入研究,发现gpi锚定蛋白在真核生物的生命活动中起着免疫识别、补体调节及跨膜信号转导等重要功能。针对哺乳动物细胞和真菌细胞中gpi锚定蛋白的结构及功能的差异,日本首先以真菌细胞壁gpi锚定蛋白为抗真菌药物的新靶点,通过高通量分子筛选,发现了抗真菌小分子化合物如gepinacin、1210和10b,、并且通过基因敲除实验方法证明这些小分子抑制的靶点是gpi锚定蛋白生物合成过程中肌醇酰基化必需基因Gwt1表达的蛋白。本课题探讨的是对抗真菌小分子化合物gepinacin、E1210和10b进行结构修饰和改造后,重新设计合成新的小分子化合物,并对合成的新型化合物进行体外抗真菌药理活性测试,根据活性测试结果分析、讨论构效关系。我们前期对新型化合物gepinacin进行了结构改造,设计合成的10个新型化合物(zj-g-1b～10b)。经过体外抗真菌活性实验筛选,得到的最优结构zj-g-5b～6b(MIC80 =4.0μg/ml)活性与对照化合物gepinacin相当,但很难与对照药物氟康唑(MIC80=0.5 μg/ml)相比,因此我们并未寻找到有潜力的先导化合物。对另一类先导化合物E1210和10b的结构改造和修饰,则分为A环、B环、C环、连接子I和连接子Ⅱ五个部分的不同程度的修饰和改造,得到了48个未见文献报道的新型化合物。首先利用不同的芳香环取代2-氨基吡啶环,确认A环是否作为活性保守区域,结果得到的新化合物苯并噻唑环类(zj-e-1b～11b) (MIC80=0.125～4.0μg/ml)具有较好的的抗真菌活性。以此推测2位氨基并不一定是活性必需基团,但是化合物zj-e-23b～34b的活性数据表明A环必须存在氮原子的条件下,化合物抗真菌活性才能保持,可以推测出小分子与靶点蛋白结合的方式中可能存在氢键作用。利用电子等排原理,用酰胺键替换E1210中的异嚯唑环,同时用噻吩环替代苯环,设计合成的新化合物均有较好的抗真菌活性。对于连接子Ⅱ,实验证明不管缩短还是延长链长,化合物的抗真菌活性都表现出减弱或消失。活性最佳的化合物连接子长度为两个碳原子长度,这证明整个分子的长度对分子的抗真菌活性有较大影响,可能与小分子化合物整体的水溶性、脂溶性等物理性质有关。zj-e-lb～3b等化合物的抗真菌活性数据表明,即使C环的改造变动较大,苯环取代基也能表现出较好抗真菌活性,其中苯环邻氟取代与间氟取代的化合物(MIC80=0.125μg/ml)抗真菌活性表现最佳。另一方面,以往的改造多集中于B环噻吩环2位的取代,而新设计出的噻吩环3位取代的化合物(zj-e-45b～48b) (MIC80=0.0625～0.5μg/ml)表现出了较好的抗真菌活性,特别是化合物zj-e-48b在对其他菌株的抗真菌活性检测中同样表现良好,这一新的作用位点的发现为将来抗真菌药物的研发提供了新的启示。我们设计合成的所有的化合物都通过1H-NMR和LC-MS确认了结构,并根据抗真菌活性对构效关系进行了深入讨论,得出了活性最优结构zj

关键词：抗真菌 gpi锚定蛋白构效关系药理活性

利用PiggyBac转座子系统快速控制gpi锚定蛋白的表达

同方学位论文库评论

在线全文

同方学位论文库

学校读者我要写书评

暂无评论

食品与生物技术学报 2017年第9期36卷 927-932页

作者： Matabaro Emmanuel 柳艺石张慧杰高晓冬藤田盛久江南大学生物工程学院江苏无锡214122

gpi锚定蛋白的合成是一个发生在内质网中多步骤、多基因参与的过程。PIGK是gpi锚定蛋白转酰胺酶复合物的一个催化亚基,负责把gpi前体转移到蛋白质上。作者在人体胚胎肾细胞(HEK 293)中获得了PIGK敲除的细胞株,敲除PIGK的细胞不能表达GP... 详细信息

gpi锚定蛋白的合成是一个发生在内质网中多步骤、多基因参与的过程。PIGK是gpi锚定蛋白转酰胺酶复合物的一个催化亚基,负责把gpi前体转移到蛋白质上。作者在人体胚胎肾细胞(HEK 293)中获得了PIGK敲除的细胞株,敲除PIGK的细胞不能表达gpi锚定蛋白。利用piggyBac(PB)转座子系统,在细胞中重新插入PIGK基因,细胞膜表面的gpi锚定蛋白恢复表达。实验成功构建了HEK293pB-PIGK细胞株并命名为G36,通过引入PB转座酶或FLP重组酶,可以控制gpi锚定蛋白的表达。本系统可以快速调控细胞表面蛋白质的表达并能够用于基础研究和工业应用。

关键词： gpi锚定蛋白 PiggyBac转座子 PIGK

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

白假丝酵母菌gpi锚定蛋白的研究进展

第二军医大学学报 2012年第12期33卷 1368-1373页

作者：李德东王彦李星星赵兰雪姜远英第二军医大学药学院新药研究中心上海200433

gpi锚定蛋白(glycosylphosphatidylinositol-anchored protein)是白假丝酵母菌重要的细胞表面蛋白,对白假丝酵母菌的黏附、形态转换和细胞壁合成等有着重要影响。近年来,随着对白假丝酵母菌研究的深入,gpi锚定蛋白越来越多的重要功能逐... 详细信息

gpi锚定蛋白(glycosylphosphatidylinositol-anchored protein)是白假丝酵母菌重要的细胞表面蛋白,对白假丝酵母菌的黏附、形态转换和细胞壁合成等有着重要影响。近年来,随着对白假丝酵母菌研究的深入,gpi锚定蛋白越来越多的重要功能逐渐被发现。本文从白假丝酵母菌gpi锚定蛋白的概念入手,从家族分类和功能分类两个角度对gpi锚定蛋白的研究现状进行综述,并对gpi锚定蛋白未来的研究方向进行展望。

关键词：白假丝酵母菌 gpi锚定蛋白家族功能

吉氏巴贝斯虫多个gpi锚定蛋白基因的筛选与生物信息学分析

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

中国动物传染病学报 2019年第5期27卷 57-64页

作者：战雪燕聂政赵阳楠罗晓莹李慕晓安晓梦敖阳思琦崔杰王森贺兰赵俊龙华中农业大学动物医学院

吉氏巴贝斯虫是一类红细胞内专性寄生的血液原虫,犬一旦感染终生带虫,治疗后时有复发,因此需要简便快捷的临床诊断方法及时确诊治疗。gpi锚定蛋白是虫体表面重要的抗原分子,是很好的潜在诊断标识,在虫体粘附、识别以及入侵红细胞等过程... 详细信息

吉氏巴贝斯虫是一类红细胞内专性寄生的血液原虫,犬一旦感染终生带虫,治疗后时有复发,因此需要简便快捷的临床诊断方法及时确诊治疗。gpi锚定蛋白是虫体表面重要的抗原分子,是很好的潜在诊断标识,在虫体粘附、识别以及入侵红细胞等过程中具有非常重要的作用。为了筛选吉氏巴贝斯虫gpi锚定蛋白基因,通过搜索NCBI、Uniprot以及PiroplasmaDB数据库中吉氏巴贝斯虫表面抗原,与武汉株吉氏巴贝斯虫数据库作比对,筛选出可能的吉氏巴贝斯虫武汉株的gpi锚定蛋白基因,并通过bigpi、Predgpi、gpi-SOM网站预测其gpi锚定位点。运用生物信息学分析软件预测其氨基酸信号肽、跨膜区、疏水区以及结构域和抗原表位等,分析其生物信息特性。通过分析确定了5个吉氏巴贝斯虫武汉株的gpi候选抗原,分别命名为BgP50-WH、BgP47-WH、BgP45-WH、BgP32-WH、BgP12-WH,其gpi锚定位点均位于C端,长度约为21~22个氨基酸,均有信号肽并含有4个抗原表位。分析结果表明,这5个gpi抗原均有望成为吉氏巴贝斯病的诊断标识,其中BgP47-WH和BgP50-WH与抗体亲和力最强,最具有成为诊断标识的潜力。

关键词：吉氏巴贝斯虫 gpi锚定蛋白生物信息学免疫原性

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

gpi锚定蛋白与白血病

实用预防医学 2009年第4期16卷 1325-1328页

作者：杨智英唐建华湖南省长沙市卫生学校湖南长沙410100 中南大学生命科学与技术学院

羧基末端结合有糖基化磷脂酰肌醇(gpi)结构的膜蛋白,称为gpi锚定蛋白(glycosylphosphatidy-linositol-anchored protein);它们功能广泛,涉及细胞识别、生长、分化和程序性死亡等重要生命过程,与许多疾病有着一定的联系。人体内水解gpi... 详细信息

羧基末端结合有糖基化磷脂酰肌醇(gpi)结构的膜蛋白,称为gpi锚定蛋白(glycosylphosphatidy-linositol-anchored protein);它们功能广泛,涉及细胞识别、生长、分化和程序性死亡等重要生命过程,与许多疾病有着一定的联系。人体内水解gpi锚定蛋白中的肌醇磷酸酯键的只有糖基化磷脂酰肌醇特异性磷脂酶D(glycosylphosphatidy-linositol spe-cific phospholipaseD gpi-PLD)。本文概述了近年来有关gpi锚定蛋白的研究状况,包括它的结构、组成、功能和水解酶gpi-PLD,gpi锚定蛋白与白血病的发生、发展及治疗等的相关性研究。

关键词： gpi锚定蛋白自血病 gpi—PLD

核盘菌gpi锚定蛋白SsGSSP1的功能分析

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

核盘菌GPI锚定蛋白SsGSSP1的功能分析

作者：廖洪梅西南大学

学位级别：硕士

核盘菌(Sclerotinia sclerotiorum)作为一类分布广泛的坏死性丝状病原真菌,其引起的菌核病严重危害油菜等作物的产量和品质。但目前,油菜中匮乏抗菌核病资源,抗病育种进程缓慢。gpi锚定蛋白在植物病原真菌感染中发挥一定重要作用,影响... 详细信息

核盘菌(Sclerotinia sclerotiorum)作为一类分布广泛的坏死性丝状病原真菌,其引起的菌核病严重危害油菜等作物的产量和品质。但目前,油菜中匮乏抗菌核病资源,抗病育种进程缓慢。gpi锚定蛋白在植物病原真菌感染中发挥一定重要作用,影响菌株的营养发育,细胞壁完整性以及致病性等。因此鉴定并研究核盘菌gpi锚定蛋白的功能不仅能进一步解析核盘菌的致病机理,也能为菌核病的防治提供理论基础。本研究前期通过转录组分析鉴定到7个编码gpi锚定蛋白的核盘菌差异表达基因,其中SS1G＿03230(SsGSSP1)在侵染寄主过程中表达量最高,推测其可能参与核盘菌的致病过程,因此本研究以SsGSSP1作为候选基因,对其进行功能分析,同时探究其在抗菌核病作物育种中的应用潜力。主要研究结果有:(1)生物信息学分析:SsGSSP1(Sclerotinia sclerotiorum gpi-anchored small secreted protein 1)基因全长为780 bp,编码区为639 bp,编码212个氨基酸,其中N端17个氨基酸为信号肽,无跨膜结构域,属于gpi锚定的富含丝/苏氨酸膜蛋白家族。预测其gpi的结合位点G-ω在C-31位,亚细胞定位预测发现SsGSSP1蛋白定位在胞外,包括细胞壁。因此,推测该基因编码的蛋白可能是一种gpi锚定分泌蛋白。(2)基因表达模式分析:通过q RT-PCR分析SsGSSP1基因在侵染植物过程中的表达情况,结果发现SsGSSP1基因在接种油菜叶片后的早期阶段其表达量不明显,但在48 h显著升高,是PDA培养基上生长时的9倍。因此,推测SsGSSP1基因可能参与核盘菌的致病过程。(3)蛋白分泌性验证:为验证SsGSSP1基因编码的蛋白具有分泌活性,利用一个蔗糖酶缺陷型的酵母分泌系统,构建了SsGSSP1蛋白的信号肽融合表达载体p SUC2-GSSP1SP,并转入YTK12酵母菌株,结果发现携带有表达p SUC2-GSSP1SP和阳性对照p SUC2-Avr1b的菌株在含有棉子糖的YPRAA培养基上均能生长,表明SsGSSP1基因编码的蛋白信号肽具有分泌活性。(4)敲除菌株筛选与表型分析:通过构建SsGSSP1基因敲除载体,利用PEG介导的原生质体转化野生型核盘菌1980,在含潮霉素的PDA培养基上进行筛选,成功筛选出5个阳性转化子。与野生型菌株相比,半定量PCR及q RT-PCR分析发现5个转化子中SsGSSP1几乎不表达。通过表型分析发现,与野生型菌株1980相比,SsGSSP1基因敲除菌株的菌丝生长速度与侵染垫形成均无明显差异,但对高渗、高盐和高氧及细胞壁抑制剂更加敏感。在接种离体野生型拟南芥、烟草、油菜以及活体拟南芥后,SsGSSP1基因敲除菌株的致病性均显著下降,表明SsGSSP1基因参与核盘菌的致病过程。(5)SsGSSP1转基因拟南芥抗病性分析:构建SsGSSP1基因的HIGS及植物超表达载体,转化野生型拟南芥,获得转基因拟南芥T代稳定表达株系。菌核病抗性鉴定发现,相比野生型拟南芥,HIGS转基因株系HIGS-SsGSSP1的病斑面积显著减小,且SsGSSP1基因在HIGS-SsGSSP1转基因株系接种12 h后的表达量显著降低,表明在植物中表达靶向核盘菌SsGSSP1基因的ds RNA,能够显著提高转基因拟南芥的菌核病抗性。而SsGSSP1基因的超表达拟南芥植株病斑面积也显著减小,菌核病抗性增强,推测SsGSSP1基因可能影响寄主植物的免疫反应。(6)转录组分析:利用RNA-seq对野生型菌株1980(W)与SsGSSP1基因敲除菌株(KO)的转录组差异进行分析,结果发现,KO中下调的核盘菌差异表达基因显著富集在氧化应激、热休克反应及对化学剂的耐性,表明SsGSSP1基因可能参与核盘菌的胁迫压力响应。对W和KO接种野生型拟南芥后寄主的转录组差异进行分析,结果发现下调的拟南芥差异表达基因显著富集在木质素生物合成以及植物-病原菌互作途径,表明SsGSSP1基因可能通过影响植物免疫防御反应,参与寄主与核盘菌的互作。

关键词：核盘菌 gpi锚定蛋白致病机理寄主诱导基因沉默

真菌和哺乳动物gpi锚定蛋白结构和功能差异的研究进展

同方学位论文库评论

在线全文

同方学位论文库

学校读者我要写书评

暂无评论

中国真菌学杂志 2015年第3期10卷 182-184,189页

作者：牛理达赵静吴建华第二军医大学附属长海医院皮肤科上海200433

gpi锚定蛋白(Glycosylphosphatidylionsitol-anchored protein,gpi-anchored protein)是在真核生物中的一种保守的翻译后修饰蛋白,已发现有超过150种gpi锚定蛋白存在于细胞膜或细胞壁上,近年来随着对gpi锚定蛋白的深入研究,其越来越多... 详细信息

gpi锚定蛋白(Glycosylphosphatidylionsitol-anchored protein,gpi-anchored protein)是在真核生物中的一种保守的翻译后修饰蛋白,已发现有超过150种gpi锚定蛋白存在于细胞膜或细胞壁上,近年来随着对gpi锚定蛋白的深入研究,其越来越多功能被发现,我们将从gpi锚定蛋白的结构入手,详细描述其在哺乳动物和真菌中gpi锚的结构及功能的差异,以真菌的gpi锚定蛋白为切入点来研究抗真菌药物但同时要留意该类药物对构成人体细胞的gpi锚定蛋白的潜在性损伤,为将来抗真菌药物的研发提供新的思路。

关键词：真菌哺乳动物 gpi锚定蛋白结构

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

神经元gpi锚定蛋白结构与功能研究进展

生物工程进展 2001年第5期21卷 52-55页

作者：李光涛隋玮刘炳岩袁建刚强伯勤中国医学科学院基础医学研究所中国协和医科大学基础医学院国家人类基因组北方研究中心医学分子生物学国家重点实验室北京100005

神经系统中的IgSF蛋白是一类重要的神经细胞表面分子 ,种类繁多 ,功能多样 ,其中一类分子缺乏跨膜区 ,通过gpi锚结合在细胞膜上 ,表现出结构和功能的特异性。本文对该类神经元gpi锚定蛋白分子作一系统介绍。根据结构特点 ,神经元gpi锚... 详细信息

神经系统中的IgSF蛋白是一类重要的神经细胞表面分子 ,种类繁多 ,功能多样 ,其中一类分子缺乏跨膜区 ,通过gpi锚结合在细胞膜上 ,表现出结构和功能的特异性。本文对该类神经元gpi锚定蛋白分子作一系统介绍。根据结构特点 ,神经元gpi锚定蛋白分子可分为三类 ,各类分子通过Ig结构域与其自身或其它蛋白分子进行顺式或反式结合 ,调节神经细胞活动。

关键词：神经元免疫球蛋白超家族 gpi锚定蛋白结构功能

不同脂酰链对gpi锚定蛋白在脂筏中定位的影响

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

不同脂酰链对GPI锚定蛋白在脂筏中定位的影响

作者：黄静大连医科大学

学位级别：硕士

目的:许多膜蛋白(包括酶,细胞粘附因子,受体等)依靠糖基磷脂酰肌醇锚定于细胞质膜表面,又称gpi锚定蛋白。在细胞表面,gpi锚定蛋白常与鞘脂(包括鞘糖脂和鞘磷脂),胆固醇等聚集在一起形成具有特定结构和功能的质膜微区,称gpi微域(gpi micr... 详细信息

目的:许多膜蛋白(包括酶,细胞粘附因子,受体等)依靠糖基磷脂酰肌醇锚定于细胞质膜表面,又称gpi锚定蛋白。在细胞表面,gpi锚定蛋白常与鞘脂(包括鞘糖脂和鞘磷脂),胆固醇等聚集在一起形成具有特定结构和功能的质膜微区,称gpi微域(gpi microdomain)。因其组成脂类的结构特点,使gpi微域呈低流动性,介于液晶相和凝胶相之间,有如半固体的“筏”,漂浮在液态的脂质双层中,故又被形象的称为“脂筏”。脂筏具有许多重要的功能,其中又有许多功能直接与gpi锚定蛋白有关,尤其近年来脂筏被作为细胞膜上细胞信号跨膜转导的工作平台,引起了人们的广泛兴趣。目前对脂筏的结构与功能已经有一定的认识,但要彻底弄清脂筏功能及作用机制,仍有许多问题有待进一步深入研究,如脂筏形成的确切机制,各种组分尤其是蛋白质如何定位于脂筏以及影响定位的因素等。作为脂筏的组成成分,gpi锚定蛋白的功能与脂筏关系密切。gpi锚定蛋白在脂筏内外分布的不同常影响其功能。因此弄清gpi锚定蛋白在脂筏中定位机制及影响其定位的因素,对阐明gpi锚定蛋白的作用机制十分重要。已知gpi锚定蛋白由磷脂酰肌醇,糖链和蛋白部分组成。一般认为影响gpi锚定蛋白在脂筏中定位的主要因素是gpi锚的脂质部分。研究发现,不同的gpi锚定蛋白,其脂质部分常存在着结构上的差异,这些差异可表现为甘油部分所连接的脂酰链的长,短和饱和度的不同或为溶血磷脂,一些gpi锚定蛋白脂质部分不是甘油而是神经酰胺。gpi锚定蛋白脂质部分在结构上的差异是否与gpi锚定蛋白在细胞质膜上的分布不同有关,又是如何影响gpi锚定蛋白在脂筏中的定位,目前尚无详细的资料。弄清不同结构脂酰链对gpi锚定蛋白在脂筏中分布的影响,将有助于对gpi锚定蛋白作用机制和脂筏结构与功能进一步深入研

关键词： gpi锚定蛋白脂筏脂质体