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基于PDI-GRP94-GPⅡb/Ⅲa通路探讨血小板对小鼠静脉血栓形成的影响及其干预机制研究

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基于PDI-GRP94-GPⅡb/Ⅲa通路探讨血小板对小鼠静脉血栓形成的影...

作者：兰洪涛山东大学

学位级别：硕士

研究背景当前中国心血管疾病的发病率和死亡率持续上升,已高于恶性肿瘤并成为了中国居民的主要致死原因,其中静脉血栓栓塞(venousthromboembolism,VTE)是除冠心病、中风外的第三大致死亡的心血管疾病。目前认为,静脉血栓和动脉血栓形成... 详细信息

研究背景当前中国心血管疾病的发病率和死亡率持续上升,已高于恶性肿瘤并成为了中国居民的主要致死原因,其中静脉血栓栓塞(venousthromboembolism,VTE)是除冠心病、中风外的第三大致死亡的心血管疾病。目前认为,静脉血栓和动脉血栓形成之间存在着相似的发病机理,凝血和血小板激活过程在动脉和静脉血栓生成时均有重要影响。随着对血小板活化机制的深入研究,人们进一步认识到抗血小板治疗不仅可降低血栓事件复发率,而且是预防血栓的有效途径。现有的抗血小板药物存在出血风险增加等不良后果。因此,寻找安全有效的新型抗血小板药物仍是心血管研究领域的热点话题。GPⅡb/Ⅲa受体是血小板活化的最后途径,研究证实,GPⅡb/Ⅲa的激活受蛋白质二硫键异构酶(proteindisulfideisomerase,PDI)的调节,PDI是一种具有催化蛋白质二硫键的酶,可促进血小板聚集、粘附和颗粒释放。因此PDI是一个有潜在开发价值的抗血栓药物研究靶点。血小板表面GPⅡb/Ⅲa的表达受葡萄糖调节蛋白94(glucose-regulatedprotein 94,GRP94)调节,GRP94在GPⅡb/Ⅲa受体的信号传导和激活中发挥作用。GRP94抑制剂可显著降低血小板表面活性GPⅡb/Ⅲa受体的表达,显著减少血小板α颗粒的释放。GRP94蛋白主要依靠C-末端二硫键形成同源二聚体并发挥其生物活性。PDI通过完成二硫键的转移和交换来调节细胞的功能。GRP94蛋白C-末端二硫键结合形成的同源二聚体是否依赖PDI调节?目前尚缺少相关研究。但可以肯定的是,细胞内PDI与GRP94的分布与变化具有一致性。外泌体是细胞膜衍生的球状囊泡,在细胞应激条件下形成并包含亲代细胞的活性成分如蛋白质。这些来自于亲代细胞的遗传物质使外泌体具有生物标记的特征。一旦外泌体与靶细胞相连,可通过内吞作用内化,将其内容物转移到细胞质中,从而影响受体细胞生物学功能。血管内皮损伤与内皮细胞活化脱落的内皮细胞来源外泌体(endothelialmicroparticle,EMP)水平密切相关。最近的研究显示,外泌体在血栓性疾病中明显升高,尤其是EMP。静脉血栓的启动涉及血流淤滞、血液高凝状态和血管内皮细胞损伤。血管内皮细胞处于血管的最内层,为血栓形成提供表面,参与血栓形成的机制包括内皮屏障的完整性、内皮细胞与血细胞的相互作用、内皮细胞活化释放促/抑凝物质失衡等。通过研发靶向内皮细胞及其血小板的药物,减少传统抗血栓药物使用过程中的出血风险,是抗血栓形成的新策略。然而血小板的活化是否有内皮来源外泌体的参与,目前尚不清楚。因此,本实验旨在探讨静脉内皮损伤条件下,大量分泌携带PDI的内皮源外泌体调控血小板GRP94表达和GPⅡb/Ⅲa含量表达及构象变化从而影响血栓形成的主要机制。在本研究中,我们以C57/bL6小鼠为研究对象,建立下腔静脉结扎动物模型,构建静脉内皮细胞损伤的体内环境;以静脉内皮细胞为研究对象,置于缺氧条件下,模拟静脉内皮损伤的体内环境,探讨PDI对血小板活化及血栓形成的影响及其可能机制。研究目的1.研究携带PDI的内皮细胞来源外泌体参与静脉血栓发生发展的机制;2.明确以PDI-GRP94-GPⅡb/Ⅲa信号通路为靶点抗血小板活化在VTE防治中的作用。研究方法1.动物造模小鼠麻醉后,将30G胰岛素针头与下腔静脉并行放置,再用一根7-0 prolene缝线在右肾静脉汇入下腔静脉下1cm处结扎,抽出针头后缝合关腹。2.动物分组采用下腔静脉狭窄法造模。10周龄雄性C57/bL6野生型小鼠随机分为4组,分别是假手术组(n=7)、VTE 组(n=9)、VTE+PDI 抑制剂组(n=8)、VTE+GRP94抑制剂组(n=9)。均于13周行下腔静脉狭窄法或假手术造模,术后2天处死小鼠。3.组织病理学检测用苏木素-伊红染色观察血栓形成情况;进行CD41的免疫组织化学染色,计算单位面积上GPⅡb/Ⅲa的表达;进行GRP94、CD41双色免疫荧光染色,计算活化血小板上GRP94的荧光强度。4.流式细胞术检测提取小鼠外周血中乏血小板血浆,进行CD144和PDI双色流式细胞术染色,观察血浆中EMP上PDI的表达情况;提取小鼠外周血中的血小板,进行CD62P、CD41、CD61三色流式细胞术染色,观察血小板活化和GPⅡb/Ⅲa受体表达情况;血小板与静脉内皮细胞共培养10 min后,进行CD62P、CD41、CD61三色流式细胞术染色,观察血小板活化和GPⅡb/Ⅲa受体表达情况。5.细胞造模及分组培养人脐静脉内皮细胞,待静脉内皮细胞培养至第3代,将培养基改为无外泌体血清的内皮细胞专用培养基,将培养皿放置在有机玻璃暴露室中,交替地充入低氧气体混合物(1%O2,5%CO2和平衡N2,缺氧,300秒)或常氧气体混合物(21%O2,5%CO2和平衡N2,充氧,600秒)培养1天,随机分为4组:对照组、缺氧组、缺氧+PDI抑制

关键词：静脉血栓血小板缺氧人脐静脉内皮细胞 PDI GRP94 GPⅡb/Ⅲa

PDI-GPⅡb/Ⅲa受体参与糖尿病血小板活化的基础研究

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PDI-GPⅡb/Ⅲa受体参与糖尿病血小板活化的基础研究

作者：秦冉冉山东大学

学位级别：硕士

研究背景糖尿病(diabctes mellitus,DM)和心血管疾病是全球目前最主要的疾病负担和死亡原因,国际糖尿病联盟(International Diabetes Federation,IDF)在2013年推测全球糖尿病在20-79岁成人中的患病率为8.3%,估计到2035年全球将有近5.92... 详细信息

研究背景糖尿病(diabctes mellitus,DM)和心血管疾病是全球目前最主要的疾病负担和死亡原因,国际糖尿病联盟(International Diabetes Federation,IDF)在2013年推测全球糖尿病在20-79岁成人中的患病率为8.3%,估计到2035年全球将有近5.92亿人患糖尿病。中国大陆地区有1亿人患糖尿病,中国已成为世界上糖尿病患者最多的国家。动脉粥样硬化是糖尿病患者的主要死亡原因,糖尿病患者的心脏病疾病相关的死亡率是非糖尿病患者的2-4倍,而绝大多数急性心血管事件都与血栓形成有关,在该过程中血小板的激活是启动因素,其激活途径具有多样性,其中GPⅡb/Ⅲa受体激活是血小板活化聚集的最终共同途径,与血小板聚集、血栓形成密切相关。糖尿病状态下血栓形成机制尚未完全阐明,其中血小板活化和血管内皮细胞损伤可能起着关键作用。抗血小板治疗能显著降低糖尿病患者的心脑血管事件发生率,然而即使在双重抗血小板治疗下,糖尿病患者的血小板聚集和活化仍然增加,因此寻找最佳抗血小板治疗方案对于降低糖尿病患者的心血管疾病风险,降低死亡率具有重要意义。近期的研究结果强调了蛋白质二硫键异构酶(protein disulfide isomerase,PDI)、微粒(microparticle,MP)在血小板活化过程中的作用。PDI可以通过调控血小板表面GPⅡb/Ⅲa受体二硫键的异构,促使GPⅡb/Ⅲa受体空间结构改变,活化GPⅡb/Ⅲa受体,进而活化血小板,促进血栓形成。糖尿病状态下,血管内皮细胞受损,释放更多的内皮细胞源的微粒(endothelial derived microparticles,EMP),血小板活化增多,而且血小板也释放更多血小板源微粒(platelet derived microparticles,PMP),其上携带PDI。我们推测糖尿病状态下,内皮细胞受损,释放出EMP,其上携带PDI,EMP-PDI通过与血小板表面的GPⅡb/Ⅲa受体结合,活化血小板,释放更多的携带PDI的PMP,从而实现了血小板级联放大信号的传导;同时血小板源性PDI削弱了胰岛素的抗血小板活化的作用。因此,糖尿病患者血小板的粘附聚集能力显著增加,容易形成血栓。研究目的(1)研究糖尿病状态下血浆中血小板活性和PDI含量的变化;(2)研究糖尿病状态下血浆中凝血状态的变化;(3)探讨糖尿病导致的内皮细胞受损EMP、EMP-PDI释放量的变化;(4)从整体水平探讨糖尿病状态下EMP-PDI在血小板活化过程中的作用。研究方法及材料(1)动物模型建立4周龄雄性ApoE-/-小鼠60只,行腹腔注射糖耐量试验(intraperitoneal glucose tolerance test,IPGTT)后随机分为普通饮食组(30只)和高糖高脂饮食组(30只),分别给予普通饮食和高糖高脂饮食,6周后再次测各组小鼠的IPGTT。出现胰岛素抵抗的高糖高脂饮食组的小鼠腹腔注射注射链脲佐菌素(streptozocin,STZ)85mg/kg-90mg/kg,2周后随机血糖≥11.1mmol/L时,可作为ApoE-/-小鼠2型糖尿病成模的动物入组。再将小鼠分为普食组,普食+芦丁组,糖尿病组,糖尿病+芦丁组各15只小鼠,普食组和糖尿病组小鼠每日予生理盐水灌胃一次,剂量为0.1ml/10g;普食+芦丁组,糖尿病+芦丁组小鼠每日予芦丁灌胃一次,剂量为80mg/kg,灌胃8周后取小鼠的血液用于实验。(2)小鼠体重的监测:每周定期监测小鼠的体重。(3)血浆的获得取小鼠心尖血于0.109 mol/L枸橼酸钠抗凝的EP管中。常温下,3000rpm/min离心后获得乏血小板血浆(platelet-poor plasma,PPP),用于后面的实验。(4)血小板的提取常温下,取小鼠心尖血于0.109mol/L枸橼酸钠抗凝的EP管中,经过800rpm/min离心10分钟后获得富含血小板血浆(platelet-rich plasma,PRP),后者经800g/min离心,离心10分钟后获得血小板沉淀。血小板沉淀经改良台式液洗涤、重悬。血小板悬液的浓度经细胞计数仪调整为1×106/ml,用于后面的实验。(5)流式细胞术检测小鼠血小板活化指标流式测血小板表面P-selectin(CD62P)、GPⅡb/Ⅲa及血小板白细胞聚集体(platelet-leukocyte-aggregetes,PLA)的表达:在bD流式管中加入适量待测样品及待检测指标相应的荧光抗体,用磷酸盐缓冲液(phosphate buffer saline,PbS)补齐至100μL,室温避光孵育15-30min,然后加200μL4%多聚甲醛混匀固定后上机检测。(6)酶联免疫吸附法(Enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)小鼠血浆中PDI、可溶性P-选择素(soluble P-sele

关键词：糖尿病血小板活化 EMP PDI GPⅡb/Ⅲa

血小板GPⅡb/Ⅲa 受体抑制剂(A辅剂)在血栓弹力图血小板聚集功能检测中的应用

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中国输血杂志 2021年第3期34卷 236-239页

作者：黄皓梁群谭碧雯王则永伍庆赵阳暨南大学附属广州红十字会医院输血科广东广州510220

目的评估以功能性纤维蛋白原(功纤杯)检测结果为标准的血栓弹力图(TEG)血小板聚集功能检测中在巴曲酶杯(A杯)内加入血小板GPⅡb/Ⅲa受体抑制剂(A辅剂)对检测结果的影响。方法从2019年12月~2020年5月在本院神经内科、心内科、综合科和康... 详细信息

目的评估以功能性纤维蛋白原(功纤杯)检测结果为标准的血栓弹力图(TEG)血小板聚集功能检测中在巴曲酶杯(A杯)内加入血小板GPⅡb/Ⅲa受体抑制剂(A辅剂)对检测结果的影响。方法从2019年12月~2020年5月在本院神经内科、心内科、综合科和康复科就诊、做TEG血小板聚集功能检测的患者中收集100(人)份全血标本,根据TEG测得的A杯血块强度(MA)值(mm)将血标本分为MA0.975);2)MA≥25 mm组,血小板ADP及AA途径抑制率(%)A杯、A辅剂与功纤杯3个亚组分别为34.34±33.59 vs 18.45±24.42 vs 18.01±24.33,23.19±39.33 vs 8.48±21.75 vs 8.31±21.7(其中A杯组与A辅剂组比较均为R20.975);3)以功纤杯组检测结果为标准,A杯组与A辅剂组间ADP和AA途径药物疗效判读正确率分别为82%(41/50)vs 100%(50/50)、84%(42/50)vs 100%(50/50)(P0.05)。结论在TEG的血小板聚集功能检测中A杯内添加A辅剂可以有效抑制A杯中非特异激活的血小板,真实反映纤维蛋白原的功能,故提高了其血小板抑制率检测结果的准确性。

关键词：血栓弹力图 GPⅡb/Ⅲa 血小板受体抑制剂血小板聚集功能功能性纤维蛋白原 A辅剂巴曲酶

子痫前期孕妇孕中期GPⅡb/Ⅲa受体的表达及其对母婴结局的影响

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中国现代医生 2021年第2期59卷 71-74页

作者：刘喜娟陈安儿程淑清蔡海瑞宁波市妇女儿童医院新生儿科浙江宁波315012 宁波市妇女儿童医院产科浙江宁波315012

目的探讨子痫前期(PE)孕中期孕妇血清GPⅡb/Ⅲa受体的表达水平变化及对母婴预后的影响。方法选取2016年9月至2018年9月于本院住院分娩的PE患者70例为PE组,对照组为50例正常妊娠妇女。PE组以GPⅡb/Ⅲa受体表达水平中位数为界,分为高gpⅡb... 详细信息

目的探讨子痫前期(PE)孕中期孕妇血清GPⅡb/Ⅲa受体的表达水平变化及对母婴预后的影响。方法选取2016年9月至2018年9月于本院住院分娩的PE患者70例为PE组,对照组为50例正常妊娠妇女。PE组以GPⅡb/Ⅲa受体表达水平中位数为界,分为高GPⅡb/Ⅲa组和低GPⅡb/Ⅲa组各35例。采用流式细胞仪检测血清GPⅡb/Ⅲa受体表达水平。记录和比较各组孕妇的分娩方式、母婴结局。结果PE组GPⅡb/Ⅲa表达显著高于对照组,差异有统计学意义(PGPⅡb/Ⅲa组、高GPⅡb/Ⅲa组相比,对照组自然分娩率高,剖宫产率低,差异均有统计学意义(PGPⅡb/Ⅲa组、高GPⅡb/Ⅲa组相比,对照组子痫、凝血异常、心功能不全、肾功能损害等不良妊娠发生率均较低,差异均有统计学意义(PGPⅡb/Ⅲa组、高GPⅡb/Ⅲa组的小早产儿(GPⅡb/Ⅲa受体表达水平与母婴不良结局发生率间有关,对PE患者母婴结局的预测具有重要参考价值。

关键词：子痫前期血小板膜糖蛋白 GPⅡb/Ⅲa 新生儿

复发性流产患者HLA及血小板特异性糖蛋白抗体GPⅡb/Ⅲa表达的初步研究

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中国免疫学杂志 2012年第4期28卷 338-340页

作者：尹爱华邓晶吴菁徐秀章夏文杰丁浩强陈扬凯叶欣广东省妇幼保健院产前诊断中心广州510010 广州血液中心临床输血研究所广州510095

目的:探讨原因不明复发性流产(RSA)患者HLA抗体和血小板特异性糖蛋白(GPⅡb/Ⅲa)抗体的表达情况。方法:对299名复发性流产的患者血浆中HLA抗体和GPⅡb/Ⅲa抗体进行检测,血小板抗体检测试剂盒(固相凝集法)筛查IgG抗体,Antigen Tray-LATM... 详细信息

目的:探讨原因不明复发性流产(RSA)患者HLA抗体和血小板特异性糖蛋白(GPⅡb/Ⅲa)抗体的表达情况。方法:对299名复发性流产的患者血浆中HLA抗体和GPⅡb/Ⅲa抗体进行检测,血小板抗体检测试剂盒(固相凝集法)筛查IgG抗体,Antigen Tray-LATM板检测HLA抗体,GTI公司PAK-PLUS检测试剂盒检测血小板特异性抗体,利用流式细胞仪技术进行GPⅡb/Ⅲa抗体的确证。结果:检测的299例RSA患者中,IgG抗体阳性26例,阳性率8.69%。26例IgG抗体阳性患者中,25例HLA抗体呈阳性。HLA-Ⅰ类抗体阳性占5.02%,HLA-Ⅱ类抗体阳性占1.33%,HLA-Ⅰ+Ⅱ类抗体阳性占2.01%;在26例RSA患者中,GPⅡb/Ⅲa抗体阳性4例(占15.38%),其中GPⅡb/Ⅲa阳性和HLA抗体均阳性3例(占11.54%),GPⅡb/Ⅲa抗体单独阳性1例(占3.85%)。结论:初步探讨了RSA患者HLA抗体和GPⅡb/Ⅲa抗体的分布情况,本研究为复发性流产患者血小板抗体的检测提供了初步的实验基础。

关键词： HLA GPⅡb/Ⅲa 复发性流产

地塞米松联合咖啡酸片治疗ITP患者对PAIgG及GPⅡb/Ⅲa抗体的影响

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临床输血与检验 2019年第4期21卷 368-371页

作者：徐丹计成阜陈超姜金龙刘鑫王萍周海侠江苏省盐城市阜宁县人民医院血液科 224400 苏州大学附属第一医院血液科

目的探讨地塞米松联合咖啡酸片治疗原发性免疫性血小板减少症(primary immune thrombocytopenia,ITP)对患者血小板相关抗体(platelet-associated immunoglobulin,PAIgG)及GPⅡb/Ⅲa抗体水平的影响.方法将2014年8月~2017年3月本院收治的ITP患者80例随机分为2组,观察组与对照组各40例,其中对照组患者服用地塞米松,观察组服用地塞米松及咖啡酸.对比两组治疗效果、PAIgG及GPⅡb/Ⅲa抗体水平的差异.结果两组患者治疗14 d、28 d、12 w后CR、R及NR人数比例间的差异无统计学意义;治疗前,两组出血评分、PAIgG及GPⅡb/Ⅲa抗体水平的组间差异无统计学意义(P>0.05).治疗后,两组出血评分、PAIgG及GPⅡb/Ⅲa抗体水平明显低于治疗前(PGPⅡb/Ⅲa抗体水平[(16.77±2.15)vs(21.49±1.58)]明显低于对照组(P均GPⅡb/Ⅲa抗体水平.

关键词：地塞米松咖啡酸原发性免疫性血小板减少症 PAIgG GPⅡb/Ⅲa

实验高压电烧伤血清GPⅡb/Ⅲa、gpⅠb/Ⅰb/Ⅸ/Ⅴ/动态变化及己酮可可碱的干预作用

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实验高压电烧伤血清GPⅡb/Ⅲa、GPⅠb/Ⅰb/Ⅸ/Ⅴ/动态变化及己酮...

作者：陈文婷河北医科大学

学位级别：硕士

目的：通过前期的实验研究，可以观察到实验高压电烧伤后动物活体软脑膜、深筋膜、胃黏膜、肝脏、肠系膜、肠黏膜、肾皮质等的微循环变化，发现高压电流一方面可使局部组织微循环失调，而且还使远隔器官的微循环紊乱，从而导致全身的微... 详细信息

目的：通过前期的实验研究，可以观察到实验高压电烧伤后动物活体软脑膜、深筋膜、胃黏膜、肝脏、肠系膜、肠黏膜、肾皮质等的微循环变化，发现高压电流一方面可使局部组织微循环失调，而且还使远隔器官的微循环紊乱，从而导致全身的微循环障碍，导致机体组织和器官损伤。微观上可以观察到血细胞流变学变化，包括白细胞附壁与黏附、血小板聚集、红细胞聚集以及微小血栓形成等。已有实验证明血小板膜糖蛋白GPⅡb/Ⅲa（CD41/CD61）、gpⅠb/Ⅸ/Ⅴ（CD42）在血小板聚集、黏附及早期血栓形成中起着重要作用，GPⅡb/Ⅲa浓度升高及gpⅠb/Ⅸ/Ⅴ浓度降低是血小板活化的重要标志之一。我们设计此实验目的在于通过观察高压电流对血小板膜糖蛋白GPⅡb/Ⅲa、gpⅠb/Ⅸ/Ⅴ的影响，进一步探讨高压电烧伤微循环紊乱的机制，及己酮可可碱（PTX）对血清血小板膜糖蛋白表达的干预作用，为高压电烧伤后微循环障碍的防治提供理论依据。方法： 1.实验动物分组：健康成年雄性SD大鼠（河北医科大学动物实验中心提供，合格证编号832457）90只，按随机数字表法分成三组，即假高压电烧伤组（简称对照组）、高压电烧伤实验组（简称实验组）、高压电烧伤己酮可可碱（PTX）治疗组（简称治疗组），每组各30只。以上三组又分别分为点击前15min（T0）、电击即刻（5min内）（T1）、电击后1h（T2）、2h（T3）、4h（T4）、8h（T5）6个不同的时相，每组5只。各组分别编号后分笼饲养。 2.实验前准备：将大鼠编号、称重、左上肢及右上肢脱毛，记录数据。将实验药品配成所需浓度。 3.高压电烧伤模型复制：正确连接实验变压器及调压器，待用。1%戊巴比妥钠溶液麻醉大鼠（40mg/kg），待麻醉成功后，备皮大鼠左上肢、右下肢及胸部，将大鼠仰卧于动物绝缘台上，四肢伸展，固定于高压输出电路之间，分别固定1cm2圆形铜制电极片于大鼠的左上肢、右下肢脱毛区，左上肢为电流入口，右下肢为电流出口。接通电源，调整变压器输出电压1KⅤ，电击实验组与治疗组实验动物各3s，对照组给予假电（即只连电线，不通电），其他条件各组均相同。电击后即刻，治疗组于腹腔内注射1%PTX（按50mg/kg即5mL/kg给药），对照组及电击组电击后即刻于腹腔内注射5mL/kg生理盐水。 4.标本采集与保存：将复制成功的高压电烧伤大鼠模型麻醉、开胸，直视下心脏取血，收集4mL全血，并置于普通塑料试管中，静置约30分钟，待血清析出后上离心机以3000转/min离心，离心10min，取上清液，于Eppendorf管中-70℃保存待用。 5.指标检测：采用ELISA双夹心抗体法，检测高压电烧伤后不同时相血清中GPⅡb/Ⅲa、gpⅠb/Ⅸ/Ⅴ浓度的动态变化，及PTX对二者的干预效果。 6.实验数据处理：所得数据为计量资料，则用SPSS13.0统计软件进行分析处理，实验数据均以均数±标准差（x±s）表示，采用完全随机设计的单因素方差分析（ANOⅤA）对实验得到数据进行分析，以p＜0.05为有显著性差异。结果：血清GPⅡb/Ⅲa、gpⅠb/Ⅸ/Ⅴ的变化：（1）对照组组内比较无统计学意义（p＞0.05），可认为对照组组内各水平无显著性差异。（2）高压电烧伤后实验组T1～T4时相血清GPⅡb/Ⅲa水平高于对照组及电击前（T0）GPⅡb/Ⅲa的水平（p＜0.05），T5时相GPⅡb/Ⅲa水平较对照组及电前无显著性差异（p＞0.05），GPⅡb/Ⅲa表达水平电击后即刻即达高峰，以后随时间下降，至电击后8h恢复至电击前水平;高压电烧伤后血清gpⅠb/Ⅸ/Ⅴ早期实验组T1、T2时相水平低于对照组及电击前的水平（p＜0.05），T3～T5时相gpⅠb/Ⅸ/Ⅴ水平较对照组及电前无显著性差异（p＞0.05），gpⅠb/Ⅸ/Ⅴ表达水平电击后即刻降低，至电击后2h恢复至电击前水平。（3）高压电烧伤后早期PTX治疗组T1～T4时相血清GPⅡb/Ⅲa水平高于对照组及电击前水平（p＜0.05），但较同一时相电击组血清水平有不同程度下降（p＜0.05），T5时相PTX治疗组GPⅡb/Ⅲa的水平较对照组、电击前及电击组无显著性差异（p＞0.05）;高压电烧伤后PTX治疗组T1、T2时相血清gpⅠb/Ⅸ/Ⅴ水平低于对照组及电击前水平（p＜0.05），较同一时相的电击组水平升高，T3～T5时相PTX治疗组gpⅠb/Ⅸ/Ⅴ水平较对照组、电击前及电击组无显著性差异（p＞0.05）。结论： 1．实验高压电烧伤大鼠血液中的GPⅡb/Ⅲa浓度升高、gpⅠb/Ⅸ/Ⅴ浓度降低，二者浓度随时间变化具有可逆性，均可恢复至电击前水平。二者电击后的浓度变化标志着血小板活化，从而使血小板发生黏附、聚集等反应，使血液黏稠，血流减慢，造成微循环障碍。 2．高压电烧伤早期PTX治疗组GPⅡb/Ⅲa与实验组比较明显

关键词：烧伤电 GPⅡb/Ⅲa gpⅠb/Ⅸ/Ⅴ 大鼠己酮可可碱微循环

AMPE家兔血浆ET-1、vWF、GPⅡb/Ⅲa及GMP-140水平变化及与心肌受损关系的研究

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山东医药 2010年第43期50卷 25-27页

作者：张泽明陈宝元尹娟葛常青张敬国王彦存赵学琴天津医科大学总医院天津300402 河北大学附属医院保定市第二医院

目的探讨大面积急性肺血栓栓塞(AMPE)家兔心肌受损情况及可能机理。方法模型组10只家兔静注血栓栓子制作AMPE模型;假手术组10只家兔造模过程中只注射生理盐水;对照组10只家兔不做任何处理。于造模成功后2、24 h采集三组静脉血,分别采用... 详细信息

目的探讨大面积急性肺血栓栓塞(AMPE)家兔心肌受损情况及可能机理。方法模型组10只家兔静注血栓栓子制作AMPE模型;假手术组10只家兔造模过程中只注射生理盐水;对照组10只家兔不做任何处理。于造模成功后2、24 h采集三组静脉血,分别采用微粒子化学发光法、流式细胞仪法、放射免疫法、酶联免疫双抗体夹心法测定血浆心肌肌钙蛋白(CTnI)、血小板膜表面糖蛋白(GPⅡb/Ⅲa)、内皮素-1(ET-1)及血管性假血友病因子(vWF)、α-颗粒蛋白(GMP-140)水平。结果模型组2、24 h血浆CTnI、vWF、GPⅡb/Ⅲa、ET-1、GMP-140水平均明显高于假手术组(P均GPⅡb/Ⅲa、ET-1、GMP-140水平升高有关。

关键词：肺血栓栓塞,大面积心肌肌钙蛋白血管性假血友病因子 GPⅡb/Ⅲa 血浆内皮素-1 GMP-140

GPⅡb/Ⅲa和FAK在血小板信号转导中的作用

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国际免疫学杂志 2010年第4期33卷 311-314页

作者：胡惠静刘彦虹吴晓岩黑龙江省医院检验科哈尔滨150036 哈尔滨医科大学附属第二医院检验科

GPⅡb/Ⅲa是血小板膜上最重要的糖蛋白,不但参与血小板的黏附、聚集反应,同时介导血小板的信号转导,在维持血小板正常功能中起关键作用.近几年对gpⅡ b/Ⅲa介导的双向信号转导过程的研究有了较大进展,其中信号转导分子--黏着斑激酶在信... 详细信息

GPⅡb/Ⅲa是血小板膜上最重要的糖蛋白,不但参与血小板的黏附、聚集反应,同时介导血小板的信号转导,在维持血小板正常功能中起关键作用.近几年对gpⅡ b/Ⅲa介导的双向信号转导过程的研究有了较大进展,其中信号转导分子--黏着斑激酶在信号转导中所起的重要作用也日益引起人们的重视.

关键词： GPⅡb/Ⅲa 信号转导黏着斑激酶