检索结果-南通市图书馆

作者：薛建新四川大学

学位级别：硕士

目的：前期研究发现gnb2ll基因编码的蛋白能够与近日节律系统的核心元件PERIOD1蛋白相互作用。本文研究gnb2ll基因及其蛋白在大鼠体内外的近日节律特征。包括二部分：1、体外研究：研究大鼠C6细胞中gnb2ll基因是否存在节律性表达，并观... 详细信息

目的：前期研究发现gnb2ll基因编码的蛋白能够与近日节律系统的核心元件PERIOD1蛋白相互作用。本文研究gnb2ll基因及其蛋白在大鼠体内外的近日节律特征。包括二部分：1、体外研究：研究大鼠C6细胞中gnb2ll基因是否存在节律性表达，并观察gnb2ll是否与Per1一样对刺激产生立早反应。2、体内研究：观察gnb2ll基因及其蛋白在大鼠体内是否存在节律性表达。方法：实验一：体外研究分别采用PMA (Phorbol 12-Myristate 13-acetate, 12-十四酸佛波酯-13-乙酸盐)及马血清刺激体外培养的小鼠NIH-3T3细胞，RT-PCR检测不同时间点mPerl mRNA的表达水平，比较两者的诱导效率;PMA刺激体外培养的大鼠C6神经胶质瘤细胞，RT-PCR检测不同时间点rPerl，rDbp mRNA的表达水平。在确定C6细胞具有近日节律特征后，RT-PCR检测不同时间点rgnb2ll mRNA的变化规律。实验二：体内研究12D／12l光暗循环下，采用半定量RT-PCR的方法观察大鼠脑组织及肝脏组织的gnb2ll，Perl mRNA的变化规律;采用WesternBlot方法检测大鼠脑组织及肝脏组织中gnb2ll编码蛋白、PER1蛋白在不同时间点的变化。结果：实验一：体外研究PMA及50％的马血清均能诱导NIH-3T3细胞mPerl的近日节律表达且诱导效率近似;C6细胞的rPerl，rDbp基因表达呈近日节律，同时PMA刺激的C6细胞的rgnb2ll的表达也呈近日节荡，并且与Perl一样对刺激产生立早反应。实验二：体内研究12D／12l光暗循环下，大鼠脑组织及肝脏组织中gnb2ll mRNA和节律基因Perl mRNA及其蛋白产物均呈近日节律。结论：PMA是一种有效的体外节律诱导剂;经PMA诱导后，C6细胞表现出近日节律特征，gnb2ll的mRNA存在着近日节律，并且是一种立早基因。在大鼠体内，gnb2ll基因及其编码的蛋白也存在着近日振荡。通过体内外实验，可以看出gnb2ll存在着广泛的近日节律性振荡，其相位总在节律基因Perl之前。由于gnb2ll基因编码的蛋白RACK1是一种重要的接头分子，参与了PKC信号通路，而Perl基因的启动子又可以被PKC通路激活，因此RACK1蛋白很可能是Perl的上游调控分子，参与激活了Perl基因的启动子。

关键词：时间生物学近日节律 gnb2l1 Period1 PMA C6神经胶质瘤细胞

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光线诱导下大鼠体内gnb2l1基因及其蛋白节律性表达的研究

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四川生理科学杂志 2007年第4期29卷 145-147页

作者：张宇薛建新汪宇辉刘延友王正荣卫生部时间生物学重点实验室四川大学四川成都610041

目的:观察gnb2l1基因及其蛋白在大鼠体内是否存在节律性表达。方法:12D/12l光暗循环下,采用半定量RT-PCR的方法观察大鼠脑组织及肝脏组织的gnb2l1,Per1 mRNA的变化规律;采用Western Blot方法检测大鼠脑组织及肝脏组织中gnb2l1编码蛋白、... 详细信息

目的:观察gnb2l1基因及其蛋白在大鼠体内是否存在节律性表达。方法:12D/12l光暗循环下,采用半定量RT-PCR的方法观察大鼠脑组织及肝脏组织的gnb2l1,Per1 mRNA的变化规律;采用Western Blot方法检测大鼠脑组织及肝脏组织中gnb2l1编码蛋白、PER1蛋白在不同时间点的变化。结果:12D/12l光暗循环下,大鼠脑组织及肝脏组织中gnb2l1 mRNA和节律基因Per1mRNA及其蛋白产物均呈近日节律。结论:在大鼠体内,gnb2l1基因及其编码的蛋白存在着近日振荡,其相位在节律基因Per1之前。由于gnb2l1基因编码的蛋白RACK1是一种重要的接头分子,参与了PKC信号通路,而Per1基因的启动子又可以被PKC通路激活,加之前期试验证实RACK1能与PER1蛋白相互作用,因此RACK1蛋白很可能在有Per1参与的节律基因分子振荡环路的反馈机制中起到了重要的作用。

关键词：时间生物学近日节律 gnb2l1 Period1

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支架蛋白gnb2l1调控炎性微环境介导肝细胞癌发生的机制研究

支架蛋白GNB2L1调控炎性微环境介导肝细胞癌发生的机制研究

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第十一届全国免疫学学术大会

作者：王晶花蕾郭璐靳家扬王庆阳黎燕沈倍奋张纪岩军事医学科学院基础医学研究所

目的:参与调控多种炎性通路的支架蛋白gnb2l1与肝细胞癌(HCC)发生发展密切相关。然而在肝细胞癌(HCC)发生早期gnb2l1是否通过调控炎性微环境促使肝细胞癌的发生,还不清楚。本研究利用肝实质细胞条件性敲除gnb2l1小鼠模型(gnb2l1Δhep),... 详细信息

目的:参与调控多种炎性通路的支架蛋白gnb2l1与肝细胞癌(HCC)发生发展密切相关。然而在肝细胞癌(HCC)发生早期gnb2l1是否通过调控炎性微环境促使肝细胞癌的发生,还不清楚。本研究利用肝实质细胞条件性敲除gnb2l1小鼠模型(gnb2l1Δhep),探讨GBN2l1调控肝癌炎性微环境介导HCC发生的机制,为肝细胞癌恶性转化提供全新的干预靶点。方法:利用致癌剂二乙基亚硝胺(DEN)诱导gnb2l1Δhep小鼠产生HCC,与野生小鼠比较观测肿瘤成瘤率,瘤体积;检测肝内炎性细胞因子的分泌,炎性细胞的浸润情况;分离原代巨噬细胞检测其炎性因子表达情况;免疫印迹检测MAPK、STAT、NF-k B等炎性信号通路的变化;敲低或过表达gnb2l1分析对肿瘤肝细胞干性的影响;免疫组化分析临床HCC组织中gnb2l1与Nanog、Oct4、Sox2等干性相关蛋白的相关性。结果:研究发现在小鼠肝实质细胞中敲除gnb2l1导致DEN诱导的肝细胞癌的成瘤率下降,肿瘤数与瘤重也均明显降低。HE染色显示野生小鼠中炎性浸润的细胞明显要比敲除小鼠多。敲除小鼠肝组织中炎性因子(Il-6、TNF-α)表达明显减少。同样在体外分离原代巨噬细胞,敲低或敲除gnb2l1也检测到lPS诱导的炎性因子表达受到抑制。进一步研究显示gnb2l1可能通过激活NF-k B和MAPK信号通路促进巨噬细胞分泌炎性因子,而在炎性条件下gnb2l1通过与Nanog的相互作用促进肝癌干细胞的产生。免疫组化也显示gnb2l1与Nanog的表达具有正相关性。结论:多功能支架蛋白gnb2l1参与调控肝癌炎性微环境(炎性因子与炎性细胞),直接或间接诱发肝癌干细胞的产生,最终导致HCC的发生。我们的工作丰富和加深了对"炎-癌"转化分子机制的认识,希望能为今后以gnb2l1为靶点的肿瘤精准治疗提供理论依据。

关键词： gnb2l1 肝细胞癌炎性微环境基因敲除小鼠

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构建以RACK1为核心口腔鳞状细胞癌差异基因间相互作用的关系网路

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中国组织工程研究 2015年第18期19卷 2911-2916页

作者：郑建伟利小平董俊英曾宪丽梁友龙韩帮峰杨德群罗刚南方医科大学附属广东省口腔医院广东省广州市510280 广东省深圳牙科医疗中心广东省深圳市518001

背景:RACK1与口腔鳞状细胞癌的发生发展密切相关,但肿瘤的发生发展不是一个基因或蛋白决定的,是多基因、多分子呈网络结构,多步骤、多阶段共同作用的长期复杂过程,各肿瘤基因之间相互协同作用促使肿瘤细胞形成和发展。因此要揭示口腔鳞... 详细信息

背景:RACK1与口腔鳞状细胞癌的发生发展密切相关,但肿瘤的发生发展不是一个基因或蛋白决定的,是多基因、多分子呈网络结构,多步骤、多阶段共同作用的长期复杂过程,各肿瘤基因之间相互协同作用促使肿瘤细胞形成和发展。因此要揭示口腔鳞状细胞癌的作用机制将不能局限于单个蛋白或基因,而要着眼于与口腔鳞状细胞癌差异蛋白或基因相关的信号网络通路,研究整个信号通路中相关蛋白或基因的表达变化,进而分析研究这些分子之间的相互作用机制。目的:筛选出的口腔鳞状细胞癌相关差异基因,使用STRING数据库通过生物信息学的方法构建它们之间的相互作用关系网络,为后续实验提供线索。方法:根据作者所在课题组前期口腔鳞状细胞癌的经典蛋白组学实验结果和基因表达谱芯片实验的数据结果,选择表达一致且差异相对较大的基因作为实验的差异基因。将筛选的差异基因输入STRING数据库进行分析,找出差异基因对应蛋白之间的可能作用关系,构建相互作用网络结构图。结果与结论:口腔鳞状细胞癌的19个差异基因对应蛋白相互间构成一个复杂的作用网络,各差异蛋白间通过多条相互作用通路进行调节,RACK1蛋白是整个网络的节点蛋白。gnb2l1的编码蛋白RACK1蛋白通过WD40重复蛋白亚基(编号COG2319)和β-G蛋白亚基(编号KOG0279)与其他差异蛋白的亚基间相互作用。其中WD40重复蛋白(编号COG2319)与其中5个差异蛋白直接作用并构建了10条相互作用通路,β亚基G蛋白(编号KOG0279)与其中8个差异蛋白直接作用并构建了11条相互作用通路。说明通过STRING数据库分析构建了这19个差异基因相互作用的结构网络图发现RACK1蛋白的2个亚基共与8个相关差异蛋白直接作用,产生18条相互作用通路。在这个网络结构中RACK1蛋白是中心,提示其是口腔鳞状细胞癌的一个关键节点蛋白。

关键词：实验动物组织构建实验模型口腔鳞状细胞癌差异基因差异蛋白 RACK1 gnb2l1 STRING数据库网络调节作用通路国家自然科学基金

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