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Relationship between ghrp-6 and TPA in the Regulation ofGrowth Hormone Secretion by Human PituitarySomatotrophinomas

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Journal of Huazhong University of Science and Technology(Medical Sciences) 1997年第3期17卷 132-135页

作者：刘勤雷霆 Department of Pediatrics Xiehe Hospital Tongji Medical University Wuhan

Growth hormone releasing peptide (ghrp-6) is a synthetic hexapeptide which specifically stimulates secretion of growth hormone (GH) by pituitary somatotrophs. Phorbel ester, 1,2 tetradecanoylphorbol 13 acetate (TPA) can also stimulate releasing of GH. The precise intracellular mechanism has not been entirely deciphered. We used cell cultures of human pituitary somatotrophinomas to investigate the relation between ghrp-6 and TPA on membrane phosphatidylinositol (PI) turnover and GH secretion. The results showed that the working mechanisms of ghrp-6 and TPA are not identical, although they all can stimulate GH secretion in human pituitary somatotrophinomas. This indicates that PI-PKC signal transduction system may play a crucial role in the regulation of GH secretion.

关键词： pituitary adenoma ghrp-6 phorbol ester phosphatidylinositol

ghrp-6温敏型凝胶的制备及其对小鼠生长的影响

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中国兽医学报 2013年第12期33卷 1879-1884页

作者：官员张昕张鑫张大伟郝林琳于浩张英刘松财吉林大学动物科学学院吉林长春130062

采用开环聚合法合成PLGA—PEG-PLGA共聚物，制备ghrp-6温度敏感型缓释凝胶并对其体外释药和对小鼠生长的影响进行研究。以PLGA—PEpPLGA为载体材料制备ghrp一6缓释凝胶制剂，采用BCA法测定体外释放度，并对体外释放数据用Korsmeyer-Pep... 详细信息

采用开环聚合法合成PLGA—PEG-PLGA共聚物，制备ghrp-6温度敏感型缓释凝胶并对其体外释药和对小鼠生长的影响进行研究。以PLGA—PEpPLGA为载体材料制备ghrp一6缓释凝胶制剂，采用BCA法测定体外释放度，并对体外释放数据用Korsmeyer-Peppas方程进行拟合；分别对分组小鼠皮下注射ghrp-6凝胶（2．0g／L）、GH—RP-6（2．0g／L）、空胶和生理盐水，隔周称重。结果表明合成产物符合PLGA—PEG-PLGA共聚物的特征，质量分数为15％、20％、30％的共聚物水溶液的胶凝化温度在32～37℃；ghrp-6在浓度为15％、20％、25％共聚物中释放出95％以上的药物分别需要16、18、20d，其释放曲线均符合Korsmeyer-Peppas方程模型，且具有良好的相关性；各组小鼠在注射35d后，ghrp-6凝胶组的累积增重分别比生理盐水组、空胶组、ghrp-6组高45．18％（P〈0．01），39．090．4（P〈0．01），21．80％（P〈0．01）。由此表明ghrp一6在凝胶中的释放达到预期要求，且对小鼠的生长有显著的促进作用，因此ghrp-6的PLGA—PEGPLGA凝胶有望开发成为一种长效促生长的注射制剂。

关键词： ghrp-6 温敏凝胶缓释促生长

Maternal Administration of ghrp-6-loaded PLGA-PEG-PLGA Thermosensitive Hydrogel Increases Growth and Vitality of Piglets

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Journal of Animal Science and Biotechnology 2011年第3期2卷 173-178页

作者： Xiaohui Ren Zhunli Qi Xiuwen Zhang Jianwei Dai Linlin Hao Songcai Liu Yongliang Zhang College of Ocean Hebei Agriculture University Qinhuangdao Hebei 066003 China Department of Biochemistry Guangzhou Medical College Guangzhou Guangdong 510182 China Department of Biochemistry Veterinary College Jinlin University Changchun Jilin 130062 China College of Animal Science South China Agricultural University Guangzhou Guangdong 510642 China

Both growth hormone-releasing peptide 6 （ghrp-6） and growth hormone-releasing hormone （GHRH） have potent GH-releasing activity in animals. We have previously demonstrated that the administration of a plasmid encoding the GHRH gene to pregnant mice and pig augmented long-term growth in first generation progeny,and that the administration of ghrp-6 results in growth augmentation in mice and rabbits. However,it has not yet been reported if ghrp-6 induces intergenerational growth effects in pigs. Ploy lactic-co-glycolic acid （PLGA） microsphere adsorption of treatment proteins enhances gene expression,genetic immunization and the ability to protect plasmid DNA and peptides from degradation. The cur-rent study was conducted to determine the growth performance of piglets born to gilts treated with ghrp-6 incorporated into thermosensitive PLGA-PEG-PLGA triblock copolymers. Gilts were injected intra-muscularly once at day 85 of gestation with 30 mg of ghrp6-loaded thermosensitive PLGA-PEG-PLGA triblock copolymers. Piglets were weighed periodically between birth and 28 days. Mean body weights of piglets born to ghrp-6-treated gilts were 6. 58% to 18. 89% （P 〈 0. 05 ） greater than those of piglets born to control gilts. This study confirms that enhanced maternal ghrp-6 mediated by thermosensitive PLGA-PEG-PLGA can augment growth of piglets.

关键词： GH ghrp-6 growth performance pig PLGA-PEG-PLGA

ghrp-6对心衰模型大鼠心肌细胞PI3K/Akt/Caspase-9信号通路调节作用的研究

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GHRP-6对心衰模型大鼠心肌细胞PI3K/Akt/Caspase-9信号通路调节作...

作者：陈立强佳木斯大学

学位级别：硕士

目的:观察ghrp-6对心力衰竭模型大鼠心脏功能的调节作用和其对PI3K/Akt/Caspase-9信号转导通路的影响,探讨ghrp-6对心力衰竭模型大鼠心肌细胞的保护作用机制。方法:清洁级SD大鼠140只,2月龄,体重(188.17±21.86)g,分为4组:正常对照组(A... 详细信息

目的:观察ghrp-6对心力衰竭模型大鼠心脏功能的调节作用和其对PI3K/Akt/Caspase-9信号转导通路的影响,探讨ghrp-6对心力衰竭模型大鼠心肌细胞的保护作用机制。方法:清洁级SD大鼠140只,2月龄,体重(188.17±21.86)g,分为4组:正常对照组(A组)、假手术组(B组)、模型组(C组)和ghrp-6治疗组(D组)。C组和D组通过结扎大鼠左冠状动脉前降支制备心力衰竭模型,B组开胸后左冠状动脉前降支穿线,不结扎。造模4w后,D组按100μg?kg-1?d-1剂量尾静脉注射ghrp-6,其余组尾静脉注射等量生理盐水,连续注射4w。应用心电图、B型超声检测各组大鼠心脏功能;HE染色法观测各组大鼠心肌病理变化;免疫组织化学SABC法检测各组大鼠左心室后壁和室间隔心肌细胞PI3K p110α、Akt p-Ser308、Akt p-Thr473、Caspase-9和Caspase-3蛋白的表达情况;流式细胞术检测各组大鼠左心室和室间隔心肌细胞凋亡率。结果:1.各组大鼠心功能的检测结果:(1)术后8w单通道标准肢体导联Ⅱ心电图显示:A组、B组大鼠心电图律整,各波形正常;C组、D组ST段明显回落,呈下斜状,T波倒置,部分动物可见病理性Q波;D组ST段回落幅度接近于正常水平,倒置的T波电压0.1mV。(2)术后8w M模式超声可见C组和D组大鼠左心室前壁运动减弱,C组左室前壁运动波形几乎消失,左心室扩大明显,与A组、B组比较LVEDD、LVESD、LVEDV、LVESV均明显增加(P6%),与A组(5.30%±1.13%)、B组(5.67%±0.99%)比较,凋亡率显著升高(Pghrp-6通过调控PI3K/Akt/Caspase-9/Caspase-3信号转导通路,抑制心力衰竭模型大鼠心肌细胞凋亡,是其实现心肌细胞保护作用机制之一。

关键词： ghrp-6 心力衰竭 PI3K Akt Caspase-9 Caspase-3 细胞凋亡

ghrp-6温敏型缓释凝胶的制备及其对獭兔生长和皮张品质的作用

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GHRP-6温敏型缓释凝胶的制备及其对獭兔生长和皮张品质的作用

作者：官员吉林大学

学位级别：硕士

生长激素释放肽-6(Growth hormone releasing peptide6，ghrp-6)是一种由六个氨基酸构成的多肽，具有促进动物生长，提高动物生产性能和免疫力等多种生物学作用，并且对毛皮动物皮张品质的提高有一定的促进作用，但ghrp-6半衰期短，在... 详细信息

生长激素释放肽-6(Growth hormone releasing peptide6，ghrp-6)是一种由六个氨基酸构成的多肽，具有促进动物生长，提高动物生产性能和免疫力等多种生物学作用，并且对毛皮动物皮张品质的提高有一定的促进作用，但ghrp-6半衰期短，在体内易被酶水解，制约了其在畜牧业生产中的开发与应用，因此有必要开发一种长效的ghrp-6缓释制剂。本实验合成了三嵌段共聚物聚乳酸-羟基乙酸-聚乙二醇-聚乳酸羟基乙酸(Poly(lactic-co-glycolicacid)-Poly(ethyleneglycol)-Poly(lactic-co-glycolicacid)，PLGA-PEG-PLGA)，以这种共聚物为载体制备了可注射的ghrp-6缓释凝胶制剂;进行体外缓释实验，分析了ghrp-6在共聚物中的释放机制，并通过X射线衍射和红外光谱分析研究了ghrp-6与共聚物的相互作用;将獭兔作为实验动物，研究了ghrp-6缓释凝胶对獭兔增重和皮张品质的影响。本实验采用开环聚合法成功合成了PLGA-PEG-PLGA共聚物，通过核磁共振氢谱，红外光谱，凝胶渗透色谱对共聚物的表征进行分析，共聚物的结构与目标产物相符，可用于进一步研究。采用试管倒置法测定了共聚物水溶液的相变温度，结果表明不同质量分数的共聚物水溶液的相变温度均在生理温度范围内，适合体内给药，且随着共聚物质量分数的增加，从溶液态向凝胶态转变的温度逐渐降低，从凝胶态向沉淀态转变的温度逐渐升高。小鼠急毒性实验和最大耐受量实验结果表明，小鼠在注射共聚物溶液后的14d内没有出现异常和死亡，且皮下注射和肌肉注射的最大耐受量分别为人用剂量的1250与250倍，说明共聚物的毒性极低，对动物体内给药是安全的。制备了以PLGA-PEG-PLGA共聚物为载体的ghrp-6凝胶缓释制剂，研究了ghrp-6在凝胶中的体外释放，并考察了不同质量分数共聚物溶液，不同载药量，不同分子量蛋白对释放速率的影响，结果表明该制剂有良好的缓释效果，缓释时间最长可达18d，且随着共聚物质量分数的增加，释放速率降低;随着药物浓度的增加，释放速率增加;随蛋白分子量的增加，释放速率降低。ghrp-6的释放曲线符合Korsmeyer-Peppas方程模型，在凝胶中的释放机制为药物扩散和凝胶降解相结合的作用机制。x射线衍射、红外光谱分析证明共聚物与ghrp-6分子间有氢键作用。分别给獭兔一次性皮下注射空胶、生理盐水、ghrp-6溶液和ghrp-6凝胶溶液，考察了ghrp-6凝胶对獭兔生长的作用，结果表明ghrp-6凝胶可显著提高獭兔血清中IGF-1水平，平均日增重和累积增重。注射ghrp-6凝胶7、14、21和28d后血清IGF-1水平分别比空胶组高15.85%(P6.81%(P60%(Pghrp-6凝胶7，14和21d后平均日增重分别比空胶组高68.35%(P68.34%(Pghrp-6凝胶28d后累积增重比空胶组高62.77%(Pghrp-6溶液组高25.44%(Pghrp-6凝胶组的皮张面积与空胶组相比差异显著(Pghrp-6溶液组相比差异显著(Pghrp-6凝胶对獭兔皮张品质的提高有促进作用。

关键词： ghrp-6 PLGA-PEG-PLGA 缓释促生长

Ghrelin、ghrp-6和胃动素对大鼠胃肠动力调控研究

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Ghrelin、GHRP-6和胃动素对大鼠胃肠动力调控研究

作者：王玮青岛大学

学位级别：硕士

目的:Ghrelin是含有28个氨基酸的脑肠肽,又称为胃动素相关肽。其可调控生长素的分泌、参与摄食、能量平衡、睡眠/觉醒以及心血管活动等多方面的调控。人胃动素(Motilin)在结构上与ghrelin有36%相似性,其主要参与胃肠移行性综合运动(MMC... 详细信息

目的:Ghrelin是含有28个氨基酸的脑肠肽,又称为胃动素相关肽。其可调控生长素的分泌、参与摄食、能量平衡、睡眠/觉醒以及心血管活动等多方面的调控。人胃动素(Motilin)在结构上与ghrelin有36%相似性,其主要参与胃肠移行性综合运动(MMC)调控。本研究拟探讨ghrelin及其受体拟似剂生长激素释放肽-6(ghrp-6)、胃动素对大鼠胃肠动力的影响及潜在机制。方法:采用腹腔注射给药方法,分别观察ghrelin、ghrp-6及胃动素对大鼠胃排空和小肠推进的影响;离体实验观察ghrelin、ghrp-6及胃动素对大鼠电场刺激诱导胃窦和胃底平滑肌舒缩反应的影响及潜在机制;采用RT-PCR观察ghrelin mRNA在胃组织的表达;采用Western blot观察Ghrelin受体(GHSR)在胃组织的表达。结果:1.在体研究结果显示,与生理盐水(NS)对照组相比,大鼠腹腔注射30μg/kg ghrelin(P60μg/kg ghrelin(P0.05)。与NS对照组相比,腹腔注射不同浓度ghrelin(10μg/kg、30μg/kg、60μg/kg、120μg/kg),仅60μg/kg ghrelin可显著增加小肠推进率(Pghrp-6,大鼠胃排空率均显著上升(Pghrp-6,大鼠小肠推进率显著增高,且呈明显量效依赖关系(P0.05),但腹腔注射高剂量的胃动素(120μg/kg),可使大鼠胃排空率显著增加(P0.05)。4.离体研究结果显示,L-NAME(N-硝基-L-精氨酸甲酯酸盐,250μM)可使平滑肌条开电刺激的舒张反应变为收缩反应(P6 Hz开电刺激下的舒张反应(Pghrp-6可使胃底平滑肌在2 Hz及16 Hz开电刺激舒张反应减弱(P6Hz断电刺激收缩反应(Pghrp-6诱导的胃底平滑肌条舒缩活动(P6 Hz开电或断电刺激)的舒缩无显著影响(P>0.05),经L-NAME孵育后胃动素对胃底平滑肌条的舒缩反应仍无显著改变(P>0.05)。6.在胃窦平滑肌研究发现,给予胃窦平滑肌条场刺激,在开电刺激时并未出现与胃底平滑肌相类似的舒张反应,仅在断电刺激下出现了明显的收缩反应。但L-NAME可使胃窦平滑肌收缩反应增强,提示,胃窦平滑肌断电刺激收缩效应可能是由胆碱能介导的;NANC(5μM阿托品和3μM胍乙啶混合液)可完全阻滞场刺激诱导的胃窦平滑肌舒缩活动(P>0.05)。7.2μM ghrelin或2μM ghrp-6可使胃窦平滑肌在4-16 Hz断电刺激下的收缩反应显著增强(Pghrp-6(1-16Hz)诱导的胃窦平滑肌条收缩作用(P0.05),且L-NAME预先孵育肌条也不能显著改变胃动素对胃窦平滑肌的舒缩反应(P>0.05)。***-PCR和Western blot结果显示,大鼠胃窦部及胃底部均有GHSR mRNA和蛋白表达。结论:促进大鼠胃排空或小肠推进作用强弱依次为Ghrelin,ghrp-6,胃动素;大鼠胃平滑肌在场刺激下的舒缩反应

关键词： ghrelin ghrp-6 胃动素胃排空小肠推进

ghrp-6对培养的垂体生长激素腺瘤和正常胚胎垂体细胞促GH分泌特征

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青岛医药卫生 2004年第1期36卷 4-6页

作者：李洛王智兰雷霆青岛大学医学院附属医院 266003 华中科技大学同济医学院同济医院

目的　研究人工合成的生长激素释放剂ghrp 6对体外培养的人垂体生长激素腺瘤细胞GH分泌影响 ,并分析其可能的临床意义。方法　用原代细胞培养技术 ,观察了 6例垂体GH腺瘤细胞和 4例正常胚胎垂体细胞对ghrp 6、生长释放激素 (GH releasin... 详细信息

目的　研究人工合成的生长激素释放剂ghrp 6对体外培养的人垂体生长激素腺瘤细胞GH分泌影响 ,并分析其可能的临床意义。方法　用原代细胞培养技术 ,观察了 6例垂体GH腺瘤细胞和 4例正常胚胎垂体细胞对ghrp 6、生长释放激素 (GH releasinghormone,GHRH)和生长抑素 (somatostatin ,SS)的体外分泌效应。结果　ghrp 6对所有 6例GH腺瘤细胞GH分泌表现出明显的刺激效应 (P ghrp 6刺激反应时间延长。GHRH和SS仅对部分GH腺瘤细胞有作用 ,且SS不能完全阻断ghrp 6对于GH分泌的刺激效应。结论　GH腺瘤细胞对于体外ghrp 6持续刺激的异常反应 ,表明垂体GH腺瘤中可能存在GH释放剂受体 (GHS R)所固有的负反馈机制———“脱敏”机制的减弱。

关键词： ghrp-6 细胞培养垂体腺瘤正常胚胎垂体细胞促分泌作用生长激素释放六肽生长释放激素生长抑素生长激素释放剂

Ghrelin、ghrp-6以及胃动素对大鼠胃肠运动影响研究

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现代生物医学进展 2018年第3期18卷 428-432,452页

作者：王玮栾晓柳洋郭菲菲孙向荣徐珞青岛大学医学院病理生理学教研室山东青岛266021 淄博齐鲁医药学院山东淄博255213 青岛市第九人民医院山东青岛266000

目的:探究ghrelin、ghrp-6以及胃动素对大鼠胃肠运动的影响。方法:在体实验观察ghrelin、ghrp-6及胃动素对大鼠胃排空及小肠推进的影响,离体实验观察ghrelin、ghrp-6及胃动素对大鼠电场刺激引起胃窦胃底平滑肌舒缩反应的影响,RT-PCR观察... 详细信息

目的:探究ghrelin、ghrp-6以及胃动素对大鼠胃肠运动的影响。方法:在体实验观察ghrelin、ghrp-6及胃动素对大鼠胃排空及小肠推进的影响,离体实验观察ghrelin、ghrp-6及胃动素对大鼠电场刺激引起胃窦胃底平滑肌舒缩反应的影响,RT-PCR观察ghrelin mRNA在胃的表达。结果:在体研究发现ghrelin及ghrp-6能够促进胃排空及小肠推进,胃动素对胃排空及小肠推进无影响。离体研究发现,ghrelin 1μM能够抑制胃底平滑肌4-8Hz开电刺激下的舒张反应,并增强胃底平滑肌1-8Hz及胃窦平滑肌4-16Hz断电刺激下的收缩反应;ghrp-6 1μM能够抑制胃底平滑肌4-8Hz开电刺激下的舒张反应,并增强胃底平滑肌1-2Hz、8-16Hz及胃窦平滑肌4-8Hz断电刺激下的收缩反应;L-NAME增强ghrelin、ghrp-6诱导的胃底和胃窦平滑肌条舒缩作用。大鼠胃窦及胃底分布有ghrelin受体mRNA。结论:ghrelin和ghrp-6能够加快胃排空促进小肠推进,该效应可能是通过迷走神经通路及胆碱能兴奋产生的。

关键词： ghrelin ghrp-6 胃动素胃排空小肠推进

温敏型缓释剂的合成及其对ghrp-6在小鼠体内缓释性能的研究

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畜牧与兽医 2012年第S1期44卷 216-216页

作者：官员房希碧马强李明谦张鹏郝林琳刘松财吉林大学畜牧兽医学院吉林长春130062

近年来温敏型缓释材料以其独特的温度敏感性受到国内外的关注国。这种缓释材料针对一些每天都需注射或一天需多次注射的多肽和蛋白类药物显示出其独特的优势,大大降低了病人的经济成本,同时也减少了持续给药的痛苦,具有广阔的应用前景... 详细信息

近年来温敏型缓释材料以其独特的温度敏感性受到国内外的关注国。这种缓释材料针对一些每天都需注射或一天需多次注射的多肽和蛋白类药物显示出其独特的优势,大大降低了病人的经济成本,同时也减少了持续给药的痛苦,具有广阔的应用前景。本实验采用开环聚合法自行合成PLGA-PEG-PLGA,在温度低于体温时。

关键词：温敏型 ghrp-6 PLGA 缓释材料蛋白类药物温度敏感性缓释性能开环聚合法缓释剂生长激素释放肽